检索结果-内蒙古大学图书馆

您好，读者！请登录

内蒙古大学图书馆

首页
概况
党建
资源
服务
科研支持
- 论文收录引用证明
- 科技查新
知识产权
档案馆
帮助

咨询与建议

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

您的常用邮箱：*

您的手机号码：*

问题描述：

当前已输入0个字，您还可以输入200个字

全部搜索
期刊论文
图书
学位论文
标准
纸本馆藏
外文资源发现
数据库导航
超星发现

高级检索

时间限定

出版年份：

文献类型

图书期刊文献学位论文多媒体

馆藏选择

电子馆藏纸本馆藏

核心期刊

全部期刊 SCI 收录期刊 SSCI 收录期刊 EI 收录期刊 CSCD 收录期刊 CSSCI 收录期刊

语言

中文英文

文献类型

期刊文献图书学位论文标准纸本馆藏

帮助

文字说明：

T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

检索规则说明：

AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

分类表

所选分类

>> <<

限定检索结果

文献类型

57 篇 期刊文献
56 篇 学位论文
6 篇 会议

馆藏范围

119 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

64 篇 医学
- 52 篇 药学(可授医学、理...
- 34 篇 基础医学(可授医学...
- 4 篇 医学技术（可授医学...
- 3 篇 公共卫生与预防医...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 中西医结合
49 篇 理学
- 46 篇 生物学
- 2 篇 生态学
- 1 篇 物理学
- 1 篇 化学
- 1 篇 海洋科学
32 篇 农学
- 14 篇 作物学
- 10 篇 兽医学
- 5 篇 植物保护
- 2 篇 农业资源与环境
- 1 篇 水产
17 篇 工学
- 8 篇 轻工技术与工程
- 7 篇 生物工程
- 3 篇 化学工程与技术
- 2 篇 水利工程
- 1 篇 材料科学与工程（可...

主题

119 篇 毒素-抗毒素系统
16 篇 结核分枝杆菌
9 篇 持留菌
8 篇 环境胁迫
7 篇 生物被膜
6 篇 集胞藻
5 篇 生物膜
5 篇 mazef
4 篇 细胞毒性
4 篇 高致病性
4 篇 金黄色葡萄球菌
4 篇 应激反应
4 篇 2型猪链球菌
4 篇 毒力岛
4 篇 鱼腥藻pcc7120
4 篇 基因敲除
3 篇 vapbc家族
3 篇 pcc6803染色体
3 篇 asr0757/alr0758
3 篇 铜绿假单胞菌

机构

9 篇 江苏大学
8 篇 石河子大学
7 篇 北京师范大学
5 篇 中南民族大学
5 篇 浙江大学
5 篇 华中农业大学
4 篇 中国科学院大学
4 篇 第三军医大学
4 篇 厦门大学
3 篇 南京农业大学
3 篇 浙江工商大学
3 篇 江南大学
3 篇 中国科学技术大学
2 篇 西南大学
2 篇 安徽大学
2 篇 北京协和医学院
2 篇 中国科学院热带海...
2 篇 吉林大学
2 篇 中国农业大学
2 篇 首都医科大学附属...

作者

7 篇 袁俐
5 篇 张俊杰
5 篇 yuan li
4 篇 赵继利
4 篇 申爱平
4 篇 刘微
3 篇 王晓雪
3 篇 宋毅怡
3 篇 谢婉莹
3 篇 曹帅丽
3 篇 章苗苗
3 篇 屈艳琳
3 篇 liu wei
3 篇 宁德刚
3 篇 赵卫飞
3 篇 王敏
2 篇 陈瑜
2 篇 侯博
2 篇 孙亮华
2 篇 颜晓梅

语言

119 篇 中文

检索条件"主题词=毒素-抗毒素系统"

共 119 条记录，以下是41-50 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

噬菌体YopM蛋白激活细菌毒素-抗毒素系统MazEF的机制研究

噬菌体YopM蛋白激活细菌毒素-抗毒素系统MazEF的机制研究

引用

作者：苏香华中农业大学

学位级别：硕士

群体感应是细菌中普遍存在的一种信号交流机制。近年来,在芽胞杆菌噬菌体中发现存在类似群体感应系统的信号交流方式调控温和性噬菌体生命周期裂解到溶原过程的转换,此类群体感应系统被称为arbitrium信号交流系统。该系统主要包括两个成... 详细信息

群体感应是细菌中普遍存在的一种信号交流机制。近年来,在芽胞杆菌噬菌体中发现存在类似群体感应系统的信号交流方式调控温和性噬菌体生命周期裂解到溶原过程的转换,此类群体感应系统被称为arbitrium信号交流系统。该系统主要包括两个成分:信号短肽Aim P和信号短肽受体Aim R。我们课题组通过转录组分析发现SPbeta噬菌体感染枯草芽胞杆菌后,产生的信号短肽能使下游区域的yop M基因表达水平上调,过表达yop M基因抑制噬菌斑的形成。进一步通过质谱筛选噬菌体YopM可能的相互作用蛋白包括宿主细菌的抗毒素Maz E和毒素Maz F。噬菌体编码的YopM蛋白如何与宿主菌的毒素-抗毒素系统发生相互作用?我的研究工作围绕这个科学问题展开,取得以下四方面结果:(1)获得纯化的噬菌体YopM蛋白(分别来源于SPbeta家族的SPbeta噬菌体和phi3T噬菌体)、枯草芽胞杆菌的毒素Maz F、抗毒素Maz E及毒素-抗毒素复合物Maz EF,通过pull-down实验与共表达实验,证明了噬菌体YopM蛋白与抗毒素Maz E存在相互作用。(2)通过分子筛实验证明当噬菌体YopM蛋白与宿主菌Maz F-Maz E复合物孵育时,能结合抗毒素Maz E,从而释放毒素Maz F。(3)建立了体外Maz F核酸酶的反应体系,Maz F蛋白可以特异性切割底物RNA,当Maz EF复合物与YopM蛋白孵育后,随着YopM蛋白量的增加,可以观察到底物被切割的现象,证明了噬菌体YopM蛋白与宿主抗毒素蛋白Maz E结合后,激活了毒素Maz F的核酸酶活性。(4)抗毒素Maz E进行丙氨酸置换突变,发现抗毒素Maz E的第61-65位氨基酸突变后,不能与YopM结合,而这个区域也是抗毒素Maz E与毒素Maz F的区域,说明噬菌体通过YopM蛋白是通过竞争性结合的方式与细菌抗毒素Maz E相互作用,导致毒素Maz F的释放和活化。综上,本研究对噬菌体YopM蛋白与宿主芽胞杆菌毒素-抗毒素复合物Maz F-Maz E的作用方式进行探索,首次证明噬菌体蛋白可以破坏细菌的毒素-抗毒素复合物,揭示了噬菌体激活宿主毒素的分子机制,为理解噬菌体感染过程奠定基础。

