检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2012年第8期47卷 969-977页

作者：龙泉鑫何颖谢建平 f西南大学生命科学学院现代生物医药研究所三峡库区生态环境与生物资源省部共建国家重点实验室重庆400715

氟喹诺酮类药物是目前使用最广泛的广谱抗生素,占据了全球抗生素类药物市场约18%的份额。其杀菌快速,而且具备大量的衍生物库,为药物更新换代提供了良好的基础。但这些衍生物在杀菌的速度、代谢过程中对氧需求、对蛋白合成的依赖性等方... 详细信息

氟喹诺酮类药物是目前使用最广泛的广谱抗生素,占据了全球抗生素类药物市场约18%的份额。其杀菌快速,而且具备大量的衍生物库,为药物更新换代提供了良好的基础。但这些衍生物在杀菌的速度、代谢过程中对氧需求、对蛋白合成的依赖性等方面的差异很大。从药物作用后细菌分子遗传层面的应答特征揭示各类衍生物的深层次作用机制,可以为寻找更有效的新喹诺酮类药物提供坚实基础。SOS应答、毒素-抗毒素系统,细菌程序性死亡、染色体片段化以及活性氧簇等新机制可能不同程度参与了喹诺酮类药物的杀菌过程。本文重点介绍喹诺酮作用的"二步特征"。该特征的引入有助于理解不同喹诺酮类药物的杀菌特征,也有助于开发新的喹诺酮类药物。

关键词：喹诺酮类药物 SOS应答毒素-抗毒素系统细菌程序性死亡染色体片段化活性氧簇

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大肠杆菌mazG基因参与mazEF介导的严紧反应调控

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国际药学研究杂志 2020年第8期47卷 623-631页

作者：段恒杜现礼车永胜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 中国医学科学院医药生物技术研究所北京100050

目的探索mazG基因参与调控mazEF毒素-抗毒素系统(TAs)介导的细菌生长抑制与程序性死亡的分子机制,明确MazG蛋白真正的生理功能。方法以大肠杆菌MC4100为原型,通过relA基因的回复突变,获得relA野生型的菌株MC4200。通过同源重组的方法,... 详细信息

目的探索mazG基因参与调控mazEF毒素-抗毒素系统(TAs)介导的细菌生长抑制与程序性死亡的分子机制,明确MazG蛋白真正的生理功能。方法以大肠杆菌MC4100为原型,通过relA基因的回复突变,获得relA野生型的菌株MC4200。通过同源重组的方法,构建大肠杆菌mazG、mazEF、mazEFG基因敲除菌株,测试mazG基因在不同基因背景菌株中过表达对细菌存活率的影响;通过rifampicin、H2O2及serine hydroxamate(SHT)等胁迫条件处理细菌,研究mazG及mazEFG操纵子缺失菌株的生长曲线与存活率;克隆大肠杆菌mazG基因,构建诱导型过表达质粒pET28a-mazG及突变体pET28a-mazG E38A,在BL21菌株中表达纯化MazG蛋白,通过酶学实验验证了MazG蛋白的去磷酸酶活性;测试突变体过表达对细菌存活率的影响。结果mazG过表达对大肠杆菌MC4200的生长无显著影响,但对mazEFG基因敲除株具有显著抑制作用;MazG的细胞毒性依赖于其NTP-PPase酶活性;mazEF的存在会显著抑制mazG的表型;mazEF/mazG/mazEFG敲除不影响大肠杆菌正常环境下的生长曲线;在胁迫条件下,mazG敲除菌株的存活率与mazEFG的敲除菌株基本一致,显著高于野生型。结论mazG基因参与mazEF诱导的细菌程序性死亡调控,并对细菌的生长抑制具有重要作用。本研究为TAs的研究提供了新的角度,有助于进一步理解TAs在细菌生长与死亡调节中的作用机制。

关键词：毒素-抗毒素系统 mazEF mazG 细胞程序性死亡严紧反应

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亚抑菌浓度博落回生物碱对ExPEC主要外膜蛋白和Ⅱ型T-A系统表达的影响

