检索结果-内蒙古大学图书馆

PCR法制备地高辛标记探针改良PCR-Select Differential Screening试剂盒

中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 205-208页

作者：肖军邹飞蔡绍曦第一军医大学热带军队卫生学系南方医院呼吸内科广东广州510515

目的 :探讨采用地高辛 (digoxin ,DIG)标记探针替代PCR Selectdifferentialscreening试剂盒中同位素标记探针的方法。方法 :抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)所分离的差异表达序列转移至硝酸纤维素膜 ,以PCR... 详细信息

目的 :探讨采用地高辛 (digoxin ,DIG)标记探针替代PCR Selectdifferentialscreening试剂盒中同位素标记探针的方法。方法 :抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)所分离的差异表达序列转移至硝酸纤维素膜 ,以PCR法掺入DIG 11 dUTP制备探针 ,按DIG标记探针常规操作进行杂交显色 ,杂交阳性结果采用reverseNorthernblot再度杂交验证。结果 :应用DIG标记探针改良PCR SelectDifferentialScreening试剂盒所得到的阳性结果经reverseNorthernblot验证符合率达到 90 %。结论 :DIG标记探针改良PCR Selectdifferentialscreening试剂盒在避免了放射污染同时具备很高的特异性 ,完全可以替代同位素标记探针。

关键词：抑制性消减杂交地高辛标记探针同位素 PCR

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侵染广西甘蔗的1个SCMV分离物CP基因序列分析及地高辛标记探针制备

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植物病理学报 2005年第S1期35卷 116-117页

作者：汤亚飞宋晓兵许东林周国辉华南农业大学资源环境学院广州510642

甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SC- MV)引起的甘蔗花叶病是一种重要的世界性甘蔗病害,在我国各蔗区普遍发生,局部地区为害严重。本文报道侵染华南地区甘蔗的SCMV一个分离物CP基因片段克隆、序列分析、地高辛标记探针制备及其在... 详细信息

甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SC- MV)引起的甘蔗花叶病是一种重要的世界性甘蔗病害,在我国各蔗区普遍发生,局部地区为害严重。本文报道侵染华南地区甘蔗的SCMV一个分离物CP基因片段克隆、序列分析、地高辛标记探针制备及其在病毒检测中应用的结果。 1 材料与方法 1．1 样品采集、病毒CP基因片段RT-PCR扩增、扩增产物回收及克隆测序自广西合浦田间采取表现典型花叶症状的甘蔗品种“新台糖22”病叶,华美(洛阳)生物工程公司总RNA抽提试剂盒(I)抽提总RNA。PCR引物 SCMV-F5:5'-GAAGAXGTYTTCCAYCAAFCXG- GAAC-3'(-18-+8,Y=C或T,X=T或A。

关键词：分离物 CP基因 SCMV 甘蔗花叶病基因序列分析甘蔗病害广西甘蔗标记探针甘蔗品种蔗区

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多功能纳米标记探针在生命分析中的初步应用

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厦门大学学报（自然科学版） 2011年第B9期50卷 10-11页

作者：唐点平福州大学化学化工学院食品安全分析与检查教育部重点实验室福建福州350108

免疫分析是利用抗原一抗体特异性反应来测定痕量物质的一种高灵敏度、高选择性的方法，该方法的提出和发展不仅推动了血清学的应用，而且也有助于从理论上研究抗原一抗体的关系及其本质．纳米生物技术是纳米技术与生物技术交叉渗透形成... 详细信息

免疫分析是利用抗原一抗体特异性反应来测定痕量物质的一种高灵敏度、高选择性的方法，该方法的提出和发展不仅推动了血清学的应用，而且也有助于从理论上研究抗原一抗体的关系及其本质．纳米生物技术是纳米技术与生物技术交叉渗透形成的新技术，

关键词：纳米技术标记探针应用多功能纳米生物技术生命高灵敏度免疫分析

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PCR法标记探针在核酸杂交中的应用

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临床检验杂志 2004年第2期22卷 111-112页

作者：姜宏李麓芸卢光琇中国人民解放军第105医院生殖中心合肥230031 湖南医科大学生殖工程研究室合肥230031

目的　建立一种简便、高效的核酸探针标记方法。方法　以扩增小鼠生精细胞凋亡相关基因时使用的引物 ,基因重组扩增后阳性克隆质粒DNA为模板 ,采用PCR法标记同位素 [α 3 2 P]dCTP。结果　制成的探针比放射活性大于 1× 10 9cpm/ml... 详细信息

目的　建立一种简便、高效的核酸探针标记方法。方法　以扩增小鼠生精细胞凋亡相关基因时使用的引物 ,基因重组扩增后阳性克隆质粒DNA为模板 ,采用PCR法标记同位素 [α 3 2 P]dCTP。结果　制成的探针比放射活性大于 1× 10 9cpm/ml,电泳仅见一条条带 ;northernblot杂交显示阳性条带清晰 ,背景噪音低。结论　PCR法标记探针简便、特异。

关键词： PCR法标记探针核酸杂交应用聚合酶链反应

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应用生物素标记探针对癌周肝硬变组织中HBV-DNA的原位分子杂交研究