关键词：噬菌体 arbitrium系统溶原裂解决定毒素-抗毒素系统

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

铜绿假单胞菌WK172中两对毒素-抗毒素系统HigB/HigA的功能研究

铜绿假单胞菌WK172中两对毒素-抗毒素系统HigB/HigA的功能研究

引用

作者：倪沐阳长江大学

学位级别：硕士

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)广泛存在于自然环境,如水、土壤及空气等,是院内感染的主要条件致病菌,属于革兰氏阴性杆菌。铜绿假单胞菌目前被认为是一个致命的超级细菌,它不仅可以感染人体,还可以感染所有非哺乳生物,如植物、... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)广泛存在于自然环境,如水、土壤及空气等,是院内感染的主要条件致病菌,属于革兰氏阴性杆菌。铜绿假单胞菌目前被认为是一个致命的超级细菌,它不仅可以感染人体,还可以感染所有非哺乳生物,如植物、鱼类、线虫、昆虫或变形虫。毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin system,TA)几乎存在于所有的细菌和古细菌基因组中,通常由两个共表达的基因组成,一个编码毒素,一个编码抗毒素。本论文旨在通过实验鉴定铜绿假单胞菌WK172上两对毒素-抗毒素系统HigB/HigA,深入研究其在胞内的生理功能,为防治铜绿假单胞菌的危害提供理论基础,主要工作如下:从临床分离的铜绿假单胞菌WK172先进行生物信息学分析,预测这两对毒素-抗毒素系统是HigB/HigA家族,属于II型。实验证明了这两对符合II型毒素-抗毒素系统的特性:在大肠杆菌宿主中,过表达毒素HigB1,HigB2分别能杀死细菌,抑制细菌生长。而HigA作为抗毒素,与毒素共同表达时能够拮抗毒素HigB的毒性。HigB均位于HigA的上游,HigB2/HigA2两者的编码区存在8个碱基的重叠。通过引物延伸实验发现HigB2/HigA2是共转录的,并且两个基因均编码蛋白。通过蛋白pull-down实验和β-半乳糖苷酶实验发现毒素HigB直接与HigA通过蛋白-蛋白相互作用来拮抗毒素的毒性,并且对自身启动子进行反馈调节,以上实验均验证了生物信息学的预测,这两对都属于II型毒素-抗毒素系统。重要的是,本研究通过质粒稳定性实验,气-液生物被膜实验和噬菌体侵染实验等发现,该系统中抗毒素HigA2可以增加质粒的稳定性,促进气-液生物被膜的形成和抑制噬菌体感染的功能。这些实验结果有助于进一步了解铜绿假单胞菌的致病机理和毒素-抗毒素系统HigB/HigA的调控功能。

关键词：铜绿假单胞菌毒素-抗毒素系统 HigB/HigA 生物被膜抗噬菌体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

嗜盐四联球菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统DinJ-YafQ的鉴定与功能研究

嗜盐四联球菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统DinJ-YafQ的鉴定与功能研究

引用

作者：骆晓彤华南理工大学

学位级别：硕士

嗜盐四联球菌是中度嗜盐乳酸菌,因具有良好的盐耐受能力和发酵特性,被广泛应用于传统发酵食品。在工业应用发酵过程中,嗜盐四联球菌长期处于复杂的环境,如高盐浓度,低p H,营养缺乏,高温,氧化应激等,这会影响微生物的生理代谢和存活。毒... 详细信息

