检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2018年第6期29卷 796-801页

作者：陆泓雨刘波秦超勇张彦北京市第十二中学北京100071 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071

目的:建立一套简便、对RNA样本起始量要求很低的RNA测序建库方法,在此基础上引入分子条形码技术,从而使RNA-seq的数据所反映的表达丰度更加客观真实。方法:将微量RNA用RNaseⅢ片段化后,利用反转录酶的反转录活性、模板转换活性以及DNA... 详细信息

目的:建立一套简便、对RNA样本起始量要求很低的RNA测序建库方法,在此基础上引入分子条形码技术,从而使RNA-seq的数据所反映的表达丰度更加客观真实。方法:将微量RNA用RNaseⅢ片段化后,利用反转录酶的反转录活性、模板转换活性以及DNA依赖的DNA聚合酶活性,一步实现从RNA到cDNA文库的反应,再通过PCR扩增获得适合测序仪的测序文库,通过测序分析验证建库效果,最后采用荧光定量PCR法测定部分基因的表达量以验证测序结果,同时比较分子条形码的引入对表达量分析的影响。结果:通过电泳观察和测序结果分析,选择Clontech公司的SMARTscribe,反转录和模板转换反应温度设为50℃,反转录完成后经AMPure Beads纯化再经PCR扩增得到测序文库,电泳检测文库DNA长度和浓度符合测序要求。比较发现,用分子条形码建库的测序结果能够更加真实地反应基因的实际表达量。结论:初步建立了针对10 ng RNA样品的RNA-seq建库技术,并在建库方案中加入分子条形码使其测序结果更加真实地反映基因表达量。该技术未来可适用于微量RNA样品的高通量测序。

关键词：微量RNA测序引物设计一步法反转录模板转换分子条形码测序参数优化

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用于mRNA 5’分析的模板转换寡核苷酸(TSO)

用于mRNA 5’分析的模板转换寡核苷酸(TSO)

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作者：丹尼斯·普罗森瑞瑟雷·阿格巴亚尼·阿科布美国新泽西州

本文的公开内容包括用于基于5’的基因表达谱分析和用于使用随机引发和延伸(RPE)的全转录组分析(WTA)的系统、方法、组合物和试剂盒。在一些实施方案中，提供了模板转换寡核苷酸(TSO)和使用其减少文库制备过程中不期望的延伸产物的产生... 详细信息

标准号: CN118176306A

本文的公开内容包括用于基于5’的基因表达谱分析和用于使用随机引发和延伸(RPE)的全转录组分析(WTA)的系统、方法、组合物和试剂盒。在一些实施方案中，提供了模板转换寡核苷酸(TSO)和使用其减少文库制备过程中不期望的延伸产物的产生的方法。在一些实施方案中，TSO包含阻断序列。在一些实施方案中，阻断序列包含阻断核苷酸。在一些实施方案中还提供了免疫组库(immune repertoire)谱分析方法。

关键词：基因表达谱分析转录组分析寡核苷酸免疫组库模板转换延伸产物制备过程核苷酸谱分析试剂盒文库期望延伸

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用于使用模板转换反应进行cDNA合成和单细胞转录组概况分析的方法和组合物

用于使用模板转换反应进行cDNA合成和单细胞转录组概况分析的方法...

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作者：里卡德·桑德伯格西莫内·佩斯里欧麦德·R·法瑞达尼美国纽约

本申请披露了用于以改善的逆转录、模板转换以及预扩增合成cDNA以增加由个体细胞产生的cDNA文库的收率和平均长度的方法。这些新方法包括将TSO 3'端的单个核苷酸残基换成锁核酸(INA)、使用甲基基团供体、和/或高于常规所用的MgCb浓... 详细信息

标准号: CN115558661A

本申请披露了用于以改善的逆转录、模板转换以及预扩增合成cDNA以增加由个体细胞产生的cDNA文库的收率和平均长度的方法。这些新方法包括将TSO 3'端的单个核苷酸残基换成锁核酸(INA)、使用甲基基团供体、和/或高于常规所用的MgCb浓度。结合这些差异的单细胞转录组分析具有全长覆盖度、改善的灵敏度和准确度，具有较少偏差并且更易进行成本有效的自动化。本发明还提供了在3'端包含锁核酸的cDNA分子、包含这些cDNA分子的组合物和cDNA文库，以及用于单细胞转录组概况分析的方法。

关键词：锁核酸核苷酸残基转录组分析准确度概况分析个体细胞甲基基团模板转换覆盖度灵敏度逆转录预扩增转录组供体收率自动化合成申请

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一种用于产品可靠性维修性保障性与性能一体化流程构建的模板转换方法

一种用于产品可靠性维修性保障性与性能一体化流程构建的模板转换...

