检索结果-内蒙古大学图书馆

中国呼吸与危重监护杂志 2019年第4期18卷 362-368页

作者：陈思肖华张伟孔晨陈长明 Venkataramana Sidhaye 李强白冲海军军医大学附属第一医院长海医院呼吸与危重症医学科上海200433 解放军陆军第948医院急诊科新疆乌苏833000 约翰霍普金斯大学医学院呼吸与危重症医学科美国马里兰州巴尔的摩21205 上海同济大学附属东方医院呼吸与危重症医学科上海200120

目的建立一种小鼠气管–支气管上皮细胞气–液界面(ALI)培养及纤毛摆动频率测量的方法,最大程度还原气道上皮的生理功能。方法利用1 mg/mLⅪⅤ型链蛋白酶冷消化的方法获取BALB/c小鼠气管–支气管上皮细胞,筛选出最佳消化时长以保证所得... 详细信息

目的建立一种小鼠气管–支气管上皮细胞气–液界面(ALI)培养及纤毛摆动频率测量的方法,最大程度还原气道上皮的生理功能。方法利用1 mg/mLⅪⅤ型链蛋白酶冷消化的方法获取BALB/c小鼠气管–支气管上皮细胞,筛选出最佳消化时长以保证所得细胞的数量及活力。差速贴壁法去除成纤维细胞后,接种于Ⅰ型鼠尾胶原预包被的Transwell小室,用不同培养基进行增殖期和ALI分化期培养。结果采用链蛋白酶冷消化12 h、14 h和16 h所得细胞数目分别为(1.78±0.33)×10^5、(1.93±0.26)×10^5和(2.01±0.28)×10^5,经台盼蓝染色活细胞率分别为(96.86±0.25)%、(94.73±1.63)%和(86.87±5.95)%。1周左右细胞铺满小室,继续ALI培养2~3周后光学显微镜下可见纤毛节律性摆动,电镜及免疫荧光均证实纤毛结构。培养所得细胞纤毛摆动频率与小鼠气管在体纤毛摆动频率与一致。结论本实验建立的气管–支气管上皮细胞分离、ALI培养及纤毛摆动频率测量体系简便、稳定、高效、可靠,为探索气道疾病的致病和治疗机制创造了基础,亦可为其他物种气道上皮和(或)其他器官上皮的培养提供参考依据。

关键词：气道表面液体层假复层纤毛柱状上皮气-液界面气管-支气管上皮细胞原代培养跨上皮电阻纤毛摆动频率

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氧化应激在氡及其子体致BALB/c小鼠肺组织线粒体损伤中的作用

氧化应激在氡及其子体致BALB/c小鼠肺组织线粒体损伤中的作用

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作者：方丽君苏州大学

学位级别：硕士

目的:氡已成为继吸烟之后第二位主要的肺癌致病因子,目前大量研究主要集中于氡致肺癌的流行病学调查,而有关的动物实验与分子机制研究仍然十分缺乏。本研究采用氡室吸入染氡,观察氡及其子体对小鼠肺组织线粒体的损伤作用,为阐明氡及其... 详细信息