嗜盐四联球菌是中度嗜盐乳酸菌,因具有良好的盐耐受能力和发酵特性,被广泛应用于传统发酵食品。在工业应用发酵过程中,嗜盐四联球菌长期处于复杂的环境,如高盐浓度,低p H,营养缺乏,高温,氧化应激等,这会影响微生物的生理代谢和存活。毒素-抗毒素系统广泛分布于细菌基因组中,可以通过调控基因表达来调节细胞生理行为,对细胞应对胁迫条件发挥重要作用。与其他细菌相似,嗜盐四联球菌基因组中也含有多对毒素-抗毒素系统,但其特性与生理功能从未被研究鉴定。本研究通过生物信息分析嗜盐四联球菌CICC10469中含有16对假定毒素-抗毒素系统,并对TEH＿RS02450-TEH＿RS02455和TEH＿RS06855-TEH＿RS06860进行深入研究,以期探究该菌株II型毒素-抗毒素系统的特性及其对生理生化等过程的影响。其中,TEH＿RS02450与TEH＿RS02455共转录,命名为din J-yaf Q。毒素Yaf Q过量表达后发挥毒性作用使细胞生长受到抑制,当抗毒素Din J与其共表达时,这两个蛋白能在胞内发生相互作用并中和Yaf Q毒性使细胞恢复正常生长。gfp报告基因系统和凝胶迁移实验证明,抗毒素Din J与Din J-Yaf Q复合物能够直接结合在自身启动子上抑制din J-yaf Q转录表达,且Yaf Q与Din J结合形成复合体后能增强转录抑制效果。综合以上分析结果,嗜盐四联球菌Din J-Yaf Q被证实是一对符合典型特征且具有活性的II型TA系统。毒素蛋白Yaf Q具有核糖核酸酶活性,能够切割从嗜盐四联球菌中提取的RNA,而与抗毒素Din J结合后酶活性被抑制,预示着嗜盐四联球菌在响应压力过程,一旦Yaf Q被激活后可以发挥RNase活性,从而调控基因的表达谱。din J-yaf Q的存在明显提高质粒稳定性并且参与细胞应激反应,将嗜盐四联球菌置于发酵过程常见的压力环境中,din J-yaf Q操纵子的表达水平出现不同程度上的变化,特别是盐胁迫和酸胁迫处理后分别上调约10倍和5倍,表明该系统对嗜盐四联球菌响应环境压力具有一定作用。TEH＿RS06855-TEH＿RS06860预测编码第二对DinJ-YafQ系统,进一步基因结构分析后发现毒素已缺失,只存在抗毒素Din J。本研究发现抗毒素Din J也能与非配对的毒素蛋白Yaf Q产生相互作用及中和毒素Yaf Q的毒性,并且能够特异性结合在din J-yaf Q启动子上发挥转录调控作用;本文首次证实DinJ-YafQ家族中的不同成员间能发生相互作用与交叉调控作用。而抗毒素蛋白Din J与Din J序列相似性很低、亲缘性疏远,可能来源于不同的祖先并通过水平基因转移迁入嗜盐四联球菌基因组中。总而言之,对DinJ-YafQ系统的鉴定与功能分析有助于研究毒素-抗毒素系统在嗜盐四联球菌中的特性与关键作用,为进一步研究奠定基础。

关键词：嗜盐四联球菌毒素-抗毒素系统 DinJ-YafQ 相互作用应激反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肺炎克雷伯菌毒性质粒上潜在的Ⅱ型毒素-抗毒素系统KipTA的鉴定及功能研究

肺炎克雷伯菌毒性质粒上潜在的Ⅱ型毒素-抗毒素系统KipTA的鉴定及...

引用

作者：曾童南华大学

学位级别：硕士

目的:对肺炎克雷伯菌毒性质粒p KP20194a-p1上II型TA（Toxin–Antitoxin,TA）系统Kip TA进行鉴定,了解Kip TA在临床肺炎克雷伯菌中的分布情况,并探讨Kip TA的生物学功能。方法:1.对13株已测序的碳青霉烯耐药的高毒力肺炎克雷伯菌（Carba... 详细信息

目的:对肺炎克雷伯菌毒性质粒p KP20194a-p1上II型TA（Toxin–Antitoxin,TA）系统Kip TA进行鉴定,了解Kip TA在临床肺炎克雷伯菌中的分布情况,并探讨Kip TA的生物学功能。方法:1.对13株已测序的碳青霉烯耐药的高毒力肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae,CR-hv Kp）毒性质粒上的一对假定蛋白（暂命名为Kip T与Kip A）进行生物信息学结构分析。2.构建Kip T表达载体,诱导Kip T在异位菌（*** DH5α）及本体菌（NUTH-K2044）中表达,光密度(OD600)测定细菌生长情况,联合大蜡螟细菌感染实验监测Kip T对细菌生长的影响。3.构建Kip A表达载体,利用光密度(OD600)监测Kip A与Kip T共表达时细菌生长情况,探究Kip A的抗毒素作用。***检测临床分离的肺炎克雷伯菌中Kip TA的分布。5.致死剂量环丙沙星筛选持留菌,通过琼脂平板菌落克隆的形成计数持留菌的形成量。6.结晶紫半定量法测定生物膜的形成。7.多重PCR检测临床分离的肺炎克雷伯菌中19种毒力基因携带情况,比较Kip TA与毒力基因检出率的关系。结果:1.生物信息学分析发现Kip T和Kip A共用4个碱基,Kip A位于上游,以强启动子ATG启动,片段大小为444 bp,编码147个氨基酸;Kip T位于下游,以弱启动子GTG启动,片段大小为471 bp,编码156个氨基酸。Kip T与具有RES结构域毒素蛋白具有高度同源的R、E、S残基。2.成功构建Kip T原核表达载体,Kip T表达时能抑制细菌生长,大蜡螟毒性实验显示Kip T表达时可抑制NUTH-K2044在大蜡螟体内增殖(P（27）0.05)。3.成功构建Kip A原核表达载体,Kip A表达时可逆转Kip T对细菌的毒性作用(P（27）0.05)。*** TA在临床肺炎克雷伯菌中的检出率高达49.38%。5.相比于未诱导组,Kip T诱导表达后,持留菌形成概率增加了86.62%（*** MG1655）差异有统计学意义(P（27）0.05)。*** T的表达使得大肠杆菌和肺炎克雷伯菌生物膜形成的量分别增加了40.00%和62.87%,差异具有统计学意义(P（27）0.05)。7.肺炎克雷伯菌中17种毒力基因（iut A、rmp A/rmp A2、iro N、uge、ycf M、wab G、kpn、all S、ent B、wca G、mrk D、irp-2、aerobactin、irp-1、ybt S、ure A）检出率与Kip TA的检出率呈正相关(P（27）0.05);Kip TA阳性组中hv Kp的检出率为86.08%,高于Kip TA阴性组（32.92%）(P（27）0.05); 结论:*** TA是肺炎克雷伯菌毒性质粒上新发现的一对II型TA系统。*** TA在临床肺炎克雷伯菌中分布广泛。*** TA参与持留菌和生物被膜的形成,且与肺炎克雷伯菌毒力基因存在相关。

