检索结果-内蒙古大学图书馆

华南农业大学学报 2025年第1期46卷 12-24页

作者：邓健浩刘力舒婵吴坤吴坤钟姚兵华李康田铃黄志君华南农业大学动物科学学院广东广州510642 华南师范大学昆虫发育生物学与应用技术重点实验室广梅园研发中心广东梅州514779

【目的】利用果蝇作为宿主比较单增李斯特菌Listeria monocytogenes、格氏李斯特菌L. grayi以及威尔斯李斯特菌L. welshimeri侵染后触发果蝇S2细胞基因表达模式的异同,为探究宿主的先天免疫防御机制以及不同种李斯特菌的致病差异机制提... 详细信息

【目的】利用果蝇作为宿主比较单增李斯特菌Listeria monocytogenes、格氏李斯特菌L. grayi以及威尔斯李斯特菌L. welshimeri侵染后触发果蝇S2细胞基因表达模式的异同,为探究宿主的先天免疫防御机制以及不同种李斯特菌的致病差异机制提供一定的研究基础。【方法】单增李斯特菌、格氏李斯特菌以及威尔斯李斯特菌分别侵染果蝇S2细胞3 h后,利用转录组测序技术检测果蝇S2细胞中的mRNA表达谱,并利用生物信息学方法筛选出差异表达基因(DEGs),然后对这些基因进行GO注释和KEGG分析,最后采用qRT-PCR技术验证5个Toll和Imd通路相关的抗菌肽基因的转录水平。【结果】单增李斯特菌、格氏李斯特菌和威尔斯李斯特菌侵染3 h后果蝇S2细胞中共有18个DEGs,特有DEGs分别为104、28和33个。3种李斯特菌侵染组共有的DEGs被注释到代谢过程、细胞过程、细胞器、对刺激反应和免疫系统过程等共有的GO条目;此外,单增李斯特菌侵染组特有的DEGs被注释到生物黏附、参与化学突触传递的突触前过程、生物过程的负调节、核酸结合转录因子活性和信号转导器活性等特有GO条目;格氏李斯特菌侵染组特有的DEGs被注释到多个生物体过程、细胞外区域等特有GO条目;威尔斯李斯特菌侵染组特有的DEGs则被注释到发育过程及膜包裹腔等特有GO条目。KEGG分析结果显示,3种李斯特菌侵染组的DEGs均富集到了Toll/Imd信号通路。qRT-PCR验证5个Toll和Imd通路相关的抗菌肽基因转录水平,定量结果与测序结果基本吻合。【结论】3种不同李斯特菌侵染后触发S2细胞的转录表达模式具有一定的相似性,但同时也存在不同之处,这些差异存在的信号通路可能与3种李斯特菌在S2细胞中的致病力强弱存在相关性。

关键词：单增李斯特菌格氏李斯特菌威尔斯李斯特菌果蝇S2细胞转录组测序抗菌肽信号通路

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脉冲磁场处理对格氏李斯特菌钙离子跨膜行为的影响

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中国食品学报 2017年第4期17卷 182-188页

作者：吴平马海乐江苏大学食品与生物工程学院江苏省农产品物理加工重点实验室农业部蔬菜脱水加工技术集成基地江苏镇江212013

研究了脉冲磁场处理后格氏李斯特菌细胞Ca^(2+)的跨膜行为,包括对该探针进行荧光光谱特性以及细胞负载研究,建立了格氏李斯特菌胞内钙离子荧光强度测定方法,同时采用激光共聚焦荧光显微镜检测不同脉冲数下受脉冲磁场处理的后格氏李斯特... 详细信息

研究了脉冲磁场处理后格氏李斯特菌细胞Ca^(2+)的跨膜行为,包括对该探针进行荧光光谱特性以及细胞负载研究,建立了格氏李斯特菌胞内钙离子荧光强度测定方法,同时采用激光共聚焦荧光显微镜检测不同脉冲数下受脉冲磁场处理的后格氏李斯特菌胞内钙离子荧光强度和浓度的变化。研究结果表明,Fluo-4/AM荧光探针自身的荧光强度较小,能成功负载于格氏李斯特菌中,可用于格氏李斯特菌胞内游离Ca^(2+)浓度的测定,且最优负载条件是负载浓度6μmol/L,负载时间60 min,负载温度37℃。经不同脉冲数的脉冲磁场处理后,格氏李斯特菌胞内Ca^(2+)浓度与菌落总数的变化呈较高的负相关性;LCSM观察发现,在一定脉冲数范围,胞内Ca^(2+)荧光强度随脉冲数的增加而增加,这说明脉冲磁场作用造成细胞生物膜通透性改变,使胞外大量Ca^(2+)跨膜进入胞内。由此推测,由脉冲磁场造成的细胞生物膜通透性的变化,导致胞内Ca^(2+)浓度的升高,这是脉冲磁场具有杀菌作用的重要原因。

