检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2015年第8期25卷 62-67页

作者：邢进冯育芳岳秉飞贺争鸣戴方伟萨晓婴代解杰中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所北京100050 浙江省医学科学院实验动物中心杭州310013 中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

目的建立念珠状链杆菌的实时荧光定量PCR检测方法,实现该菌在多种实验动物中的快速检测。方法根据NCBI公布的念珠状链杆菌序列,设计特异性引物和探针,通过对24株标准参考菌株的扩增,验证其特异性、敏感性和重复性。运用所建立的方法对... 详细信息

目的建立念珠状链杆菌的实时荧光定量PCR检测方法,实现该菌在多种实验动物中的快速检测。方法根据NCBI公布的念珠状链杆菌序列,设计特异性引物和探针,通过对24株标准参考菌株的扩增,验证其特异性、敏感性和重复性。运用所建立的方法对小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、长爪沙鼠和树鼩的共823份呼吸道样本进行检测。结果用所建Taqman MGB荧光定量PCR方法在小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔中未检出念珠状链杆菌;检出普通级长爪沙鼠和树鼩中念珠状链杆菌的阳性率分别为1.5%(1/65)和61.7%(37/60)。结论本研究所建立的念珠状链杆菌Taqman MGB荧光定量PCR检测方法,能够对实验动物中念珠状链杆菌进行快速准确的检测,敏感性优于国标方法,为实验动物质量检测体系的完善奠定了基础。

关键词：念珠状链杆菌荧光定量PCR 检测方法实验动物

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念珠状链杆菌引起鼠咬热1例

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中国热带医学 2019年第2期19卷 192-194页

作者：麦文慧陈少金陈东科朱雄王日海口市第三人民医院检验科海南海口571100 三亚市人民医院检验科海南三亚572000 北京医院检验科北京100730

目的通过对一株念珠状链杆菌及其引发的鼠咬热病例的回顾性分析,为临床微生物室和临床医生提供诊治经验。方法病例回顾性分析:患者因被老鼠咬伤左手拇指引起发热就诊,入院后进行血培养,并用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州... 详细信息

目的通过对一株念珠状链杆菌及其引发的鼠咬热病例的回顾性分析,为临床微生物室和临床医生提供诊治经验。方法病例回顾性分析:患者因被老鼠咬伤左手拇指引起发热就诊,入院后进行血培养,并用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪和16SrRNA基因测序进行细菌鉴定。临床给予阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星抗感染治疗12 d。结果血培养分离出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌;该菌用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪均无法鉴定;16sRNA基因测序结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100%;临床确诊为念珠状链杆菌型鼠咬热,用阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星治疗有效。结论念珠状链杆菌能引起人类鼠咬热,该菌用16sRNA基因测序能准确鉴定,常规细菌鉴定仪和质谱仪均难以鉴定。临床医生对于有鼠咬史的患者,血液中检出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌时需考虑念珠状链杆菌引发鼠咬热的可能。。

关键词：念珠状链杆菌鼠咬热鼠 L型细菌 16sRNA基因测序

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念珠状链杆菌在小鼠群中的自然感染和发病特征的观察

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中国实验动物学报 1995年第2期3卷 80-86页

作者：李红陈卫兰蒋观成中国医学科学院实验动物研究所

本文在国内首次报告了念珠状链杆菌在清洁级Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠群中的自然感染，并从临床、病理解剖、病原学及流行病学方面进行了较为详细的观察，在受检的１４例发病动物中，颈部淋巴结肿大、化脓占７１．４％，皮下、肺门淋巴结脓... 详细信息

本文在国内首次报告了念珠状链杆菌在清洁级Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠群中的自然感染，并从临床、病理解剖、病原学及流行病学方面进行了较为详细的观察，在受检的１４例发病动物中，颈部淋巴结肿大、化脓占７１．４％，皮下、肺门淋巴结脓肿分别占５０．０％和２１．４％，多发性关节炎（包括趾、跗关节）占２１．４％，子宫积脓占７．１％，从所有病灶及部分动物的血液、脾、肝、肺、肾均分离到了单一的细菌。该菌在小鼠成功地进行了急性感染实验，受感染动物出现了典型的念珠状链杆菌病的临床及病理特征，即败血症、关节炎、淤血、水肿、紫绀、结膜炎等。所分离的致病菌在病原学上也完全符合念珠状链杆菌的病原学特征。在饲养环境上与发病鼠群有密切关系的其它４个品系小鼠群，即６１５、ＢＡＬＢ／ｃ、ＣＢＡ、ＫＭ，均未波感染，证明在对该菌的易感性方面存在品系差异。