关键词：肺炎克雷伯菌毒素-抗毒素系统持留菌生物膜毒力基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

集胞藻PCC 6803中VapBC11毒素-抗毒素系统毒素活性调控的研究

集胞藻PCC 6803中VapBC11毒素-抗毒素系统毒素活性调控的研究

引用

作者：费倩中国科学院大学

学位级别：硕士

Ⅱ型毒素-抗毒素(toxin-antitoxin，TA)系统是细菌重要的生长调控因子，对环境胁迫条件下细菌的生存具有重要的作用。TA系统毒素具有不同的生化活性，通过作用于一些重要细胞过程中的靶点，调控细胞生长，使细菌适应环境胁迫。Ⅱ型TA系... 详细信息

Ⅱ型毒素-抗毒素(toxin-antitoxin，TA)系统是细菌重要的生长调控因子，对环境胁迫条件下细菌的生存具有重要的作用。TA系统毒素具有不同的生化活性，通过作用于一些重要细胞过程中的靶点，调控细胞生长，使细菌适应环境胁迫。Ⅱ型TA系统的抗毒素是不稳定的蛋白，被有些依赖ATP的蛋白酶降解，通过与毒素相互作用形成毒素-抗毒素复合体，屏蔽毒素活性位点或诱导毒素构象变化抑制毒素活性。抗毒素还能作为转录调控因子，通过结合于TA基因启动子的调控序列，反馈抑制TA系统基因的转录，调控毒素和抗毒素的表达水平。因此，Ⅱ型TA系统的抗毒素通过依赖ATP的蛋白酶，在转录水平和蛋白水平上严谨调控毒素的活性。具有独特环境适应能力的蓝藻具有大量的、多个不同家族的Ⅱ型TA系统。但目前对这些保守的TA系统的活性调控及其生理功能所知甚少。模式蓝藻Synechocystis PCC6803染色体上的vapBC11(slr1209/slr1210)操纵子编码VapBC11TA系统。其中，VapB11为抗毒素，VapC11为毒素。本文对该TA系统毒素活性的调控进行了研究。\n 研究内容和结果包括:\n 第一，VapBC11系统毒素活性在蛋白水平上的调控。利用酵母双杂交技术、亲和捕捉技术结合质谱分析技术，分析了抗毒素VapB11与毒素VapC11之间的相互作用。结果显示，VapB11和VapC11相互作用，在细胞内形成以VapB118-VapC118为主的TA复合体。此外，VapB11的N-或C-末端缺失的突变蛋白(VapB11△N1-13aa，VapB11△N1-24aa，VapB11△C77-109aa，VapB11△C65-109aa)都不能与VapC11相互作用。\n 第二，VapBC11系统毒素活性在转录水平上的调控。利用lacZ融合转录技术分析了编码VapBC11的操纵子vapBC11启动子活性以及系统组分对vapBC11启动子的转录调控作用。结果显示，vapBC11操纵子有两个转录活性不同的启动子:一个是具有中等转录活性的操纵子启动子PvapBC11，另一个是具有高转录活性的vapC11特异的启动子PvapC11。VapBC11系统组分对这两个启动子均无反馈调控作用。\n 第三，集胞藻蛋白酶对抗毒素VapB11水平的调控。利用蛋白质免疫印迹(Western blot)技术分析选择性表达VapBC11和集胞藻蛋白酶Lons和ClpXP2s的大肠杆菌细胞、以及胁迫诱导集胞藻细胞中抗毒素VapB11的水平变化。分析结果显示，在大肠杆菌选择性表达细胞中，VapB11不能被蛋白酶Lons和ClpXP2s降解;在高温胁迫和蛋白合成抑制的集胞藻细胞中，VapB11也能维持相对稳定水平。\n 以上研究结果得到如下结论:\n VapBC11TA系统具有独特的毒素活性调控模式。除抗毒素在蛋白水平上调控毒素活性外，可能还有更重要的调控因子，如未知的转录调控因子和小RNA，分别在转录水平上和转录后水平上调控毒素活性。

关键词：集胞藻毒素-抗毒素系统毒素活性调控机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Synechocystis PCC 6803细胞中双元系统组分及毒素—抗毒素系统组分与其他蛋白之间的相互作用

Synechocystis PCC 6803细胞中双元系统组分及毒素—抗毒素系统组...

