检索结果-内蒙古大学图书馆

广西植物 2025年第2期45卷 328-336页

作者：赵小超柴玲林霄商勋葛竹妹万广闻南京中医药大学宿迁附属医院江苏宿迁223800 广西中医药研究院广西中药质量标准研究重点实验室南宁530000 广西中医药大学海洋药物研究院南宁530000

为探究鬼点灯(Bothriospermum zeylanicum)的抗结直肠癌活性成分,该研究采用ODS反相柱色谱、高压制备液相色谱等方法对乙酸乙酯部进行分离纯化,通过质谱及核磁共振等波谱分析鉴定化合物结构,并采用CCK8法检测化合物对人结直肠癌细胞(SW... 详细信息

为探究鬼点灯(Bothriospermum zeylanicum)的抗结直肠癌活性成分,该研究采用ODS反相柱色谱、高压制备液相色谱等方法对乙酸乙酯部进行分离纯化,通过质谱及核磁共振等波谱分析鉴定化合物结构,并采用CCK8法检测化合物对人结直肠癌细胞(SW620、HT-29)及人正常结肠上皮细胞(NCM460)增殖的影响。结果表明:(1)从鬼点灯乙酸乙酯部共分离得到12个化合物,分别鉴定为富马酸(1)、原儿茶酸(2)、富马酸单甲酯(3)、3,4,α-三羟基甲基苯丙酸酯(4)、对羟基苯甲酸(5)、echiumin A(6)、echiumin B(7)、(+)-异落叶松脂素-2a-O-β-D-葡萄糖苷(8)、对香豆酰-α-L-鼠李吡喃糖苷(9)、对香豆酸(10)、(-)-5′-甲氧基异落叶松脂醇-3α-O-β-D-葡萄糖苷(11)、rupestrin B(12)。化合物1-12均为首次从鬼点灯中分离得到。(2)化合物8和化合物12对SW620细胞增殖具有一定抑制作用,其IC50值分别为(9.34±1.10)μmol·L^(-1)和(0.33±0.06)μmol·L^(-1),化合物12对HT-29细胞增殖具有一定的抑制作用,其IC50值为(15.94±1.56)μmol·L^(-1)。该研究结果丰富了鬼点灯的化学成分,进一步明确了其抗结直肠癌活性成分,为鬼点灯的药效开发与利用提供了参考。

关键词：鬼点灯化学成分结构鉴定抗结直肠癌活性乙酸乙酯部

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珊瑚状猴头菌多糖超声辅助提取工艺优化及抗结直肠癌活性研究

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生物技术通报 2024年第11期40卷 78-87页

作者：余金岂邬柯奕陈正睿王婧涵张鑫王春月吉林农业大学植物保护学院长春130118 吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心长春130118 沈阳农业大学园艺学院沈阳110866

【目的】珊瑚状猴头菌(Hericium coralloides(Scop.)Pers.)是一种食药用菌,重点优化其多糖(HCP)的超声提取方案,并对HCP的体外抗结直肠癌活性及机制进行探索。【方法】利用单因素实验结合响应面法(response surface methodology,RSM)对... 详细信息

【目的】珊瑚状猴头菌(Hericium coralloides(Scop.)Pers.)是一种食药用菌,重点优化其多糖(HCP)的超声提取方案,并对HCP的体外抗结直肠癌活性及机制进行探索。【方法】利用单因素实验结合响应面法(response surface methodology,RSM)对HCP超声提取条件进行优化。通过MTT实验与Western blot分析对HCP的抗结直肠癌活性与机制进行研究。【结果】珊瑚状猴头菌多糖超声提取的最优提取方案如下:提取功率417 W,液料比62 mL/g,提取时间52.5 min,多糖的提取率预测值为19.61%,实际提取率为(19.58±0.05)%。HCP通过降低SW480细胞中IKK、IκBα和NF-κB的磷酸化水平,减少了促炎因子IL-6的分泌,抑制SW480细胞生长,半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为1.246 mg/mL。【结论】珊瑚状猴头菌多糖的最佳超声辅助提取率为19.58%,HCP通过抑制NF-κB信号通路减少促炎细胞因子的分泌,进而抑制SW480细胞生长,对于结直肠癌具有潜在的治疗作用。

关键词：珊瑚状猴头菌抗结直肠癌活性超声提取响应面法多糖 NF-κB信号通路

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异源重组联合酶法环化制备环状Lunasin及其性质研究

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食品工业科技 2025年第7期46卷 133-139页

作者：石帆侯轶赵劲松胡松青华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 华南理工大学轻工科学与工程学院广东广州510640

