检索结果-内蒙古大学图书馆

中华中医药学刊 2025年第2期43卷 108-111,I0014页

作者：王诗雨吕恒高萌陈彤彤赵晨曦罗建蓉大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理大学药学院云南大理671000

目的建立1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)联合气相色谱和质谱联用技术(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)快速筛选棒毛络新妇油脂中的抗氧化活性成分。方法采用DPPH自由基化学反应与GC-MS色谱分析相结合的方法进行研究,通过分析棒毛络新妇油脂与自由基反应前后色谱图的变化来筛选抗氧化成分,并以各化合物的色谱峰面积降低率评价其抗氧化活性。同时进行方法学考察,并采用酶标仪法测定对照品的自由基清除能力,以验证DPPH-GC-MS方法的抗氧化成分筛选结果。结果从棒毛络新妇油脂中共鉴定出22个化合物,占总量的89.67%,主要为脂肪酸和脂肪酸酯,其中油酸甲酯和亚油酸甲酯相对含量较高。通过DPPH-GC-MS方法从中快速筛选到16个抗氧化成分,其中2,4-二叔丁基苯酚、硬脂酸乙酯、亚油酸、亚油酸乙酯、油酸乙酯和棕榈酸乙酯的抗氧化能力较强。活性验证结果表明DPPH-GC-MS方法可靠,可对天然产物中的抗氧化活性物质进行快速筛选和鉴定。结论DPPH-GC-MS方法可简便高效地筛选出棒毛络新妇油脂中的抗氧化成分,为进一步开发利用棒毛络新妇资源提供实验依据。

关键词：棒毛络新妇油脂 DPPH-GC-MS 抗氧化成分

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棒毛络新妇蜘蛛抗氧化活性成分研究

棒毛络新妇蜘蛛抗氧化活性成分研究

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作者：王诗雨大理大学

学位级别：硕士

棒毛络新妇(Trichonephila clavate ***)是园蛛科毛络新妇属蜘蛛,收录于《中国药用动物志》具有解热消肿、截疟杀虫、退黄生肌的功效,主治温证、瘰疬、疮肿、毒蛇咬伤等。《本草纲目》中记载蜘蛛“微寒、有小毒,主治婴儿口噤、泄痛脱肛... 详细信息

