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生物工程学报 2008年第4期24卷 610-616页

作者：吴松刘迎龙崔彬唐跃王强曲向华陈国强中国医学科学院心血管病研究所、北京协和医学院阜外心血管病医院小儿心脏外科中心北京100037 清华大学生物系微生物研究室北京100084

为了研究可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)的血管内生物相容性,采用脱细胞羊肺动脉为支架,以PHBHHx涂层,构建复合补片(Hybrid patch),植入New Zealand兔腹主动脉内(12只),以脱细胞未涂层羊肺动脉片(Uncoated patch)做为对照(12只)。分别于术后第1、4和12周处死动物,取出移植补片进行组织学、免疫荧光染色、扫描电镜和钙含量测定。结果表明:hybrid patch管腔面光滑无血栓,内膜增生适度,再细胞化完全:免疫荧光染色检测,新生内膜组织中类内皮细胞呈CD31阳性反应,单层连续排列,间质细胞呈现SMA阳性反应;钙含量测定,hybrid patch明显低于uncoated patch(P<0.05)。由此认为:PHBHHx的血管内生物相容性满意,是心血管组织工程较为理想的腔内涂层材料。

关键词：脱细胞异种血管 3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx) 血管内生物相容性心血管组织工程

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人脐带沃顿胶间充质干细胞研究及其在心血管组织工程中的应用现状

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中国美容医学 2013年第3期22卷 401-404页

作者：陈立力赖章丽邢颜超兰州军区乌鲁木齐总医院输血科新疆乌鲁木齐830000 兰州军区乌鲁木齐总医院麻醉手术科新疆乌鲁木齐830000

间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是干细胞家族的重要成员，来源于早期中胚层和外胚层的一类多能干细胞。MSCs最初在骨髓中发现，随后在多种组织中分离得到，包括肌肉、脂肪、大脑、软骨、牙髓以及脐带等。大量研究表明，M... 详细信息

间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是干细胞家族的重要成员，来源于早期中胚层和外胚层的一类多能干细胞。MSCs最初在骨髓中发现，随后在多种组织中分离得到，包括肌肉、脂肪、大脑、软骨、牙髓以及脐带等。大量研究表明，MSCs具有巨大的治疗潜力，因为其具有自我更新和多向分化的潜能，在体内或体外的合适条件下能分化成为多种成体细胞，从而实现组织重建：

关键词：心血管组织工程间充质干细胞人脐带 MSCs 多向分化 cells 多能干细胞自我更新

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3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯的血管内生物相容性(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第38期15卷 7066-7070页

作者：吴松刘迎龙唐跃王强万峰曲向华陈国强北京大学第三医院心脏外科北京市100191 中国医学科学院心血管病研究所北京协和医学院阜外心血管病医院心血管外科 100037 清华大学生物系微生物研究室北京市100084

背景:可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)具有良好的机械性能和生物可降解性。目的:在体研究PHBHHx的血管内生物相容性。方法:采用脱细胞羊肺动脉为支架,以PHBHHx涂层,构建... 详细信息

背景:可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)具有良好的机械性能和生物可降解性。目的:在体研究PHBHHx的血管内生物相容性。方法:采用脱细胞羊肺动脉为支架,以PHBHHx涂层,构建复合补片,植入新西兰兔腹主动脉内,以脱细胞未涂层羊肺动脉片作为对照。分别于植入后第1,4,12周取出移植补片进行组织学、免疫荧光染色、扫描电镜和钙含量测定。结果与结论:复合补片管腔面光滑无血栓,内膜增生适度,再细胞化完全;免疫荧光染色可见新生内膜组织中类内皮细胞呈CD31阳性反应,单层连续排列,间质细胞呈平滑肌肌动蛋白阳性反应;复合补片的钙含量明显低于未涂层羊肺动脉片。说明PHBHHx的血管内生物相容性满意,是心血管组织工程较为理想的腔内涂层材料。

关键词：脱细胞异种血管 3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯血管内生物相容性心血管组织工程

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人骨髓基质细胞体外分离及定向培养内皮细胞

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细胞生物学杂志 2004年第6期26卷 627-630页

作者：冯滨刘迎龙冯凯陈虎龚茹中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院外科北京100037 军事医学科学院附属医院全军造血干细胞移植中心北京100039 第三军医大学成都军医学院成都610083