为了实现环状多肽cLunasin的全生物合成,本文设计了合成cLunasin的线性前体aLunasin,构建了含MBP与SUMO双标签的重组表达载体,应用大肠杆菌重组表达aLunasin后经多肽连接酶Butelase 1介导合成cLunasin,进一步通过圆二色光谱、内源荧光... 详细信息

为了实现环状多肽cLunasin的全生物合成,本文设计了合成cLunasin的线性前体aLunasin,构建了含MBP与SUMO双标签的重组表达载体,应用大肠杆菌重组表达aLunasin后经多肽连接酶Butelase 1介导合成cLunasin,进一步通过圆二色光谱、内源荧光光谱和细胞实验探究了环化对Lunasin热稳定性、结构特性与抗结直肠癌活性的影响。结果显示,37℃诱导后重组蛋白成功表达,质谱鉴定结果显示Butelase 1成功环化aLunasin,通过该法每升发酵液可以制备6.36 mg的电泳纯cLunasin。圆二色光谱与内源荧光光谱结果表明,环化在一定程度上提升了Lunasin结构的有序性与致密性。而且,环化改善了Lunasin的热稳定性,在97℃孵育30 min后,多肽保留率从Lunasin的62.3%提高到cLunasin的74.9%。cLunasin对结直肠癌HCT-116细胞的半抑制浓度为15.2μmol/L,显著低于Lunasin的30.3μmol/L,抗结直肠癌活性增强。本文建立了一种cLunasin的绿色生物合成方法,为活性多肽的改造与重组表达提供有益探索。

关键词：大豆 Lunasin 重组表达环化 Butelase 1 稳定性抗结直肠癌活性

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猴头菌子实体多糖的提取、纯化、结构鉴定及其体外抗结直肠癌活性的研究

猴头菌子实体多糖的提取、纯化、结构鉴定及其体外抗结直肠癌活性...

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作者：侯笑笑山西农业大学

学位级别：硕士

结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是一类常见的消化系统恶性肿瘤,目前主要的临床治疗措施是手术兼化疗,但术后极易复发并产生耐药性,具有较为强烈的毒副作用。因此,查找和研发更有效或低毒性的新型抗癌药物就显得尤为迫切。猴头菌,是... 详细信息