棒毛络新妇(Trichonephila clavate ***)是园蛛科毛络新妇属蜘蛛,收录于《中国药用动物志》具有解热消肿、截疟杀虫、退黄生肌的功效,主治温证、瘰疬、疮肿、毒蛇咬伤等。《本草纲目》中记载蜘蛛“微寒、有小毒,主治婴儿口噤、泄痛脱肛、结核、蛇虫叮咬等”。长期以来,对蜘蛛化学成分的研究主要集中在其毒液中的大分子成分,尤其是多肽类成分被广泛认为是主要的活性成分,但对棒毛络新妇蜘蛛中的生物活性小分子研究报道匮乏。故本文以抗氧化活性为导向,围绕棒毛络新妇中的小分子化学成分进行研究,采用DPPH自由基反应联合色谱技术快速筛选抗氧化成分,并对目标化合物进行定向分离及结构鉴定,拓展对其物质基础的认识,并进一步为棒毛络新妇药材质量标准研究提供科学依据。目的: 1.运用DPPH自由基反应联合HPLC技术研究棒毛络新妇正丁醇部位的抗氧化活性成分。 2.采用DPPH自由基反应联合GC-MS技术快速筛选棒毛络新妇油脂中的抗氧化活性成分。 3.分离鉴定棒毛络新妇中的小分子成分,揭示棒毛络新妇中所含有的小分子成分。方法: 1.采用DPPH自由基反应联合HPLC技术对棒毛络新妇正丁醇部位的抗氧化成分进行研究。首先采用酶标仪法测定棒毛络新妇石油醚部位、正丁醇部位和水部位的DPPH自由基清除率。对抗氧化活性最强的棒毛络新妇正丁醇部位,采用MCI柱层析进行分离,得到四个组分TCN1～TCN4。优化反应时间、反应温度和DPPH浓度三个条件后,采用HPLC分析TCN1～TCN4与自由基反应前后色谱图的变化,筛选抗氧化成分,并对其进行定向分离。同时从线性关系、精密度、稳定性、重复性四个方面进行方法学考察,并采用酶标仪法测定对照品的自由基清除能力,以验证抗氧化成分筛选结果。 2.采用DPPH自由基反应与GC-MS技术相结合的方法进行研究,通过分析棒毛络新妇油脂与自由基反应前后色谱图的变化来筛选抗氧化成分,并以各化合物的色谱峰面积降低率评价其抗氧化活性。同时从线性关系、精密度、稳定性、重复性四个方面进行方法学考察,并采用酶标仪法测定对照品的自由基清除能力,以验证抗氧化成分筛选结果。 3.采用硅胶、MCI、半制备液相色谱和重结晶等分离手段对棒毛络新妇正丁醇部位的小分子成分进行分离纯化,并运用核磁共振、质谱等波谱学方法对单体化合物进行结构鉴定。结果: 1.棒毛络新妇各极性部位均具有抗氧化活性,其中正丁醇部位(TCN)活性最强。正丁醇部位的四个组分(TCN1～TCN4)中,TCN3和TCN4表现出较强的抗氧化活性。通过DPPH自由基反应联合HPLC技术筛选抗氧化成分并进行定向分离,从TCN1中发现抗氧化成分酪氨酸(1),TCN2中发现抗氧化成分苯丙氨酸(2)和肌苷(3),TCN3中发现抗氧化成分原儿茶酸(4)和没食子酸(5),TCN4中发现抗氧化成分对羟基苯甲酸(6)和2,4-二叔丁基苯酚(7)。其中原儿茶酸、没食子酸、对羟基苯甲酸和2,4-二叔丁基苯酚的抗氧化能力较强,峰面积降低率超过60%。通过方法学考察及活性验证结果表明DPPH自由基反应联合HPLC技术简便可靠,可对天然产物中的抗氧化活性成分进行快速筛选。 2.通过GC-MS分析从棒毛络新妇油脂中共鉴定出22个化合物,占总量的89.67%,主要为脂肪酸和脂肪酸酯,其中油酸甲酯和亚油酸甲酯相对含量较高。通过DPPH自由基反应联合GC-MS技术从中快速筛选到16个抗氧化成分,其中2,4-二叔丁基苯酚、亚油酸乙酯、油酸乙酯和棕榈酸乙酯的抗氧化能力较强,峰面积降低率均超过70%。经方法学考察及活性验证结果表明DPPH自由基反应联合GC-MS技术简便可靠,可高效地对小极性混合物中的抗氧化成分进行筛选及鉴定。 3.从棒毛络新妇正丁醇部位中分离鉴定20个化合物,分别为酪氨酸(1)、苯丙氨酸(2)、肌苷(3)、原儿茶酸(4)、没食子酸(5)、对羟基苯甲酸(6)、(7)赖氨酸(8),环(丙氨酸-丙氨酸)(9),丙氨酸(10),异亮氨酸(11),尿嘧啶(12),精氨酸(13),(3S)-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(14),乳酸(15),色氨酸(16),次黄嘌呤(17),腺嘌呤(18),2-甲氧基-3-苯基丙酸(19)和9-(3′-羰基甲基)羟基嘌呤(20)。结论: ***自由基反应联合HPLC技术可简便高效的筛选出棒毛络新妇正丁醇部位中的抗氧化成分,初步阐述了棒毛络新妇的抗氧化活性成分。 ***自由基反应联合GC-MS技术可简便高效的筛选出棒毛络新妇油脂中的抗氧化成分,为进一步开发利用棒毛络新妇资源提供实验依据。 3.从棒毛络新妇正丁醇部位中分离鉴定了20个化合物,化合物1～2、4～7、9、11～20首次从棒毛络新妇蜘蛛中分离得到,为棒毛络新妇整体的小分子

关键词：棒毛络新妇快速筛选抗氧化活性小分子化学成分

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棒毛络新妇（Trichonephila clavata）的质量控制研究

棒毛络新妇（Trichonephila clavata）的质量控制研究

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作者：顾小亮大理大学

学位级别：硕士

目的:棒毛络新妇(Trichonephila clavata)蜘蛛作为部分经典古方的原料药,是一种分布范围较广的动物,具有较高的药用价值,但目前并未收录于中国药典及其它地方中药材标准中,且未见棒毛络新妇药材的相关生药学系统研究的报道。本课题对云... 详细信息