目的:氡已成为继吸烟之后第二位主要的肺癌致病因子,目前大量研究主要集中于氡致肺癌的流行病学调查,而有关的动物实验与分子机制研究仍然十分缺乏。本研究采用氡室吸入染氡,观察氡及其子体对小鼠肺组织线粒体的损伤作用,为阐明氡及其子体导致肺组织损伤作用的机制提供实验基础资料。方法:6-8周龄雄性BALB/c小鼠,适应性喂养一周后,随机分为7组(每组10只),通过HD-3型氡室进行吸入染氡,每天染氡8h,当染氡剂量分别达到6,12,18,60,120,180工作水平月(WLM)后,空腹12h,颈椎脱臼处死小鼠。取对照组和各染氡组小鼠肺组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,并取小鼠气管-支气管进行酶解消化,分离气管-支气管上皮细胞。采用流式细胞术检测小鼠气管-支气管上皮细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)和细胞凋亡水平;采用WST-8法检测对照组和各染氡组肺组织线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)的活性;硫代巴比妥酸法(TBA)法检测丙二醛(MDA)的含量;实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)检测 Cyt-C mRNA、COX-2 mRNA 表达、线粒体 DNA拷贝数;酶标仪检测ATP水平的变化。6-8周龄雄性BALB/c小鼠,适应性喂养一周后,随机分为4组(每组10只):对照组、180WLM、褪黑素组(Mel)、180WLM+Mel组,按照上述检测方法,测定褪黑素处理后小鼠肺组织相关指标的变化。采用免疫组织化学分析方法,测定对照组、褪黑素组(Mel)、180WLM、180WLM+Mel组肺组织中细胞自噬相关蛋白p62和LC3B的表达以及细胞凋亡因子caspase-3的表达;Real-time PCR检测各组肺组织中p62、LC3B、caspase-3 mRNA的表达水平。结果:小鼠肺组织HE染色结果显示,低剂量组与对照组比较无明显差异,随着染氡剂量的增加,高剂量组肺泡间隔增厚,肺泡壁破裂严重,支气管腔内上皮细胞脱落增多,支气管粘膜下出现炎症细胞浸润增多。与180WLM染氡组比较,180WLM+褪黑素组肺泡间隔厚度增生减轻,支气管壁上皮细胞脱落减少,支气管粘膜下出现炎症细胞浸润减少,支气管腔异物减少,纤毛排列较整齐。随着染氡剂量的增加,小鼠气管-支气管上皮细胞ROS、MDA、细胞凋亡水平升高,肺组织 SOD、Cyt-C mRNA、COX-2 mRNA、MtDNA 拷贝数、ATP水平下降。与 180WLM 染氡组比较,180WLM+褪黑素组气管-支气管上皮细胞ROS、细胞凋亡、MDA水平下降,小鼠肺组织MMP、SOD、Cyt-C mRNA、COX-2 mRNA、ATP、MtDNA拷贝数水平上升。小鼠肺组织免疫组化结果表明,与对照组比较,随着染毒剂量的增加,caspase-3、p62、LC3B阳性数、caspase-3 mRNA的表达、细胞自噬标志蛋白p62、LC3B mRNA的表达升高。与180WLM剂量组比较,180WLM+褪黑素组caspase-3、p62、LC3B阳性数、caspase-3 mRNA的表达、细胞自噬标志蛋白p62、LC3B mRNA的表达降低。结论:(1)长期低剂量氡暴露可导致肺组织线粒体损伤;(2)褪黑素可能通过降低机体氧化应激水平而对氡暴露导致的肺组织损伤起保护作用;(3)氡及其子体可能通过活性氧途径诱导细胞自噬和细胞凋亡的发生,但具体的研究机制仍需进一步探索。

关键词：氡氧化应激线粒体气管-支气管上皮细胞肺组织 BALB/c小鼠

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肺组织修复中肺内外干细胞的作用、功能及问题

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中国组织工程研究 2018年第33期22卷 5408-5412页

作者：陈艳刘弦湖北省十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)呼吸科湖北省十堰市442000

背景:干细胞局部修复受损组织的能力为细胞治疗包括慢性肺病在内的大多数不可逆疾病提供了可能性。目的:阐述肺内外干细胞对肺组织的修复作用。方法:第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库和Medline数据库,检索词分别为"干细胞,... 详细信息

背景:干细胞局部修复受损组织的能力为细胞治疗包括慢性肺病在内的大多数不可逆疾病提供了可能性。目的:阐述肺内外干细胞对肺组织的修复作用。方法:第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库和Medline数据库,检索词分别为"干细胞,肺组织干细胞,气管-支气管上皮细胞,移植,细支气管-终末细支气管上皮细胞,肺泡上皮细胞,肺间质细胞"和"lung stem cells,tracheal and bronchial epithelial stem cells;transplantation;stem cells in the bronchial and terminal bronchial epithelium;stem cells at the bronchoalveolar junction;alveolar epithelial stem cells,interstitial lung stem cells",共计500余篇论文,语言分别设定为中文和英文,最终纳入47篇文献。结果与结论:肺内外干细胞是肺脏损伤、修复、重塑的基础,机体内肺干细胞多处于静息状态,当肺组织损伤或在体外培养的情况下,肺内外干细胞分裂、增殖。此外,在肺组织修复过程中甚至在生理条件下,是否由于其他因素的影响而发生细胞凋亡、迁移和分化,目前仍未知。因此,肺内外干细胞在慢性肺疾病中的作用仍有很多问题尚待解决。

关键词：肺组织干细胞移植气管-支气管上皮细胞细支气管-终末细支气管上皮细胞肺泡上皮细胞肺间质细胞干细胞肺干细胞肺疾病干细胞移植组织工程

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氡染毒大鼠气管-支气管上皮细胞的基因差异表达

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中华结核和呼吸杂志 2008年第9期31卷 700-701页

作者：陈锐李建祥聂继华施敏骅胡华成童建苏州大学附属第二医院呼吸科 215004 苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室