结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是一类常见的消化系统恶性肿瘤,目前主要的临床治疗措施是手术兼化疗,但术后极易复发并产生耐药性,具有较为强烈的毒副作用。因此,查找和研发更有效或低毒性的新型抗癌药物就显得尤为迫切。猴头菌,是一种我国传统的药食两用的大型真菌。中医认为猴头菌具有健胃、补虚、益肾精的功效,其子实体被应用于消化系统疾病的治疗,已经有2000多年的历史。现有研究表明:猴头菌子实体中含有多种具有抗肿瘤、免疫调节、抗胃溃疡、抗氧化和保肝护肝的生物活性成分,其中大分子物质,尤其是多糖,也已成为当前的研究热点内容之一。目前,关于猴头菌多糖抗肿瘤的研究相对较少,尤其是其作用机理相关的研究鲜有报道。因此,本研究在采用水提醇沉法进行多糖提取的过程中,系统研究了超声波和脱蛋白处理两个关键工艺环节对多糖提取效果的影响;将获得的猴头菌子实体多糖（HEFP2）进行进一步的分离纯化,并对其主要组分HEFP2-α-2与HEFP2-β-2进行了相应的结构鉴定研究;在细胞水平探讨了HEFP2的抗结直肠癌效应,并分别从细胞凋亡的分子机制及细胞活性氧生成的潜在关系等方面对其抗结直肠癌的作用机制进行了探究,从而为其作为功能食品和或结肠癌潜在治疗替代药物开发提供研究思路。主要研究结果如下:（1）以猴头菌子实体为供试材料,在采用水提醇沉法进行多糖提取的过程中,系统研究了超声波和脱蛋白处理两个关键工艺环节对多糖提取效果的影响。结果表明,采用超声波辅助处理可提高猴头菌多糖提取率,降低多糖的纯度。比较Sevage、亚铁氰化钾、复合法3种脱蛋白方法,发现复合法对蛋白的除去效率最高,但多糖的保留率最低;亚铁氰化钾-乙酸锌法操作简便且蛋白除去率与多糖保留率均较高,但会使HEFP-β-2组分的含量和回收率降低;Sevage法蛋白脱除效率最低,多糖组分的保留率相对较高,且柱洗脱后发现经Sephacryl S-400凝胶柱分离后获得的主峰整体峰值较高,适合多糖活性组分未知时的蛋白脱除。这一研究结果将会为该类大型真菌子实体的大分子生物活性物质的提取以及相关产品的开发提供重要的参考依据。（2）将使用热水浸亚铁氰化钾-乙酸锌法脱蛋白提得到的粗多糖HEFP2分离纯化后得到的HEFP2-α-2和HEFP2-β-2进行结构鉴定。结果显示:HEFP2由阿拉伯糖,半乳糖,葡萄糖和甘露糖组成,所得各组分所占的摩尔比为:8.99:11.15:1.2:1.97,其水溶液呈典型的剪切变稀的假塑性流体性质,扫描电镜结果显示HEFP表面较为粗糙,呈蜂窝状。红外光谱、核磁共振光谱结果表明HEFP2-α-2和HEFP2-β-2两个主要组分的单糖组成相似度较高,都是β-d-阿拉伯糖,β-1,6-d葡聚糖,α-半乳糖,β-甘露糖,其摩尔比分别为10.28:6.57:3.07:1.57和3.23:9.88:3.82:3.82;数均分子量分别为2.886×10～4Da和1.833×10～4Da;扫描电镜结果HEFP-α-2表面较为粗糙,呈片状结构,HEFP-β-2表面较为光滑,呈支架结构。显然地,这些优良特性增加了该多糖在食品工业中的应用潜力。（3）通过对HEFP2抗肿瘤活性的一系列体外实验研究,发现HEFP2能够有效的抑制结直肠癌细胞（HCT-116和DLD1）的增殖与细胞的克隆集落形成(IC50分别为0.587±0.092,0.695±0.073 mg/mL),且在所用浓度范围内HEFP2不具有细胞毒性。随后的实验表明,HEFP2的这种抑制作用是通过介导Bcl-2、Bax的表达,降低线粒体膜电位,触发Caspase-9依赖的内源性线粒体通路的一系列信号级联发挥诱导结直肠癌细胞凋亡的效应。有趣的是,我们发现HEFP2处理可以显著提高结直肠癌细胞内活性氧的水平。使用抗氧化剂NAC和高浓度HEFP2（0.6 mg/mL）对结直肠癌细胞共处理后,凋亡率显著下降,活性氧水平与对照组相比也没有明显变化。进一步的分子实验表明,在添加NAC的条件下,HEFP2不能调节Bcl-2和Bax的表达,也不能诱导线粒体膜电位的丢失和Cleaved-caspase-9和Cleaved-caspase-3的激活。综上所述,这些发现表明活性氧的生成和积累可以作为该级联反应的上游调节因子,通过触发HCT-116和DLD1细胞中Caspase-9和caspase-3依赖的内源性线粒体通路的一系列信号级联诱导结直肠癌细胞的凋亡。这一研究结果对深入研究HEFP2诱导结直肠癌细胞凋亡的分子机制及其与活性氧生成的潜在关系具有重要的参考价值。同时,该研究数据可能会为寻找具有潜力的新型食用菌多糖,及其相应功能性食品和癌症相关治疗药物的开发提供一个新的研究思路。

关键词：猴头菌子实体多糖结构鉴定抗结直肠癌活性细胞凋亡

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中国红色蜂胶化学成分及抑菌和抑制结直肠癌活性机制

中国红色蜂胶化学成分及抑菌和抑制结直肠癌活性机制

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作者：张文文中国农业科学院

学位级别：博士

蜂胶是由西方蜜蜂 (Apis mellifera) 的工蜂采集植物树脂和嫩芽分泌物并与自身上颚腺、蜡腺的分泌物、花粉粒等混合成的具有黏性、特殊芳香气味的固体胶状物，蜂胶的化学成分复杂，受胶源植物的种类、当地气候、采胶时间以及蜂种等各种... 详细信息

