检索结果-内蒙古大学图书馆

国外药学(抗生素分册) 1985年第4期 245-248页

作者：泽井哲夫刘庆增陈微微

药物耐药菌由于抗生素的滥用造成耐药菌增加,导致疗效显著下降.分析1951年至1967年的17年间日本主要生产的链霉素、四环素、氯霉素,从当时由患者分离的痢疾杆菌来看,对这些抗生素至少有一种以上出现耐药菌株.证实从1956年起随着抗生素... 详细信息

药物耐药菌由于抗生素的滥用造成耐药菌增加,导致疗效显著下降.分析1951年至1967年的17年间日本主要生产的链霉素、四环素、氯霉素,从当时由患者分离的痢疾杆菌来看,对这些抗生素至少有一种以上出现耐药菌株.证实从1956年起随着抗生素用量的增加耐药菌急剧上升.结核杆菌的耐药性比痢疾杆菌更为严重,1972年调查说明约8%的患者在治疗前已感染链霉素耐药菌.统计资料提示

关键词：内酞胺类抗生素耐药菌株头抱菌素甲氧苯青霉素新青霉素Ⅰ 青霉素酶酰胺酶抗生素耐药菌金黄色葡萄球菌氨基糖碳水化合物丁胺卡那霉素耐药变异金葡菌

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空气中抗生素耐药菌和耐药基因的赋存特征及研究现状

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中国农业气象 2024年第5期45卷 472-483页

作者：李烨姗杨珍珍王雪荣颜蒙蒙张卓毅张琇李红娜中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所北京100081 赣南师范大学生命科学学院赣州341000 北京市畜牧总站北京100101 北方民族大学宁夏特殊生境微生物资源开发与利用重点实验室银川750021

抗生素被广泛用于医疗和养殖行业,由此引起的微生物耐药性已成为全球公共卫生难题。当前对土壤和水体环境中抗生素耐药菌(Antibiotic-resistant bacteria,ARB)及耐药基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)的报道较多,而针对空气中的... 详细信息

抗生素被广泛用于医疗和养殖行业,由此引起的微生物耐药性已成为全球公共卫生难题。当前对土壤和水体环境中抗生素耐药菌(Antibiotic-resistant bacteria,ARB)及耐药基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)的报道较多,而针对空气中的研究较为缺乏。本文全面揭示了国内外不同类型环境空气中ARB和ARGs的赋存特征、影响因素及传播机制,以期为微生物耐药性的跨介迁移规律解析及科学应对提供理论支撑。结果表明,空气中ARB和ARGs的丰度受环境条件影响,养殖场、污水处理厂及医院等典型污染区丰度较高,四环素类、磺胺类和β-内酰胺类ARGs为主要类型。其中,养殖场空气中ARGs的丰度高于其他环境2~3个数量级,猪舍在所有畜禽舍类型中丰度最高。目前,对空气中ARB和ARGs的采样要求缺乏统一的规范标准,采样季节、时长、粒径及共存污染物均对测定结果产生影响。同时,大气污染程度、土壤含水率、降水情况及气团运动等一定程度上影响着空气中ARB和ARGs的环境行为,有关其在土壤−大气界面的迁移规律及驱动机制仍有待进一步深入研究。

关键词：环境空气抗生素耐药基因抗生素耐药菌采样因素跨介质迁移

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大气环境中抗生素耐药菌的来源与传播扩散研究进展

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中国抗生素杂志 2021年第9期46卷 821-828页

作者：付星宇汪庆毕聪聪曹弘扬郭绍月梁海崟李梦涵骆慧晓河北工程大学能源与环境工程学院河北省大气污染成因与影响重点实验室(筹)邯郸056038

抗生素耐药性日益成为威胁人类健康的重大挑战。目前,抗生素耐药菌在水和土壤中的传播扩散已被广泛研究,但大气环境中耐药菌的污染现状还鲜有报道。大气作为一种强流动性的耐药菌存储库,可使细菌在空气介质中长时间跨区域传播扩散,并可... 详细信息