用Ficoll(比重1.077 g/ml)从正常成人骨髓中分离骨髓基质细胞(BMSCs),DMEM-HG 培养基内含20%FBS、GM-CSF(100 u/ml)、VEGF(10 ng/ml)、FGF(5 ng/ml)、L-谷氨酰胺(2mmol/ L)、肝素(90 u/ml),以及抗生素液进行定向培养和扩增其中的内皮细胞(ECs),Ⅷ因子相关抗原的免疫组化法和透射电镜观察(TEM)鉴定其细胞的性质。结果5.0×105个BMSCs在体外经定向ECs 培养和扩增8代后,获得了6.0×109个ECs,扩增了约1.2×104倍。70%-80%的细胞对Ⅷ因子相关抗原免疫组化呈阳性反应;光镜下细胞呈典型的“鹅卵石”样;TEM下可观察到胞浆内有Weible- palade小体,证实为内皮细胞。实验表明,BMSCs在体外分离和定向培养的ECs,经扩增后可能是心血管组织工程所需种子细胞的又一个重要来源。

关键词：人骨髓骨髓基质细胞体外分离定向培养内皮细胞种子细胞心血管组织工程

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脱细胞异种心脏瓣膜/可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步试验研究

脱细胞异种心脏瓣膜/可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步...

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作者：吴松中国协和医科大学

学位级别：博士

脱细胞异种心脏瓣膜／可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步试验研究目的：构建新型复合瓣膜，进行体外生物力学测试和动物体内移植试验，对其进行初步评价，为进一步的试验研究提供依据。方法：新鲜猪主动脉瓣经trypsin／EDTA法... 详细信息

脱细胞异种心脏瓣膜／可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步试验研究目的：构建新型复合瓣膜，进行体外生物力学测试和动物体内移植试验，对其进行初步评价，为进一步的试验研究提供依据。方法：新鲜猪主动脉瓣经trypsin／EDTA法脱全部细胞后做为支架，用可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate，PHBHHx)涂层，构建复合瓣膜(hybrid valve)，进行如下试验：(1)采用单轴生物拉伸机对hybrid valve进行体外生物力学测试，以新鲜猪主动脉瓣(fresh valve)和脱细胞未涂层猪主动脉瓣(uncoated valve)做为对照，观察脱细胞和涂层处理对瓣叶生物力学相应指标的影响。(2)以脱细胞羊肺动脉血管片为支架，用PHBHHx涂层，构建复合补片(hybrid patch)并植入New Zealand白兔腹主动脉内(9只)，进行小动物血管内生物相容性试验，以脱细胞未涂层羊肺动脉血管片(uncoated patch)做为对照(9只)，在体观察涂层材料PHBHHx的细胞相容性、引导性和抗血栓性。(3)体外生物力学测试和小动物血管内相容性试验结果满意后，开始hybrid valve的大动物体内移植试验。方法：在全麻常温非体外循环下，将hybrid valve带瓣管道植入成年小尾寒羊的肺动脉瓣位(4只)，以脱细胞未涂层瓣膜(uncoated valve)做为对照(2只)。术后18周将受试动物处死，取出植入瓣膜进行组织学、免疫荧光染色、扫描电镜检查和钙含量测定，对hybrid valve进行初步评价。结果：(1)hybrid valve具有自然瓣膜的形态结构，瓣叶柔软，体外生物力学测试结果表明，瓣膜抗拉强度明显提高，有助于增强耐疲劳性。(2)hybrid patch兔血管内生物相容性研究表明，hybrid patch形态满意，管腔面无血栓，新生内膜增生适度，自体再细胞化完全，全身炎症反应轻微。(3)hybrid valve羊体内移植试验结果显示，hybrid valve瓣膜形态良好，瓣叶柔软，无明显钙化和血栓形成；扫描电镜显示，瓣膜表面光滑；免疫荧光染色检测，证实瓣膜表面新生内膜(neointima)组织中类内皮细胞(endothelial-like cells)呈CD31阳性反应，沿瓣叶表面单层连续排列，瓣膜间质细胞呈现SMA阳性反应；钙含量测定表明，hybrid valve钙含量明显低于uncoated valve(P＜0.05)。结论：复合瓣膜(hybrid valve)具有自然瓣膜的三维形态结构，良好的生物力学特性、生物相容性和细胞引导性。它主要通过引导或诱导自身组织再生，进行一定程度的瓣膜间质重建、修复和塑型，已经初步具备组织工程瓣膜的雏形，是一种有前途的心脏瓣膜替代物。

