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条件性位置厌恶大鼠伏隔核壳区多巴胺及其代谢产物3，4二羟基苯乙酸水平变化

中华行为医学与脑科学杂志 2014年第1期23卷 4-6页

作者：苏少华王传升乔振李文强潘苗王亚丽张瑞岭李毅石玉中新乡医学院第二附属医院、河南省生物精神病学重点实验室新乡453002 武汉市精神卫生中心

目的探讨伏隔核壳区（AcbSh）多巴胺（DA）及其代谢产物3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）在吗啡依赖戒断所致厌恶动机中的作用，揭示阿片依赖戒断的厌恶动机机制。方法40只SPF级雄性***大鼠分为实验组（吗啡＋纳洛酮，MN组）与对照组（吗啡... 详细信息

目的探讨伏隔核壳区（AcbSh）多巴胺（DA）及其代谢产物3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）在吗啡依赖戒断所致厌恶动机中的作用，揭示阿片依赖戒断的厌恶动机机制。方法40只SPF级雄性***大鼠分为实验组（吗啡＋纳洛酮，MN组）与对照组（吗啡＋生理盐水，MS组；生理盐水＋纳洛酮，sN组），连续6．5d吗啡注射（10mg／kg，bid，IP）一次纳洛酮催瘾（0．3mg／kg，IP），同时搭配条件性位置训练箱建立条件性位置厌恶（CPA）大鼠模型。在立体定位术后3-5d，CPA建立前、后收集AcbSh中的细胞外液，采用高效液相色谱-电化学方法对透析液中DA及DOPAC浓度进行测定。结果连续6．5d的吗啡注射与纳洛酮一次催瘾搭配，实验组大鼠表现出明显的厌恶动机，在伴药侧的时间[（230．01±24．76）S]明显缩短，与实验前[（566．04±19．80）s]相比，差异具有统计学意义（t=11．889，P〈0．01）。CPA建立后，MN组AcbSh中DA水平（1．72±0．10）明显升高，与MS组（0．95±0．05）和sN组（0．09±0．06）相比差异有统计学意义（F=42．319，P〈0．01）；MN组DOPAC水平（1．56±0．07）与MS组（1．19±0．04）、SN组（1．07±0．02）相比，明显升高，差异具有统计学意义（F=25．375，P〈0．01）。结论AcbSh中DA及DOPAC可能参与CPA的建立，中脑边缘系统的多巴胺机制可能在物质依赖厌恶动机中起到十分重要的调节作用。

关键词：吗啡依赖条件性位置厌恶多巴胺 3 ,4二羟基苯乙酸伏隔核壳区微透析

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条件性位置厌恶大鼠伏隔核壳区多巴胺及DOPAC浓度变化

条件性位置厌恶大鼠伏隔核壳区多巴胺及DOPAC浓度变化

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作者：苏少华新乡医学院

学位级别：硕士

目的通过测定吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾CPA建立、消退及重建不同阶段伏隔核壳区多巴胺(dopamine)及其代谢产物3,4二羟基苯乙酸(dihydroxyphenyl acetic acid, DOPAC)浓度的变化情况,探讨吗啡依赖负性强化的神经生化机制。方法1、69只SPF... 详细信息