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微生物学通报 2022年第6期49卷 2183-2192页

作者：侯博王晨燕栗绍文周伦江车勇良陈秋勇福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

【背景】血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱等生物碱是我国二类新兽药博落回散和博普总碱散的主要成分,具有广泛的药理作用。【目的】研究亚抑菌浓度血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱对肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escheric... 详细信息

【背景】血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱等生物碱是我国二类新兽药博落回散和博普总碱散的主要成分,具有广泛的药理作用。【目的】研究亚抑菌浓度血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱对肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)主要外膜蛋白及其调控基因和Ⅱ型毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,T-A)系统基因表达的影响,初步探讨博落回生物碱对ExPEC细菌生理活动影响的可能机制。【方法】比较不同Ⅱ型T-A系统基因yafON、hicAB、prlF-yhaV缺失的ExPEC对血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱及抗生素的最小抑菌浓度;在1/2MIC亚抑菌浓度血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱条件下,比较它们对ExPEC野生型(wild type,WT)菌株和外膜蛋白tolC缺失菌株(ΔtolC)的不同外膜蛋白基因ompC、ompX、tolC、ompF和调控基因acrR、rob、marR、rpoS、soxS表达的影响,以及对T-A系统基因yafON、hicAB、prlF-yhaV表达的影响。【结果】T-A系统hicAB和prlF-yhaV缺失菌株对氯霉素的敏感性提高2–4倍,而且hicAB缺失菌株对血根碱的敏感性也提高2倍;1/2 MIC白屈菜红碱显著促进WT和ΔtolC菌株的ompX和tolC基因表达,而血根碱抑制WT菌株tolC基因的表达;在ΔtolC菌株中1/2MIC血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱不同程度地促进ompX和ompC的基因表达,而对ompF存在着不同程度的抑制;1/2 MIC血根碱和白屈菜红碱显著促进WT和ΔtolC菌株的marR基因表达,并且血根碱还可以促进rpoS基因的表达。1/2 MIC原阿片碱显著降低WT菌株的yafN基因表达,而显著增加ΔtolC菌株的yafN基因表达水平;1/2 MIC血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱不同程度地抑制WT菌株hicA和hicB基因表达,而促进ΔtolC菌株hicA和hicB的基因表达;1/2MIC血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱不同程度地促进WT和ΔtolC菌株的prlF基因表达,而血根碱显著抑制yhaV基因表达。【结论】Ⅱ型T-A系统和外膜蛋白参与ExPEC对不同生物碱的应激反应,外膜蛋白TolC的完整性对于T-A系统参与细菌应激具有一定的影响,并且其机制可能存在不同。

关键词：肠外致病性大肠杆菌博落回生物碱亚抑菌浓度外膜蛋白毒素-抗毒素系统

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细菌有活力但不可培养状态及其机制研究进展

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微生物学通报 2020年第3期47卷 880-891页

作者：阚玉敏蒋娜白凯红李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大... 详细信息

有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大的潜在威胁,开展关于VBNC状态的检测及诱导、复苏及其机制研究可为减少或避免该状态细菌的危害提供理论基础。本文简要综述了细菌VBNC状态在诱导、复苏及致病性等方面的研究进展,并结合本实验室及国内外相关团队近年来在植物病原细菌VBNC状态研究中的结果,详细总结了VBNC状态细菌的形成和复苏机制,对植物病原细菌在环境胁迫下的存活机制、病害田间初侵染来源分析及VBNC状态菌体在病害循环中的作用等相关研究具有重要参考意义。

关键词：有活力但不可培养严紧反应毒素-抗毒素系统蛋白酶调控因子复苏促进因子群体感应

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持留菌的形成及致病机制的研究进展

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1357-1362页

作者：王琦岳盈盈李冰清山东第一医科大学(山东省医学科学院)基础医学院(基础医学研究所) 山东济南250062

持留菌是一种对抗生素耐受的休眠细菌亚群,在一定的条件下可以复苏,越来越多的证据表明持留菌是导致感染复发和慢性感染的重要原因,因此,对持留菌的研究在治疗细菌感染时具有非常重要的临床意义。然而由于在菌群中所占比例较小,且形成... 详细信息