氡（Radon）及其子体的致癌效应已引起广泛的关注，被国际癌症研究机构列入室内重要的致癌物质。Meta分析结果提示，氡暴露使矿工发生肺癌的危险陛增高。本研究通过抑制性消减杂交（supprssion subtractive hybridization，SSH）方法，... 详细信息

氡（Radon）及其子体的致癌效应已引起广泛的关注，被国际癌症研究机构列入室内重要的致癌物质。Meta分析结果提示，氡暴露使矿工发生肺癌的危险陛增高。本研究通过抑制性消减杂交（supprssion subtractive hybridization，SSH）方法，筛选氡染毒大鼠模型的气管．支气管上皮细胞差异表达基因，为探讨氡及其子体致肺癌的早期分子机制提供依据。

关键词：气管-支气管上皮细胞染毒大鼠氡暴露基因差异表达抑制性消减杂交 Meta分析差异表达基因致癌效应

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大鼠气管-支气管上皮细胞的提取方法

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毒理学杂志 2005年第A03期19卷 197-198页

作者：崔凤梅苏世标聂继华李冰燕童建苏州大学放射医学与公共卫生学院江苏苏州215007

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法.

关键词：气管-支气管上皮细胞分离鉴定培养

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大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养

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中国辐射卫生 2005年第4期14卷 246-247页

作者：崔凤梅苏世标聂继华李冰燕童建苏州大学放射医学与公共卫生学院江苏苏州215007

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法。方法采用链酶蛋白酶消化联合细胞刷刷洗气管-支气管分离上皮细胞,激光共聚焦显微镜下鉴定,于无血清完全F12培养基中培养。结果实验中可得到大约106个细胞/鼠,并且有较高的成... 详细信息

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法。方法采用链酶蛋白酶消化联合细胞刷刷洗气管-支气管分离上皮细胞,激光共聚焦显微镜下鉴定,于无血清完全F12培养基中培养。结果实验中可得到大约106个细胞/鼠,并且有较高的成活率和细胞纯度,在无血清完全F12培养基中细胞生长良好。结论消化后刷洗法是一种实用的大鼠气管-支气管上皮细胞提取方法,无血清完全F12培养基是一种可行的培养体系。

关键词：气管-支气管上皮细胞分离鉴定培养

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大鼠气管-支气管上皮细胞的提取方法

大鼠气管-支气管上皮细胞的提取方法

引用

中国毒理学会第四届全国学术会议

作者：崔凤梅苏世标聂继华李冰燕童建苏州大学放射医学与公共卫生学院苏州大学放射医学与公共卫生学院苏州大学放射医学与公共卫生学院苏州大学放射医学与公共卫生学院苏州大学放射医学与公共卫生学院

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法。方法7-8周的雄性Wistar大鼠5只,体积分数为3.6%的水合氯醛麻醉后,无菌条件下暴露气管和肺,环状软骨下方插管,生理盐水灌洗3次,下端在左右肺门处结扎,去除肺组织,然后灌入质... 详细信息

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法。方法7-8周的雄性Wistar大鼠5只,体积分数为3.6%的水合氯醛麻醉后,无菌条件下暴露气管和肺,环状软骨下方插管,生理盐水灌洗3次,下端在左右肺门处结扎,去除肺组织,然后灌入质量分数为1% 的链酶蛋白酶,结扎上端,4℃过夜,置于90 mm培养

关键词：气管-支气管上皮细胞分离鉴定培养

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氡及其子体诱发大鼠体细胞HPRT基因位点的突变

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环境与职业医学 2007年第3期24卷 282-284页

作者：崔凤梅宁萍段蓉芳童建苏州大学放射医学与公共卫生学院江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

[目的]用多核细胞法研究氡及其子体诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变情况。[方法]Wistar雄性大鼠24只,采用HD-3型多功能移动式氡室进行动态吸入染毒,按照氡染毒的累计暴露... 详细信息

[目的]用多核细胞法研究氡及其子体诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变情况。[方法]Wistar雄性大鼠24只,采用HD-3型多功能移动式氡室进行动态吸入染毒,按照氡染毒的累计暴露量,分为3个实验组和1个对照组;获取大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞,以多核细胞法检测该两种细胞的HPRT基因突变频率。[结果]大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变频率均随氡累积暴露剂量的增加而相应增加,剂量-效应关系明显,拟合的函数分别为(?)=1.785×10^(-5)D^2+ 1.174×10^(-3)D+1.054和(?)=3.538×10^(-5)D^2+8.338×10^(-4)D+1.032。[结论]氡及其子体能诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变,呈现一定的剂量-效应关系。

关键词：氡及其子体外周血淋巴细胞气管-支气管上皮细胞 HPRT基因位点突变

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