检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第23期9卷 170-172,i004页

作者：韩清民施佳平林一峰方坚庄洪刘庆思广州中医药大学第三附属医院骨科广东省广州市510240 广州中医药大学第三附属医院药剂科广东省广州市510240

目的:观察能诱导体外培养的破骨细胞凋亡的骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞凋亡的抑制作用。方法:实验于2003-01/2003-06在广州中医药大学第一附属医院骨科实验室完成。①选用1d龄雌性SD大鼠3只,用于分离原代成骨细胞;6月龄SD雌性大鼠2... 详细信息

目的:观察能诱导体外培养的破骨细胞凋亡的骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞凋亡的抑制作用。方法:实验于2003-01/2003-06在广州中医药大学第一附属医院骨科实验室完成。①选用1d龄雌性SD大鼠3只,用于分离原代成骨细胞;6月龄SD雌性大鼠24只用于制备含药血清。②6月龄SD雌性大鼠随机分成3组,每组8只,分别为骨康方组、罗盖全组和空白对照组(蒸馏水灌胃)。骨康方由淫羊藿、补骨脂、黄芪、熟地、白芍等药物组成,为中药煎剂,含生药量1.43kg/L,按4.8g/kg生药灌胃,相当于临床剂量的10倍。罗盖全(活性维生素D3)按0.084μg/kg灌胃,相当于临床剂量的10倍。各组大鼠分别用上述物质灌胃,每次17.5mL/kg,2次/d,间隔5h,连续灌胃3d,最后1次灌胃后2h腹主动脉取血,离心获取含药血清。将传代的成骨细胞分别加入含药血清培养7d时,加入肿瘤坏死因子α,剂量为30μg/L,分别于12和24h后取出长有成骨细胞的盖玻片,经吖啶橙染色,置Nikon荧光显微镜下直接观察拍照。③成骨细胞的鉴定,包括形态学观察和碱性磷酸酶染色和矿化结节茜素红染色观察。结果:①在用空白血清培养7d的成骨细胞中加入肿瘤坏死因子α,12h时可见到成骨细胞出现凋亡征象,24h时出现典型的细胞凋亡形态。②在用骨康血清和罗盖全血清培养7d的成骨细胞可部分对抗肿瘤坏死因子α所致的成骨细胞凋亡作用,中药骨康血清和罗盖全血清对成骨细胞凋亡的抑制作用相似。结论:①肿瘤坏死因子α可诱导成骨细胞凋亡。②用中药骨康含药血清培养7d的成骨细胞可部分对抗肿瘤坏死因子α对其的损伤,提示中药骨康可通过阻滞肿瘤坏死因子α诱导的成骨细胞凋亡,发挥防治骨质疏松的作用。

关键词：补气补肾补益脾肾动物实验骨质疏松/中药疗法成骨细胞/生理学细胞凋亡

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改良成骨细胞体外培养和鉴定方法

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中国老年学杂志 2006年第1期26卷 76-78页

作者：胡静郑洪新辽宁中医学院基础医学院辽宁沈阳110032

目的探讨理想的成骨细胞培养和鉴定方法。方法同时采用多次胶原酶消化法及骨片贴附法获得成骨细胞,应用Gomori改良钙钴法和在此基础上苏木精复染法做成骨细胞鉴定,通过做成骨细胞动态形态学观察和生物学鉴定,比较不同细胞培养法和鉴定... 详细信息

目的探讨理想的成骨细胞培养和鉴定方法。方法同时采用多次胶原酶消化法及骨片贴附法获得成骨细胞,应用Gomori改良钙钴法和在此基础上苏木精复染法做成骨细胞鉴定,通过做成骨细胞动态形态学观察和生物学鉴定,比较不同细胞培养法和鉴定法。结果多次胶原酶消化法获得的成骨细胞数量更多,纯度更高,密度更均匀一致,多数细胞处于同一个生长周期;在改良钙钴法基础上做苏木精复染,成骨细胞结构更清楚,棕黑色颗粒分布位置更清晰可见,和阴性对照比较差异更显著。结论多次胶原酶消化法获得的成骨样细胞更适于做体外实验研究模型;采用苏木精复染法做成骨细胞鉴定更有效。

关键词：成骨细胞/生理学形态学碱性磷酸酶酶消化法攀定细胞培养

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补肾复方含药血清对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达的影响

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中医正骨 2006年第9期18卷 1-3页

作者：肖鲁伟王伟东童培建代燎原浙江中医药大学杭州310006

为研究补肾复方对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达影响。以补肾活血方、补肾健脾方、龟鹿二仙膏、金匮肾气丸、六味地黄丸、左归丸6种补肾中药复方及生理盐水给体重为250g左右的大鼠灌胃,提取含药血清;采用酶消化法从初生2天SD大鼠头盖骨中分... 详细信息

