检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王静张洁张玲魏蕾武汉大学基础医学院病理生理教研室

目的:血管扩张刺激磷蛋白(VASP)作为一种肌动蛋白调节蛋白,能调节细胞黏附及伸展过程中肌动蛋白的重排,在肿瘤细胞迁移中发挥重要作用。本实验构建靶向VASP的小RNA的慢病毒表达载体,观察其对胃癌细胞BGC-823中VASP表达的影响。方法:(1)... 详细信息

目的:血管扩张刺激磷蛋白(VASP)作为一种肌动蛋白调节蛋白,能调节细胞黏附及伸展过程中肌动蛋白的重排,在肿瘤细胞迁移中发挥重要作用。本实验构建靶向VASP的小RNA的慢病毒表达载体,观察其对胃癌细胞BGC-823中VASP表达的影响。方法:(1)设计并合成3对靶向VASPmRNA的寡核苷酸链,克隆入pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体,构建

关键词：慢病毒表达载体 RNA

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小鼠Islet-1基因慢病毒表达载体的构建及其促进C3H10T1/2细胞向心肌样细胞特异性分化的作用

小鼠Islet-1基因慢病毒表达载体的构建及其促进C3H10T1/2细胞向心...

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中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会

作者：智深深朱静田杰吕铁伟鲁荣邓兵刘建平林建萍重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所重庆医科大学附属儿童医院心脏内科

研究Islet-1对干细胞特化心肌样细胞的调控作用。用PCR获取目的基因,将目的基因与pLenO-WPI载体连接,选取阳性质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞生产出慢病毒载体。感染C3H10T1/2细胞,实时荧光定量PCR及Western blot检测Islet-1和心肌、... 详细信息

研究Islet-1对干细胞特化心肌样细胞的调控作用。用PCR获取目的基因,将目的基因与pLenO-WPI载体连接,选取阳性质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞生产出慢病毒载体。感染C3H10T1/2细胞,实时荧光定量PCR及Western blot检测Islet-1和心肌、肝脏、骨骼及神经各系统相关标志物的表达,免疫荧光检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达部位。PCR及测序显示目的片段正确插入,实验组有Islet-1表达;心肌早期发育相关基因GATA-4、MEF2C、NKx2.5在检测到荧光蛋白1周后升高,2周到达高峰,3周后可检测到心肌特异性蛋白cTnT(0.582±0.0576),其时序性表达呈随时间增强趋势;cTnT表达于胞质;肝脏系统特异性标志AFP及ALB、骨骼系统特异性标志BGP及BALP、神经系统特异性标志Nestin及GFAP均未表达。Islet-1具有特异性促进干细胞向心肌样细胞分化的作用。

关键词：慢病毒表达载体 Islet-1 干细胞特异性分化心肌样细胞

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白细胞介素-18基因慢病毒表达载体抗肺癌作用的研究

白细胞介素-18基因慢病毒表达载体抗肺癌作用的研究

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第九届中国肿瘤内科大会、第四届中国肿瘤医师大会、中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2015年学术年会

作者：熊冬兰冯睿杨升林挺岩陈湘琦福建医科大学附属协和医院

目的:观察白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)基因慢病毒表达载体转染肺腺癌A549细胞后对肺癌细胞增殖生长、凋亡生物学等行为的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将转染IL-18基因慢病毒表达载体的肺腺癌A549细胞确定为IL-18干预组(... 详细信息

目的:观察白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)基因慢病毒表达载体转染肺腺癌A549细胞后对肺癌细胞增殖生长、凋亡生物学等行为的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将转染IL-18基因慢病毒表达载体的肺腺癌A549细胞确定为IL-18干预组(即A组),转染仅有慢病毒表达载体而不含IL-18基因的肺腺癌A549细胞确定为慢病毒空载组(即B组),未加任何干预的肺腺癌A549细胞

关键词：慢病毒表达载体白细胞介素肺腺癌抗肺癌

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miR-455慢病毒表达载体的构建与鉴定

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生物技术通讯 2013年第1期24卷 49-52页

作者：张康梅倩李祥赵亚力韩为东孟元光解放军总医院妇产科北京100853 解放军总医院基础医学所分子生物室北京100853

目的:构建人源microRNA-455(miR-455)慢病毒载体,并鉴定成熟has-miR-455在细胞内的表达水平。方法:提取SiHa细胞中的人基因组DNA,设计并合成人miR-455的上下游引物,PCR扩增目的基因,将其中表达miR-455的结构经酶切后插入慢病毒转移质粒p... 详细信息