目的通过测定吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾CPA建立、消退及重建不同阶段伏隔核壳区多巴胺(dopamine)及其代谢产物3,4二羟基苯乙酸(dihydroxyphenyl acetic acid, DOPAC)浓度的变化情况,探讨吗啡依赖负性强化的神经生化机制。方法 1、69只SPF级雄性(Sprage-Dawley)大鼠随机分为实验组(吗啡+纳洛酮,MN组)与对照组(吗啡+生理盐水,MS组;生理盐水+纳洛酮,SN组),每组23只,采用连续6.5天吗啡(10mg/kg,bid,IP)注射后进行一次纳洛酮催瘾(0.3mg/kg,IP),同时搭配条件性位置训练箱建立CPA大鼠模型,从day7下午至day13上午,对CPA大鼠进行每天2次的消退行为训练,第14天,对CPA行为消退了的大鼠进行药物“点燃”重建； 2、分别在套管针植入术后3-5天,CPA建立前、后及消退与重建后用微透析方法收集伏隔核壳区的细胞外液；采用高效液相色谱-电化学方法检测透析液中DA及DOPAC浓度。 3、所有结果如非特殊说明,均以均数±标准误(Mean±SEM)表示,多组均数间的多重比较,采用方差分析(ANOVA),组内行为学和不同时间点神经递质的两两比较采用Independent-Samples t-test。当P<0.05被认为差异具有统计学意义。所有的统计分析均采用SPSS16.0软件完成。结果 1、连续6天半的吗啡注射与纳洛酮一次催瘾搭配可以成功建立CPA模型,实验鼠表现出明显的厌恶动机,对伴药侧表现出明显的回避；经过连续7天的消退训练后CPA行为可以成功消退；而消退后的CPA大鼠经药物“点燃”并纳洛酮催瘾后CPA行为可成功重建; 2、MN组大鼠伏隔核壳区多巴胺及DOPAC水平在CPA建立后明显升高(P<0.01),而MS组与SN组较建立前差异无统计学意义(P>0.05)；经过为期一周的消退训练之后,条件戒断大鼠DA/DOPAC水平明显下降至基础水平;CPA行为重建后,MN组大鼠伏隔核壳区的DA/DOPAC水平明显升高,与MS组、SN组相比差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 1、小剂量纳洛酮可以诱发吗啡依赖大鼠CPA的产生,经过为期一周的无药状态下消退行为训练,CPA行为可以成功消退,当再次暴露于药物相关环境时,消退了的CPA行为可以重建; 2、伏隔核壳区的多巴胺与其代谢产物DOPAC可能参与小剂量纳洛酮所诱发的吗啡依赖大鼠的条件性位置厌恶,中脑边缘系统的多巴胺机制可能在吗啡依赖的厌恶动机方面起到十分重要的调节作用。

关键词：吗啡依赖条件性位置厌恶 DA/DOPAC 伏隔核壳区微透析

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慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶模型杏仁中央核蛋白激酶A表达变化

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中国应用生理学杂志 2012年第4期28卷 328-331,389页

作者：宋秀花李文强冯玉芳张景丹石玉中张瑞岭李毅新乡医学院第二附属医院河南新乡453002 青岛市精神卫生中心湖北武汉430022 武汉市精神卫生中心山东青岛266034

目的:分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶(CPA)建立前后、消退后及重建后,与成瘾密切相关的脑区杏仁中央核(CeA)内蛋白激酶A(PKA)蛋白表达的适应性变化,探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法:①将雄性SD大... 详细信息

目的:分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶(CPA)建立前后、消退后及重建后,与成瘾密切相关的脑区杏仁中央核(CeA)内蛋白激酶A(PKA)蛋白表达的适应性变化,探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法:①将雄性SD大鼠分为实验组(慢性吗啡注射+纳洛酮催瘾组,MN),对照组(慢性吗啡注射+生理盐水催瘾组,MS),慢性生理盐水注射+纳洛酮催瘾组,SN),每组24只。采用慢性吗啡注射(10 mg/kg,BID,ip)后给予一次纳洛酮(0.3 mg/kg)催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠CPA模型。②在CPA建立前后、消退后及重建后,采用免疫组织化学方法检测CeA内PKA蛋白表达情况。结果:MN组在CPA建立前后、消退后及重建后CeA内PKA的蛋白表达出现适应性变化(P<0.05),建立后(Day7,134.43±4.481,P<0.05),消退后(Day13,141.01±3.360,P<0.01)及重建后(Day14,137.18±40.330,P<0.05)PKA蛋白表达水平均低于建立前(Day5,124.48±6.722)。而MS组(P>0.05)和SN组(P>0.05)在CPA的各个时间点PKA的蛋白表达变化差异均无显著性。结论:①CeA内PKA蛋白的低表达导致的厌恶的中枢状态,可能是CPA建立的关键的神经机制。②CeA内PKA的适应性变化可能是物质依赖戒断后CPA相关神经可塑性变化的重要分子基础。

关键词：条件性位置厌恶蛋白激酶A 杏仁中央核免疫组化

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慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶过程杏仁核中央核Kappa阿片受体表达变化

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中国应用生理学杂志 2014年第5期30卷 457-459页

作者：宋秀花吕江玲李文强张景丹石玉中张瑞岭李毅青岛市精神卫生中心山东青岛266034 新乡医学院第二附属医院河南新乡453002 武汉市精神卫生中心湖北武汉430022

目的:探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法:采用慢性吗啡腹腔注射注射一日两次(10 mg/kg)后予一次纳洛酮(0.3 mg/kg)催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠条件性位置厌恶(CPA)模型。在CPA建立前后,采用免疫组织... 详细信息