为研究补肾复方对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达影响。以补肾活血方、补肾健脾方、龟鹿二仙膏、金匮肾气丸、六味地黄丸、左归丸6种补肾中药复方及生理盐水给体重为250g左右的大鼠灌胃,提取含药血清;采用酶消化法从初生2天SD大鼠头盖骨中分离出成骨细胞,用含药血清及生理盐水进行成骨细胞传代培养;取第2代细胞,培养至细胞铺满培养瓶约80%时,更换含药血清培养液24小时;用含药血清培养液24小时后终止培养,提取总RNA,应用RT-PCR方法观察六种补肾复方对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达影响。结果显示补肾活血方、补肾健脾方、金匮肾气丸、六味地黄丸和左归丸含药血清培养的大鼠成骨细胞OPG的表达量高于生理盐水对照组,龟鹿二仙膏含药血清培养的大鼠成骨细胞OPG的表达量低于生理盐水对照组,其中补肾活血方组、补肾健脾方组大鼠成骨细胞OPG表达量明显高于生理盐水对照组,统计学有显著性差异(P<0.05)。6种补肾复方含药血清培养的大鼠成骨细胞ODF表达量均低于生理盐水对照组,其中补肾活血方组、补肾健脾方组和金匮肾气丸组大鼠成骨细胞ODF表达量明显低于生理盐水对照组,统计学有显著性差异(P<0.05)。表明补肾活血方、补肾健脾方含药血清能增加大鼠成骨细胞OPG表达量,降低大鼠成骨细胞ODF表达量。

关键词：补肾复方/药效学成骨细胞/生理学血清药理学 OPG ODF 实验研究动物大鼠

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补骨脂注射液对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响

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中医正骨 2004年第6期16卷 6-7页

作者：林举择陈升恺罗家栋广州中医药大学级研究生***

为研究补骨脂对体外成骨细胞增殖的影响。以出生 2 4h以内的wistar大鼠为来源 ,酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,胰蛋白酶消化后 ,传代培养大鼠成骨细胞 ;取一定量接种于 2 4孔培养板细胞贴壁后 ,分成实验组 1 5与空白对照组 ... 详细信息

为研究补骨脂对体外成骨细胞增殖的影响。以出生 2 4h以内的wistar大鼠为来源 ,酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,胰蛋白酶消化后 ,传代培养大鼠成骨细胞 ;取一定量接种于 2 4孔培养板细胞贴壁后 ,分成实验组 1 5与空白对照组 ,分别用含补骨脂注射液 5 %、12 .5 %、2 5 %、5 0 %、10 0 %、0 %的DMEM培养基进行培养 ,连续观察 7天 ,绘制细胞生长曲线 ;另取一定量接种于 96孔培养板 ,分组及加入培养基同上 ,MTT法观察细胞存活和增殖能力。结果显示原代成骨细胞逐渐形成成纤维细胞集落 ,有成纤维细胞型表现 ;传代成骨细胞逐渐被细胞分泌的基质所包埋 ,形成钙化。补骨脂对新生大鼠成骨细胞的增殖有显著促进作用。表明利用胰酶消化法可以分离培养出纯度高 ,数量较多且培养时间明显缩短的成骨细胞。补骨脂抗骨质疏松的作用与其增加成骨细胞的数量和促进成骨细胞的增殖能力有关。

关键词：骨质疏松症/中医药方法补骨脂/治疗应用成骨细胞/生理学实验研究动物大鼠

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单味中药对成骨相关基因表达的影响

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中医正骨 2004年第3期16卷 6-8页

作者：冯伟傅文彧魏义勇张玥王君朱雅萍张凤华上海市伤骨科研究所 200025 上海中医药大学

为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞成骨相关基因表达的影响。应用RT PCR方法观察常用接骨单味中药含药血清对体外培养成骨细胞成骨相关基因mRNA的表达。结果显示单味中药在促进成骨细胞中cbfal的表达以自然铜为最 ,其下依次为... 详细信息

为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞成骨相关基因表达的影响。应用RT PCR方法观察常用接骨单味中药含药血清对体外培养成骨细胞成骨相关基因mRNA的表达。结果显示单味中药在促进成骨细胞中cbfal的表达以自然铜为最 ,其下依次为续断、当归、乳香、没药和地鳖虫 ,而骨碎补并没有促进cbfal的表达 ;在促进成骨细胞BMP 2的表达中以续断和骨碎补为最 ,依次为当归、自然铜和没药 ,但是地鳖虫和乳香并没有促进BMP 2表达的功能 ;在促进IGF的表达中 ,以乳香为最 ,依次当归、自然铜、续断 ,而骨碎补、地鳖虫和没药 ,却没有上调IGF的表达。表明单味接骨中药可影响成骨相关基因的表达 ,但不同药物作用的基因靶点不同。

关键词：中药/药效学成骨细胞/生理学细胞培养对比研究动物大鼠

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纳米钙补肾中药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响

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中医正骨 2005年第5期17卷 1-3+65页

作者：胡静明彩荣郑洪新林庶如辽宁中医学院辽宁中医学院沈阳110032

用血清药理学方法探讨纳米钙补肾中药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。按照随机对照原则设立7个实验组假手术组、模型空白组、中药复方小剂量组、中药复方中剂量组、中药复方大剂量组、骨疏康颗粒组、牡蛎碳酸钙咀嚼片组,在相同... 详细信息