关键词：念珠状链杆菌小鼠自然感染发病特征

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念珠状链杆菌的研究现状

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中国实验动物学报 2007年第6期15卷 474-476页

作者：刘星李红中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京100021

念珠状链杆菌是人类鼠咬热及哈佛山热的主要致病菌,对人和实验小鼠等温血类动物有极强的致病性。近年来,随着城市范围的扩大、宠物种类的增多,被其感染而发病的人数也逐渐增加,尤其是对于生物医学实验工作者来说,该菌已被认为是一种职... 详细信息

念珠状链杆菌是人类鼠咬热及哈佛山热的主要致病菌,对人和实验小鼠等温血类动物有极强的致病性。近年来,随着城市范围的扩大、宠物种类的增多,被其感染而发病的人数也逐渐增加,尤其是对于生物医学实验工作者来说,该菌已被认为是一种职业危害。为此,部分发达国家已将该菌的感染列为新发感染性疾病的范畴。本文将就其生物学特性、致病性、实验室诊断及流行病学特征等方面的研究现状做一简要综述。

关键词：念珠状链杆菌生物学特性实验室诊断

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1株从败血症患者血液分离的念珠状链杆菌的生物学特征

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中华医院感染学杂志 2021年第8期31卷 1200-1204页

作者：周晓君轩断断张冠男王旭明苏屿邓垂文凌海青牛莉娜海南医学院病原生物学教研室海南医学院-香港大学热带传染病联合实验室海南海口571199 海南省人民医院检验科海南医学院附属海南医院海南海口570311 中国医学科学院国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心北京协和医院风湿免疫科北京100730 海南省白沙黎族自治县人民医院检验科海南白沙572800

目的采用形态学方法结合分子生物学方法分析1株临床败血症患者血液分离的念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis),为临床罕见致病性病原菌的鉴定提供参考。方法采用革兰染色、DL-96E,VITEK2 Compact自动细菌鉴定仪、MALDI-TOF MS... 详细信息

目的采用形态学方法结合分子生物学方法分析1株临床败血症患者血液分离的念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis),为临床罕见致病性病原菌的鉴定提供参考。方法采用革兰染色、DL-96E,VITEK2 Compact自动细菌鉴定仪、MALDI-TOF MS质谱仪结合16S rRNA基因序列进行细菌鉴定,同时采用E-test法开展药敏试验。结果传统方法和MALDI-TOF MS无法鉴定出该菌,16S rRNA鉴定出该菌为念珠状链杆菌,药敏试验结果显示该菌对青霉素、头孢噻肟、亚胺培南、四环素和环丙沙星敏感,对氨基糖苷类(妥布霉素)、阿米卡星、庆大霉素和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药。结论 16S rRNA分子生物学方法结合形态观察和生化反应可以很好地鉴定出念珠状链杆菌,青霉素、头孢噻肟、亚胺培南、四环素和环丙沙星可用于该菌临床治疗。

关键词：念珠状链杆菌 16S rRNA 药敏青霉素

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应用16SrRNA基因序列分析与细菌生化反应鉴定膝关节脓液分离的念珠状链杆菌

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实用医学杂志 2014年第11期30卷 1814-1817页

作者：张伟铮邓光远屈平华陈文科林冬玲陈茶广东省中医院大学城医院检验科广州市510006

目的:对我院一名患者左膝关节脓液中分离到的1株少见病原菌进行16S rRNA基因测序鉴定,探讨该方法在临床病原菌鉴定方面的意义。方法:采用16S rRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的Vitek 2全自动细菌鉴定药敏系统、API 20NE、API ... 详细信息

目的:对我院一名患者左膝关节脓液中分离到的1株少见病原菌进行16S rRNA基因测序鉴定,探讨该方法在临床病原菌鉴定方面的意义。方法:采用16S rRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的Vitek 2全自动细菌鉴定药敏系统、API 20NE、API 20E与API 50CH系统的生化实验进行细菌的表型鉴定。结果:该菌在血平板和巧克力平板生长缓慢,麦康凯平板不生长;血平板上菌落形态呈1~2 mm"油煎蛋"圆形凸起,边缘光滑、半透明、湿润;镜下革兰染色阴性,呈链状排列,菌体1~3μm,呈圆形、卵圆形或梭形等;Vitek 2 GN-13、API 20NE、API 20E均为不能鉴定的细菌;16S rRNA基因序列分析的结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100%。结论:该膝关节脓液分离出的病原菌为念珠状链杆菌,16S rRNA基因序列分析能提供有力的遗传学证据,结合细菌的生化反应可准确地鉴定该菌。

关键词：念珠状链杆菌生化反应 16S rRNA 基因测序鉴定

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（一）抗猪鼻支原体单克隆抗体的研制及双抗体夹心ELISA检测法的建立（二）念珠状链杆菌血清学抗原检测方法的建立

（一）抗猪鼻支原体单克隆抗体的研制及双抗体夹心ELISA检测法的...