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肿瘤 1991年第4期11卷 152-153页

作者：丛文铭吴孟超张秀忠屠振兴第二军医大学肝胆外科研究所

在肝癌病因学的研究中,HBV感染与肝癌发生的关系最受到重视。许多资料显示,在乙肝及肝癌组织内有HBV-DNA的存在。然而,以往的此类研究多以Southern吸印法为主,难以获得HBV-DNA在单个肝细胞内的定位证据。本文应用晚近发展起来的原位分... 详细信息

在肝癌病因学的研究中,HBV感染与肝癌发生的关系最受到重视。许多资料显示,在乙肝及肝癌组织内有HBV-DNA的存在。然而,以往的此类研究多以Southern吸印法为主,难以获得HBV-DNA在单个肝细胞内的定位证据。本文应用晚近发展起来的原位分子杂交技术,对26例肝硬变组织中单个肝细胞内HBV-DNA的存在状态和分布特征进行了定位研究,讨论了可能的生物学意义,现报告如下。

关键词：肝肿瘤癌周组织生物素标记探针 HBV

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多聚酶链反应和地高辛素标记探针技术检测产类志贺毒素大肠埃希菌的评价

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国外医学(微生物学分册) 1995年第1期 45-46页

作者：胡圣尧

作者对95株产类志贺毒素(SLT)的大肠埃希菌(EC)和5株产志贺毒素(STX)的Ⅰ型痢疾志贺菌进行毒素检测,并改进了操作方法。95株SLTEC含15个不同血清型(或12个O群),其中82%是与肠出血性大肠杆菌(EHEC)暴发有关的O157;H7或O157:NM血清型。作... 详细信息

作者对95株产类志贺毒素(SLT)的大肠埃希菌(EC)和5株产志贺毒素(STX)的Ⅰ型痢疾志贺菌进行毒素检测,并改进了操作方法。95株SLTEC含15个不同血清型(或12个O群),其中82%是与肠出血性大肠杆菌(EHEC)暴发有关的O157;H7或O157:NM血清型。作者以原先的多聚酶链反应(PCR)技术为基础,分别用SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ两对寡核苷酸或两者混合物为引物,对用95℃、10min

关键词：大肠埃希菌 PCR 标记探针类志贺毒素

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两种非放射性标记探针在马立克氏病毒检测上的应用

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畜牧与兽医 1995年第5期27卷 225-226页

作者：李光富钱建飞陈溥言张林元南京军事医学研究所江苏农科院南京农业大学

两种非放射性标记探针在马立克氏病毒检测上的应用李光富，钱建飞，陈溥言，张林元（南京军事医学研究所，１２１０００２；江苏农科院，南京农业大学）鸡马立克氏病（ＭＤ）是遍布世界各地的危害最严重的家禽传染病之一，每年给全世界... 详细信息

两种非放射性标记探针在马立克氏病毒检测上的应用李光富，钱建飞，陈溥言，张林元（南京军事医学研究所，１２１０００２；江苏农科院，南京农业大学）鸡马立克氏病（ＭＤ）是遍布世界各地的危害最严重的家禽传染病之一，每年给全世界的养鸡业带来极为严重的损失。常规检...

关键词：鸡病马立克氏病病毒检测标记探针

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用^3H,^35S和^32P标记探针的原位杂交和透射电镜把基因定位在人的...

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国外生物科技 1989年第3期 27-32页

作者：李昌本

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用非放射位标记探针进行原位杂交测定人精子核中Y染色体的非整倍性

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国际遗传学杂志 1991年第1期 47-48页

作者：蒋小英

本研究尝试采用生物素标记的Y特异DNA探针与精液精子进行原位杂交来测定人精子核中Y染色体的非整倍性。结果表明由于这项技术简单并且出现清晰的杂交带,因此,非常适用于对精子染色体非整倍性的分析。 PHY2.1探针,由于它对Y染色体的特异... 详细信息

本研究尝试采用生物素标记的Y特异DNA探针与精液精子进行原位杂交来测定人精子核中Y染色体的非整倍性。结果表明由于这项技术简单并且出现清晰的杂交带,因此,非常适用于对精子染色体非整倍性的分析。 PHY2.1探针,由于它对Y染色体的特异性和进行原位杂交时程序简便并不具放射活性,因此用作估价人成熟精子Y染色体的非整倍性非常理想。在制备精子混悬液时,低渗处理是不必要的。因为,它和未作低渗处理的细胞无差别。同样,也无需对精子头进行解凝聚处理。因为,杂交前变性时间长,已使

关键词：精子核染色体非整倍性原位杂交标记探针

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35S-α-dATP用于缺口转移标记探针DNA及蓖麻蚕核型多角体病毒（ArNPV）多角体蛋白基因的初步定位

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生物化学与生物物理进展 1988年第4期15卷 286-288页

作者：陈蔚梅林栖凤马延高卢文钩武汉大学病毒研究所

本文用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的多角体蛋白基因mRNA的cDNA为探针,用35S-α-dATP为标记化合物,经缺口转移体外标记探针DNA,用旋转柱层析法分离出标记探针,由膜上DNA-DNA杂交,将ArNPV的多角体蛋白基因定位,确定是在其EcoRⅠ-Ⅱ片段上。

关键词：多角体蛋白基因初步定位 dATP ArNPV 标记探针 DNA 缺口

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