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文献类型

2 篇 学位论文

馆藏范围

2 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

1 篇 理学
- 1 篇 化学
1 篇 工学
- 1 篇 化学工程与技术
1 篇 农学
- 1 篇 农业资源与环境
1 篇 医学
- 1 篇 临床医学

主题

2 篇 极性切换模式
1 篇 lc-ms/ms
1 篇 质谱法
1 篇 液相色谱法
1 篇 抗菌活性
1 篇 同位素标记法
1 篇 甲状腺肿瘤
1 篇 内生真菌
1 篇 分离鉴定
1 篇 非法色素
1 篇 小分子代谢物

机构

1 篇 中国科学院大学
1 篇 华南农业大学

作者

1 篇 祁婉舒
1 篇 胡志博

语言

2 篇 中文

检索条件"主题词=极性切换模式"

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详细简洁

排序：

人体甲状腺组织中小分子代谢物的质谱定量分析方法研究

人体甲状腺组织中小分子代谢物的质谱定量分析方法研究

引用

作者：祁婉舒中国科学院大学

学位级别：博士

本论文的研究工作基于LC-MS技术，围绕人体甲状腺组织中重要的小分子代谢物的分析，开发了三种质谱定量分析方法。\n 首先，我们使用极性切换检测模式，建立了外标法结合HILIC-ESI-MS/MS快速分析氨基酸的质谱定量方法。极性切换模式... 详细信息

本论文的研究工作基于LC-MS技术，围绕人体甲状腺组织中重要的小分子代谢物的分析，开发了三种质谱定量分析方法。\n 首先，我们使用极性切换检测模式，建立了外标法结合HILIC-ESI-MS/MS快速分析氨基酸的质谱定量方法。极性切换模式下，使用MRM多反应监测模式检测时，大多数氨基酸在正、负离子模式下的信号强度均可以提升30％～50％，十九种氨基酸的最低检测限在1.00 ng/mL～100 ng/mL之间。之后该方法被应用于分析人体甲状腺组织中的游离氨基酸，验证了癌症组织中氨基酸含量升高的现象。该氨基酸分析方法所需时间短、操作简单。\n 接着，我们使用0.08 mmol/L邻苯二甲酸作为流动相添加剂，建立了同位素内标法结合HILIC-ESI-MS/MS快速分析25种游离氨基酸的质谱定量方法。加入邻苯二甲酸后，氨基酸的加质子峰强度显著增强，而钠离子加和峰比例降低，检测灵敏度显著提高。同时，色谱分离效果也得到改善。氨基酸的最低检测限为0.050～20.0 ng/mL，相较于未添加邻苯二甲酸时，提升了4～50倍。最后该定量方法成功应用于分析人体甲状腺癌旁正常组织和甲状腺癌组织中的游离氨基酸。结果表明相对于癌旁正常组织，甲状腺癌组织中的绝大多数氨基酸含量明显升高。该方法应用方便，只需在流动相中加入适宜浓度的邻苯二甲酸，无需改变其他分析条件。\n 最后，我们采用吡啶（氘代吡啶）、氯化亚砜作为衍生化试剂，建立了稳定同位素标记法结合HPLC-ESI-IM-Q-TOF-MS同时对脂肪醇、脂肪醛和甾醇的进行相对定量分析的方法。不同于常见的衍生化试剂，不带电荷的试剂吡啶和二氯亚砜可以与醇类、醛类化合物反应，并使其带上永久性的带电荷基团，从而使得脂肪醇、脂肪醛和甾醇类化合物的质谱检测灵敏度显著提高。此外，具有三维分离效果的离子淌度质谱技术（包括漂移时间、质荷比、离子强度）的使用，可以有效的提高检测的分辨率并同时降低复杂样本的基质效应。在进一步与液相色谱联用后，四分钟内可以同时完成包括脂肪醇、脂肪醛和甾醇在内的15种化合物的检测。之后这种使用d0和d5同位素峰对标记的相对定量方法被应用于人体甲状腺肿瘤组织和癌旁正常组织中15种化合物的差异性分析。该方法检测灵敏度高、相对定量结果准确可靠。

关键词：甲状腺肿瘤小分子代谢物质谱法液相色谱法同位素标记法极性切换模式

来源：评论

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两株植物内生真菌代谢产物及LC-MS/MS法检测食品中非法色素的研究