关键词：脱细胞异种心脏瓣膜可降解聚合材料 PHBHHx(3—羟基丁酸与3—羟基己酸共聚酯) 复合瓣膜心血管组织工程

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小管径人工血管支架之研制

小管径人工血管支架之研制

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作者：鲁镇宇国立交通大学

学位级别：硕士

近年来生医领域的兴起，组织工程快速发展，人工血管支架也在组织工程的研究中扮演重要的一环。目前人工血管支架有许多不同种类的材料与制程，有些甚至已经可以在临床上实用。但至今为止，发展成熟的人工血管支架仅只于管径大于4mm之... 详细信息

近年来生医领域的兴起，组织工程快速发展，人工血管支架也在组织工程的研究中扮演重要的一环。目前人工血管支架有许多不同种类的材料与制程，有些甚至已经可以在临床上实用。但至今为止，发展成熟的人工血管支架仅只于管径大于4mm之管状支架，小管径的人工血管支架其实在体外的人工器官培养、临床周边循环系统上的需求实际上也并不亚于大管径的血管支架，但现今并无有效制备小管径人工血管支架的方法。尤其是在类似微血管的人工血管支架研究上，目前皆尚未能完全满足类似微血管的性质需求。本研究以聚乳酸及聚乙二醇为原料，以电气纺丝加工技术制备出富含孔隙的小管径人工血管支架，支架内径仅0.18-0.20mm，管壁约30-40μm，并对聚乳酸和聚乙二醇在电气纺丝加工稳定的状态下所产生的纤维及孔隙大小变化作探讨，另外进行亲水性的量测以及内皮细胞的养殖，确认在同样总表面孔隙度下的支架，拥有较小平均孔隙和较佳亲水性的支架上会有较佳的细胞生长贴附情形。

关键词：电气纺丝心血管组织工程细胞生长支架人工微血管

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以电气纺丝法制备具方向性纤维之管状结构

以电气纺丝法制备具方向性纤维之管状结构

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作者：黄宣谕国立交通大学

学位级别：硕士

奈米纤维细胞生长支架结构近来被广泛应用在组织工程上，因为其同时具有多孔性的特质及较高的面积-体积比，并拥有较多样性的表面结构特征，这些特性都有利于细胞的附着、迁移和增殖。纤维支架结构的性质会随着纤维尺寸的大小、排列方... 详细信息

奈米纤维细胞生长支架结构近来被广泛应用在组织工程上，因为其同时具有多孔性的特质及较高的面积-体积比，并拥有较多样性的表面结构特征，这些特性都有利于细胞的附着、迁移和增殖。纤维支架结构的性质会随着纤维尺寸的大小、排列方式、材料等而改变，因此近几年对于透过电气纺丝方式制作组织工程结构材料方面的研究数量有明显上升的趋势。经由电气纺丝法所制备出的奈米级结构，大概可以分为两种类型，即有顺序性的与杂乱无顺序性的结构。传统电气纺丝法所制备出来的支架结构，通常都是由高分子或天然聚合物纤维丝以乱数重叠排列，形成薄膜或其他的立体状结构。而由具有特定方向性的纤维所组成的结构，会具有较佳的机械强度，且也具有较佳的细胞相容性。目前已有部份学者针对制备具方向性排列之结构，提出数种可行之方法，但受限于制程上的限制，并无法在小管径的管状结构上，制作出表面形态具方向性的纤维，故本研究将利用电气纺丝函工技术将聚乳酸与聚乙二醇进行混合射出函工，并结合单轴心旋转及外函两平行接地导体，来改良电气纺丝收集纤维丝的方式，制作出纤维具方向性排列的管状结构。实验结果显示此方法可有效制造出方向性一致的纤维结构，亦可在较低旋转转速下制备小管径的管状结构，如此制造出具较佳机械强度及生物组织相仿性的管状纤维结构，可以提高在心血管组织工程领域上的应用。

关键词：心血管组织工程细胞生长支架方向性纤维电气纺丝

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人胚胎心肌祖细胞的免疫原性

人胚胎心肌祖细胞的免疫原性

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作者：李瑞第二军医大学

学位级别：硕士

本实验针对目前心脏组织工程和心脏干细胞治疗学研究中,胚胎源性干/祖细胞作为种子细胞的免疫排斥反应问题,以体外培养的人胚胎心肌祖细胞(ECPC)为代表,从蛋白和基因水平研究了ECPC的免疫原性,探讨通过基因修饰的方法降低胚胎源性干/祖... 详细信息