引用

作者：孙瑞江苏大学

学位级别：硕士

双元系统(two-component signaling system, TCS)和Ⅱ型毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin system, TAS)是细菌适应特异性环境胁迫的重要调控系统,广泛存在于各种细菌中。典型的TCS是由组氨酸激酶(histidine kinase, HK)和反应调控因子(r... 详细信息

双元系统(two-component signaling system, TCS)和Ⅱ型毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin system, TAS)是细菌适应特异性环境胁迫的重要调控系统,广泛存在于各种细菌中。典型的TCS是由组氨酸激酶(histidine kinase, HK)和反应调控因子(response regulator, RR)组成。当HK感应到特异性的环境胁迫时,其保守的组氨酸残基磷酸化,并将磷酸基团传递到下游的反应调控因子保守的天冬氨酸残基。激活的反应调控因子调控与细胞适应特异环境胁迫相关的基因表达,表达产物通过调控细胞的代谢使细菌适应特异性环境胁迫。Ⅱ型TA系统通常由稳定的毒素蛋白和不稳定的抗毒素蛋白构成。毒素通过作用于细胞重要的过程而调控细胞的生长,使细菌适应特异的环境胁迫。毒素的活性是由抗毒素在转录水平和蛋白水平上的调控决定的。具有独特环境适应能力并由此获得生态竞争优势的蓝藻中存在大量TCS和TAS。模式蓝藻Synechocystis PCC6803染色体上有44个组氨酸激酶基因、42个反应调控因子基因以及至少34个属5个家族的TAS。除部分TCS的构成和生理功能被阐明外,多数TCS的组成及功能还不清楚。并且,Synechocystis PCC 6803中一些TAS具有非典型的活性调控模式,推测可能存在其他非TAS蛋白参与其活性调控。蛋白质间的相互作用是细胞完成信号转导、蛋白活性调控和复合体形成的重要过程。为阐明Synechocystis PCC 6803中TCS组分构成、TAS活性的调控,本文根据组学水平上蛋白相互作用的分析结果,研究TCS组分之间以及TAS组分与其他蛋白之间的相互作用。本文主要内容包括：(1)酵母双杂交系统表达质粒的构建。PCR扩增可能存在相互作用的13对TCS组分、13个TAS组分与15个非TAS组分的基因。将扩增产物克隆于酵母双杂交系统的表达质粒中,构建相应的酵母表达重组质粒。(2)利用酵母双杂交技术分析TCS组分之间及TAS组分与其他蛋白之间的相互作用。将构建的酵母双杂交系统表达质粒共转化酵母细胞,构建酵母双杂交的重组菌株。根据重组菌株在不同的选择性培养基中的表型特征,确定TCS组分之间,以及TAS毒素或抗毒素与其他细胞蛋白之间的相互作用。(3)相互作用的TCS组分基因缺失突变株的构建与表型分析。根据酵母双杂交技术的试验结果,选择一对相互作用的TCS组分,通过基因敲出构建相应的缺失突变株,分析缺失突变株在胁迫条件下的生长表型。根据突变株生长表型的一致性进一步确定TCS组分之间的相互作用。研究得到以下结论：(1)TCS组分Hik10与Rre3, Hik13与Rre18, Hik38与Hik28, Hik16与Rre17, Hik5与Rre42, Hik7与Rre5之间存在相互作用；此外8个TAS组分与10个已知或未知功能非TAS组分之间存在相互作用；VapBC10与VapBC12系统组分之间存在交互作用。(2)Rre3缺失突变株与Hik10缺失突变株在高盐和Cd2+胁迫条件下的生长表型分析显示,在高盐条件下Rre3缺失突变株与Hik10缺失突变株的生长状态与野生型表型无显著性差异；在Cd2+胁迫条件下,两突变株具有相同的生长表型,且生长速度显著低于野生型藻株。结果提示,组氨酸激酶Hik10和反应调控因子Rre3可能构成一个具有功能的TCS系统,并介导Synechocystis细胞适应Cd胁迫。

关键词： Synechocystis PCC 6803 双元系统毒素-抗毒素系统蛋白相互作用酵母双杂交技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

集胞藻PCC6803染色体上毒素-抗毒素系统ssl420/sll1225与ssl2749/sll1411的研究

集胞藻PCC6803染色体上毒素-抗毒素系统ssl420/sll1225与ssl2749/...

引用

作者：汪牧西江苏大学

学位级别：硕士

细菌的毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin，TAsystem)由毒素基因和抗毒素基因构成。广泛存在于细菌染色体上的TA系统可能与细菌适应环境胁迫有关。细菌适应环境胁迫的策略之一是降低生长速度或使细胞处于休眠状态，从而降低细胞的新陈代... 详细信息