抗生素耐药性日益成为威胁人类健康的重大挑战。目前,抗生素耐药菌在水和土壤中的传播扩散已被广泛研究,但大气环境中耐药菌的污染现状还鲜有报道。大气作为一种强流动性的耐药菌存储库,可使细菌在空气介质中长时间跨区域传播扩散,并可直接被人体吸入,从而对人体健康产生严重的危害。本文介绍了大气环境中抗生素耐药菌的国内外研究现状,分析了大气中耐药菌的来源以及对人体的潜在健康风险,对今后有关大气环境耐药菌的研究重点进行了展望,对正确揭示耐药菌在空气中的传播扩散具有重要理论意义。

关键词：抗生素耐药菌大气环境污染来源健康风险

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食源性抗生素耐药菌的污染现状、传播扩散及健康风险研究进展

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中国抗生素杂志 2022年第10期47卷 1002-1012页

作者：曹弘扬汪庆赵佳丽梁海崟郭绍月万春云骆慧晓河北工程大学能源与环境工程学院河北省大气污染成因与影响重点实验室邯郸056038 河北工程大学医学院邯郸056038

抗生素的过度使用加剧了环境耐药菌的产生,给人类健康造成潜在风险。在食品链多个环节过度使用或滥用抗生素,造成肉制品、水产品和水果蔬菜等多种食品中细菌耐药性逐年增强。携带耐药质粒的耐药菌通过“农场到餐桌”转移、定植在人体肠... 详细信息

抗生素的过度使用加剧了环境耐药菌的产生,给人类健康造成潜在风险。在食品链多个环节过度使用或滥用抗生素,造成肉制品、水产品和水果蔬菜等多种食品中细菌耐药性逐年增强。携带耐药质粒的耐药菌通过“农场到餐桌”转移、定植在人体肠道,引起人体肠道菌群变化和免疫功能改变。食品的全球化贸易进一步加剧了细菌耐药性的全球性传播。本文综述了食源性耐药菌污染现状、传播途径和人体健康风险。同时,结合国内外研究现状,对食品环境中抗生素耐药菌的研究重点进行展望。

关键词：抗生素耐药菌食源性传播途径健康风险

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肉鸡饲养场PM2.5、粪便和土壤中抗生素抗性基因污染特征及抗生素耐药菌的分布

肉鸡饲养场PM2.5、粪便和土壤中抗生素抗性基因污染特征及抗生素...

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作者：刘菲常州大学

学位级别：硕士

抗生素抗性基因（antibiotic resistance genes,ARGs）和抗生素耐药菌（antibiotic resistance bacteria,ARB）的环境污染主要是由于抗生素的过度使用和滥用,进而也降低了抗生素对人类和动物体内多种致病菌的治疗潜力。畜禽粪便通常被... 详细信息

抗生素抗性基因（antibiotic resistance genes,ARGs）和抗生素耐药菌（antibiotic resistance bacteria,ARB）的环境污染主要是由于抗生素的过度使用和滥用,进而也降低了抗生素对人类和动物体内多种致病菌的治疗潜力。畜禽粪便通常被认为是抗生素、ARB和ARGs的重要贮存库,随着粪便的排泄,加速了抗生素耐药性在环境中的传播。家禽肠道细菌是导致人类病原体获得抗生素抗性的一个重要环境储存库。因此,本文针对常州集约化肉鸡饲养场PM2.5、粪便和土壤样本,研究其ARGs丰度和多样性、细菌群落结构及ARB分布情况,分析一类整合子（int1）和细菌群落在ARGs环境传播中扮演的作用,并进行ARGs呼吸途径暴露量评估。具体结论如下:（1）磺胺类抗性基因、大环内酯类抗性基因和四环素类抗性基因在肉鸡饲养场PM2.5、粪便和土壤样品中检出丰度较高。在肉鸡饲养的微环境中,粪便是饲养舍内PM2.5中ARGs的重要来源。Int1与ARGs呈显著正相关,促进了ARGs在不同环境介质之间传播。肉鸡饲养场环境中PM2.5可作为多药耐药性的储库,其中int1和ARGs的暴露量和每日摄入量较高。（2）PM2.5与粪便细菌群落结构及多样性较为相似,UPGMA聚类分析表明粪便对肉鸡饲养场PM2.5的贡献更大。同时,PM2.5与粪便中人类潜在致病菌的相对丰度均高于土壤。冗余分析结果表明肉鸡饲养场不同ARGs与细菌群落的作用关系相似,不同环境介质中ARGs具有类似命运,而优势细菌会在肉鸡饲养场抗性改变中扮演重要作用。共现模式分析结果表明多种ARGs会被葡萄球菌属（Staphylococcus）、拟杆菌属（Bacteroides）和Jeotgalicoccus携带,Staphylococcus作为典型的人类致病菌,其风险更大。（3）肉鸡饲养场土壤、粪便、舍外PM2.5和舍内PM2.5中多重耐药比率分别为38.46%、100%、33.33%、100%。土壤中苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）为多重耐药致病菌,而松鼠葡萄球菌（Staphylococcus sciuri）、缓慢葡萄球菌（Staphylococcus lentus）、Staphylococcus arlettae、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、鹑鸡肠球菌（Enterococcus gallinarum）和多动物链球菌（Streptococcus pluranimalium）为粪便和PM2.5中的多重耐药致病菌。

