检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2007年第8期37卷 645-649页

作者：傅志强蔡学忠刘金明石耀军李浩吴祥甫蔡幼民林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232 中国科学院上海生化与细胞生物研究所上海200032

为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行... 详细信息

为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行日本血吸虫病免疫保护试验,计算减虫效果,并用ELISA法检测小鼠免疫前后的特异性抗体水平。结果显示,经3轮富集筛选后,免疫印迹法鉴定到4个阳性克隆,它们对SSj14单抗的抑制率分别为20.0%、40.8%、58.6%、61.5%,并分别在小鼠中诱导了7.42%、9.43%、11.74%、22.30%的减虫率。用噬菌体克隆免疫的小鼠均产生了较高水平的特异性抗体。结果表明,筛选到的阳性噬菌体克隆和SSj14单抗有较高的亲和力,并诱导了抗小鼠日本血吸虫的部分保护效果。

关键词：日本血吸虫噬菌体展示 SSj14单抗模拟表位

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利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位

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中国人兽共患病杂志 2003年第1期19卷 60-63页

作者：张扬焦新安刘文博潘志明高崧张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的　用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果　经过三轮的亲和筛... 详细信息

目的　用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果　经过三轮的亲和筛选 ,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm6 2和 gm6 8,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争ELISA实验表明 ,10 10转导单位噬菌体 gm6 8对肠炎沙门氏菌与 3- 4 7-O结合的抑制率达到 6 5 % ,而噬菌体 gm6 2的抑制率仅为 2 0 % ,且 gm6 8可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体 ,而gm6 2则不能。结论　实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。

关键词：沙门氏菌 O9抗原模拟表位噬菌体展示肽库

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志贺毒素B亚单位及其模拟表位的制备和免疫保护效应

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军事医学科学院院刊 2008年第6期32卷 537-540页

作者：包士中史晶蔡昆侯晓军高翔刘昊荫俊王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对重组表达的StxB和预测的模拟表位肽进行免疫保护效应评价。方法:用分子生物学方法构建基因工程菌,IPTG诱导表达重组StxB,经复性后进行离子交换层析纯化。同时采用生物信息学手段对StxB的表位相关参数进行分析,预测StxB可能的抗... 详细信息

目的:对重组表达的StxB和预测的模拟表位肽进行免疫保护效应评价。方法:用分子生物学方法构建基因工程菌,IPTG诱导表达重组StxB,经复性后进行离子交换层析纯化。同时采用生物信息学手段对StxB的表位相关参数进行分析,预测StxB可能的抗原表位。以纯化的StxB和合成的模拟表位肽免疫小鼠后攻毒,评价StxB及其模拟表位肽的免疫保护效应。结果:表达并制备了90%以上纯度重组StxB;发现p14和p17多肽易形成转角和无规卷曲的柔性区段,可及性、极性和亲水性较强,是可能的抗原表位。免疫保护试验显示,经重组StxB和合成多肽免疫的小鼠发病延迟,症状减轻,存活率显著提高。结论:重组StxB和预测的模拟表位肽具有良好的免疫保护效果,为亚单位疫苗及其作用机制的研究奠定了基础。

关键词：志贺毒素B亚单位模拟表位免疫保护效应

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镰刀菌细胞壁蛋白抗原模拟表位的筛选和鉴定

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基因组学与应用生物学 2016年第2期35卷 235-240页

作者：刘锦龙胡祖权李和平廖玉才包头医学院基础医学与法医学院包头014040 贵州医科大学生物与工程学院贵阳550004 华中农业大学生命科学技术学院武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院武汉430070

镰刀菌不仅能侵染小麦、大麦、玉米等粮食作物,造成作物产量严重降低,谷物中存留的镰刀菌毒素还能引发人、畜中毒,严重威胁人、畜健康。本研究以镰刀菌细胞壁蛋白特异单链抗体CWP2为靶标,淘选噬菌体随机12肽库,筛选获得两种与抗体CWP2... 详细信息