用血清药理学方法探讨纳米钙补肾中药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。按照随机对照原则设立7个实验组假手术组、模型空白组、中药复方小剂量组、中药复方中剂量组、中药复方大剂量组、骨疏康颗粒组、牡蛎碳酸钙咀嚼片组,在相同条件下分别制备含药血清和对照血清。采用多次胶原酶消化法获得足够数量的成骨细胞进行实验研究。用MTT法观察各组不同浓度血清在不同作用时间段对成骨细胞增殖的影响。采用SPSS10.0软件进行均数比较和多元线性分析。结果表明,3个中药复方组均能促进成骨细胞增殖,其中20%血清浓度下中剂量中药复方增殖作用最为明显,有显著的统计学意义(P<0.01)。表明血清浓度与成骨细胞增殖率有较强的相关关系。

关键词：成骨细胞/生理学纳米中药/药效学细胞培养 MTT法实验研究动物大鼠

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活络骨康丸对成骨细胞作用的研究

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中医正骨 2004年第9期16卷 3-4页

作者：刘建民张依山马锦富河南省郑州市骨科医院 450052 四川大学华西第四医院

为了观察活络骨康丸对成骨细胞的直接刺激作用。采用酶消化法分离培养人成骨细胞 ,加入不同浓度的活络骨康丸药液 ,测定AKP、BGP、PYD的含量。结果AKP、BGP水平随药物浓度增加而升高 ,PYD反而减少 (P <0 .0 5 )。表明活络骨康丸对成... 详细信息

为了观察活络骨康丸对成骨细胞的直接刺激作用。采用酶消化法分离培养人成骨细胞 ,加入不同浓度的活络骨康丸药液 ,测定AKP、BGP、PYD的含量。结果AKP、BGP水平随药物浓度增加而升高 ,PYD反而减少 (P <0 .0 5 )。表明活络骨康丸对成骨细胞有直接刺激作用 ;

关键词：骨质疏松症/中医药疗法活络骨康丸/治疗应用活络骨康丸/药效学成骨细胞/生理学实验研究

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牡蛎钙补肾中药血清对骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用

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中国中医骨伤科杂志 2009年第7期17卷 1-4页

作者：胡静郑洪新上海中医药大学基础医学院上海201203 辽宁中医药大学基础医学院

目的:用血清药理学方法研究牡蛎钙补肾中药血清对离体大鼠成骨细胞中骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法:采用多次胶原酶消化法获得足够数量的成骨细胞(OB),用改良钙钴法测定碱性磷酸酶(ALP)活性以鉴定OB。用含药血清进... 详细信息

目的:用血清药理学方法研究牡蛎钙补肾中药血清对离体大鼠成骨细胞中骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法:采用多次胶原酶消化法获得足够数量的成骨细胞(OB),用改良钙钴法测定碱性磷酸酶(ALP)活性以鉴定OB。用含药血清进行细胞培养48h后,用逆转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)检测各组OB中BMP-4和Smad5、6mRNA表达。结果:与模型空白组比较,牡蛎钙补肾中药组可明显上调OB中BMP-4和Smad5 mRNA表达,下调Smad6mRNA表达。结论:牡蛎钙补肾中药血清可以提高OB中BMP-4和Smad5基因表达、降低Smad6基因表达,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一。

关键词：成骨细胞/生理学中药/药效学骨质疏松症骨形成蛋白-4 Smads蛋白

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Effect of liposomes on mineralization in rat osteoblast-enriched cultures.

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Kaohsiung Journal of Medical Sciences 1999年第4期15卷 187-94页

作者： HuangJS WuHF HongJM ChangFH HongK Graduate Institute of Dental Science Kaohsiung Medical College.

Liposomes, artificial membranous lipid vesicles, have been used as model structures for biological calcification processes. However, there is no definite conclusion that liposomes can be like matrix vesicles for inducing bone calcification and bone-like tissue formation on primary cultured cells. To determine whether liposomes can promote bone cell growth and mineralization by inducing crystal nucleation, liposomes composed of egg phosphatidylcholine, cholesterol, and bovine brain phosphatidylserine were added to 21-day-old Sprague-Dawley fetal rat calvarial cell cultures from day 1. The aims were to observe proliferation and the phenotype of osteoblasts by measuring cell numbers and alkaline phosphatase (ALP) activity and, when added at confluence, to observe calcification. The data were analyzed with two-way ANOVA. During the 16-day culture period, cell numbers were not significantly affected by liposomes (100 mumol/L). However, ALP activity was significantly inhibited by liposomes (p < 0.05) at day 16 and thereafter. Calcified particles were detected by von Kossa's method, and were larger and more abundant (p < 0.05) in the liposomes groups than in the control from days 12-24. This response depended on liposomes dose. These findings suggest that liposomes promote calcification and accelerate the formation of bone-like tissue. Liposomes slightly reduce the expression of the osteoblast phenotype and do not affect cell growth in primary rat osteoblast-enriched cultures.

关键词：碱性磷酸酶/代谢钙化生理性/药物作用细胞分裂/药物作用细胞培养的脂质体/药理学成骨细胞/药物作用成骨细胞/生理学大鼠 Sprague-Dawley 动物大鼠

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