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作者：冯强孙博曾声奎任羿郭健彬马纪明 100191 北京市海淀区学院路37号北航可靠性与系统工程学院

一种用于产品RMS与性能一体化流程构建的模板转换方法，步骤如下：1根据产品选择一体化流程模板，通过增删改工作，构成初始待优化一体化流程2利用流程有向图和设计结构矩阵双向转换关系，在确定工作项目间信息依赖关系基础上，构成初... 详细信息

标准号: CN102024203A

一种用于产品RMS与性能一体化流程构建的模板转换方法，步骤如下：1根据产品选择一体化流程模板，通过增删改工作，构成初始待优化一体化流程2利用流程有向图和设计结构矩阵双向转换关系，在确定工作项目间信息依赖关系基础上，构成初始设计结构矩阵N；3求解N对应的邻接矩阵A、可达矩阵R，以及R及其转秩矩阵R^T的乘积找出矩阵中耦合集。4采用分割、聚合及撕裂算法对耦合集内工作项目排序；5将耦合集视为一个工作项目与其他独立项目进行排序和分级，形成优化后设计结构矩阵；6利用流程有向图和设计结构矩阵的双向转换关系，将优化后设计结构矩阵转换为待定的RMS与性能一体化设计流程；7利用标准检查单对待定RMS与性能一体化流程进行检验，并形成供后续用的新一体化流程模板。

关键词：结构矩阵矩阵工作项目一体化耦合流程模板双向转换有向图排序优化一体化设计产品选择初始设计独立项目流程构建模板转换信息依赖分级撕裂算法聚合分割转换检验检查

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模板转换用于DNA合成的用途

模板转换用于DNA合成的用途

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作者： A.M.拉姆博维茨 S.莫尔 T.B.怀特 S.库尔斯坦美国得克萨斯州

描述了使用模板转换制备靶多核苷酸的DNA拷贝的方法。所述方法包括：将双链模板/引物底物（其由与互补寡核苷酸模板链结合的DNA引物寡核苷酸组成）与靶多核苷酸一起在反应介质中混合，并将合适量的非逆转录病毒逆转录酶加入反应介质中... 详细信息

标准号: CN104114702A

描述了使用模板转换制备靶多核苷酸的DNA拷贝的方法。所述方法包括：将双链模板/引物底物（其由与互补寡核苷酸模板链结合的DNA引物寡核苷酸组成）与靶多核苷酸一起在反应介质中混合，并将合适量的非逆转录病毒逆转录酶加入反应介质中，以使DNA引物寡核苷酸从它的3’末端延伸从而提供DNA拷贝多核苷酸。所述DNA拷贝多核苷酸包括使用靶多核苷酸作为模板合成的互补的靶DNA多核苷酸。还描述了向双链模板/引物底物添加核苷酸的方法。所述方法可以用于便利RNA和DNA序列的检测、PCR扩增、克隆和测定。

关键词：多核苷酸引物寡核苷酸拷贝底物双链逆转录病毒模板合成模板转换逆转录酶核苷酸链结合克隆检测延伸

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模板转换用于DNA合成的用途

模板转换用于DNA合成的用途

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作者： A.M.拉姆博维茨 S.莫尔 T.B.怀特 S.库尔斯坦美国得克萨斯州

标准号: CN104114702B

关键词：靶多核苷酸多核苷酸寡核苷酸双链模板引物寡核苷酸模板逆转录病毒底物添加模板合成模板转换末端延伸逆转录酶核苷酸靶DNA 底物制备克隆便利检测

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一种800型石英石板模板转换机构

一种800型石英石板模板转换机构

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作者：王俊东 528000 广东省佛山市南海区小塘五星工业区

本实用新型公开了一种800型石英石板模板转换机构，包括转换机构本体、玻璃模板、玻璃模板固定台、推板、石材板、推动机构、PVC模板和横移辊台，转换机构本体的一侧设有玻璃模板固定台，玻璃模板固定台的顶端设有玻璃模板，玻璃模板固... 详细信息

标准号: CN207736499U

本实用新型公开了一种800型石英石板模板转换机构，包括转换机构本体、玻璃模板、玻璃模板固定台、推板、石材板、推动机构、PVC模板和横移辊台，转换机构本体的一侧设有玻璃模板固定台，玻璃模板固定台的顶端设有玻璃模板，玻璃模板固定台的一侧设有横移辊台，横移辊台的顶端设有PVC模板，PVC模板的顶端设有石材板，石材板的顶端设有推板，推板的顶端设有推动机构，该石英石板模板转换机构结构简单，推板通过气缸升降，减速机带动板平移，速度快，采用变频调速，避免因冲击对板材造成破坏；自动化程度高，减少人工劳动强度；板材重约100kg，15件/小时，人工操作需两个人一起操作且劳动强度大。