镰刀菌不仅能侵染小麦、大麦、玉米等粮食作物,造成作物产量严重降低,谷物中存留的镰刀菌毒素还能引发人、畜中毒,严重威胁人、畜健康。本研究以镰刀菌细胞壁蛋白特异单链抗体CWP2为靶标,淘选噬菌体随机12肽库,筛选获得两种与抗体CWP2特异结合的短肽,多肽1(YLNPPCDLYACA)和多肽2(YQSVFFTDPHEF)。竞争性酶联免疫吸附实验证实,多肽1更好的模拟了镰刀菌细胞壁蛋白的抗原表位。这是首次对镰刀菌细胞壁蛋白模拟肽的报道,为探寻CWP2所结合抗原表位的编码基因,进一步阐明CWP2介导的抗镰刀菌分子机理提供了信息和材料。同时,获得的模拟肽可直接用于家畜疫苗以及作为粮食安全检测标准品。

关键词：镰刀菌细胞壁蛋白噬菌体展示模拟表位

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应用噬菌体随机肽库技术筛选SARS-CoV S蛋白模拟表位

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免疫学杂志 2005年第6期21卷 442-444,452页

作者：张小萍王靖雪魏静万瑛吴玉章第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038

目的筛选SARS病毒(Severe acute respiratory syndrome associated coronavirus,SARS-CoV)结构蛋白D(Spike)特异性的模拟表位,为抗SARS疫苗研究提供基础.方法以抗SARS病毒D蛋白的单克隆抗体为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽... 详细信息

目的筛选SARS病毒(Severe acute respiratory syndrome associated coronavirus,SARS-CoV)结构蛋白D(Spike)特异性的模拟表位,为抗SARS疫苗研究提供基础.方法以抗SARS病毒D蛋白的单克隆抗体为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,随机挑选30个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附(ELISA)法和交叉反应实验鉴定阳性克隆,再进行DNA序列分析和竞争抑制结合实验,以确定SARS病毒D蛋白的模拟表位.结果经噬菌体富集后,从随机挑选的30个克隆中得到了29个编码8种12肽的阳性克隆,8条肽与D蛋白的320～350氨基酸序列有较高同源性,确定Y/F、W、E和K氨基酸残基为模拟表位的骨架结构.结论用噬菌体12肽库成功筛选到了SARS病毒D蛋白的模拟表位,为基于D蛋白的肽疫苗研制提供了基础.

关键词： SARS病毒 D蛋白模拟表位噬菌体肽库

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丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽刺激小鼠脾淋巴细胞增殖

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第9期26卷 856-857页

作者：迟淑萍汪辰戚扬由莉越孙杰尹笛李瑞生程云解放军第302医院传染病研究所北京100039

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)模拟表位7肽在体外刺激小鼠经脾内直接免疫后脾淋巴细胞增殖的变化。方法:选用经7肽脾内直接注射免疫的小鼠,分离脾细胞后,脾细胞再经7肽刺激,应用单溶液细胞增殖检测方法,体外检测7肽在不同浓... 详细信息

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)模拟表位7肽在体外刺激小鼠经脾内直接免疫后脾淋巴细胞增殖的变化。方法:选用经7肽脾内直接注射免疫的小鼠,分离脾细胞后,脾细胞再经7肽刺激,应用单溶液细胞增殖检测方法,体外检测7肽在不同浓度和不同培养时间点,对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:7肽刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后,实验组的脾淋巴细胞增殖反应与对照组相比有明显促进作用。结论:HCV高变区1模拟表位7肽在体外对脾内直接免疫小鼠脾淋巴细胞具有一定的促增殖作用。

关键词：模拟表位脾淋巴细胞小鼠增殖

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从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶模拟表位

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中国预防兽医学报 2004年第6期26卷 428-431页

作者：孙林焦新安刘文博潘志明黄金林彭大新刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学畜牧兽医学院江苏扬州225009