本实验针对目前心脏组织工程和心脏干细胞治疗学研究中,胚胎源性干/祖细胞作为种子细胞的免疫排斥反应问题,以体外培养的人胚胎心肌祖细胞(ECPC)为代表,从蛋白和基因水平研究了ECPC的免疫原性,探讨通过基因修饰的方法降低胚胎源性干/祖细胞移植排斥强度的可能性。结果证明ECPC自然分化和在IFN-γ、TNF-α刺激下HLA-I类分子表达明显增加;ASNS、IRF-1、MCP-3和VCAM-1等基因可能对ECPCs免疫原性有重要调节作用。

关键词：心血管组织工程人胚胎心肌祖细胞免疫原性人类白细胞抗原肿瘤坏死因子α γ干扰素

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脱细胞猪主动脉瓣膜与可降解聚合材料共同构建复合组织工程瓣膜

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中国胸心血管外科临床杂志 2008年第5期15卷 354-359页

作者：吴松刘迎龙唐跃王强崔彬于存涛中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所北京100037 阜外心血管病医院小儿心脏外科中心北京100037

目的对新型复合组织工程瓣膜进行体外生物力学和动物体内移植试验,为临床应用过渡提供依据。方法以脱细胞猪主动脉瓣作为支架,用可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)涂层,构... 详细信息

目的对新型复合组织工程瓣膜进行体外生物力学和动物体内移植试验,为临床应用过渡提供依据。方法以脱细胞猪主动脉瓣作为支架,用可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)涂层,构建新型复合组织工程瓣膜。(1)复合组织工程瓣膜、新鲜猪主动脉瓣和脱细胞猪主动脉瓣各12枚,用单轴生物拉伸机进行体外生物力学测试;(2)小尾寒羊10只,其中5只在全身麻醉非体外循环下接受复合组织工程瓣膜,移植到羊的肺动脉瓣位;其余接受脱细胞猪主动脉瓣作为对照。术后18周处死动物,取出移植瓣膜,进行组织学、免疫荧光染色、扫描电子显微镜检查和钙含量测定。结果复合组织工程瓣膜保持了自然瓣形态,抗拉强度显著提高(P<0.05);瓣膜柔软,表面光滑无血栓;免疫荧光染色检测,瓣膜新生内膜中内皮细胞呈CD31阳性反应,沿瓣表面连续排列,间质细胞呈现单克隆鼠抗人平滑肌actin(SMA)阳性反应;复合组织工程瓣膜钙含量明显低于脱细胞猪主动脉瓣(P<0.05)。结论复合组织工程瓣膜具有自然瓣膜的三维形态结构,良好的生物力学特性、生物相容性和细胞引导性,初步具备组织工程瓣膜雏形。

关键词：脱细胞猪主动脉瓣可降解聚合材料 3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯复合组织工程瓣膜心血管组织工程

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3D生物打印技术在心脏组织工程中的研究进展

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生物医学工程与临床 2023年第3期27卷 388-391页

作者：王占磊金健汤顺清(审校) 遵义医科大学贵州遵义563000 成都大学附属医院四川成都610081 暨南大学生物医学工程研究所广东广州510632

心脏组织工程(CTE)是一种具有发展前景的心脏修复技术,为心脏组织的研究提供了平台,其主要应用于修复受损或无效的血管、心脏瓣膜和心肌。三维(3D)生物打印技术已经越来越多地用于医学的不同领域,包括心血管疾病(CVD)。文章就CTE的3D生... 详细信息

心脏组织工程(CTE)是一种具有发展前景的心脏修复技术,为心脏组织的研究提供了平台,其主要应用于修复受损或无效的血管、心脏瓣膜和心肌。三维(3D)生物打印技术已经越来越多地用于医学的不同领域,包括心血管疾病(CVD)。文章就CTE的3D生物打印技术的最新进展作一综述,针对特定CVD患者的3D打印模型,重点介绍了3D打印模型在先天性心脏病、冠状动脉疾病及主动脉瓣疾病等CAD中的应用,以及生物打印过程中常用于生物墨水的海藻酸盐、明胶、纤维蛋白和胶原蛋白等生物材料,并分析了3D生物打印技术在CTE领域的应用前景及未来要面临的挑战。3D生物打印技术因能够将多个细胞整合到具有复杂3D结构的打印支架中而备受关注,为多种CAD患者提供更多治疗方案,增强了临床医生对复杂疾病的理解和对复杂手术的信心。随着3D打印技术的发展和打印材料的改进,3D打印技术将在CTE中应用会越来越广泛。

关键词：心血管疾病心血管组织工程三维打印生物墨水心脏修复和再生

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