持留菌是一种对抗生素耐受的休眠细菌亚群,在一定的条件下可以复苏,越来越多的证据表明持留菌是导致感染复发和慢性感染的重要原因,因此,对持留菌的研究在治疗细菌感染时具有非常重要的临床意义。然而由于在菌群中所占比例较小,且形成机制复杂,持留菌一直是一个富有挑战性的研究课题,随着抗生素的耐药性问题日趋严重,持留菌也逐渐受到更多我们的重视。近年来的一系列研究使我们对持留菌的认识有了新的进展和突破,在这里,我们将重点介绍TA系统、(p)ppGpp、生物膜、SOS反应、吲哚、TacT等六种持留菌的形成机制,并对几种常见持留菌的致病性进行综述,旨在为将来对持留菌清除等方面的研究提供参考和思路。

关键词：持留菌毒素-抗毒素系统感染综述

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hipA对禽致病性大肠杆菌生物学特性和致病性的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2023年第8期51卷 11-18,28页

作者：吴晓妍吴剑梅傅丹丹涂健宋祥军邵颖祁克宗安徽农业大学动物科技学院兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽省动物性食品质量与生物安全工程实验室安徽合肥230036

【目的】探究毒素-抗毒素(TA)系统中毒素基因hipA对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性和致病性的影响,为深入研究TA系统和APEC的致病机制提供理论依据。【方法】利用Red同源重组方法,构建禽致病性大肠杆菌野生株AE81的hipA基因缺失株AE8... 详细信息

【目的】探究毒素-抗毒素(TA)系统中毒素基因hipA对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性和致病性的影响,为深入研究TA系统和APEC的致病机制提供理论依据。【方法】利用Red同源重组方法,构建禽致病性大肠杆菌野生株AE81的hipA基因缺失株AE81ΔhipA及回复株C-AE81ΔhipA,测定其生长曲线、运动性、环境耐受能力、细胞黏附能力,并采用实时荧光定量PCR检测环境耐受相关基因(hdeA、hdeB)、黏附相关基因(fimF、fimH)、毒力相关基因(hcp、ompR、ompC)的转录水平,探究毒素蛋白hipA对APEC的生物学功能及致病性的影响。【结果】成功构建hipA基因的缺失株和回复株。野生株AE81、缺失株AE81ΔhipA和回复株C-AE81ΔhipA的生长情况无明显差异。与野生株AE81相比,hipA基因缺失株AE81ΔhipA的运动能力降低,对酸性、碱性、高渗和氧化应激环境的耐受能力减弱,鞭毛和菌毛的数量和长度明显减小,对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的黏附能力极显著减弱(P<0.01),回复株C-AE81ΔhipA各指标基本恢复到野生株水平。实时荧光定量PCR结果显示,与野生株AE81相比,AE81ΔhipA菌株的hdeA、hdeB、fimF、ompR、ompC基因转录水平显著降低(P<0.05),hcp基因转录水平差异不显著,但fimH转录水平显著升高(P<0.05)。【结论】TA系统毒素蛋白hipA影响APEC的运动性、环境耐受能力和对细胞的黏附能力,参与APEC的致病过程。

关键词：禽致病性大肠杆菌毒素-抗毒素系统 hipA基因

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mazEF系统介导胁迫诱导细菌细胞程序性死亡

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微生物学通报 2009年第6期36卷 905-909页

作者：庄强宁德刚江苏大学环境学院江苏镇江212013 江苏大学生命科学研究院江苏镇江212013

mazEF是细菌染色体上的"毒素-抗毒素系统"基因(Toxin-antitoxin system,TA系统),可介导胁迫诱导细菌细胞程序性死亡。本文介绍了mazEF系统的遗传结构特征、生理生化功能、环境胁迫激活mazEF系统介导的细菌细胞程序性死亡的机... 详细信息

mazEF是细菌染色体上的"毒素-抗毒素系统"基因(Toxin-antitoxin system,TA系统),可介导胁迫诱导细菌细胞程序性死亡。本文介绍了mazEF系统的遗传结构特征、生理生化功能、环境胁迫激活mazEF系统介导的细菌细胞程序性死亡的机制,参与细胞死亡过程中的细胞信号和细胞因子的调控,以及关于mazEF系统介导的细菌细胞程序性死亡理论的争论,提出了进一步丰富和完善细菌细胞程序性死亡理论亟待解决的问题。

