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中南大学学报（医学版） 2020年第1期45卷 1-7页

作者：鞠静谭人千钟勇彭玲玲潘宇政重庆市永川区中医院重症医学科重庆404000 广西医科大学第一附属医院中医科南宁530021

目的:探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对气管切开模型大鼠早期免疫相关指标的影响。方法:将54只SPF级雄性SD大鼠随机分成正常对照组(A组)、模型组(B组)、模型+ICA治疗组(C组),每组18只。B,C组制备大鼠气管切开模型。模型成功6 h后给予C组ICA... 详细信息

目的:探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对气管切开模型大鼠早期免疫相关指标的影响。方法:将54只SPF级雄性SD大鼠随机分成正常对照组(A组)、模型组(B组)、模型+ICA治疗组(C组),每组18只。B,C组制备大鼠气管切开模型。模型成功6 h后给予C组ICA干预,A,B组给予等量生理盐水。分别在第24,72,168 h取肺组织、肺泡灌洗液及外周血。用RT-PCR检测大鼠肺组织中β-防御素-2 mRNA表达,ELISA检测肺泡灌洗液及外周血血清中β-防御素-2含量,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)含量,并计算CD4+/CD8+值。结果:气管切开后B组大鼠肺组织β-防御素-2 mRNA及肺泡灌洗液β-防御素-2含量在24 h明显升高,随后逐渐降低,至168 h降低最明显(均P<0.05);外周血血清β-防御素-2含量逐渐降低,168 h明显低于24 h(P<0.05),但3个时间点与A组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);外周血CD3+T细胞水平24 h明显低于A组(P<0.05),CD4+和CD8+T细胞水平3个时间点与A组比较差异均无统计学意义,且各组组内差异亦均无统计学意义(均P>0.05)。C组ICA干预后:肺组织、肺泡灌洗液、外周血血清β-防御素-2含量及外周血中CD3+和CD4+T细胞水平均逐渐升高,明显高于B组(均P<0.05);CD8+在24 h明显低于A组(P<0.05),其余时间点3组组间组内比较差异均无统计学意义(均P>0.05);CD4+/CD8+值在168 h明显高于A,B组(均P<0.01)。结论:ICA可以改善气管切开模型大鼠早期肺部免疫功能,这可能与上调肺组织β-防御素-2 mRNA表达及肺泡灌洗液、外周血血清中β-防御素-2含量,提高外周血中CD3+和CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+值,降低CD8+T细胞水平有关。

关键词：淫羊藿苷气管切开模型早期肺部免疫功能 β-防御素-2 T细胞亚群

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淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症及免疫指标的影响

淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症及免疫指标的影响

引用

作者：鞠静广西医科大学

学位级别：硕士

目的:观察淫羊藿苷和宝藿苷I干预气管切开模型大鼠,在早期不同时间点（24 h、72 h、168 h）肺组织病理形态学、肺组织中?防御素-2（rBD2）mRNA相对表达量,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?和sIgA,外周血T细胞亚群和IL-6以及肺泡灌洗液和外周血中... 详细信息