关键词：玻璃模板固定台推板石材板辊台横移模板转换推动机构转换机构石英石板本实用新型变频调速机构结构气缸升降人工操作平移带动板减速机自动化

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一种用于模板转换层下口固定的配件

一种用于模板转换层下口固定的配件

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作者：吴明军王军辉连圳峰刘剑锋李亚基刘光辉 361000 福建省厦门市翔安区莲亭路819号101单元

本实用新型提供了一种用于模板转换层下口固定的配件，包括：第一竖直段、第二竖直段和伸缩段；所述第一竖直段和第二竖直段平行并且在第一竖直段的末端和第二竖直段的首端通过伸缩段连接；所述第一竖直段通过对拉螺栓与铝模板或木模板... 详细信息

标准号: CN215368698U

本实用新型提供了一种用于模板转换层下口固定的配件，包括：第一竖直段、第二竖直段和伸缩段；所述第一竖直段和第二竖直段平行并且在第一竖直段的末端和第二竖直段的首端通过伸缩段连接；所述第一竖直段通过对拉螺栓与铝模板或木模板的侧壁固定连接，第二竖直段通过预埋螺栓与墙体固定连接，所述伸缩段用于适配铝模板或木模板相对于墙体外凸的距离。上述的用于模板转换层下口固定的配件，能够适配铝模板或木模板相对于墙体外凸的各种距离。

关键词：竖直段铝模板木模板伸缩段墙体模板转换固定的适配外凸下口配件本实用新型对拉螺栓预埋螺栓侧壁首端平行

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一步逆转录模板转换PCR

一步逆转录模板转换PCR

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作者：城口克之日本埼玉县和光市广泽2番1号

本发明提供了用于更快、更容易，且具有高特异性地进行一步逆转录模板转换PCR的技术。本发明提供了使用经修饰的寡核苷酸引物扩增RNA的至少一部分区域的核酸扩增方法，所述核酸扩增方法的特征如下：核酸扩增反应包括逆转录步骤a)，其中... 详细信息

标准号: CN109328235A

本发明提供了用于更快、更容易，且具有高特异性地进行一步逆转录模板转换PCR的技术。本发明提供了使用经修饰的寡核苷酸引物扩增RNA的至少一部分区域的核酸扩增方法，所述核酸扩增方法的特征如下：核酸扩增反应包括逆转录步骤a)，其中RNA用作模板，模板转换步骤b)，其中将模板转换寡核苷酸加入到步骤a)中合成的cDNA中，和DNA扩增步骤c)，其中通过PCR进行DNA扩增，其中步骤b)中合成的模板转换cDNA用作模板；步骤a)至c)在同一反应体系中的单个阶段中进行；该经修饰的寡核苷酸在逆转录步骤a)中引物功能部分地封闭或完全地封闭，并在DNA扩增步骤c)中清除引物功能的封闭。

关键词：模板转换逆转录寡核苷酸核酸扩增引物修饰封闭合成寡核苷酸引物核酸扩增反应扩增

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用于经由模板转换机制的核酸文库制备的系统和方法

用于经由模板转换机制的核酸文库制备的系统和方法

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作者： M.拉尼克 P.麦克尤恩 E.范德瓦尔特 J.谢 R.瓦兹沃思 M.斯特赖敦美国马萨诸塞州

本公开内容提供了包含双链脱氧核糖核酸（dsDNA）序列的组合物，所述双链脱氧核糖核酸（dsDNA）序列从5'至3'包含序列，所述序列包含第一衔接子序列、模板序列和第二衔接子序列，其中所述第二衔接子序列包含模板转换寡核苷酸（... 详细信息

标准号: CN111727249A

本公开内容提供了包含双链脱氧核糖核酸（dsDNA）序列的组合物，所述双链脱氧核糖核酸（dsDNA）序列从5'至3'包含序列，所述序列包含第一衔接子序列、模板序列和第二衔接子序列，其中所述第二衔接子序列包含模板转换寡核苷酸（TSO）的杂交位点。本公开内容提供了使用模板转换机制制备本公开内容的组合物的方法，以将非模板碱基对添加到DNA分子的末端、使TSO与非模板碱基对杂交并然后延伸与TSO互补的序列以添加衔接子。

关键词：衔接子双链脱氧核糖核酸模板转换内容提供非模板碱基寡核苷酸模板序列杂交位点碱基与非制备杂交延伸

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