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2 篇 氧-葡萄糖剥夺/复...
2 篇 gaba
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2 篇 nrg-1

机构

2 篇 南方医科大学

作者

2 篇 吴翠莹
1 篇 胡洪海
1 篇 梅林
1 篇 李树基
1 篇 高天明
1 篇 朱心红

语言

2 篇 中文

检索条件"主题词=氧-葡萄糖剥夺/复氧模型"

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详细简洁

排序：

GABA能机制参与NRG-1的神经保护作用

GABA能机制参与NRG-1的神经保护作用

引用

作者：吴翠莹南方医科大学

学位级别：硕士

脑中风(Stroke)是一组以脑缺血或出血型损伤,导致部分脑功能丧失为主要临床表现的疾病。在中国,脑中风已上升为第一死亡原因,发病率排名世界第一,存活者也致残率极高。而在西方发达国家,脑中风是仅次于心脏疾病和癌症,第三大的死亡原因... 详细信息

脑中风(Stroke)是一组以脑缺血或出血型损伤,导致部分脑功能丧失为主要临床表现的疾病。在中国,脑中风已上升为第一死亡原因,发病率排名世界第一,存活者也致残率极高。而在西方发达国家,脑中风是仅次于心脏疾病和癌症,第三大的死亡原因。临床上对脑中风的治疗方法最常用的是溶栓疗法,但是它有严格的时间窗的限制(<3小时),并且可能引发颅内出血等严重并发症,因此应用受到很大的限制。为了能够延长时间窗和降低溶栓后颅内出血的发病率,使更多的患者得到治疗,脑保护剂的研究显得极为迫切。Neuregulin(NRG)是目前为止研究的比较多的一种神经调节蛋白。神经调节蛋白(NRG)是一种细胞之间的信号蛋白。有NRG-1, NRG-2,NRG-3和NRG-4四种亚型,神经调节蛋白1(NRG-1)是目前为止研究的较为透彻的一种亚型。我们的离体实验结果表明神经调节蛋白1(NRG-1)与其受体erbB4结合后,对皮层神经元有显著的神经保护作用。然而神经调节蛋白1(NRG-1)发挥神经保护作用的机制,迄今为止国内外尚无确切的相关报告。阐明这一机制,对于进一步的了解神经调节蛋白在体内的生理作用,为脑卒中的临床治疗提供新的治疗靶点是非常有意义的。本实验室2007年发表的一篇neuron的文章证实在前额叶皮层中GABA能神经元的突触前末梢存在大量的erbB4受体,NRG-1与erbB4受体结合后,可以促进去极化诱导的GABA的释放。我们的实验结果表明GABA受体激动剂对氧-葡萄糖剥夺诱导的皮层神经元死亡有显著的保护作用。那我们的假说是：NRG-1与GABA能神经元表面的erbB4受体结合,可能通过促进GABA的释放,作用于皮层神经元表面的GABA受体,从而发挥神经保护作用。具体的实验如下：首先,用出生一天的SD乳鼠取皮层组织,原代培养皮层神经元,12d神经元成熟后,用免疫组织化学的方法,标记GAD67,计数离体的皮层神经元中GABA神经元的比例。结果显示GABA神经元占约总皮层神经元的20%。其次,将成熟的皮层神经元用于氧-葡萄糖剥夺(OGD)／复氧(R)模型。取培养12天生长良好的皮层神经元,分成两组：control组,将Neurobasal-A Medium换为有糖的EBSS平衡液,放至正常有氧孵箱;OGD/R组,将培养基更换为无糖EBSS平衡液,放至缺氧孵箱。4h后,control组和OGD组均更换为正常Neurobasal-A Medium培养基,24h后,染Hoechst33342/PI,计数PI阳性细胞率,评估细胞死亡情况。结果显示：control组和OGD/R组细胞死亡率分别为5.0478%±3.9862%和30.3178%±1.6481%(两组相比,P<0.01), OGD/R组的神经元死亡率明显高于control组,模型建立成功。在OGD/R模型建立成功的基础上,分别向OGD组给予NRG-1,NRG-1+ecto-erbB4 (ecto-erbB4为人工提纯的erbB4包外段,可中和游离的NRG-1), NRG-1+CGP52432+BMI(CGP52432和BMI分别GABA受体A,B阻断剂),baclofen and muscimol (muscimol和baclofen分别为GABA受体A,B激动剂),NRG-1, baclofen and muscimol。给予1nM,5nM和10nMNRG-1,细胞死亡率分别为18.7073%±1.3083%,14.5508%±1.1598%和16.7418%±1.5110%,(分别与OGD组相比,均为P<0.01),表明NRG-1可以显著降低皮层神经元的死亡率,NRG-1对离体皮层神经元有明显的保护作用。这一结果同Byron D. Ford课题组的在体结果是一致的。erbB4+/+HER4heart(+/+)mice体外培养皮层神经元成熟后,做OGD模型成功后,计数细胞的死亡率为29.5737%±3.1727%,而erbB4-/-HER4heart(-／-)nice的细胞死亡率为50.3186%±2.7868%,两组相比P<0.01,erbB4-/-HER4heart(-/-)mice细胞死亡率明显高于erbB4+/+HER4heart(+／+)mice。因此,认为erbB4全脑敲除的mice与野生型mice相比,对OGD的敏感性增强。给予NRG-l+ecto-erbB4后,神经元的死亡率为25.4851%±2.3788%(与NRG-1组相比P<0.01),可以看出ecto-erbB4可以明显减弱NRG-1的神经保护作用。以上结果表明NRG-1的神经保护作用是通过NRG-1-erbB4途径发挥的。向OGD/R模型分别加入muscimol, b

关键词：氧-葡萄糖剥夺/复氧模型皮层神经元 NRG-1 GABA

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NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

引用

中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：吴翠莹李树基胡洪海朱心红梅林高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立... 详细信息

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立培养皮层神经元的氧-葡萄糖剥夺(OGD)/复氧(R)模型,通过细胞计数检测各组神经元死亡率。结果在氧-葡萄糖剥夺模型上,NRG-1具有明显的神经保护作用;单独给予ecto-erbB4以中和内源性NRG-1可使神经元死亡率升高;ecto-erbB4可明显减弱外源性NRG-1的神经保护作用;ErbB4受体敲除的神经元对OGD损伤更敏感。分别给予GABA受体激动剂muscimol、baclofen或同时给予baclofen和muscimol,均可降低神经元的死亡率,表明GABA受体激动剂对神经元有显著的保护作用。GABA受体阻断剂bicucullin可部分取消NRG-1的神经保护作用,并且NRG-1与GABA受体激动剂(muscimol+baclofen)的保护作用无协同作用。结论 NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用。

关键词：氧-葡萄糖剥夺/复氧模型皮层神经元 NRG-1 GABA

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