关键词：抗生素抗性基因抗生素耐药菌一类整合子 PM2.5 肉鸡饲养场

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养殖业水土环境抗生素耐药菌分离鉴定及潜在风险研究

养殖业水土环境抗生素耐药菌分离鉴定及潜在风险研究

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作者：赵佳山东建筑大学

学位级别：硕士

中国是抗生素产量大国，也是抗生素使用大国。而抗生素在医疗、畜牧业、水产养殖等行业的不合理应用，导致抗生素耐药菌的普遍存在，严重影响人类健康。近年来，对于耐药菌的研究在医学领域已经十分普遍，而对于和人类生活息息相关的养... 详细信息

中国是抗生素产量大国，也是抗生素使用大国。而抗生素在医疗、畜牧业、水产养殖等行业的不合理应用，导致抗生素耐药菌的普遍存在，严重影响人类健康。近年来，对于耐药菌的研究在医学领域已经十分普遍，而对于和人类生活息息相关的养殖业中耐药菌的研究依然匮乏。因此，对养殖业水土环境中耐药菌的数量、种类和耐药情况的研究是十分必要的，并且可以为养殖行业抗生素的使用提出建议。　　本研究以养殖业水土环境样品作为研究对象，对样品中的细菌总数、耐药菌数量采用平板菌落计数的方法，并进行对比分析;通过PCR和16SrDNA测序鉴定分离出的耐药菌，并检测其中的条件致病菌对于多粘菌素等10种抗生素的最小抑菌浓度(MICs)，通过4种外排泵抑制剂对菌株耐药性的影响，推断菌株是否存在外排泵，探讨抗生素耐药菌株的耐药机制：对研究菌株是否可以将抗性基因水平基因转移至大肠杆菌标准质控菌株(EscherichiacoliATCC25922DN)进行鉴定;最后对来源于寡养单胞菌属(Stenotrophomonassp.)POL-G4菌株的外排泵基因进行异源表达和抗生素MICs分析。通过本课题的研究发现（1）通过对养殖业水土环境中菌落总数及耐药菌总数的检测发现细菌的数量级在105CFU/mL及以上且含有大量的耐药菌，说明养殖业是耐药菌发展扩大和传播的重要途径，在研究样品中共分离并鉴定了86株耐药菌，包含大量的球菌、杆菌、假单胞菌等;在不同抗生素的筛选压力下，样品中分离的耐药菌明显少于样品细菌总数;分离出的耐药菌部分属于条件致病菌;（2）检测耐药菌对不同抗生素的最小抑菌浓度，发现分离的耐药菌都对3种及以上的抗生素耐药，属于多重耐药菌;且大多数耐药菌对阿米卡星和氨苄青霉素的耐药性较强，对于氟甲砜霉素的耐药性明显小于测试的其他抗生素;（3）本研究初步探讨了抗生素耐药菌作用机制，实验结果证明外排泵抑制剂确实能够降低菌株对某抗生素的耐药性，推断分离出的耐药菌可能存在相关的外排泵;从基因组测序结果来看，全基因组里面包含大量抗生素耐药基因;（4）部分抗生素耐药菌具有潜在的环境风险，某些菌株可以将抗性基因水平转移至***25922DN菌株中，例如菌株MER-M202(Pandoraeapnomenusasp.).通过接合转移实验使原本对抗生素敏感的大肠杆菌具有耐药性，推断在养殖业水土环境中水平基因转移是使抗性基因传播扩散的重要途径;（5）对POL-G4菌株预测的目的基因进行重组载体的构建，成功构建了RS16900、RS17565、RS18690、RS08745、RS06240、RS06780、RS05865重组表达载体。