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作者：刘星中国协和医科大学

学位级别：硕士

猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）是猪鼻腔的常在菌,除了在自然条件下可引起猪的肺炎,近年来被发现其与人胃癌、大肠癌有高度相关性,已经被认为是一种新发人传染病的病原。由于缺乏简单、快速的检测方法,该病原在人群中的感染情况尚... 详细信息

猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）是猪鼻腔的常在菌,除了在自然条件下可引起猪的肺炎,近年来被发现其与人胃癌、大肠癌有高度相关性,已经被认为是一种新发人传染病的病原。由于缺乏简单、快速的检测方法,该病原在人群中的感染情况尚不清楚。因此,该病原检测方法的研究将是流行病学研究的关键。血清学检测方法以其灵敏度高、简便快捷及费用相对低廉等各种优点已经广泛用于病原微生物感染的实验室诊断,尤其是直接血清学方法对于因带菌量少、血清抗体滴度较低的感染检测具有较大的优势。因此,本研究从单克隆抗体研制着手,进而建立以检测抗原为目的的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试验法（ELISA）,以期发展一种特异、敏感和快速的人猪鼻支原体感染的检测方法。为此,我们从以下几个方面进行了研究。首先,单抗的制备与鉴定。使用猪鼻支原体CVCC361（购自中国兽药监察所）株全菌抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合,用ELISA法筛选获得ZB1～ZB17共17个阳性杂交瘤细胞株,其分泌抗体的效价最高达1∶1.28×10～5以上,并与实验动物常见的7种病原菌及11种支原体呈阴性反应;IgG亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3;免疫印迹试验显示,ZB1、ZB2及ZB16与相对分子质量为35×10～3的抗原有特异性结合,而ZB3和ZB10与相对分子质量为70×10～3的抗原有特异性结合。其次,我们建立了以单抗为诊断抗体的双抗体夹心ELISA法。采用最佳配对实验,筛选出以单抗ZB1作为包被抗体、ZB1、ZB2-辣根过氧化物酶标记（ZB1-HRP、ZB2-HRP）作为检测抗体的配对,对猪鼻支原体抗原的检测限均可达到ng级水平,可检出最小抗原量为3.9ng/mL,检出猪鼻支原体活菌8.34×10～2CFU/mL,与人呼吸道常见的致病微生物及11种支原体均无非特异性反应。综上所述,本研究采用B淋巴细胞杂交瘤细胞技术成功地制备出了17株较高特异性和敏感性的抗猪鼻支原体单克隆抗体,并以其为诊断抗体建立起以检测抗原为目的的双抗体夹心ELISA法,显示了较好的特异性和敏感性。为人群猪鼻支原体流行病学研究提供了一种更可靠而便利的手段,并将对这一新发感染性疾病的研究,进而对人类肿瘤防控有重要的意义。念珠状链杆菌是一种革兰阴性,多形态细菌,可引起人鼠咬热及哈佛山热,其正常宿主为啮齿类动物,对人类、实验小鼠、非人灵长类等有极强的致病性,已经被认为是动物试验工作者的职业危害、是各国实验动物必需排除的致病菌,也被世界卫生组织列为人类新发传染病的病原菌。该病原菌细胞的形态和排列因环境条件及菌龄不同而差别极大,具有自动形成和保持L型的能力,对链霉素、青霉素、四环素较敏感。体外培养营养要求高,生长缓慢。由于念珠状链杆菌特殊的生物学特性,决定了其在实验动物质量常规检测和人感染的实验室诊断的困难性。病原学方法可能因该菌的变异性、特殊营养要求、生长缓慢、带菌量少、形态变异等特性而呈阴性结果;分子生物学方法对该菌的检测尚处于探索阶段,在用于实验动物常规检测时,没有商品化的检测试剂盒,难以确保检测质量,此外,检测成本也是限制该方法的一个重要因素;由于该菌在人和实验小鼠感染后潜伏期短,发病急,间接血清学检测方法也不适用。因此发展以检测病原为目的的直接血清学方法具有十分重要的意义。本研究利用单克隆抗体技术,制备抗念珠状链杆菌的特异性单抗,进而建立双抗体夹心ELISA法,以期建立一种快速、高特异性、高敏感性和低成本的实验动物质量常规检测方法和人类念珠状链杆菌感染的实验室诊断方法,并为进一步的病原学、流行病学研究提供技术储备。为此,我们从以下几个方面进行了研究。首先,对念珠状链杆菌的变异性进行了观察,以确定免疫原。对不同培养条件及培养时间的念珠状链杆菌进行了动态观察,发现不同培养时间及液体培养环境与固体培养基上菌体形态有明显差异,电镜结果显示了细胞结构的变化,链状形态的细菌有细胞壁缺失及膜成分的增厚。结果表明,48h液体培养物既有较典型的原型结构也有变异型,适宜作为免疫原免疫动物。其次,单抗的制备与鉴定。选用48h液体培养物对BALB/c小鼠进行免疫,ELISA法筛选获得SM1～SM16共16个阳性杂交瘤细胞株,其分泌抗体的效价最高达1∶1×10～5;IgG亚类分别为IgG1、IgG2a;免疫印迹试验显示,SM6、SM7和SM8与念珠状链杆菌在50×10～3相对分子质量处有反应条带,SM9在35×10～3相对分子质量处有反应条带。与不同形态的培养物的免疫印迹试验显示,SM9与肉汤及平皿培养物在35×10～3相对分子质量处均有一条反应条带,SM6、SM7和SM8仅与平皿培养物在50×