以生物素标记的抗新城疫病毒(NDV)血凝素＿神经氨酸酶(HN)的单抗M22为分子探针,从噬菌体随机12肽库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位。经过三轮亲和筛选,得到了四个能与单抗M22反应的阳性噬菌体单克隆,分别为CLONE11、17、18、20... 详细信息

以生物素标记的抗新城疫病毒(NDV)血凝素＿神经氨酸酶(HN)的单抗M22为分子探针,从噬菌体随机12肽库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位。经过三轮亲和筛选,得到了四个能与单抗M22反应的阳性噬菌体单克隆,分别为CLONE11、17、18、20。竞争ELISA试验表明,CLONE20与M22的结合能被新城疫弱毒株LaSota特异性抑制,抑制率达67 3%。经测序,获得CLONE20的插入序列为SWFHHHQARAPM,同源性分析认为WF和QAR在HN的抗原性中起重要作用。动物试验结果表明,CLONE20能诱导SPF鸡产生一定水平的具有血凝抑制活性的特异抗体。以上结果显示SWFHHHQARAPM是具有免疫原性的HN抗原模拟表位。

关键词：新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶单克隆抗体亲和筛选模拟表位

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噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位

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第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1332-1334页

作者：杨清浩王祥卫金燕张立新第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 北京军事医学科学院附属307医院肿瘤分子室北京100850

目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得... 详细信息

目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。

关键词： MCU1抗原模拟表位噬菌体随机7肽库抗体

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应用噬菌体随机十二肽库筛选猪传染性胸膜肺炎菌体抗原模拟表位

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华中农业大学学报 2006年第4期25卷 347-350页

作者：赵娜王安华何玉龙聂芬袁芳艳龙良启刘平华中农业大学水产学院武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 武汉成长动物营养研究所武汉430070

利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改... 详细信息

利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从5.76×10-5增加到了1.69×10-2,P/N值逐步提高;随机挑取10个噬菌斑进行扩增,用ELISA检测其免疫活性,结果有6个阳性克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对筛选到的6个阳性克隆提取ssDNA进行测序,并分析其氨基酸序列,其中5个克隆所递呈的序列一致,用Blastp软件进行分析,2种类型的氨基酸序列之间无同源性,且未发现同源性50%以上的序列,提示该短肽可能模拟了猪传染性胸膜肺炎菌体的特异的抗原表位。

关键词：噬菌体随机肽库模拟表位猪胸膜肺炎放线杆菌

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利用噬菌体肽库筛选脂多糖的模拟表位

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军事医学科学院院刊 2003年第4期27卷 271-273页

作者：董洁高亚萍张杰柳川薛沿宁军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的 :利用噬菌体肽库获得脂多糖的模拟表位。方法 :用脂多糖免疫大耳白兔获得抗血清 ,从中纯化抗脂多糖的多克隆抗体。以纯化的抗体IgG为筛选靶分子 ,对噬菌体随机十二肽库进行亲和筛选。经 3轮筛选后 ,随机挑取 2 5个克隆测序 ,并进... 详细信息

目的 :利用噬菌体肽库获得脂多糖的模拟表位。方法 :用脂多糖免疫大耳白兔获得抗血清 ,从中纯化抗脂多糖的多克隆抗体。以纯化的抗体IgG为筛选靶分子 ,对噬菌体随机十二肽库进行亲和筛选。经 3轮筛选后 ,随机挑取 2 5个克隆测序 ,并进行噬菌体ELISA结合实验及脂多糖竞争抑制实验 ,以确定阳性克隆。结果 :获得 12种序列 ,ELISA实验结果显示其中 6个为阳性克隆 ,且经脂多糖竞争抑制实验进一步证实。结论 :获得了 6个脂多糖的模拟表位 ,为脂多糖抗原表位的研究及疫苗研究提供了线索。

关键词：脂多糖噬菌体随机肽库模拟表位筛选

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