目的:棒毛络新妇(Trichonephila clavata)蜘蛛作为部分经典古方的原料药,是一种分布范围较广的动物,具有较高的药用价值,但目前并未收录于中国药典及其它地方中药材标准中,且未见棒毛络新妇药材的相关生药学系统研究的报道。本课题对云南不同地方的棒毛络新妇药材依据2020年版《中国药典》、《生药学》教材(第5版)和云南省中药材(民族药材)质量标准研究技术指导原则(2017年发布)中有关中药材质量标准研究的相关要求进行较为系统的生药学研究。研究内容包括药材的鉴别方法、检查项测定和主要组分的含量测定,得到棒毛络新妇药材生药学研究基础数据,为棒毛络新妇药材资源的进一步开发利用提供参考依据。方法:采用放大镜和显微镜观察描述棒毛络新妇药材性状和显微特征;以三种氨基酸为对照品进行薄层色谱展开分析;按照系统预试验法初步判断棒毛络新妇中可能存在的一些化学成分;通过分子生物学技术进行COI基因序列DNA条形码建立,以鉴别药材真伪。按照2020版《中国药典》检查项规定对10批药材样品中的水分、灰分及不同溶剂的浸出物等进行研究测定;以原子分光光度计和原子荧光光度计测定样品中重金属及几种微量元素含量;采用SDS-PAGE法对药材样品中含有的蛋白质及多肽的分子量分布进行考察。采用索氏提取法提取样品中脂溶性成分,以气相色谱质谱联用仪鉴定脂溶性化合物的种类、结构等,并测定各化合物相对百分含量,采用紫外分光光度计测定10批样品中水溶性蛋白质和总多糖的含量,以高效液相色谱仪对样品中核苷类成分进行含量测定。结果:系统描述了棒毛络新妇药材的原动物形态,干燥药材性状和显微特征,并建定了以三种氨基酸为对照的薄层色谱鉴别方法,其显色斑点为玫红色,且不少于6个;系统预试验结果展示了样品中含有蛋白质类、糖类、生物碱类和酚类化学成分,并提供了相应的图片资料,基于COI基因序列构建的系统发育树可以将棒毛络新妇和其它蜘蛛物种区分开来,计算得到的种间遗传距离和种内遗传距离大小也可将不同物种明显区分;参照《中国药典》相关要求测定得到10批棒毛络新妇样品的检查项测定数据:水分含量在4.06%～5.73%,平均含量为5.09%;总灰分含量在8.88%～13.81%,平均含量为11.58%;酸不溶性灰分在1.63%～2.55%,平均含量为1.98%;浸出物测定中以水为溶剂热浸法所得浸出物含量最高,在25.24%～34.44%,平均含量为32.08%;挥发性醚浸出物含量最低,在12.14%～16.27%,平均含量为13.78%;测定得到10批样品的八种金属元素含量,砷、汞、铜、锑、硒、铁、锰和锌元素的平均含量分别为1.805 mg/kg、0.028 mg/kg116.75 mg/kg、0.087 mg/kg、0.539 mg/kg、659.89 mg/kg、58.09 mg/kg和737.02mg/kg;SDS-PAGE法对样品中蛋白质多肽分子量分布考察结果显示分子量大多集中于75 KDa左右,在11 KDa和35 KDa附近也分布有较多寡肽和多肽。分别测定得到了10批棒毛络新妇样品中的脂溶性成分含量在12.25%～16.10%,平均含量为13.81%;双缩脲法测定水溶性蛋白质含量在196.18～287.34 mg/g,平均含量为240.24 mg/g;考马斯亮蓝法测定水溶性蛋白质含量在18.91～40.75 mg/g,平均含量为34.19 mg/g;总多糖含量在1.331～1.722 mg/g,平均含量为1.509 mg/g;尿嘧啶、鸟嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷五种核苷类成分的总含量在4.017～6.473mg/g,平均含量为5.495 mg/g。结论:本课题对不同产地的10批次棒毛络新妇药材样品进行较为系统的生药学研究,建立了棒毛络新妇药材的真伪鉴别方法、测定得到检查项下水分、灰分、浸出物和重金属、微量元素含量等数据,对药材中脂溶性成分、蛋白质、总多糖和核苷类成分等主要组分进行了含量测定,并建立了质量控制方法。进一步完善了棒毛络新妇药材在生药学方面的研究内容,为棒毛络新妇及其他节肢动物资源的可持续发展和后续潜在药用价值的开发利用提供了重要的科学依据和参考资料。