关键词：养殖业水土环境抗生素耐药菌最小抑菌浓度外排泵抑制剂水平基因转移

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养鸡场抗生素耐药菌及抗性基因污染规律研究

养鸡场抗生素耐药菌及抗性基因污染规律研究

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作者：韩帅东北林业大学

学位级别：硕士

近年来,各类抗生素在畜禽养殖业中的大量乃至过量使用,致使环境中抗生素抗性细菌(Antibiotic resistance bacteria，ARB)和抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes ARGs)的污染正在加剧。作为环境中抗生素耐药菌和抗性基因的重要源... 详细信息

近年来,各类抗生素在畜禽养殖业中的大量乃至过量使用,致使环境中抗生素抗性细菌(Antibiotic resistance bacteria，ARB)和抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes ARGs)的污染正在加剧。作为环境中抗生素耐药菌和抗性基因的重要源头,畜禽环境中ARB和ARGs的相关研究较少,特别是养殖场空气环境中ARB和ARGs污染规律未见系统研究。针对以上不足,对北京地区某典型蛋鸡养殖场粪便,舍内外空气样本进行采集,对其中ARB的浓度,耐药性以及影响因素进行分析,在此基础上,考察了 ARGs污染种类和浓度。本研究结果将为养鸡场环境中ARB和ARGs对周围环境的危害评估和制定相应的控制措施提供基础依据。首先,我们采用6级撞击式采样器采集鸡舍内外空气,同时采集蛋鸡粪便,对其中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、金黄色葡萄球菌(S)和总细菌(LB)浓度变化趋势及其可能的影响因素进行分析。通过K-B药敏纸片法对鸡场空气和粪便中MRSA对7大类14种抗生素,青霉素(PEN)、氨苄西林(AMP)、头孢哌酮(CFP)、链霉素(STR)、庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、红霉素(ERY)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LEV)、诺氟沙星(NOR)、四环素(TET)、强力霉素(DOX)、磺胺甲恶唑(SXT)、万古霉素(VAN)的耐药情况进行研究。运用微滴数字PCR(ddPCR)技术对鸡场舍内外空气和粪便样本中的6类22种抗生素抗性基因,β-内酰胺类(blaPSE,blaCTXM,blaTEM,blaOXA10,mecA),氨基糖苷类(aadAl,aadA2,strB,aac(6’)-Ⅱ,aphA3),大环内酯类(mpha,mefA,ermA,ermB),磺胺类(suI1,su12,dfrA1),四环素类(tetG,tetW,tetQ),万古霉素(VanA,VanB)和两类基因整合子(intI1,intI2)进行定量分析。研究结果表明,空气和粪便中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌浓度平均浓度为4.31±4.56×102CFU·m-3和3.37±4.83×104CFU·m-3,占金黄色葡萄球菌比例分别为41.99%±26.99%和22.11%±20.06%。鸡舍内空气和粪便中总细菌浓度随蛋鸡的日龄增加而呈现线性升高;整体上,金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌浓度随日龄增加而增加,并受舍内温度和颗粒物浓度的影响。药敏实验结果表明,本次实验所分离到的MRSA和金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类均表现出显著的耐药性,对磺胺甲恶唑和阿米卡星敏感性较高,对多肽类的万古霉素则为完全敏感。粪便中的金黄色葡萄球菌和MRSA对头孢哌酮的耐药程度,随蛋鸡日龄的增加而下降,与蛋鸡日龄呈显著负相关,对诺氟沙星的耐药程度与蛋鸡日龄呈显著正相关,在蛋鸡日龄较小时表现出轻度耐药,到成年时期则出现高度耐药乃至完全耐药情况。抗性基因究结果显示,本研究所选取的6类ARGs的目标基因及两类基因整合子在鸡舍空气和粪便中大部分都可以被检测到。其中blaTEM、aadA1、aadA2、ermB、tetW、sulI2、sulI1为空气和粪便样品中检出率及丰度较高的基因。从各类抗性基因总量角度来看,依次排序为,氨基糖苷类＞四环素类＞β-内酰胺类＞大环内酯类＞磺胺类＞多肽类。所选取的六类ARGs中均有与移动基因元件(intI1、intI2)呈显著正相关的目标基因,且这种正相关性在粪便样本中检出较多,舍内空气样本次之。

