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基于RANKL/RANK-NF-κb-NLRP3炎性小体通路探讨强骨饮治疗骨质疏松症模型大鼠的作用机制

中国药业 2025年第3期34卷 42-49页

作者：邓祖跃李志豪徐俊峰黄俊俊董艳蓉蒋霞任艳云浙江省食品药品检验研究院·浙江省药品接触材料质量控制研究重点实验室·国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室浙江杭州310052 浙江工业大学浙江杭州310014 浙江省立同德医院浙江杭州310012 浙江中医药大学附属第二医院浙江杭州310005 中国人民解放军联勤保障部队第903医院浙江杭州310022

目的探讨强骨饮调节核因子-κb受体激活因子配体/核因子-κb受体激活因子-核因子-κb受体-nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(RANKL/RANK-NF-κb-NLRP3)炎性小体通路治疗骨质疏松症(OP)的作用机制。方法将100只SD大鼠随机分为正常对照组(A... 详细信息

目的探讨强骨饮调节核因子-κb受体激活因子配体/核因子-κb受体激活因子-核因子-κb受体-nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(RANKL/RANK-NF-κb-NLRP3)炎性小体通路治疗骨质疏松症(OP)的作用机制。方法将100只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,等量生理盐水,灌胃给药),OP组(b组,等量生理盐水,灌胃给药),强骨饮低、中、高剂量组[C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组,0.83,1.66,3.32 g/(kg·d),灌胃给药],己烯雌酚(DES)组[D组,0.1 mg/(kg·d),灌胃给药],吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)组[E组,0.1 g/(kg·d),腹腔注射],C_(2)组+E组(F组),氟甲基酮(Z-YVAD)组[G组,0.15 mg/(kg·d),尾静脉给药],C_(2)组+G组(H组),各10只。除A组外,其余各组大鼠均行腹部切口双侧去卵巢术,复制OP大鼠模型。连续6周给药后处死大鼠,采用发色底物法测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、骨形成发生蛋白-2(bMP-2)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)水平;采用免疫印迹(Western blot)法检测骨组织中RANKL、RANK、NF-κb亚基p65(NF-κb p65)、NLRP3、胱天蛋白酶-1 p20(caspase-1 p20)、消皮素D-N端抗体(GSDMD-N)的蛋白表达水平;采用双能X线扫描仪测定大鼠股骨中段骨密度(bMD);采用Micro-CT仪观察大鼠股骨头的结构,记录骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(***)、骨小梁分离度(***)、骨体积分数(bV/TV);采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠骨组织的病理变化。结果与b组比较,C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组、E组、F组、G组、H组大鼠的bMD,Tb.N,***,bV/TV均显著升高(P<0.05),***均显著降低(P<0.05),骨皮质更厚,骨小梁更粗、排列更有序,成骨细胞数量更多,血清CTX-Ⅰ,IL-1β,IL-18,IL-6,TNF-α水平均显著降低(P<0.05),其中F组较E组、H组较G组以上指标均显著更优(P<0.05);C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组、F组、H组大鼠的SOD水平均显著升高(P<0.05),MDA水平均显著降低(P<0.05),其中F组较E组、H组较G组以上指标均显著更优(P<0.05);C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组大鼠的RANKL,RANK,NF-κb p65,NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);C_(2)组、F组大鼠的RANKL,RANK,NF-κb p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E组仅NF-κb p65蛋白表达水平显著降低(P<0.01);C_(2)组、H组大鼠的NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),G组仅caspase-1 p20蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与E组比较,F组大鼠的RANKL,RANK,NF-κb p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与G组比较,F组大鼠的NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论强骨饮可通过改善OP模型大鼠的bMD及骨指标而治疗OP,其作用机制与抑制RANKL/RANK-NF-κb-NLRP3炎性小体通路相关。

关键词：强骨饮骨质疏松症核因子-κb受体激活因子配体核因子-κb受体激活因子-核因子-κb受体-nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3

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