目的:构建人源microRNA-455(miR-455)慢病毒载体,并鉴定成熟has-miR-455在细胞内的表达水平。方法:提取SiHa细胞中的人基因组DNA,设计并合成人miR-455的上下游引物,PCR扩增目的基因,将其中表达miR-455的结构经酶切后插入慢病毒转移质粒pWPT-GFP,构建成pWPT-GFP-pri-miR-455,在293T细胞中与pMD2G、pSPAX2包装产生慢病毒,并用含慢病毒的上清感染SiHa细胞。结果:测序结果证明插入质粒载体中的miR-455前体序列完全正确,慢病毒载体构建成功并获得相应的慢病毒;重组慢病毒质粒pWPT-GFP-pri-miR-455感染SiHa细胞后上调miR-455的表达近40倍。结论:构建了miR-455的慢病毒载体,并能在293T细胞中表达,产生的慢病毒能成功感染SiHa细胞。为进一步研究miR-455的功能,以及利用慢病毒进行基因治疗奠定了基础。

关键词： miR-455 慢病毒表达载体 SiHa细胞

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大鼠Mecp2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

大鼠Mecp2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

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中华医学会第十四次全国儿科学术会议

作者：金婧包新华潘虹张玉稚吴希如北京大学第一医院儿科北京大学第一医院儿科北京大学第一医院儿科北京大学第一医院儿科北京大学第一医院儿科

甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)是特异与甲基化DNA结合的转录抑制因子,在神经发育性遗传病 Rett综合征存在该基因突变,一些其它的神经系统疾病也有MECP2突变,但MeCP2,在神经系统的作用及其调控的靶基因目前尚未完全明确。目的:为研究大鼠Me... 详细信息

甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)是特异与甲基化DNA结合的转录抑制因子,在神经发育性遗传病 Rett综合征存在该基因突变,一些其它的神经系统疾病也有MECP2突变,但MeCP2,在神经系统的作用及其调控的靶基因目前尚未完全明确。目的:为研究大鼠Mecp2基因功能,构建大鼠Mecp2-shRNA慢病毒表达载体。方法:按照siRNA的设计原则,根据大鼠Mecp2 mRNA序列挑选两条靶序列,设计出两组分别针对两条靶序列的茎环结构正义链与反义链,将两条茎环结构序列正义链与反义链退火形成双链,与酶切后的pLentiLox3．7载体片段进行连接,连接体系转化感受态大肠杆菌,用菌落PCR法筛选插

关键词： Mecp2-shRNA 慢病毒表达载体重组克隆

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促进肝细胞miR-199b高表达的慢病毒表达载体及其构建方法

促进肝细胞miR-199b高表达的慢病毒表达载体及其构建方法

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作者：任晓虎刘建军黄新凤钟佳成阮嘉雯 518055 广东省深圳市南山区龙苑路8号

本发明提供一种促进肝细胞miR‑199b高表达的慢病毒表达载体，包括pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑Puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和含有绿色荧光基因的Pri‑miRNA‑199b序列产物；所述多克隆位点序列包括Nhe I酶切... 详细信息

标准号: CN105925613A

本发明提供一种促进肝细胞miR‑199b高表达的慢病毒表达载体，包括pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑Puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和含有绿色荧光基因的Pri‑miRNA‑199b序列产物；所述多克隆位点序列包括Nhe I酶切位点和BamH I酶切位点，所述含有绿色荧光基因的Pri‑miRNA‑199b序列产物正向插入所述多克隆位点序列中。本发明属于基因工程技术领域，本发明提供的重组慢病毒表达载体具有转染效率高，用量少的优点，可在人源肝细胞中持续、高效、稳定地提高miRNA‑199b表达。

关键词：多克隆位点序列绿色荧光基因序列产物肝细胞慢病毒表达载体基因工程技术抗性基因序列启动子序列重组慢病毒表达载体病毒载体基本序列酶切位点转染效率高表达人源位点正向

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一种肝细胞miR-199b低表达的慢病毒表达载体及其构建方法

一种肝细胞miR-199b低表达的慢病毒表达载体及其构建方法

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作者：刘建军任晓虎阮嘉雯刘威黄新凤 518000 广东省深圳市南山区龙苑路8号

本发明提供一种肝细胞miR‑199b低表达的慢病毒表达载体，包括pLVX‑shRNA2‑puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和tudmiRNA‑199b重组质粒；所述多克隆位点序列包括Hind III酶切位点和BamH I酶切位点，所述... 详细信息

标准号: CN108517335B

本发明提供一种肝细胞miR‑199b低表达的慢病毒表达载体，包括pLVX‑shRNA2‑puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和tudmiRNA‑199b重组质粒；所述多克隆位点序列包括Hind III酶切位点和BamH I酶切位点，所述tudmiRNA‑199b重组质粒正向插入所述多克隆位点序列中。本发明属于基因工程技术领域，本发明提供的重组慢病毒表达载体具有转染效率高，用量少的优点，可在人源肝细胞中持续、高效、稳定地抑制miRNA‑199b表达。