关键词： Fluo-4/AM荧光探针格氏李斯特菌钙离子脉冲磁场激光共聚焦显微镜

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格氏李斯特菌脉冲磁场杀菌效果研究

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食品工业科技 2015年第7期36卷 127-131页

作者：吴平曾义王薇薇郁晓晨任珊珊马海乐江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013

以自行研制的脉冲磁场杀菌设备对格氏李斯特菌进行杀菌实验,研究了格氏李斯特菌的生长时期、脉冲磁场参数(强度、脉冲数),介质参数(温度、Na+浓度、p H)等对脉冲磁场杀菌效果的影响。结果表明:格氏李斯特菌在对数生长中期对脉冲磁场最... 详细信息

以自行研制的脉冲磁场杀菌设备对格氏李斯特菌进行杀菌实验,研究了格氏李斯特菌的生长时期、脉冲磁场参数(强度、脉冲数),介质参数(温度、Na+浓度、p H)等对脉冲磁场杀菌效果的影响。结果表明:格氏李斯特菌在对数生长中期对脉冲磁场最为敏感;脉冲磁场对格氏李斯特菌的杀菌效果产生生物学窗口效应,不同的磁场强度杀菌时,2.5T和4.0T残留率出现谷值;不同的脉冲数杀菌时,25个脉冲数残留率达到谷值;当介质温度为30℃时,残留率最低,较低或较高温度的介质中,杀菌效果较差;Na+对脉冲磁场的杀菌效果有一定的协同作用;较低或者较高的p H促进了脉冲磁场的杀菌作用,p H为9.0时残留率最低;对2.5T,25个脉冲数处理的格氏李斯特菌进行扫描电镜观察时发现菌体细胞膜破裂,胞内物质外溢,这可能是脉冲磁场造成格氏李斯特菌死亡的原因。

关键词：脉冲磁场格氏李斯特菌杀菌窗效应扫描电镜

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脉冲磁场对格氏李斯特菌的杀菌作用及机理研究

脉冲磁场对格氏李斯特菌的杀菌作用及机理研究

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作者：吴平江苏大学

学位级别：硕士

热杀菌作为传统的杀菌技术，其加热过程常常导致杀菌对象发生理化变化，引起色泽、风味、质地等品质下降，造成营养成分不必要的损失。传统的热加工技术已渐渐不能满足人们对食品质量的需求，而作为非热杀菌技术之一的脉冲磁场杀菌(PMF... 详细信息