细菌的毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin，TAsystem)由毒素基因和抗毒素基因构成。广泛存在于细菌染色体上的TA系统可能与细菌适应环境胁迫有关。细菌适应环境胁迫的策略之一是降低生长速度或使细胞处于休眠状态，从而降低细胞的新陈代谢速度以及能量消耗。在适宜的环境条件下便于细胞迅速恢复生长。但迄今，仅少数细菌的中部分TA系统在适应环境胁迫中的生理作用得到证明。蓝藻作为地球上最古老的生物之一，广泛分部于不同生境中。在长期的自然选择过程中，进化出极强的环境适应能力。蓝藻基因组中也存在大量的TA系统，但它们在蓝藻适应环境胁迫中的作用有待证明。生物信息技术分析表明，集胞藻PCC6803染色体上存在34个公认的TA系统，但它们的生理功能还不清楚。本文对集胞藻PCC6803染色体上由ssl2420/sll1225和ssl2749/sll1411分别构成vapBC和mnt/hepn家族TA系统进行研究，内容包括:\n 1)通过基因敲除构建ssl2420/sll1225缺失突变株DR1270和ssl2749/sll1411缺失突变株DR1267，分析在温度、壮观霉素以及过氧化氢胁迫条件下缺失突变株的生长表型;构建受铜离子诱导ssl2420/sll1225和ssl2749/sll1411基因表达的表达突变株，分析这些基因的表达产物对集胞藻生长的影响。\n 2)将集胞藻PCC6803染色体上的蛋白酶基因lons或clpP2s/Xs和毒素-抗毒素或者单独抗毒素基因分别置于PT7与PBAD控制下，分析蛋白酶和TA系统表达产物对大肠杆菌生长的影响，以及蛋白酶对ssl2420/sll1225与ssl2749/sll1411TA系统的激活作用;通过蛋白质免疫印记(Westernblot)方法证明蛋白酶Lons或ClpP2s/Xs对抗毒素蛋白的降解作用。\n 3)在大肠杆菌中诱导ssl2420/sll1225共表达，利用亲和捕捉技术证明ssl2420/sll1225TA系统编码的抗毒素蛋白和毒素蛋白之间能够相互作用形成复合体。\n 4)以lazZ为报告基因，构建ssl2749/sll1411融合转录重组质粒或构建ssl2420/sll1225单杂交重组质粒。通过重组菌株中报告基因表达产物的催化活性，确定ssl2749/sll1411与sl2420/sll1225两对TA系统在转录水平上反馈调控作用。\n 本研究得到以下结果和结论:\n 1)ssl2420/sll1225和ssl2749/sll1411的缺失导致集胞藻PCC6803在抗生素壮观霉素或过氧化氢胁迫条件下的生长速度一定程度下降，而在不同温度胁迫下蓝藻生长速度无明显变化。诱导毒素基因sll1225和sll1411过表达可降低集胞藻在正常条件下的生长速度。提示ssl2420/sll1225和ssl2749/sll1411TA系统可能通过调控细胞生长速度，使蓝藻适应蛋白质合成抑制和氧化胁迫。\n 2)集胞藻PCC6803蛋白酶Lons或ClpP2s/Xs基因与ssl2420/sll1225TA系统基因表达，不影响大肠杆菌细胞生长;但Lons或ClpP2s/Xs基因与ssl2749/sll1411同时表达时抑制大肠杆菌生长。Westernblot分析结果表明Lons或ClpP2s/Xs可降解抗毒素Ssl2420。提示Lons或ClpP2s/Xs通过降解抗毒素Ssl2420可激活ssl2420/sll1225TA系统，使细菌生长受到抑制，但是否存在可降解ssl2749/sll1411TA系统编码的抗毒素尚需进一步研究。\n 3)在ssl2420/sll1225TA系统中，抗毒素Ssl2420与毒素Sll1225在体内相互作用形成复合体，表明抗毒素与相应的毒素相互作用拮抗毒素的生长抑制作用。\n 4)转录调控分析结果表明ssl2420/sll1225和ssl2749/sll1411TA系统的启动子都具有转录激活作用。抗毒素Ssl2749可激活启动子Pssl2749的转录活性，Sll1411抑制Ssl2749的转录激活作用;Ssl2420对启动子Pssl2420有正反馈调控作用，但毒素Sll1225可一定程度上抑制这种调控作用。

关键词：集胞藻 PCC6803染色体毒素-抗毒素系统基因敲除

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

红色假交替单胞菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统PrpTA的结构生物学研究

红色假交替单胞菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统PrpTA的结构生物学研究

引用

作者：王晨晨中国科学技术大学

学位级别：硕士

抗生素滥用和持留细胞引起的多药耐药性已经成为抗生素治疗细菌性感染的最大障碍。细菌耐受性是耐药性的前提,毒素-抗毒素系统(TAS)则能促进多药耐受(MDT)的产生。近期,PrpT-PrpA毒素-抗毒素系统被报道具有调节质粒拷贝数的新功能,存在... 详细信息

抗生素滥用和持留细胞引起的多药耐药性已经成为抗生素治疗细菌性感染的最大障碍。细菌耐受性是耐药性的前提,毒素-抗毒素系统(TAS)则能促进多药耐受(MDT)的产生。近期,PrpT-PrpA毒素-抗毒素系统被报道具有调节质粒拷贝数的新功能,存在于红色假交替单胞菌的低拷贝的接合质粒pMBL6842 上。本论文对PrpTA Ⅱ型TAS进行了结构生物学研究,并且获得了若干有意义的发现。我们表达、纯化了 PrpTA、PrpA、PrpA2-54等蛋白,尝试结晶并解析了PrpTA、PrpA2-54-Form Ⅰ、PrpA2-54-Form Ⅱ等的高分辨率的晶体结构。然而,由于C端非结构化区的存在,未能成功结晶PrpA。基于结构和序列分析,PrpTA被归属到parDETAS家族。此外,毒素蛋白PrpT的结构较为保守;抗毒素PrpA则是一个全新的结构,它的N端具有一个RHH基序。根据SEC-MALS,全长PrpA及其与PrpT的复合物倾向于组装成四聚体。然而,在C端(55-86aa)缺失的情况下,PrpA2-54倾向于通过RHH结构域之间的相互作用界面组装成同源二聚体。此外,PrpA2-54的聚集形式受蛋白浓度和溶液类型有限地调节,在某些情况下,依赖对称性的二聚体和二聚体间的相互作用界面,PrpA2-54仍能以四聚体、六聚体等存在于溶液中。这些结果表明,PrpA的C端参与四聚化,但彼此之间的联系远没有N端结构域之间的联系强,以至于缺失C端间的联系,PrpA仍可能以多聚的形式存在。此外,结构叠加表明,PrpA与PrpT结合后,其C端发生了明显的构象变化,导致了独特的PrpT-PrpA互作模式。当与PrpT结合时,PrpA同源四聚体会解聚成两个同源二聚体并与Prp T建立联系,从而形成稳定的PrpTA异源四聚体并中和PrpT毒性。我们还进一步提出了 PrpA2-54四聚体-prpAT dsDNA的相互作用模型。基于本论文的研究结果,对已有的PrpTA系统如何控制质粒复制的机制进行了补充。此外,我们的研究可能有助于理解和阐明Ⅱ型TAS在耐药性形成中的分子机制和结构生物学基础。