蜂胶是由西方蜜蜂 (Apis mellifera) 的工蜂采集植物树脂和嫩芽分泌物并与自身上颚腺、蜡腺的分泌物、花粉粒等混合成的具有黏性、特殊芳香气味的固体胶状物，蜂胶的化学成分复杂，受胶源植物的种类、当地气候、采胶时间以及蜂种等各种因素影响。蜂胶的生物活性与化学组成紧密相关，我国生产的红色蜂胶在颜色上与普通蜂胶存在明显差异，目前已有部分企业展开了产业化利用，前景广阔，但其化学组成和生物活性的研究尚处于起步阶段。本课题的主要研究目的在于分析中国红色蜂胶 (RPE) 化学成分，研究 RPE 的抑菌和抑制结直肠癌 (CRC) 活性机制，以期为RPE的开发与利用提供理论依据。具体如下：　　基于LC-QTOF-MS/MS建立了快速检测RPE组成的方法，匹配筛选出1057种化合物，与中国普通蜂胶 (CPE) 比二者存在差异;测定了RPE的总酚酸、总黄酮含量，RPE比CPE中含有较多的总酚酸 (P＜0.01);基于LC-QqQ-MS对RPE中14种主要多酚进行定量，其中松属素、短叶松素-3-乙酸酯和白杨素的含量较高，RPE中主要多酚含量高于CPE;基于GPC-GC/MS建立了快速检测RPE挥发性化合物的方法，共匹配出169种。　　研究RPE抑制金黄色葡萄球菌ATCC 25923 (***) 的活性及机制。RPE抑制***的MIC为100 μg/mL、MBC为300 μg/mL，RPE在8-24 h内能极显著抑制*** (P＜0.01);通过OD 260和OD 280的值、碱性磷酸酶 (AKP) 的值和扫描电镜 (SEM) 显示细胞形态被破坏，内容物释放，说明 PRE 和 CPE 通过破坏细胞膜和细胞壁的完整性抑制 ***;基于LC-QTOF-MS/MS代谢组学表明，RPE抑制***后595个胞内代谢物改变并与CPE存在明显差异，RPE对12条代谢通路有调节作用，其中氨基酸代谢在抑制***中起到重要的作用。　　研究 RPE 抑制多重耐药金黄色葡萄球菌 ATCC 43300 (MRSA) 的活性及机制。MIC 为 50 μg/mL、MBC为200 μg/ mL，RPE在8-24 h内极显著抑制MRSA (P＜0.01);通过OD 260和OD 280、AKP和SEM测定表明RPE和CPE能破坏细胞膜和细胞壁的完整性抑制MRSA并呈剂量依赖性;LC-QTOF-MS/MS分析表明RPE抑制MRSA的机制不同于CPE，RPE抑制MRSA通过调节1565个胞内代谢物和9条代谢通路，其中氨基酸代谢起着重要作用;MRSA细胞膜 (icaC，icaR)、细胞壁 (MurE，MurC)、毒力因子 (ssaA) 等基因表达下调验证了对RPE对MRSA的抑制机制。　　构建AOM/DSS诱导的CRC小鼠模型研究RPE对CRC的抑制作用及机制。期间小鼠体重变化为Control＞ARP＞ACP＞AOM，结直肠和HE染色结果说明RPE和CPE对CRC均有抑制效果;RPE作用于CRC小鼠后通过调节小鼠肠道微生物Odoribacter、Alistipes、Lachnospiraceae、Eubacterium_siraeum_group、Lactobacillus、Allobaculum、Rikenellaceae、Proteobacteria、Enterococcus等的丰度改善CRC小鼠症状，与CPE的抑制机制不同。　　继续研究了RPE抑制CRC小鼠的作用机制。转录组学表明AOM组与ARP组的特有差异基因320个，ACP组与ARP组的特有差异基因85个，RPE作用于CRC小鼠后的差异表达基因在环境信息处理中的信号分子和相互作用和信号转导两条通路中明显富集;代谢组学表明RPE调节CRC小鼠血清代谢物的丰度与CPE存在差异，RPE调节代谢通路其中氨基酸相关代谢通路和脂质相关代谢通路在抑制CRC起着主要作用。

关键词：红色蜂胶化学成分抑菌活性抗结直肠癌活性

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猴头菌子实体多酚的体外模拟消化特性及其抗氧化与抗结肠癌活性研究

猴头菌子实体多酚的体外模拟消化特性及其抗氧化与抗结肠癌活性研...

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作者：郭杨昪山西农业大学

学位级别：硕士

猴头菌（Hericium erinaceus）是我国一种珍贵的食药兼用真菌。猴头菌子实体被中医认为具有健胃益精的功效,业已被应用于多种消化系统疾病的预防与治疗。现有研究表明:猴头菌子实体是富含多糖、多酚等多种生物活性成分的大型真菌,具有... 详细信息