热杀菌作为传统的杀菌技术，其加热过程常常导致杀菌对象发生理化变化，引起色泽、风味、质地等品质下降，造成营养成分不必要的损失。传统的热加工技术已渐渐不能满足人们对食品质量的需求，而作为非热杀菌技术之一的脉冲磁场杀菌(PMF)技术，可以在较低的温度下杀死微生物，保持食品原有的品质，因而脉冲磁场杀菌技术逐渐受到广泛关注。本实验以格氏李斯特菌（***）为对象，研究包括了脉冲磁场对格氏李斯特菌的杀菌效果、对菌体细胞结构和功能的影响以及对PMF杀菌机理进行了初步的探讨。具体的研究结果为:\n (1)格氏李斯特菌的生长时期、脉冲磁场强度以及脉冲数、介质参数（温度、pH值、Na+浓度）都会对脉冲磁场的杀菌效果产生影响。培养8h后处于对数生长中期的***对脉冲磁场的抗性较低并且敏感程度较高，此时杀菌残留率较低，杀菌效果也更好;培养12h后的***开始进入其稳定生长期。当脉冲强度为1.5、2.5、4T以及脉冲数为25个时，残留率都达到谷值，此时出现了PMF杀菌“窗效应”的强度和时间窗。杀菌强度窗口较先前的研究确实发生漂移现象，给PMF的实际推广应用带来了一定的困难。\n (2)使用2.5T，25个脉冲进行杀菌处理，当介质温度升高时，脉冲磁场杀菌的残留率总体上也在不断降低，30℃时降到谷值，产生最佳的杀菌效果;高浓度的Na+与PMF杀菌产生了较好的协同作用，而低浓度的Na+产生的协同作用较弱;酸性或者碱性的介质环境，会使PMF杀菌效果增加，弱碱性环境中杀菌效果高于弱酸环境。\n (3)扫描电镜和透射电镜观察发现，经过脉冲磁场处理，***细胞表面出现了凹凸不平的褶皱形态，细胞膜上产生皱缩现象，可能的原因是脉冲磁场的周期性冲击作用击穿了***菌体细胞膜，细胞破裂后内容物外溢，最终引发细胞的不可逆死亡。\n (4)Fluo-4/AM荧光探针在二甲亚砜中自发荧光强度很低，对实验造成的背景干扰较小。Fluo-4/AM能成功负载于格氏李斯特菌细胞中，其被胞内酶水解后产物Fluo-4能够与钙离子结合形成Fluo-4-Ca2+，在526nm处产生最大发射波长，并且该处产生的荧光的强度与胞内钙离子浓度呈正相关性。Fluo-4/AM荧光探针在***菌体中最优负载浓度为6μmol/L，最优负载时间为60min，最优负载温度为37℃。\n (5)经过脉冲磁场处理后***菌落总数明显下降，同时胞内荧光强度显著上升，说明经过脉冲磁场处理后***钙离子跨膜行为增强。因此推测细胞膜通透性的变化及胞内钙离子浓度的升高，是PMF具有杀菌作用的原因之一。不同脉冲数和强度对格氏李斯特菌胞内Ca2+荧光强弱的影响程度是不相同的。当场强小于1.5T，脉冲数小于20时，增值比接近1，说明脉冲磁场对胞内钙离子的影响不大;当场强继续升高，大于2.0T后，在25以及35个脉冲时几乎都达到峰值。这说明在这两个脉冲数下，经过脉冲磁场的处理，导致其细胞膜通透性发生改变，引起胞内的Ca2+浓度升高，这与脉冲磁场的杀菌曲线一致。\n (6)***菌经磁场强度为2.5T，脉冲数分别为15、20、25处理后，使用激光共聚焦显微镜观察发现，格氏李斯特菌的胞质内和核内荧光强度随脉冲数的增加而增加，脉冲磁场不仅导致细胞膜的通透性变化，还引起核膜通透性变化。\n (7)对经过2.5T，25个脉冲处理后的菌体蛋白进行提取，并SDS-PAGE凝胶电泳的分离。结果发现，经过脉冲磁场处理的格氏李斯特菌胞内蛋白的电泳条带与未处理组的电泳条带并无明显差别，只是处理组蛋白浓度与未经脉冲磁场处理的对照组相比更高，且集中在高分子量区域，这与2-DE电泳凝胶图谱中上调蛋白点的集中区域一致。对经过2.5T，25个脉冲处理后的***菌体蛋白进行2-DE电泳。凝胶经图像扫描分析后，发现了20个差异蛋白点，经二级质谱成功鉴定出16个蛋白点，其中有2种蛋白消失，3种蛋白出现;另外有6种蛋白质的表达量升高，5种蛋白质的表达量下降，这些差异蛋白对于理解脉冲磁场对格氏李斯特菌的影响具有重要作用。\n (8)对差异蛋白进行分析后，在成功鉴定得到的16个差异蛋白中，其中7个蛋白有pathway信息，部分蛋白还参与多种pathway，所以共有10种pathway。经过KEGG pathway分析后发现，脉冲磁场主要作用于格氏李斯特菌的有机生物合成代谢以及能量代谢过程。***菌受PMF处理后，胞内能量代谢平衡、有机物代谢平衡遭到破坏，细胞不能及时进行自我修复，这是导致细胞凋亡的又一诱因。

关键词：食品安全脉冲磁场格氏李斯特菌杀菌机理

来源：评论

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从关节腔积液中检出格氏李斯特菌1例

引用

中华医院感染学杂志 2001年第6期11卷 408-408页

作者：林九玲李百丽秦开贵山东省益都中心医院山东青州262500

格氏李斯特菌 (L isteria grayi)是 1992年国际上又重新命名的一个菌种 ,2 0 0 0年 6月我们从 1例住院患者右下肢膝关节关节腔积液中连续两次分离到该菌 ,报告如下。患者女 ,15岁 ,因不明原因的发热 ,右下肢膝并节疼痛 ,X光片示 ,髌上... 详细信息