关键词：毒素-抗毒素系统 mazEF基因环境胁迫细菌细胞程序性死亡

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mazEF系统及生物膜对北京基因型结核分枝杆菌生存能力的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2018年第6期36卷 661-668页

作者：谢婉莹赵继利刘微杨赛丽袁俐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室

目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进... 详细信息

目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进行基因测序;使用荧光定量PCR检测所有菌株的mazEF3,6,9基因、mazF3,6,9毒素基因和mazEF3,6,9抗毒素基因的mRNA表达水平;利用WesternBlot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果北京基因型菌株在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力高于非北京基因型菌株。北京、非北京基因型菌株mazF3基因193bp处发生碱基突变,由C突变为T。在mRNA表达水平上,与H37Rv相比,北京、非北京基因型菌株中mazE3低表达;非北京菌株中mazE6低表达,mazE9高表达(P<0.05)。与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株中mazEF3高表达、mazE9低表达、mazF3、mazF6、mazF9高表达,mazF9蛋白高表达(P<0.05)。结论北京基因型菌株具有较强的生存力和生物膜形成能力。mazEF系统的差异表达、生物膜成膜能力强可能与北京基因型菌株生存能力强相关。

关键词：结核分枝杆菌北京基因型结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统生存力生物膜

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鱼腥藻PCC7120染色体MazEF同源基因对asr0757/alr0758的初步研究

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中南民族大学学报（自然科学版） 2016年第1期35卷 29-33,54页

作者：陈思礼陈洁吴汇兰中南民族大学生命科学学院武汉430074

鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asr0757/alr0758,经NCBI比对显示其与大肠杆菌中的毒素-抗毒素基因Maz EF具有较高的同源性,且具有毒素-抗毒素系统基因的保守遗传结构,为研究其是否属于Maz EF家族系统基因,构建同时含有asr0757和alr0758... 详细信息

鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asr0757/alr0758,经NCBI比对显示其与大肠杆菌中的毒素-抗毒素基因Maz EF具有较高的同源性,且具有毒素-抗毒素系统基因的保守遗传结构,为研究其是否属于Maz EF家族系统基因,构建同时含有asr0757和alr0758基因的双启动子选择性表达载体,先选择性诱导了该基因对的表达,再验证了其表达产物对细菌生长的影响.结果显示:成功诱导表达出了目的蛋白asr0757(13.5KD)和alr0758(17.5KD),当单独诱导asr0757基因表达时,细菌生长状况不受影响,单独诱导alr0758表达时细菌生长明显受到抑制,同时诱导asr0757和alr0758基因时细菌生长恢复正常,说明asr0757/alr0758构成具有生物功能的Maz EF家族系统基因对,具有毒性与抗毒性功能.

关键词：鱼腥藻PCC7120 毒素-抗毒素系统 MazEF asr0757/alr0758

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三种抗氧化剂对抗生素杀菌、抑菌活性及耐药突变体筛选频率影响的研究

三种抗氧化剂对抗生素杀菌、抑菌活性及耐药突变体筛选频率影响的...