关键词：多克隆位点序列重组质粒肝细胞位点慢病毒表达载体基因工程技术抗性基因序列启动子序列重组慢病毒表达载体病毒载体基本序列转染效率低表达人源正向

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基于人源化CD276抗体的CAR慢病毒表达载体构建及其应用

基于人源化CD276抗体的CAR慢病毒表达载体构建及其应用

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作者：李峰张毅张震 450052 河南省郑州市二七区建设路50号

本发明涉及CAR慢病毒表达载体技术领域，尤其是基于人源化CD276抗体的CAR慢病毒表达载体构建及其应用，通过构建包含人源化CD276特异单链抗体(scFv)、CD8信号传导片段、以及CD28或41BB刺激信号分子的CAR序列，制备了靶向CD276的CAR(CD27... 详细信息

标准号: CN109609533A

本发明涉及CAR慢病毒表达载体技术领域，尤其是基于人源化CD276抗体的CAR慢病毒表达载体构建及其应用，通过构建包含人源化CD276特异单链抗体(scFv)、CD8信号传导片段、以及CD28或41BB刺激信号分子的CAR序列，制备了靶向CD276的CAR(CD276‑28z‑CAR或CD276‑BBz‑CAR)表达质粒与CAR‑T细胞。本发明采用了人源化的抗CD276scFv作为CAR‑T细胞识别区，可以有效避免免疫排斥发生，有助于治疗效果改善。通过添加胞内刺激信号(CD28或41BB)，能够改善T细胞功能。此类转基因修饰的CAR‑T细胞具备更强、更持久的杀伤能力。

关键词：人源化慢病毒表达载体刺激信号构建抗体转基因修饰表达质粒杀伤能力特异单链信号传导治疗效果靶向制备排斥应用

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特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用

特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与...

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作者：白晓智胡大海陶克韩军涛朱雄翔董茂龙苏琳琳石继红汤朝武 710032 陕西省西安市长乐西路127号

本发明提供一种特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是根据人SIRT1的mRNA全序列，应用RNA structure 4.4软件对靶mRNA的序列进行评估得到4条靶核苷酸序列，分别在这4条靶核苷酸序列两端引入... 详细信息

标准号: CN103589753B

本发明提供一种特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是根据人SIRT1的mRNA全序列，应用RNA structure 4.4软件对靶mRNA的序列进行评估得到4条靶核苷酸序列，分别在这4条靶核苷酸序列两端引入相应的接头后得到相对对应的shRNA寡核苷酸序列，将shRNA寡核苷酸序列插入到所述的多克隆位点、连结至慢病毒siRNA载体pFIV-H1/U6-copGFP中。所述的多克隆位点包括Bbs I酶切位点，正义及反义链的5’端分别添加了AAAG及AAAA，与Bbs I酶切后形成的粘性末端互补；本发明提供的人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体具有转染效率高，可持续、稳定、特异地抑制人SIRT1基因的表达，可用于科学研究及制备治疗人SIRT1基因表达异常相关疾病的药物。

关键词：慢病毒表达载体靶核苷酸序列寡核苷酸序列多克隆位点表达异常表达载体酶切位点粘性末端种特异性转染效率反义链慢病毒全序列对靶构建可用酶切制备连结应用科学研究引入疾病评估治疗

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一种biotin-avidin-慢病毒表达载体和CAR-T细胞制备方法及可视化方案

一种biotin-avidin-慢病毒表达载体和CAR-T细胞制备方法及可视化...

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作者：沈丽刘旭杰刘恺余郝丽敏 100871 北京市海淀区颐和园路5号

本发明提出了一种biotin-avidin-慢病毒表达载体和CAR-T细胞制备方法，以解决传统CAR-T的靶向性单一、制备繁琐、耗时费力、经济性差的缺点。该方法通过构建avidin-CAR慢病毒包装载体；病毒包装；T细胞分离、激活、共刺激结构域基因转... 详细信息

标准号: CN106282237A

本发明提出了一种biotin-avidin-慢病毒表达载体和CAR-T细胞制备方法，以解决传统CAR-T的靶向性单一、制备繁琐、耗时费力、经济性差的缺点。该方法通过构建avidin-CAR慢病毒包装载体；病毒包装；T细胞分离、激活、共刺激结构域基因转导、扩增来制备CAR-T细胞。并在通用型CAR-T治疗系统基础上，引入分子影像学检测手段，提出了一种基于该细胞的可视化治疗方案，可以实时、动态、在体监控CAR-T细胞治疗过程，从而解决目前CAR-T细胞在治疗过程中缺乏有效监控的现状。本发明具有制备简易、选择多样、靶标广泛、治疗过程可视化的优点，适用于肿瘤患者的治疗。

关键词：制备治疗可视化细胞慢病毒表达载体分子影像学结构域基因包装载体病毒包装细胞制备细胞治疗有效监控治疗系统靶向性慢病毒通用型靶标构建扩增转导耗时费力简易肿瘤激活刺激监控引入检测

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