关键词：养鸡场生物气溶胶抗生素耐药菌抗性基因

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Fe3O4@MoS2的制备及其活化过硫酸盐灭活抗生素耐药菌性能研究

Fe3O4@MoS2的制备及其活化过硫酸盐灭活抗生素耐药菌性能研究

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作者：容畅吉林大学

学位级别：硕士

水环境抗生素耐药性污染已成为全球关注的环境问题,严重威胁着人类健康及生态系统安全。抗生素耐药菌（ARB）显著促进抗生素耐药性的传播和扩散。然而,传统污水处理技术对ARB和抗生素耐药基因（ARGs）等新污染物的去除效果十分有限,并... 详细信息

水环境抗生素耐药性污染已成为全球关注的环境问题,严重威胁着人类健康及生态系统安全。抗生素耐药菌（ARB）显著促进抗生素耐药性的传播和扩散。然而,传统污水处理技术对ARB和抗生素耐药基因（ARGs）等新污染物的去除效果十分有限,并导致下游河流的持续污染。基于活化过硫酸盐（PS）的高级氧化技术凭借节能高效、绿色环保等优势,成为最具应用前景的方法之一,广泛应用于抗生素耐药性去除领域,备受研究者关注。然而,活化剂的回收利用困难、ARB灭活后自我修复等问题,限制着基于活化PS的高级氧化技术的实际应用。本研究成功制备Fe3O4@MoS2磁性纳米材料,将其应用于活化PS灭活ARB,结果表明Fe3O4@MoS2/PS体系具有优异的灭活效果,有效抑制了水体中抗生素耐药性的传播扩散。在此基础上,将体系置于模拟太阳光下,贴合原位处理的实际环境,结合太阳光活化PS灭活ARB,实现了多体系的高效协同灭菌。本文主要研究内容和结果如下: （1）首先,通过水热合成法制备MoS2,并采用共沉淀法成功制备Fe3O4@MoS2磁性纳米材料。通过扫描电子显微镜（SEM）、透射电子显微镜（TEM）、傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、拉曼光谱（Raman）、X射线衍射（XRD）、X射线光电子能谱（XPS）、振动样品磁强计（VSM）、紫外可见漫反射光谱（UV-Vis DRS）等方法对Fe3O4@MoS2复合材料进行了系统表征。结果表明,Fe3O4负载到多孔MoS2上,成功制得Fe3O4@MoS2纳米复合材料,其具有顺磁性,并有一定的光吸收能力。（2）基于制备的Fe3O4@MoS2纳米复合材料,以四环素耐药性大肠杆菌（TR ***）为目标ARB,在Fe3O4@MoS2/PS体系中,探究了不同实验因素对TR ***灭活效率的影响,并对灭活机理及灭活后抗生素耐药性传播风险进行探究。实验结果表明:优化条件下（20 mg Fe3O4@MoS2,4 m M PS及35℃）,可将初始浓度为7.5 log CFU/m L的TR ***在20 min内全部灭活。通过自由基捕获实验和电子顺磁共振波谱分析结果表明,在Fe3O4@MoS2/PS体系中,羟基自由基（·OH）和超氧自由基（·O2–）是导致TR ***失活的重要活性氧（ROS）类型;通过机理分析和抗生素耐药性风险探究,结果表明在灭活过程中,Fe3O4@MoS2/PS体系产生的ROS攻击并破坏了TR ***的外排泵蛋白,导致细胞膜破裂和细胞内物质外排。此外,在灭活处理和暗修复后,TR ***中残留的ARGs的水平转化能力得到降低,说明体系可以有效地去除水体中的TR ***及其耐药性。（3）为使Fe3O4@MoS2/PS体系更好的契合实际应用,本研究将Fe3O4@MoS2/PS体系置于模拟太阳光下,探究Fe3O4@MoS2/Light/PS体系内多种灭活路径间的协同作用,分析不同实验因素对灭活效率的影响,揭示灭活机理和处理后抗生素耐药性的传播风险。实验结果表明:优化条件下（30 mg Fe3O4@MoS2,2 m M PS及35℃）,在Fe3O4@MoS2/Light/PS体系中通过20 min的处理,初始浓度为7.5 log CFU/m L的TR ***全部失活。其中,Fe3O4@MoS2/PS体系、Fe3O4@MoS2/Light体系和Light/PS体系在Fe3O4@MoS2/Light/PS体系灭活TR ***的过程中具有协同作用。通过自由基捕获实验和电子顺磁共振波谱分析结果表明,在Fe3O4@MoS2/Light/PS体系中,·OH是导致TR ***失活的主要ROS;通过机理分析和抗生素耐药性风险探究,结果表明在灭活过程中,Fe3O4@MoS2/Light/PS体系产生的ROS攻击并破坏了ARB的外排泵蛋白,导致细胞膜破裂和细胞内物质外排。此外,在暗修复处理后,TR ***无法自我修复,体系中残留的ARGs的水平转化能力也得到降低。综上所述,本研究探究了Fe3O4@MoS2/PS体系和Fe3O4@MoS2/Light/PS体系对TR ***的灭活性能,阐明了影响因素及灭活原理,探究了灭活过程中以及暗修复后体系的抗生素耐药性变化。本研究不仅可为水环境中ARB的有效去除提供了可借鉴的方法,同时为抗生素耐药性传播风险的科学阻控提供了有效途径。