关键词：猪鼻支原体单克隆抗体检测方法念珠状链杆菌单克隆抗体血清学诊断

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（一）猪鼻支原体免疫胶体金快速检测卡的研制（二）抗念珠状链杆菌单克隆抗体的制备和鉴定

（一）猪鼻支原体免疫胶体金快速检测卡的研制（二）抗念珠状链...

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作者：杨玉萍中国协和医科大学

学位级别：硕士

胶体金免疫层析检测（gold immunochromatography assay，GICA），以其特异、敏感、快速的优点，广泛应用于病原微生物的流行病学调查和感染性疾病的临床诊断。本研究根据猪鼻支原体感染在人体血清抗体效价不高，其病原体在人体腔道寄... 详细信息

胶体金免疫层析检测（gold immunochromatography assay，GICA），以其特异、敏感、快速的优点，广泛应用于病原微生物的流行病学调查和感染性疾病的临床诊断。本研究根据猪鼻支原体感染在人体血清抗体效价不高，其病原体在人体腔道寄生的特点，确定双抗体夹心法诊断抗原的GICA检测模式。以特异性和敏感性较高的配对单克隆抗体（McAb）作为诊断试剂，然后进行条件筛选和优化建立GICA检测卡（GICAs），结果如下：首先，层析材料的制备和选择。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，调节还原剂的用量可得到不同粒径的胶体金，可见光光谱扫描鉴定表明颗粒均匀，粒径大小符合理论值。选择合适粒径的胶体金标记McAb，即为金标抗体，另一株McAb为包被抗体；对诊断试剂和层析材料通过层析性能和应用效果两方面进行筛选，确定缓冲液环境，抗体工作浓度等。其次，GICA的建立和在夹心模式下的整体优化实验，降低检测限，减少非特异性反应，提高稳定性。最后，GICA应用的初步评价。检测猪鼻支原体4d的液体培养物，其检测限为1.72×10～3CFU／mL，检测全菌蛋白检测限为50ng／100μL；特异性试验表明与实验动物和人易感11种细菌和11种支原体均无交叉反应。阳性结果可在5min内判定，弱阳性结果需时约10min。批内重复性和批间重复性好，稳定性试验结果表明其4℃保存6个月以上在检测限以上仍能得到清晰的阳性结果。本文研制的GICAs检测猪鼻支原体特异性强、灵敏度高，操作简单、结果快速，可用于感染的流行病学调查和临床诊断。念珠状链杆菌（Streptobacillus moniliformis，以下简称SM）为人鼠共患病病原。目前国内外尚缺乏针对SM的快速检测试剂盒，传统的分离培养法需时较长且该菌易形成L形变异，PCR方法检测步骤较为繁琐且容易受条件限制，均不适用于实验动物隐性感染和临床感染病例的快速诊断。本文以经典的细胞融合技术制备抗SM单克隆抗体，为进一步建立以血清学诊断试剂为基础的快速检测方法奠定基础。首先，抗SM单克隆抗体的制备。以SM全菌蛋白为免疫原，免疫BALB／c小鼠，经过基础免疫、加强免疫3次以上，待免疫血清抗体效价达到1：10～5以上后进行冲击免疫，3天后取脾细胞，与处于对数生长期的SP2／0细胞融合，以甲基纤维素半固体法进行克隆，亚克隆3次，以间接ELISA方法对克隆后的细胞株进行筛选，最后共筛选出12株分泌抗体阳性的融合细胞株。其次，抗SM单克隆抗体的鉴定。通过染色体计数试验证明12株细胞皆为杂交瘤细胞；亚类测定证实其分属于IgG1、IgG2a、IgG2b以及IgM类；Westem-blot实验表明单抗5G4结合的抗原分子量为32×10～3，6D10结合的抗原分子量为66×10～3，589结合的抗原分子量有2个条带，在60-67×10～3之间，为SM种特异性抗原；IFA结果显示，单抗5G4能够与SM表面抗原结合；ELISA实验初步表明单抗5G4与实验动物常见病原菌无交叉反应，提示单抗5G4有可能作为诊断抗体直接检测抗原或者作为诊断抗原纯化的亲和层析配体。在后续SM血清学诊断方法的研究中，我们需要对其敏感性和特异性以及存在的问题（混和亚类）作进一步的研究。