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作者：刘远莉哈尔滨医科大学

学位级别：博士

随着细菌耐药性的发展，感染性疾病的治疗正面临着严峻考验。抗生素的不合理使用或长期应用广谱抗生素，可造成大量敏感菌被杀灭，耐药菌趁机选择性扩增，引起菌群严重失调，产生细菌耐药。本课题组前期研究发现活性氧族(reactive oxyge... 详细信息

随着细菌耐药性的发展，感染性疾病的治疗正面临着严峻考验。抗生素的不合理使用或长期应用广谱抗生素，可造成大量敏感菌被杀灭，耐药菌趁机选择性扩增，引起菌群严重失调，产生细菌耐药。本课题组前期研究发现活性氧族(reactive oxygen species，ROS)在抗生素引起的细菌致死性应激中起重要作用，同时还发现抗氧化剂能拮抗喹诺酮对大肠杆菌的杀菌活性，并能提高喹诺酮诱导的细菌耐药突变频率。现今，越来越多的抗氧化剂（如白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C）作为营养保健品和药品源源不断地涌入人们的日常生活。这些外源性抗氧化剂有可能影响体内的ROS水平，进而影响抗生素的杀菌效果，促进耐药性的产生。\n 目的:以抗生素介导的细菌致死性应激为基础，在不同的细菌体系中探讨抗氧化剂对不同杀菌机制的抗生素的杀菌效果和耐药突变的影响，并探讨这些影响与细菌ROS水平和毒素-抗毒素系统的相关性，为今后临床上抗生素和抗氧化剂的合理使用提供理论依据，并为抗生素耐药机制的研究提供新思路。\n 方法:通过绘制细菌生长曲线，确定抗氧化剂对三种不同细菌生长有无影响;通过测定抗氧化剂作用下，不同抗生素在不同细菌中的最低抑菌浓度(minimal inhibitoryconcentration，MIC)，确定抗氧化剂对抗生素抑菌活性的影响;通过测定抗氧化剂作用下，不同抗生素在不同细菌中的最低杀菌浓度（minimum bactericidalconcentration，MBC）及各种抗生素的快速杀伤实验，确定抗氧化剂对抗生素杀菌活性的影响;通过real-time PCR研究抗氧化剂对奥索利酸杀伤大肠杆菌BW25113过程中，ROS生成相关基因和毒素-抗毒素系统相关基因表达的影响;通过测定抗氧化剂处理后的大肠杆菌BW25113和金黄色葡萄球菌RN450对利福平及奥索利酸耐药突变频率，确定抗氧化剂对大肠杆菌BW25113和金黄色葡萄球菌RN450耐药突变的影响。\n 结果:(1)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C对不同抗生素在大肠杆菌BW25113、金黄色葡萄球菌RN450和绿脓杆菌PAO1的MIC无明显影响;(2)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C抑制了不同抗生素对大肠杆菌BW25113、金黄色葡萄球菌RN450和绿脓杆菌PAO1的杀菌活性;(3)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C提高了大肠杆菌BW25113及金黄色葡萄球菌RN450对利福平及奥索利酸的耐药突变频率;(4)奥索利酸杀伤大肠杆菌过程中，三种抗氧化剂下调了毒素-抗毒素系统相关基因mazE、relE和chpBK的表达水平;谷胱甘肽下调了ROS生成的相关基因katG、sodA的表达水平;白藜芦醇上调基因katG，下调基因sodB的表达水平;维生素C下调基因katG，上调基因sodA的表达水平。\n 结论:(1)在大肠杆菌BW25113、金黄色葡萄球菌RN450和绿脓杆菌PAO1中，白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C对不同抗生素的抑菌活性无显著影响;(2)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C拮抗不同抗生素对大肠杆菌BW25113、金黄色葡萄球菌RN450和绿脓杆菌PAO1的杀菌活性;(3)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C提高了大肠杆菌BW25113及金黄色葡萄球菌RN450对利福平及奥索利酸的耐药突变频率;(4)白藜芦醇、谷胱甘肽和维生素C通过改变ROS生成的相关基因katG、sodA、sodB和毒素-抗毒素系统相关基因mazE、relE和chpBK的表达水平，拮抗奥索利酸对大肠杆菌BW25113的杀菌活性。

关键词：抗氧化剂抗生素杀菌杀菌机制耐药突变活性氧族毒素-抗毒素系统

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