关键词：抗生素耐药菌 Fe3O4@MoS2 过硫酸盐模拟太阳光灭活机理传播风险

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施猪粪土壤中抗生素耐药菌抗性基因的多样性及基因环境研究

施猪粪土壤中抗生素耐药菌抗性基因的多样性及基因环境研究

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作者：邹希南京农业大学

学位级别：硕士

随着畜禽养殖业抗生素的大量使用,畜禽粪便已成为抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)的汇集热点。同时,我国作为动物养殖大国,畜禽粪便常常不经过处理或者处理不完善而直接施用于农田土壤中,这增加了土壤被抗生素和ARGs... 详细信息

随着畜禽养殖业抗生素的大量使用,畜禽粪便已成为抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)的汇集热点。同时,我国作为动物养殖大国,畜禽粪便常常不经过处理或者处理不完善而直接施用于农田土壤中,这增加了土壤被抗生素和ARGs污染的风险。粪肥的施用会向土壤中引入抗生素和ARGs,增加土壤中ARGs的丰度和多样性。土壤是微生物的栖息地,同时是抗生素和ARGs的天然储藏地,由于抗生素的选择压力、ARGs的外源输入以及抗性基因的水平转移,使得土壤中越来越多的微生物对不同的抗生素表现出耐药性。施用不同肥料的土壤中的细菌群落和ARGs存在明显的差异。本研究主要围绕着祁阳红壤试验站不同施肥措施下土壤中ARGs多样性、ARGs的宿主以及施猪粪土壤中不同耐药菌内ARGs的多样性和其基因环境进行研究。本研究采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)比较了祁阳红壤试验站长期施用畜禽粪便(农家猪粪)、化学肥料(NPK)和不施肥对照的土壤中ARGs的差异。实验对土壤DNA样品中16S rRNA基因、五种ARGs(tetG、tetW、aadA、sul2和qacEdelta1)和三种MGEs(Mobile gene elements)指示基因(intI1、tnpA04和IncW)的绝对丰度进行了定量分析,并结合土壤细菌群落组成采用相关性分析对ARGs的宿主进行了初步推测。结果表明,与对照相比施用NPK对所测定的基因的丰度无显著影响(p>0.05),而施用猪粪显著增加测定基因的丰度(p<0.05)。基因aadA、sul2、qacEdelta1和tnpA-04这四个基因的潜在宿主OTU(Operational taxonomic unit)主要分布于Alphaproteobacteria、Deltaproteobacteria 和 Actinobacteria。