检索结果-内蒙古大学图书馆

医学分子生物学杂志 2005年第3期2卷 157-161页

作者：付雪王淑静林雪松刘兴汉黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150086

目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75～95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75～95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化21肽。通过MTT实验,细胞生长曲线测定,小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验及组织病理学切片研究其活性。结果获得的可溶性21肽对人脐静脉内皮细胞的生长具有抑制作用。小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验抑瘤率达42.86%。组织病理学切片结果可见H22小鼠肝癌细胞死亡,血管数量减少。结论经初步检测获得具有抗血管活性的21肽,为进一步研究肿瘤抑素的作用机制和肿瘤的临床治疗奠定了基础。

关键词：肿瘤抑素蛋白表达蛋白纯化抗血管活性

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肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第10期11卷 1837-1840页

作者：栗亚刘兴汉林雪松马洪星张宇雯李冀宏刘远莉李丹黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江省生物医药工程重点实验室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学大庆校区检验系黑龙江省大庆市163319

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关... 详细信息

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽并用几丁质亲和层析纯化。采用四甲基偶氮唑盐比色法研究10～200mg/L肿瘤抑素相关肽T42、T19、T21、T19+T21半量联合和顺铂对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞生长的影响,采用苏木精-伊红染色检测40mg/LT42肽作用24h后对细胞形态的影响,划痕修复实验研究40mg/LT42肽和40mg/L的T19肽+T21肽半量联合分别作用24,48h后对细胞迁移的影响。结果:①四甲基偶氮唑盐试验表明10～200mg/LT42肽对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞有明显抑制作用且呈剂量依赖性,IC50分别为45mg/L和51mg/L。②40mg/LT42肽作用24h后可见人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃癌细胞单个凋亡细胞与周围细胞分离,细胞皱缩呈圆形或卵圆,深染,染色质边集。③40mg/L的T42肽单独作用24h或者48h均可明显抑制人脐静脉内皮细胞、人SGC-7901胃癌细胞的迁移(P<0.05),与40mg/L的T19肽+T21肽半量联合组比较对两种细胞的迁移能力没有显著影响(P>0.05)。结论:T42肽能抑制人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞的生长及迁移,其抗肿瘤细胞作用强于T21肽,抑制内皮细胞增殖作用强于T19肽,抑制细胞增殖活性与T19肽+T21肽半量联合用药基本相同。

关键词：肿瘤抗血管活性抗肿瘤活性组织构建

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重组肿瘤抑素相关T42肽的克隆表达和抗肿瘤活性研究

重组肿瘤抑素相关T42肽的克隆表达和抗肿瘤活性研究

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作者：栗亚哈尔滨医科大学

学位级别：硕士

肿瘤抑素氨基末端的54-132位氨基酸(Tum-5)和C-端的185-203位氨基酸分别具有抗血管生成和抗肿瘤细胞活性，但肿瘤抑素是肺出血综合症的致病抗原且分子量大不能直接用于人体。为开发一种具有临床应用价值的同时具有抗血管生成活性和抗肿... 详细信息