两株植物内生真菌代谢产物及LC-MS/MS法检测食品中非法色素的研究

引用

作者：胡志博华南农业大学

学位级别：硕士

植物内生菌是近三十年来在国内外受到越来越多关注的微生物类群,被认为是产生结构新颖的农用和药用天然产物的可持续利用资源。本论文首先对源于荔枝树的一株内生真菌Trichoderma virens FY06代谢产物进行了研究。然后,在本实验室伍智... 详细信息

植物内生菌是近三十年来在国内外受到越来越多关注的微生物类群,被认为是产生结构新颖的农用和药用天然产物的可持续利用资源。本论文首先对源于荔枝树的一株内生真菌Trichoderma virens FY06代谢产物进行了研究。然后,在本实验室伍智慧硕士的研究基础上,对一株添加了苦槛蓝化学成分(2R,3R)-3,5,7-三羟基黄烷酮-3-乙酸酯诱导发酵的苦槛蓝内生真菌Botryosphaeria ramosa L29的代谢产物进行后续研究。同时,鉴于食品安全问题作为一个关系到人民群众身体健康和生命安全的公共问题,越来越受到人们的重视。本论文还与广州市食品检验所开展合作,对食品中非法色素的LC-MS/MS测定进行了研究。论文第一章通过综合运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、高效制备液相色谱等多种分离纯化方法,共分离得到33个单体化合物,并通过核磁共振波谱、高分辨质谱和紫外光谱等多种波谱学技术以及对照相关文献鉴定了它们的结构,具体结果如下:从内生真菌Trichoderma virens FY06的代谢产物中分离并鉴定了24个单体化合物,分别是diacetylgliocladic acid(1)、gliocladic acid(2)、3-acetylgliocladic acid(3)、14-acetylgliocladic acid(4)、rhinomilisin B(5)、xylaric acid B(6)、hydroheptelidic acid(7)、chlorine heptelidic acid(8)、rhinomilisin A(9)、divirensol H(10)、divirensols D(11)、lentisinic acid A(12)、trivirensol A(13)、trivirensol B(14)、3-O-acetylheptelidic acid A(15)、1-O-ethyl-3-O-acetylheptelidic acid A(16)、methylhydroheptelidate(17)、heptelidehyde(18)、xylaric acid D(19)、3-acetylxylaric acid D(20)、rhinomilisin E(21)、rhinomilisin G(22)、(7R,10R)-aspergilloid G(23)、3,4-dimethyl-2-penten-5olide(24)。从海洋半红树苦槛蓝内生生真Botryosphaeria ramosa L29添加(2R,3R)-3,5,7-三羟基黄烷酮-3-乙酸酯诱导发酵代谢产物鉴定了9个单体化合物,分别是5-hydroxy-3-hydroxymethyl-2-methyl-7-methoxychromone(25)、5-hydroxy-2-hydroxymethyl-3-methyl-7-methoxychromone(26)、pestapyrones A(27)、pestaphthalides B(28)、pestaphthalides A(29)、(S)-3-[(S)-1-Hydroxyethyl]-5,7-dimethoxy-6-methylisobenzofuran-1(3H)-one(30)、(R)-3-[(S)-1-Hydroxyethyl]-5,7-dimethoxy-6-methylisobenzofuran-1(3H)-one(31)、5-hydroxyindole-3-aldehyde(32)、chaetoquadrin F(33)。其中化合物1、10、13、14、16、18和20是未见文献报导的新化合物。化合物5、9为首次从Trichoderma属中分离得到,化合物25、26为首次从Botryosphaeria ramosa种中分离得到。对分离得到的结构较为新颖的化合物的抗植物病原菌活性研究表明,化合物1,2,3,5,7,9,10,13,16,24,26,30和31对番茄枯萎菌、荔枝炭疽菌、香蕉炭疽菌、柑橘青霉菌和小麦赤霉菌中的一种或多种显示出较强的抑菌效果。论文第二章研究了LC-MS/MS同时快速测定食品中52种具有不同酸碱性非法色素多残留的检测方法,包括23种脂溶性的中性偶氮染料、8种酸性磺化偶氮染料、12种三苯基甲烷碱性染料、3种碱性吲哚染料、3种黄蒽染料、1种喹啉染料和2种蒽醌类染料。通过对分散固相萃取(d-SPE)吸附剂、色谱和质谱条件(质谱参数、正负离子切换模式)、稀释因子与基质效应等条件的研究和优化,建立了一种通过LC-MS/MS正负离子切换模式单次进样同时测定食品中52种非法色素的快速高效的多残差检测方法。即非法染料用甲醇-乙腈(1∶1,V/V)提取;进一步以C18

关键词：内生真菌分离鉴定抗菌活性非法色素 LC-MS/MS 极性切换模式

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