关键词：多药耐药性毒素-抗毒素系统 PrpTA 构象变化 RHH 蛋白质寡聚化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

嗜热球菌中HepT-MntA毒素-抗毒素系统的结构生物学研究

嗜热球菌中HepT-MntA毒素-抗毒素系统的结构生物学研究

引用

作者：张莉萍福建师范大学

学位级别：硕士

毒素-抗毒素（Toxin-antitoxin,TA）系统是一种广泛存在于细菌和古细菌中的遗传元件。该系统通常由毒素和抑制该毒素的抗毒素组成。毒素通过多种的途径抑制细菌生长,而抗毒素则通过抑制毒素的毒性作用来维持细胞的正常生理活动。根据抗... 详细信息

毒素-抗毒素（Toxin-antitoxin,TA）系统是一种广泛存在于细菌和古细菌中的遗传元件。该系统通常由毒素和抑制该毒素的抗毒素组成。毒素通过多种的途径抑制细菌生长,而抗毒素则通过抑制毒素的毒性作用来维持细胞的正常生理活动。根据抗毒素的作用方式和性质,TA系统可分为I-VIII型。其中VII型TA系统中毒素毒性的中和依赖抗毒素对其的翻译后修饰。已有研究发现嗜冷菌希瓦氏菌（Shewanella oneidensis）TA系统中的毒素HepT蛋白毒性的中和主要依赖于抗毒素MntA对其的多聚腺苷酸化修饰,将HepT-MntA归类为VII型TA系统。在本研究中,对嗜冷菌希瓦氏菌（Shewanella oneidensis）TA系统中HepT和MntA的序列同源性分析中同时发现了一种嗜热球菌（Thermococcus cleftensis CL1）也存在着类似的TA系统。虽然该类型系统mnt-hepn基因广泛存在于已经测序的微生物中,但相关生物学功能和中和机理研究还相对较少。因此本研究开展了嗜热球菌TA系统的生物学功能研究,具体研究内容及结果如下:（1）生物信息学分析显示*** CL1基因组基因CL1＿0070和CL1＿0071编码的蛋白分别具有MNT结构域、HEPN结构域的保守基序GSX10DVD、RX4HAY,我们推测CL1＿0070-CL1＿0071组成一个VII型TA系统,命名为HepTCL1-MntACL1。（2）本实验中,目的蛋白的表达选用大肠杆菌表达系统,通过细菌毒性鉴定实验明确CL1＿0071基因编码毒素HepTCL1、CL1＿0070基因编码抗毒素MntACL1,且MntACL1蛋白可以中和HepTCL1蛋白的毒性,HepTCL1-MntACL1构成一个TA系统。（3）共表达（WT）MntACL1/HepTCL1蛋白时通过凝胶排阻层析纯化过程观测到与毒素、抗毒素单蛋白的A260/A280值相比,其核酸值明显偏高,意味着毒素HepTCL1蛋白可能受到腺苷化修饰。我们通过高效液相色谱-质谱技术鉴定共表达（WT）MntACL1/HepTCL1蛋白中毒素HepTCL1的分子量,毒素HepTCL1Y82残基分子量增加数值对应AMP的理论值,数据表明抗毒素MntACL1腺苷化修饰毒素HepTCL1Y82位点。此外,通过毒性鉴定实验发现突变HepTCL1/MntACL1复合物中毒素的Y82位点（Y82F）表现抑制***生长,表明突变毒素HepTCL1Y82位点阻碍腺苷化修饰,毒素的腺苷酸化导致其毒性丧失。（4）为深入探究嗜热球菌TA系统中腺苷化修饰后对毒素失去毒性的分子机理,我们通过晶体学方法解析了MntACL1单蛋白、HepTCL1R75A单蛋白以及共表达（WT）MntACL1/HepTCL1蛋白的晶体结构。解析的MntACL1结构具有典型MNT特有的α/β多聚体折叠方式,HepTCL1R75A整体结构由两个HEPN形成一个对称V形二聚体,二元复合物MntACL1/HepTCL1晶体结构呈现（HEPN）2:（MNT）2的四聚体构象。通过分析及突变二元复合物结构MNT与HEPN作用界面的关键氨基酸,实验表明在MNT与HEPN的识别中R69,R73,R88,D97四个位点氨基酸发挥主要功能。我们同时解析了不能被腺苷化修饰的突变体Y82F结构,突变体Y82F结构依旧呈现（HEPN）2:（MNT）2的四聚体构象。通过比较WT和突变体Y82F的构象变化,表明Y82的腺苷化酸化使得毒素HepTCL1的Y82 loop拉离毒素RNase催化中心,导致毒素RNase活性丧失从而降低毒性。综上所述,功能和结构生物学研究均表明毒素HepTCL1蛋白毒性的丧失是由于抗毒素MntACL1对其Y82位点的腺苷化修饰。我们最终阐明了*** CL1 TA系统中抗毒素MntA作为核苷酸转移酶利用底物ATP对毒素HepT腺苷化修饰的作用机制,并将HepTCL1-MntACL1归类为新型VII型TA系统。

关键词：毒素-抗毒素系统 HepT-MntA系统 HepTCL1/MntACL1复合物结构

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

前噬菌体lamdaSa04及其毒素—抗毒素系统对鱼源无乳链球菌环境适应性的影响

前噬菌体lamdaSa04及其毒素—抗毒素系统对鱼源无乳链球菌环境适...