目的:探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法:采用慢性吗啡腹腔注射注射一日两次(10 mg/kg)后予一次纳洛酮(0.3 mg/kg)催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠条件性位置厌恶(CPA)模型。在CPA建立前后,采用免疫组织化学方法检测杏仁核中央核(CeA)内Kappa阿片受体(KOR)表达情况。结果:CPA建立前,吗啡注射+纳洛酮催瘾组(MN组)KOR蛋白表达水平(132.89±10.35)与吗啡对照组(MS组)(109.83±7.30)和纳洛酮组(SN组)(121.00±2.73),差异无统计学意义(P>0.05)。CPA建立后,三组KOR蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01)其中MN组(99.56±7.67)低于MS组(85.43±7.81,P<0.01),高于SN组(118.25±1.71,P<0.01)。结论:1杏仁核中央核内Kappa受体的适应性变化,可能是慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶模型建立的基础。2杏仁核中央核内Kappa受体的表达变化可能引起了慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶模型发生突触可塑性的变化。

关键词：条件性位置厌恶戒断 Kappa阿片受体免疫组化大鼠

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慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶模型脑腹侧被盖区蛋白激酶A的表达变化

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华中科技大学学报（医学版） 2012年第3期41卷 337-340页

作者：李毅宋秀花李文强张景丹张瑞岭石玉中郝伟华中科技大学同济医学院附属精神卫生中心(武汉市精神卫生中心) 武汉430022 新乡医学院第二附属医院河南省生物精神病学重点实验室新乡453002 中南大学湘雅二院精神卫生研究所长沙410011

目的分析慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶(conditioned place aversion,CPA)模型脑腹侧被盖区(ventraltegmental area,VTA)蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)蛋白表达的适应性变化,探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法①... 详细信息

目的分析慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶(conditioned place aversion,CPA)模型脑腹侧被盖区(ventraltegmental area,VTA)蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)蛋白表达的适应性变化,探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法①将72只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分为研究组(慢性吗啡注射+纳洛酮催瘾组,MN组),对照组(慢性吗啡注射+生理盐水组,MS组;慢性生理盐水注射+纳洛酮组,SN组),每组24只。采用慢性吗啡腹腔注射(10mg/kg,Bid,ip.)后予1次纳洛酮(0.3mg/kg)催瘾注射,同时与条件性位置训练箱搭配使用建立大鼠CPA模型。②在CPA建立前后,采用免疫组织化学方法检测VTA内PKA蛋白表达情况。结果 CPA建立前,MN组PKA蛋白表达水平与对照组(MS组和SN组)比较差异无统计学意义(F=0.013,P=0.987)。CPA建立后,3组PKA蛋白表达水平比较差异有统计学意义(F=9.853,P=0.018),MN组灰度值(127.500±3.536)显著低于MS组[(140.500±3.697),P<0.05]和SN组[(138.000±2.944),P<0.05]。结论①VTA内PKA蛋白高表达,可能是CPA建立的神经机制之一。②VTA内PKA的适应性变化可能是物质依赖戒断后CPA相关神经可塑性变化的重要分子基础之一。

关键词：条件性位置厌恶蛋白激酶A 腹侧被盖区戒断

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杏仁中央核NMDA受体对急性吗啡依赖大鼠戒断诱发条件性位置厌恶的影响

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中国心理卫生杂志 2008年第2期22卷 94-97页

作者：刘彩谊李勇辉白云静隋南中国科学院心理研究所

目的:研究杏仁中央核(Central nucleus of the amygdala,CeA)N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体在纳络酮诱发急性吗啡依赖大鼠戒断性情绪反应中的作用。方法:吗啡、纳络酮间隔4小时皮下注射,通过两轮纳络酮匹配训练建... 详细信息

目的:研究杏仁中央核(Central nucleus of the amygdala,CeA)N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体在纳络酮诱发急性吗啡依赖大鼠戒断性情绪反应中的作用。方法:吗啡、纳络酮间隔4小时皮下注射,通过两轮纳络酮匹配训练建立条件性位置厌恶(Conditioned place aversion,CPA),作为急性吗啡依赖戒断诱发的情绪反应模型。观察纳络酮匹配训练前CeA微量注射NMDA受体拮抗剂地卓西平(MK801)对大鼠训练后在纳络酮匹配侧停留时间的影响。结果:戒断组大鼠经过两轮训练后在纳络酮匹配侧停留时间(230.4±32.8s)比假手术组(457.6±47.8s)显著缩短(P<0.01),训练前CeA微量注射MK801大鼠在纳络酮匹配侧停留时间(447.0±51.8s)比戒断组(230.4±32.8s)显著延长(P<0.01),非戒断组大鼠(急性吗啡依赖组,未接触吗啡组)训练前CeA注射MK801训练前后在处理侧停留时间差异无显著性(P>0.05)。结论:CeA注射MK801既无奖赏效应也无厌恶效应,但能阻断CPA的建立,提示CeA的NMDA受体参与急性吗啡依赖戒断诱发的情绪反应。