目的:观察淫羊藿苷和宝藿苷I干预气管切开模型大鼠,在早期不同时间点（24 h、72 h、168 h）肺组织病理形态学、肺组织中?防御素-2（rBD2）mRNA相对表达量,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?和sIgA,外周血T细胞亚群和IL-6以及肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量的变化。探讨淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症的干预效果。方法:将72只SPF级雄性SD大鼠随机分成空白对照组（A）、模型非用药组（B）、模型+宝藿苷I组（C）和模型+淫羊藿苷组（D）,每组18只。参照经典文献制备大鼠气管切开模型。成功造模约6 h后,C组灌胃宝藿苷I、D组灌胃淫羊藿苷,A、B组灌胃等量生理盐水。观察并记录实验大鼠一般情况。每组分别在第24 h、72 h、168 h采集6只大鼠外周血、肺泡灌洗液及肺组织。应用流式细胞技术检测外周血T细胞亚群（CD3+,CD4+,CD8+）,并计算CD4+/CD8+值;实时荧光定量PCR（qPCR）检测肺组织中rBD2 mRNA相对表达量;ELISA检测肺泡灌洗液中rBD2、sIgA、IL-6、TNF-?及血清中rBD2、IL-6含量;HE染色肺组织切片,光镜下观察肺组织病理形态学变化,并进行肺组织病理评分。结果:（1）实验大鼠一般情况A组大鼠一般情况良好。B组大鼠开始阶段活动量增加、精神状态明显较A组活跃且易激惹,但随着时间延长,活动量减少、精神状态逐渐倦怠,气管导管内以及口鼻可见黄色粘稠分泌物,呼吸急促,伴有痰鸣,进食、饮水量减少,皮毛干燥、无光泽。C、D组开始易激惹,随着用药时间延长,精神状态、进食饮水逐渐恢复,导管及口鼻分泌物较少,呼吸逐渐均匀,皮毛可见光泽。（2）肺组织病理形态学变化及病理评分B组肺组织损伤随时间延长逐渐加重,病理评分均明显高于A组正常大鼠(均P（27）0.05),呈升高趋势;C组损伤程度较B组轻,随着时间延长,肺泡融合数目减少,间隔变窄,肺泡腔、支气管管腔及周围炎性细胞逐渐减少,病理评分在168 h明显低于B组(P（27）0.05);D组肺组织病理损伤程度轻于B、C组,且随着时间延长,肺组织结构逐渐恢复至正常组水平,在72 h、168 h病理评分明显低于B组(均P（27）0.05),且D组在24 h、168 h病理评分明显低于C组(均P（27）0.05)。（3）肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α含量B组肺泡灌洗液中IL-6和TNF-?含量在三个时段均明显高于A组(均P（27）0.05)。C、D两组在72 h、168 h均明显低于B组同时段水平(均P（27）0.05);且C、D组组内IL-6和TNF-?含量在72 h、168 h均明显低于24 h(均P（27）0.05);且D组TNF-α在72 h、168 h均明显低于C组(均P（27）0.05)。（4）肺泡灌洗液中sIgA含量B组肺泡灌洗液中sIgA含量在第24 h明显高于A组(P（27）0.01),随后逐渐降低;C、D两组sIgA含量在72 h、168h明显高于B组(P（27）0.05);且D组在168 h明显高于C组(P（27）0.01)。（5）肺组织中rBD2 mRNA表达B组气切大鼠第24 h rBD2 mRNA表达明显升高(P（27）0.01),随后逐渐降低,72 h、168 h明显低于A组(P（27）0.05);C组在168 h明显高于B组(P（27）0.05);D组在第72 h、168 h明显高于B、C组(均P（27）0.05)。（6）肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量B组肺泡灌洗液rBD2含量在168 h明显低于A组(P（27）0.05),而血清中rBD2与A无明显统计学差异;C、D两组BALF中rBD2含量在72 h、168 h明显高于B组(P（27）0.05);且D组rBD2含量在168 h明显高于C组(P（27）0.01)。血清中rBD2,C组在168 h明显高于B组(P（27）0.01),D在72 h、168 h均明显高于B组(P（27）0.05),且D组三个时段均明显高于C组(P（27）0.05)。（7）外周血血清中IL-6含量B组在72h明显降低(P（27）0.01),C、D两组IL-6含量在三个时段均明显低于A、B组(P（27）0.05)。且D组在168h明显低于C组(P（27）0.05)。C、D两组组内各时段IL-6含量无明显变化。（8）外周血中T细胞亚群B组外周血T细胞亚群CD3+在24 h明显降低(P（27）0.05),但是CD4+、CD8+与A组无明显统计学差异(P（29）0.05)。C组CD3+在24 h明显高于B组(P（27）0.05),D组CD3+在24 h、168 h明显高于B组(P（27）0.01),C组CD4+在168 h明显高于B组(P（27）0.05),D组CD4+在72

关键词：淫羊藿苷宝藿苷I 气管切开模型肺组织病理 IL-6 TNF-? ?防御素-2 sIgA T细胞亚群

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