关键词：棒毛络新妇质量控制鉴别含量测定质量标准

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不同产地棒毛络新妇蜘蛛的脂溶性成分GC-MS分析

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中华中医药学刊 2023年第4期41卷 239-243,I0051,I0052页

作者：顾小亮杨月娥杨志斌罗建蓉杨自忠大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 大理大学药用特种昆虫开发国家地方联合工程研究中心云南大理671000 大理大学药用昆虫及蛛形类生物资源数字化开发创新团队云南大理671000 大理大学药学院云南大理671000

目的研究不同产地棒毛络新妇Trichonephila clavata蜘蛛的脂溶性成分,比较不同产地棒毛络新妇脂溶性成分组成和含量的差异。方法样品以石油醚进行索氏提取得到脂溶性成分,采用气相色谱质谱联用仪对甲酯化的样品进行检测,最后通过标准谱... 详细信息

目的研究不同产地棒毛络新妇Trichonephila clavata蜘蛛的脂溶性成分,比较不同产地棒毛络新妇脂溶性成分组成和含量的差异。方法样品以石油醚进行索氏提取得到脂溶性成分,采用气相色谱质谱联用仪对甲酯化的样品进行检测,最后通过标准谱库(NIST)进行检索和鉴定,用峰面积归一化法计算相对百分含量,并采用聚类分析、主成分分析和相似度评价对整体数据进行分析。结果棒毛络新妇脂溶性成分提取率为12.25%~16.10%,从中共鉴定出脂溶性成分26种,共有成分为11种,以油酸、亚油酸和棕榈酸含量最高,平均含量分别为35.84%、20.43%和11.87%;聚类分析和主成分分析结果可按产地分类,相似度评价结果在0.383~0.983。结论棒毛络新妇脂溶性成分的种类及相对百分含量受产地和生境的影响。研究为棒毛络新妇的物质基础研究提供实验数据,同时也为棒毛络新妇作为食品开发利用提供依据。

关键词：棒毛络新妇脂溶性成分气相色谱-质谱联用分析脂肪酸

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棒毛络新妇(Trichonephila clavata)的生药学研究

引用

广东化工 2022年第16期49卷 42-45页

作者：顾小亮罗建蓉肖怀赵昱张成桂杨自忠大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 大理大学药用特种昆虫开发国家地方联合工程研究中心云南大理671000 大理大学药用昆虫及蛛形类生物资源数字化开发创新团队云南大理671000 大理大学药学院云南大理671000

采用外观性状观察、显微鉴别、薄层色谱鉴别方法对不同产地来源的棒毛络新妇进行考察,通过理化鉴别方法对节肢动物棒毛络新妇(Trichonephila clavata)的化学成分进行初步检验,并对十批样品进行水分、灰分和浸出物的测定。棒毛络新妇的... 详细信息

采用外观性状观察、显微鉴别、薄层色谱鉴别方法对不同产地来源的棒毛络新妇进行考察,通过理化鉴别方法对节肢动物棒毛络新妇(Trichonephila clavata)的化学成分进行初步检验,并对十批样品进行水分、灰分和浸出物的测定。棒毛络新妇的生药学研究结果表明其性状、显微鉴别特征性强,薄层色谱的斑点清晰,分离度好,可用于棒毛络新妇的专属性鉴定;通过试管预实验法初步确定棒毛络新妇中含有蛋白质、多肽及氨基酸类、糖及苷类、生物碱类和酚类化合物;获得了棒毛络新妇水分、灰分和浸出物的数据。该研究所建立的鉴别方法操作简便,结果准确,重现性好,比较全面的提供了棒毛络新妇的生药学资料,为其进一步开发利用提供参考依据。

关键词：棒毛络新妇性状鉴别显微鉴别薄层色谱理化鉴别

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