关键词：吗啡依赖急性戒断条件性位置厌恶杏仁中央核 N-甲基-D-天冬氨酸受体

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构建吗啡依赖条件性位置厌恶模型大鼠伏隔核壳区相关基因的表达

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中国组织工程研究 2013年第20期17卷 3687-3691页

作者：张景丹李文强宋秀花娄百玉石玉中李毅河南省精神病医院河南省新乡市453002 武汉市精神卫生中心湖北省武汉市430022

背景:腺苷酸环化酶Ⅷ涉及促进吗啡耐受、戒断和强化性能,对晚期长时程增强效应、长时程记忆和对应激的适应等可塑性变化中发挥重要的作用。目的:基于慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断建立的条件性位置厌恶动物模型,观察在条件性位置厌恶... 详细信息

背景:腺苷酸环化酶Ⅷ涉及促进吗啡耐受、戒断和强化性能,对晚期长时程增强效应、长时程记忆和对应激的适应等可塑性变化中发挥重要的作用。目的:基于慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断建立的条件性位置厌恶动物模型,观察在条件性位置厌恶建立前后,与成瘾密切相关脑区伏隔核壳区内腺苷酸环化酶Ⅷ基因表达的适应性变化。方法:选用清洁级雄性SD大鼠,设模型组(吗啡+纳洛酮组)、吗啡+盐水组和盐水+纳洛酮组。模型组采用连续6.5d慢性吗啡腹腔注射10mg/kg,纳洛酮一次催瘾注射0.3mg/kg,同时与条件性位置训练箱搭配建立大鼠条件性位置厌恶模型,对照组依模型组对照注射等体积生理盐水。在条件性位置厌恶建立前后,采用免疫组织化学方法检测伏隔核壳区内腺苷酸环化酶Ⅷ基因的表达水平。结果与结论:条件性位置厌恶建立前,3组腺苷酸环化酶Ⅷ在伏隔核壳区表达水平差异无显著性意义(F=4.651,P=0.052);条件性位置厌恶建立后,吗啡+纳洛酮组腺苷酸环化酶Ⅷ在伏隔核壳区(F=4.874,P=0.028)内表达水平显著高于吗啡+盐水组和盐水+纳洛酮组。结果提示,伏隔核壳区内腺苷酸环化酶Ⅷ水平可能是调节阿片类物质戒断所致厌恶动机的关键因子之一;腺苷酸环化酶Ⅷ基因表达水平的变化可能是条件性位置厌恶建立相关的神经适应性变化的重要分子基础之一。

关键词：组织构建组织构建实验造模吗啡戒断条件性位置厌恶腺苷酸环化酶Ⅷ 动物模型伏隔核壳区国家自然科学基金

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大鼠空间记忆与吗啡戒断诱发条件性位置厌恶的相关研究

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中华行为医学与脑科学杂志 2009年第1期18卷 28-30页

作者：鞠平王婷李勇辉隋南中科院心理健康重点实验室中国科学院心理研究所中科院研究生院北京100101

目的探讨急性吗啡戒断诱发的条件性位置厌恶效应（CPA）与动物在空间记忆任务表现上的个体差异之间的关系。方法30只雄性Wistar大鼠在经历水迷宫空间任务后，依据其水迷宫探索任务成绩，分出高空间记忆组（n=8）及低空间记忆组（n=8）... 详细信息

目的探讨急性吗啡戒断诱发的条件性位置厌恶效应（CPA）与动物在空间记忆任务表现上的个体差异之间的关系。方法30只雄性Wistar大鼠在经历水迷宫空间任务后，依据其水迷宫探索任务成绩，分出高空间记忆组（n=8）及低空间记忆组（n=8），水迷宫任务结束后进行CPA训练，比较高、低空间记忆组动物CPA测试成绩上的差异。结果作为分组标准，高低空间记忆组在水迷宫探索任务中，其原站台穿梭次数和停留时间上均存在与分组相一致的显著性差异，在经历后续的CPA训练后，CPA训练组动物形成了对戒断匹配环境的厌恶，其中高空间记忆组动物CPA测试成绩[（560．12±60．09）s，（333．00±150．25）s]高于低空间记忆组动物[（568．37±57．25）s，（471．37±130．67）s]，组间差异有显著性（F=5．324，P〈0．05）。结论研究提示空间记忆提取过程与吗啡戒断的CPA效应存在部分相同的机制。