格氏李斯特菌 (L isteria grayi)是 1992年国际上又重新命名的一个菌种 ,2 0 0 0年 6月我们从 1例住院患者右下肢膝关节关节腔积液中连续两次分离到该菌 ,报告如下。患者女 ,15岁 ,因不明原因的发热 ,右下肢膝并节疼痛 ,X光片示 ,髌上囊及髌下囊混浊消失 ,但抽出的关节腔积液混浊、呈黄绿色。细菌鉴定 :血平板见到约 1～ 2 m m大小、光滑半透明、似露滴状、无溶血环的小菌落。染色检查 :2 4h培养为无芽胞、无荚膜革兰阳性、排列不规则的短小杆菌 ,72 h后则多数为革兰阴性。在半固体培养基中 ,经 2 2℃ 2 4h培养 ,细菌沿穿刺线生长 ,48h呈不规则地云雾状布满整个培养基 ,呈现一个伞状环。生化特性 :氧化酶 (- )、触酶 (+) ,甲基红、V- P、甘露醇、可溶性淀粉、七叶苷阳性 ,CAMP(金黄色葡萄球菌 )、水解马尿酸盐、硝酸盐、木糖、鼠李糖阴性。根据其培养、染色特点及生化反应鉴定该菌为格氏李斯特菌。药敏试验 :K- B法。对庆大霉素、阿米卡星 (丁胺卡那霉素 )、先锋噻肟、头孢唑林 (先锋 )、头孢曲松 (菌必治 )、万古霉素、多西环素(强力霉素 )敏感 ;...

关键词：关节腔积液格氏李斯特菌鉴定

来源：评论

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单核细胞增生李斯特菌生物学研究进展

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华南预防医学 2006年第6期32卷 26-29页

作者：何冬梅邓峰赖蔚苳严纪文宋曼丹朱海明柯昌文马聪广东省疾病预防控制中心

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)隶属于李斯特菌属,根据《伯杰氏鉴定细菌学手册》第9版,将李斯特菌属分为7种:单核细胞增生李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌、威氏李斯特菌、利斯氏李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏... 详细信息

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)隶属于李斯特菌属,根据《伯杰氏鉴定细菌学手册》第9版,将李斯特菌属分为7种:单核细胞增生李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌、威氏李斯特菌、利斯氏李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏李斯特菌。原隶属于李斯特菌属的反硝化李斯特菌已成为一个新属,称为琼斯菌属。对人和动物具有致病力的有LM和伊氏李斯特菌,其余均为非致病型。此外,郭仰霖等研究发现一种产H2S型李斯特菌,对动物具有高度致死性,牲畜病死率高达98.48%,对人存在潜在性威胁。[第一段]

关键词：格氏李斯特菌单核细胞增生生物学默氏李斯特菌菌属细菌学反硝化致病力

来源：评论

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李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法

李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法

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作者：吴清平李凡叶青华陈谋通张菊梅丁郁吴诗李滢韦献虎雷涛 510070 广东省广州市先烈中路100号院66号楼

本发明公开了李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法，本发明方法提供了用于李斯特属以及6种常见李斯特菌——单核增生李斯特菌、英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、威尔氏李斯特菌、西式李斯特菌和格氏李斯特菌的，... 详细信息

标准号: CN111057776A

本发明公开了李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法，本发明方法提供了用于李斯特属以及6种常见李斯特菌——单核增生李斯特菌、英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、威尔氏李斯特菌、西式李斯特菌和格氏李斯特菌的，共16个新特异性分子检测靶标以及对应的PCR引物组和PCR快速检测方法。本发明方法无需经过生理生化鉴别即可检测到李斯特菌，具有检测时间短、成本低、操作简单、特异性强的优点；同时本发明的检测方法可弥补生化试验鉴别李斯特菌时反应不稳定的缺陷，检测结果更准确，结果判定更简单，实用性更强。

关键词：李斯特菌检测快速检测靶标鉴别单核增生李斯特菌格氏李斯特菌特异性分子检测结果结果判定生化试验生理生化特异性强新分子尔氏绵羊

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李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法

李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法

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作者：吴清平李凡叶青华陈谋通张菊梅丁郁吴诗李滢韦献虎雷涛 510070 广东省广州市先烈中路100号院66号楼

标准号: CN111057776B

关键词：李斯特菌检测快速检测靶标鉴别单核增生李斯特菌格氏李斯特菌特异性分子检测结果结果判定生化试验生理生化特异性强新分子尔氏绵羊

来源：评论

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