本研究 ARGs 和 MGEs 的潜在宿主进行了推测时并没有考虑ARGs和MGEs分布于质粒等可在不同的细菌之间传播的移动元件上的可能性。所以对ARGs和MGEs潜在宿主的预测还有待进行下一步研究。因此,本研究通过培养祁阳红壤试验站长期施用猪粪的土壤中的抗性细菌以及细菌基因组测序分析了不同抗性细菌中ARGs的分布情况及其基因环境。结果表明:从施用猪粪土壤中共分离36株抗性细菌(9株头孢氨苄、3株金霉素、9株链霉素、5株氧氟沙星、4株磺胺二甲氧嘧啶和6株氯霉素抗性细菌),隶属于变形菌门、厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门,其中变形菌门和厚壁菌门抗性细菌占主要优势。本实验挑选了 18株抗性细菌进行了基因组测序。本研究在由不同抗生素筛选到的抗性细菌中检测到针对相应抗生素的专性抗性基因以及产生抗性的基因点位突变。其中由头孢氨苄、金霉素和氯霉素筛选到的抗性细菌中均存在相似性较高的专性抗性基因;由磺胺二甲氧嘧啶筛选到的两株菌中,菌株SUL1中存在专性的磺胺类抗性基因sul2,而菌株SUL3中仅检测出基因folP发生了可导致磺胺类抗性的点位突变;由链霉素筛选到的三株抗性细菌中均发现了可导致抗性的基因rpsL点位突变;由氧氟沙星筛选到的菌株中未检测到针对喹诺酮类抗生素的专性抗性基因以及点位突变,该菌株的抗性可能由广谱的抗生素外排机制导致。除了针对筛选抗生素的抗性基因,抗性细菌中普遍还存在针对非筛选抗生素的专性抗性基因,并且这些抗性基因还与已知抗性基因具有较高的相似性。其中,β-内酰胺类抗性基因在所有抗性细菌中分布最为广泛,其次为四环素类和氯霉素抗性基因。这说明施猪粪土壤中抗性细菌可能有被多种抗生素筛选的历史。有7株抗性细菌携带有容易发生水平转移的ARGs,分别是:C17(Pseudomonas sp.)中检测到氯霉素类抗性基因cat7与转座酶相邻;在SUL1(Acinetobactersp.)中检测到四环素类抗性基因tet(Y)与整合酶基因相邻、磺胺类抗性基因su12与转座酶基因相邻,同时发现四环素类抗性基因(tet(Y)、tet(39)、tetR)、磺胺类抗性基因sul2和氯霉素抗性基因floR由质粒携带;在SUL3(Klebsiella sp.)中检测到β-内酰胺酶抗性基因blaCMY-108与整合酶基因相邻;在Str1(Sphingomonas sp.)中检测到β-内酰胺酶抗性基因rm3与整合酶基因相邻;在Cep5(Bacillus sp.)中检测到β-内酰胺酶抗性基因bla1(1)、bla1(4)由同一个质粒携带且均与转座酶基因相邻,同时bla1(1)和bla1(4)还位于不同的基因岛上。检测到氨基糖苷类抗性基因ant(2")-Ia由质粒携带;在CTC1(Bacillus sp.)中检测到2个四环素类抗性基因tet(L)由质粒携带同时这2个基因相邻。在Cep4(Chryseobacte