关键词：吗啡戒断空间记忆条件性位置厌恶水迷宫

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慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶模型伏隔核壳区蛋白激酶A表达变化

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中华行为医学与脑科学杂志 2012年第3期21卷 232-234页

作者：宋秀花李文强张景丹石玉中张瑞岭李毅新乡医学院第二附属医院河南省生物精神病学重点实验室新乡453002 武汉市精神卫生中心

目的分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶（conditionedplaceaversion，CPA）建立前后，与成瘾密切相关的脑区伏隔核壳区（theshellofnucleusaccumbens，AcbSH）内蛋白激酶A（proteinkinaseA，PKA）蛋白表达的适应性变化... 详细信息

目的分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶（conditionedplaceaversion，CPA）建立前后，与成瘾密切相关的脑区伏隔核壳区（theshellofnucleusaccumbens，AcbSH）内蛋白激酶A（proteinkinaseA，PKA）蛋白表达的适应性变化，探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法1．将雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为研究组（慢性吗啡注射＋纳洛酮催瘾组morphine＋naloxone，MN），对照组（慢性吗啡注射＋生理盐水“催瘾”组（morphine＋saline，MS），慢性生理盐水注射＋纳洛酮催瘾组（saline＋naloxone，SN），每组12只。采用慢性吗啡注射（10mg／kg，BID，IP）后予1次纳洛酮（0．3mg／kg）催瘾注射（同时与条件性位置训练箱搭配）建立大鼠CPA模型。2．在CPA建立前后，采用免疫组织化学方法检测AcbSH内PKA蛋白表达情况。结果CPA建立前，MN组PKA蛋白表达水平（109．33±5．508）与对照组MS组（111．86±8．688）和SN组（132．25±4．844），差异无统计学意义F=2．306，P=0．130）。CPA建立后，各组PKA蛋白表达水平比较差异有统计学意义（F=36．516，P=0．000）其中MN组（109．50±4．661）高于MS组（126．50±3．697；P〈0．01），高于SN组（133．50±6．364；P〈0．01）。结论***内PKA蛋白的高表达导致的厌恶的中枢状态，可能是CPA建立的关键的神经机制。***内PKA的适应性变化可能是物质依赖戒断后CPA相关神经可塑性变化的重要分子基础。

关键词：条件性位置厌恶蛋白激酶A 免疫组化

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慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶模型伏隔核壳区蛋白激酶A表达变化

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中华行为医学与脑科学杂志 2016年第3期 232-234页

作者：宋秀花李文强张景丹石玉中张瑞岭李毅新乡医学院第二附属医院河南省生物精神病学重点实验室武汉市精神卫生中心

目的分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶(conditioned place aversion, CPA)建立前后,与成瘾密切相关的脑区伏隔核壳区(the shell of nucleus accumbens,AcbSH)内蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)蛋白表达的适应性变化,... 详细信息

目的分析慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶(conditioned place aversion, CPA)建立前后,与成瘾密切相关的脑区伏隔核壳区(the shell of nucleus accumbens,AcbSH)内蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)蛋白表达的适应性变化,探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法 1.将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分为研究组(慢性吗啡注射+纳洛酮催瘾组morphine+naloxone,MN),对照组(慢性吗啡注射+生理盐水"催瘾"组(morphine+saline,MS),慢性生理盐水注射+纳洛酮催瘾组(saline+naloxone,SN),每组12只。采用慢性吗啡注射(10 mg/kg,BID,IP)后予1次纳洛酮(0.3 mg/kg)催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠CPA模型。2.在CPA建立前后,采用免疫组织化学方法检测AcbSH内PKA蛋白表达情况。结果 CPA建立前,MN组PKA蛋白表达水平(109.33±5.508)与对照组MS组(111.86±8.688)和SN组(132.25±4.844),差异无统计学意义(F=2.306,P=0.130)。CPA建立后,各组PKA蛋白表达水平比较差异有统计学意义(F=36.516,P=0.000)其中MN组(109.50±4.661)高于MS组(126.50±3.697;P<0.01),高于SN组(133.50±6.364;P<0.01)。结论 ***内PKA蛋白的高表达导致的厌恶的中枢状态,可能是CPA建立的关键的神经机制。***内PKA的适应性变化可能是物质依赖戒断后CPA相关神经可塑性变化的重要分子基础。

关键词：条件性位置厌恶蛋白激酶A 免疫组化

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