关键词：猪鼻支原体单克隆抗体胶体金胶体金免疫层析法(GICA) 念珠状链杆菌单克隆抗体血清学诊断

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念珠状链杆菌感染引起的鼠咬热1例

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温州医科大学学报 2020年第10期50卷 844-846页

作者：苏海珍张青朱钱迎戴其锋洪亮温州医科大学附属第三医院检验科浙江温州325200 温州医科大学附属第三医院感染科浙江温州325200

鼠咬热主要由小螺菌和念珠状链杆菌感染引起,该病分布于世界各地,小螺菌型鼠咬热多见于亚洲,而念珠状链杆菌型鼠咬热多见于北美洲[1]。鼠咬热的特点是被鼠咬伤后经过一段潜伏期可出现典型的临床表现:急性发热、肌痛、关节痛、呕吐以及... 详细信息

鼠咬热主要由小螺菌和念珠状链杆菌感染引起,该病分布于世界各地,小螺菌型鼠咬热多见于亚洲,而念珠状链杆菌型鼠咬热多见于北美洲[1]。鼠咬热的特点是被鼠咬伤后经过一段潜伏期可出现典型的临床表现:急性发热、肌痛、关节痛、呕吐以及头痛、局部淋巴结肿大,随后在膝盖、脚踝、手腕、手肘等处出现斑丘疹[2-3]。该病国内相关报道较少,特别是由念珠状链杆菌引起的鼠咬热在国内的报道尤为少见。本文报道1例由念珠状链杆菌感染引起的鼠咬热,并结合国内外相关鼠咬热的文献进行复习,以提高临床实验室对念珠状链杆菌的检出率,协助临床诊断治疗。

关键词：鼠咬热念珠状链杆菌抗菌药物

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念珠状链杆菌感染3例

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上海医药 2023年第3期44卷 44-46,74页

作者：陆丹倩吴惠妃王巧媚邓聚辉中山市中医院微生物室中山528400 中山市中医院药学部中山528400

目的:通过对3例念珠状链杆菌感染的鼠咬热病例进行回顾性分析,为临床医生提供诊治经验。方法:3例患者均有被老鼠咬伤或捕食老鼠的经历,入院后进行血培养,采用杭州天和细菌微量生化管进行生化鉴定,并经专业机构鉴定确定该菌株为念珠状链... 详细信息

目的:通过对3例念珠状链杆菌感染的鼠咬热病例进行回顾性分析,为临床医生提供诊治经验。方法:3例患者均有被老鼠咬伤或捕食老鼠的经历,入院后进行血培养,采用杭州天和细菌微量生化管进行生化鉴定,并经专业机构鉴定确定该菌株为念珠状链杆菌。结果:3例患者经治疗后均明显好转并出院。结论:对于有鼠咬伤或鼠密切接触史的患者,血液中检出革兰阴性呈链状菌体、并有念珠状肿胀的L型细菌时,临床医生需考虑念珠状链杆菌感染的可能。

关键词：念珠状链杆菌鼠咬热感染血培养

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