关键词：抗生素耐药菌荧光定量基因组测序抗生素抗性基因多样性

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人工湿地中抗生素耐药菌和耐药基因环境行为研究

人工湿地中抗生素耐药菌和耐药基因环境行为研究

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作者：杨芳暨南大学

学位级别：硕士

抗生素的滥用导致抗生素耐药菌和耐药基因随生活污水和养殖废水的排放在环境中肆意散播，对公共卫生安全造成潜在威胁，其环境行为效应越来越受到关注，其去除工艺也成为亟待解决的难题。人工湿地因是一种具有广谱去污能力，且经济、高... 详细信息

抗生素的滥用导致抗生素耐药菌和耐药基因随生活污水和养殖废水的排放在环境中肆意散播，对公共卫生安全造成潜在威胁，其环境行为效应越来越受到关注，其去除工艺也成为亟待解决的难题。人工湿地因是一种具有广谱去污能力，且经济、高效、易于维护和管理的人工污水处理生态系统，得到广泛的应用。但目前关于人工湿地中抗生素耐药菌及耐药基因的相关研究还较缺乏，开发人工湿地去除污水中抗生素耐药菌的研究也未见报道，为此本文旨在探究人工湿地系统中抗生素耐药菌和耐药基因的环境行为规律，查明人工湿地去除耐药菌效率及相关影响因素，以期为开发和优化人工湿地，使之既能满足污水中常规污染物处理效果，又能高效削减污水中耐药菌生物量，保障湿地出水生态安全性。本文以大肠杆菌Escherichia coli为指示微生物，采用滤膜法，从12套不同工艺构型的模拟人工湿地的进、出水及基质生物膜的25个采样点共计分离出大肠杆菌1406株，参照Kirby-Bauer纸片法测定了全部菌株对7种常见抗生素的耐药水平，包括复方新诺明、四环素、氨苄西林、氯霉素、庆大霉素、环丙沙星、头孢他啶，并应用PCR技术对耐药菌株数较多的复方新诺明（545株）和四环素（582株）耐药菌株分别进行了磺胺类常见耐药基因sulR（sul1、2、3）与四环素类常见耐药基因tetR（tetA、B、C、D）的检测，了解耐药菌及耐药基因的分布规律，而为了探究湿地系统内部耐药基因可能存在的环境迁移行为，本文还开展了全部耐药菌株（930株）中整合子（Integron）这一类转移元件测定及基因盒(Gene cassette)的测序，主要的实验结果如下： 1.人工湿地中的大肠杆菌对7种抗生素的耐药差异较大，以四环素、复方新诺明和氨苄西林的耐药率较高，25%以上，而其他4种则较低，不足20%； 2.人工湿地能有效去除污水中70%左右的耐药大肠杆菌，有效的降低了耐药菌进入环境的风险； 3.模拟湿地不同位点的耐药率和耐药组合方式有显性著差异，整体表现为进水＜出水＜基质生物膜； 4.模拟湿地基质生物膜耐药水平受工艺类型影响显著，并以潜流湿地中多重耐药指数最高（0.34），而表面流（0.25）、垂直下行流（0.23）及垂直上行流（0.16）较低； 5.磺胺类sulR和四环素tetR耐药基因的检出率以及耐药基因的组合方式在不同采样点差异较大，总体表现为进水＜出水≤基质生物膜； 6.在各采样点均有不同水平的整合酶和基因盒的检出，其中Ⅰ型整合酶占主要，而基因盒共计检出8种类型，以携带aadA和dfrA家族基因为主。推测整合子介导耐药基因的传递在一定意义上影响着人工湿地系统中耐药基因的水平。终上所述，一方面，人工湿地能有效地削减污水中抗性大肠杆菌生物量，降低其进入环境的风险；另一方面，人工湿地基质生物膜充当着抗生素耐药菌及基因的潜在储存库及释放源的作用。因此，如何进一步降低出水抗性水平和抗性基因的检出率，又能高效削减污水中抗性菌和抗性基因，还有待进一步的研究。

关键词：工艺构型模拟人工湿地抗生素耐药菌耐药基因大肠杆菌生物膜去除率

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