引用

作者：姬姝婷南京农业大学

学位级别：硕士

无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）又称B群链球菌（group B Streptococcus,GBS）,可感染人、多种哺乳动物和鱼类。近年来,GBS感染对于我国水产养殖业特别是罗非鱼养殖造成了巨大经济损失。前噬菌体是细菌间基因水平转移的重要载体... 详细信息

无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）又称B群链球菌（group B Streptococcus,GBS）,可感染人、多种哺乳动物和鱼类。近年来,GBS感染对于我国水产养殖业特别是罗非鱼养殖造成了巨大经济损失。前噬菌体是细菌间基因水平转移的重要载体,通过插入细菌基因组可为细菌带来新的表型或生物学特性的改变,但目前在GBS中的作用尚不明晰。实验室前期研究发现,鱼源无乳链球菌GD201008-001中含有唯一的完整前噬菌体lamdaSa04。本研究在构建lamdaSa04缺失株的基础上进行一系列生物特性分析,并通过基因分段敲除的方式筛选与前噬菌体介导的特性相关的基因。随后针对其重要元件II型毒素-抗毒素系统（toxin-antitoxin system,TAS）基因簇A964＿0626-0627展开深入研究,以期阐明TAS对于前噬菌体功能发挥的影响。 1前噬菌体lamdaSa04对鱼源无乳链球菌环境适应性及毒力的影响为调查前噬菌体lamdaSa04对鱼源无乳链球菌GD201008-001环境适应性和毒力的影响,利用同源重组技术构建前噬菌体lamdaSa04基因缺失株,比较缺失株与野生株在体外生长、抗环境应激、抗巨噬细胞吞噬、胞内存活以及感染小鼠的存活率和组织细菌载量等方面的差异。结果显示,lamdaSa04基因簇缺失后,并不影响细菌的体外生长能力,但生物被膜形成能力下调38.57%;在10及20mmol/L H2O2的强氧化应激条件下,缺失株存活率较野生株分别下调22.86%及42.01%;小鼠巨噬细胞RAW264.7对缺失株的吞噬率比野生株上调76.12%。模拟巨噬细胞内的酸性及氧化环境,设置强氧化、一氧化氮、溶菌酶、强酸等多因素结合的应激条件,检测菌株的存活率,结果表明lamdaSa04的存在有助于无乳链球菌存活。动物试验结果显示,lamdaSa04缺失对小鼠致死率及组织细菌载量并无明显影响。由此可知,前噬菌体lamdaSa04的存在对无乳链球菌的环境适应性有显著影响,但并不影响细菌的致病性。 2前噬菌体lamdaSa04中毒素-抗毒素系统的鉴定及功能分析利用基因分段敲除结合生物特性分析,筛选出前噬菌体lamdaSa04显著影响宿主无乳链球菌GD201008-001环境适应性的部分关键基因,并对其中的假定毒素-抗毒素系统基因簇A964＿0626-0627进行鉴定及功能分析。结果显示,A964＿0626及A964＿0627基因位于一个操纵子上,且A964＿0627为有活性的毒素蛋白,A964＿0626作为抗毒素可以中和毒素A964＿0627的毒性作用,故二者确构成一对毒素-抗毒素系统,命名为sa04AB。通过构建sa04AB相关缺失株及互补株并进行生物特性分析可知,A964＿0626-0627的缺失使得宿主菌对菌株的抗氧化应激能力下调65.35%,生物被膜形成能力下调45.09%,且小鼠巨噬细胞RAW264.7对缺失株的吞噬率比野生株上调91.72%。进一步在ΔlamdaSa04基础上回补A964＿0626-0627发现菌株仅生物被膜形成能力得到显著恢复,推测毒素-抗毒素系统sa04AB对于lamdaSa04调控宿主菌生物被膜形成发挥了关键作用。 3毒素-抗毒素系统sa04AB介导无乳链球菌生物被膜形成的机制初探为了探究TAS/sa04AB参与lamdaSa04调控宿主菌生物被膜形成的机制,对前噬菌体lamdaSa04上另一生物被膜形成相关基因A964＿0630（clpP）开展研究,探索clpP基因与sa04AB关系,以及对生物被膜形成的影响。结果显示,clpP单缺失或A964＿0626-0627、clpP基因双缺失使得菌株生物被膜形成相较于野生株与ΔA964＿0626-0627均上调16%以上,且在ΔA964＿0626-0627中过表达ClpP可使菌株生物被膜形成下调约64.62%。另外经q PCR及β-半乳糖苷酶检测发现,A964＿0626-0627能够抑制自身以及clpP的启动子活性,且ΔA964＿0626-0627的clpP转录水平上调至野生株的2.92倍。Western blot检测可知,ClpP蛋白酶参与抗毒素蛋白A964＿0626的降解。凝胶阻滞试验（EMSA）检测表明,ClpP蛋白并不能与A964＿0626-0627直接结合。研究表明,TAS/sa04AB对菌株生物被膜形成能力的影响与其对clpP的调控有关,但该调控作用是间接的,具体机制还有待进一步研究。综上,本研究探究了前噬菌体lamdaSa04在无乳链球菌环境适应性的作用,对其包含的一对毒素-抗毒素系统sa04AB进行了鉴定,并深入分析了sa04AB与前噬菌体lamdaSa04上的clpP基因在无乳链球菌生物被膜形成上的协同调

关键词：无乳链球菌前噬菌体毒素-抗毒素系统环境适应性生物被膜

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

没有更多数据了...

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共12页 << < 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 > >>

检索报告对象比较合并检索0

隐藏清空

合并搜索

回到顶部

执行限定条件

内容：

评分：

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

订阅名称：

通借通还

温馨提示：

图书名称：

借书校区：

取书校区：

手机号码：

邮箱地址：

一卡通帐号：

电话和邮箱必须正确填写，我们会与您联系确认。

联系人：

所在院系：

联系邮箱：

联系电话：

内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号邮编: 010021

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：