肿瘤抑素氨基末端的54-132位氨基酸(Tum-5)和C-端的185-203位氨基酸分别具有抗血管生成和抗肿瘤细胞活性，但肿瘤抑素是肺出血综合症的致病抗原且分子量大不能直接用于人体。为开发一种具有临床应用价值的同时具有抗血管生成活性和抗肿瘤细胞活性的肿瘤抑素相关肽，利用-GG-柔性Linker将这两个最小活性片段连接并构建了pTYB2-T42重组质粒，通过原核表达出可溶性肿瘤抑素相关T42肽，研究其在体外及体内的抗肿瘤活性。方法：人工合成肿瘤抑素75-95位氨基酸(21肽)和185-203位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列，在21肽中新构建了RGD序列(CGTGGAGAT)，利用-GG-将两个片段连接并重组入质粒pTYB2，酶切和DNA测序鉴定插入片段的大小、方向及序列的正确性后，将构建成功的pTYB2-T42质粒转化到大肠杆菌表达载体BL-21(DE3)中，IPTG诱导产生融合蛋白的高效表达，几丁质亲和层析柱纯化后经Tricine-SDS-PAGE鉴定T42肽。利用MTT法、HE染色、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色、划痕修复实验、鸡胚绒毛尿囊膜血管(CAM)抑制实验、小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤模型抑瘤实验并结合组织病理切片及免疫组化检测CD34和Ki67的表达来研究T42肽的生物学活性。结果：经酶切和测序，证明pTYB2-T42载体含有大小、方向及序列正确的T42肽基因片段，表达的融合蛋白经几丁质亲和层析一步获得可溶性肿瘤抑素相关T42肽，其相对分子质量与理论大小一致。浓度为10-200μg/ml的T42肽对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人SGC-7901胃腺癌中分化细胞和宫颈癌Hela细胞有明显抑制作用且呈剂量依赖性，IC<,50>分别为45μg/ml、51μg/ml和53μg/ml。HE染色、AO/EB荧光染色结果表明，经过40μg/ml的T42肽作用24小时后的HUVECs和人SGC-7901胃腺癌中分化细胞细胞表现出一系列凋亡细胞特征性的形态变化，如细胞皱缩呈圆形或卵圆，深染，染色质边集。划痕修复实验显示40μg/ml的T42肽单独作用48小时可明显抑制人脐静脉内皮细胞、人SGC-7901胃癌细胞的迁移，对鸡胚尿囊膜新生血管生成具有明显的抑制作用，在小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤模型中抑瘤率达到50.52％。病理切片HE染色显示T42肽组肿瘤的血管生成明显减少，坏死灶增多，免疫组化显示T42肽组CD34和肿瘤增殖抗原Ki67的表达明显少于对照组(P<0.05)。结论：成功构建了pTYB2-T42重组质粒，肿瘤抑素相关T42肽具有显著的抗肿瘤活性，为肿瘤治疗开拓了广阔的前景。

关键词：肿瘤抑素抗肿瘤活性抗血管活性肿瘤治疗 T42肽核苷酸序列

来源：评论

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肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用

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首都食品与医药 2017年第14期24卷 32-33页

作者：董瑞强张丹凤孙广荣郑州大学附属洛阳中心医院 471000

目的探讨肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用。方法本次研究开展的时间段为2016年1月~2016年6月,在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽,同时采用几丁质亲和层析纯化。研究所采用的方法为四甲基偶氮唑盐比色法,... 详细信息

目的探讨肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用。方法本次研究开展的时间段为2016年1月~2016年6月,在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽,同时采用几丁质亲和层析纯化。研究所采用的方法为四甲基偶氮唑盐比色法,研究的对象为10~200mg/L肿瘤抑素相关肽(包括T42,T21,T19,T19+T21半量),与顺铂进行联合,对人脐静脉内皮细胞,以及人SGC-7901胃腺癌细胞生长所产生的影响。对40mg/L的T42肽的作用时间达到24h后,促使细胞形态所发生的变化采取苏木精-伊红染色进行检测,同时开展划痕修复实验,对40mg/L的T42肽,以及40mg/L的T19+T21肽进行半量联合使用,时间为24h,以及48h后,对细胞迁移所产生的作用。结果 T42肽不仅会抑制人脐静脉内皮细胞,同时也会抑制人SGC-7901胃腺癌细胞,同时这种抑制作用与剂量存在明显的关系;T42肽会导致两种细胞和出现凋亡现象,同时同周围的细胞发生分离,出现了皱缩,细胞的形状呈现为卵圆形或圆形;T42肽对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的迁移产生明显的抑制作用。同时这种抑制作用同40mg/L的T19+T21肽半量联合使用差异并不明显(P>0.05)。结论肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用显著。

关键词：肿瘤抗肿瘤活性抗血管活性

来源：评论

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