猴头菌（Hericium erinaceus）是我国一种珍贵的食药兼用真菌。猴头菌子实体被中医认为具有健胃益精的功效,业已被应用于多种消化系统疾病的预防与治疗。现有研究表明:猴头菌子实体是富含多糖、多酚等多种生物活性成分的大型真菌,具有抗氧化、免疫调节与保肝护肝功能的。我们前期的研究结果显示其子实体多糖能通过提高结直肠癌细胞内活性氧的水平,降低线粒体膜电位,触发Caspase-9和Caspase-3依赖的内源性线粒体通路,诱导结直肠癌细胞凋亡,然而,进一步的实验结果却显示,与粗多糖相比,纯化分离的多糖组分的抗结直肠癌活性显著下降。据此,我们推测该生物活性的显著降低,可能与多糖纯化过程中的活性组分损失有关。现有研究显示部分多酚类物质是能与多糖通过自由基接枝、碳二亚胺介导偶联和酶催化反应形成复合物的一种重要小分子活性物质。为此,本研究以猴头菌子实体为供试材料,采用人体体外胃肠消化模型,对猴头菌子实体多酚类物质的组成、含量及其抗氧化能力在胃肠消化过程中的变化规律进行分析。之后,在采用HO诱导的RAW 264.7细胞氧化损伤模型,对猴头菌子实体多酚肠消化产物的细胞毒性,及其对细胞氧化损伤的保护作用分析的基础上,对猴头菌子实体中的结合酚（HEP-C）诱导结直肠癌细胞凋亡的分子机制做了研究,并探索了和细胞活性氧生成的潜在关系。该研究数据将会为寻找具有潜力的大型真菌子实体的多酚类物质,及其相关功能性食品的开发提供一个新的理论依据。主要研究结果如下:（1）以猴头菌子实体为供试材料,采用体外模拟消化模型,对其多酚类物质的组成、含量以及抗氧化活性在体外模拟消化过程中的变化规律进行分析。结果表明:与HEP相比,经胃消化的猴头菌子实体多酚类物质产物（HEP-S）中,总多酚和总黄酮含量分别上升了11.66%、27.33%,DPPH、ABTS和·OH自由基清除能力分别升高了10.33%、17.52%、2.22%。与HEP相比,肠消化产物（HEP-I）总多酚和总黄酮分别降低了35.82%、46.67%,DPPH、ABTS和·OH自由基清除能力分别降低了60.02%、50.13%、46.43%。经UPLC-MS/MS技术分析,在猴头菌子实体未消化多酚（HEP）、猴头菌子实体多酚胃消化产物（HEP-S）、猴头菌子实体多酚肠消化产物（HEP-I）中均检测出18种酚酸类化合物和2种黄酮类化合物,且无新物质生成。但与HEP相比,HEP-S和HEP-I中酚酸和黄酮组分的具体含量却存在明显差异。（2）采用HO诱导的RAW 264.7氧化应激细胞模型,在不同消化阶段的猴头菌子实体多酚对RAW264.7细胞氧化损伤保护作用分析结果显示:HEP-I对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用显著高于HEP和HEP-S。进一步的检测发现,HEP-I可通过影响RAW 264.7细胞抗氧化和抗炎相关酶、免疫相关酶和相关基因的表达量对RAW 264.7细胞氧化损伤发挥保护作用。HEP-I能够降低HO诱导RAW 264.7细胞中的MDA含量,增强SOD、CAT和GSH-Px的活力,提高Cu/Zn SOD、Mn SOD、CAT、Nrf2和HO-1的表达水平;促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌与表达降低,又进一步提高了抗炎因子IL-4和IL-10的分泌与表达。（3）MTT检测结果显示:HEP-C具有显著抑制结直肠癌细胞（HCT-116和DLD1）增殖的作用,其IC分别为是0.425±0.057,0.387±0.084 mg/m L。通过HEP-C处理,可显著降低HCT-116和DLD1细胞的集落形成能力。当HEP-C浓度达到0.6 mg/m L时,HCT-116和DLD1的集落形成能力仅为37.37±1.07%、34.3±2.24%。采用Annexin V-FITC/PI双染结果进一步显示:经0.2、0.4 mg/m L HEP-C处理后,HCT-116和DLD1细胞的凋亡率分别为16.03±1.15%和29.75±0.21%,51.62±0.84%和60.46±0.83%。倒置显微镜的检测结果也表明,结直肠癌细胞（HCT-116和DLD1）的形态随着加样浓度的增加逐渐皱缩,细胞数量逐渐减少,结直肠癌细胞迁移能力明显降低。（4）Western blotting分析结果显示:HEP-C可通过上调Bcl-2和下调Bax的表达,介导线粒体去极化。随着HEP-C浓度的增加,Cleaved-caspase-9显著上调,与此一致的是,Caspase-3也被Cleaved-caspase-9裂解和激活,Caspase-9依赖的内源性线粒体通路的信号级联也被触发,进而发挥结直肠癌细胞凋亡的作用。线粒体膜电位（MMP）检测结果也表明,经HEP-C处理后,HCT-116和DLD1细胞的线粒体膜电位均

关键词：猴头菌子实体多酚体外模拟消化氧化损伤抗结直肠癌活性

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