检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：管波中国科学院水生生物研究所

学位级别：博士

经遗传改良后的转基因鱼具有生长速度快、饵料转化效率高、抗冻耐寒、抗病能力强等优良性状，但是，迄今尚无一例作为食品的转基因鱼释放到自然水体中进行商品化养殖，其原因之一在于对转基因鱼可能的生态风险的担忧。全面衡量和评估转... 详细信息

经遗传改良后的转基因鱼具有生长速度快、饵料转化效率高、抗冻耐寒、抗病能力强等优良性状，但是，迄今尚无一例作为食品的转基因鱼释放到自然水体中进行商品化养殖，其原因之一在于对转基因鱼可能的生态风险的担忧。全面衡量和评估转基因鱼的生态风险是其商业化进程中的重要一环。水产养殖中，研究最多的环境因子有温度、溶氧、氨氮和亚硝酸氮，这些因子是影响集约化养殖的主要环境因子，特别是溶氧和氨氮。目前，有大量的研究表明，低氧和氨氮影响鱼类摄食、生长、发育和生殖等。研究转生长激素基因鲤鱼的溶氧需求、低氧耐受能力和氨氮耐受特性等生理特性，是评价转基因鱼生存力与竞争力的重要参数之一。　　本论文主要围绕低氧和氨氮这2个重要的环境因子展开研究，首先，研究了低溶氧和氨氮胁迫对转生长激素基因鲤鱼的生理生态的影响和转基因鱼的代谢特性;其次，以斑马鱼为模型，通过转植VHb基因，研究了转VHb基因斑马鱼对低溶氧和氨氮胁迫的耐受特性;最后，利用基因芯片技术研究了高氨胁迫下斑马鱼脑组织的基因表达谱。本论文的主要研究结果如下：　　 (1)比较研究了转生长激素基因鲤和对照鲤的呼吸代谢，发现转植外源生长激素基因没有改变受体鲤鱼的基础代谢特性。摄食后0-96h内，转基因鱼的平均耗氧率是对照鱼的的1.32倍，存在显著性差异;饥饿96h以后，96h至144h内转基因鱼和对照鱼的平均耗氧率无显著性差异。进一步研究转基因鱼与对照鱼饥饿和摄食后的窒息点，发现两者之间在饥饿条件下窒息点无显著性差异，而摄食后转基因鱼的窒息点高于对照鱼窒息点。　　 (2)通过分析长期饥饿条件下转基因鱼的身体组分和能量的变化，研究转基因鱼的饥饿应答特点，发现两者之间干重变化及能量消耗变化无显著性差异。进一步确证外源生长激素基因没有改变鲤鱼的基础代谢，并在一定程度上揭示了转基因鱼对饥饿的耐受特征。　　 (3)发现转基因鲤鱼对氨毒胁迫比姊妹群对照鱼更敏感，转基因鲤鱼在氨氮耐受能力方面比对照鱼差。在96小时的急性毒性试验中，虽然氨氮96小时半数致死浓度(LC50)在转基因鱼和姊妹群对照鱼之间没有显著性差异，但是，转基因鱼的平均生存时间比对照鱼短，且存在显著性差异。在0.117mgN/L、0.481mgN/L和0.905mgN/L的氨氮胁迫条件下经过21天氨氮慢性实验，发现不同浓度的氨氮胁迫下，转基因鱼的特定生长率随着氨氮浓度提高显著性下降;而对照鱼的特定生长率只在氨氮浓度0.905mgN/L才表现出显著性下降。同时也比较了非离子态氨氮慢性胁迫条件下两者的死亡率，发现转基因鱼比对照鱼死亡率高。在24h急性氨氮胁迫条件下转基因鱼的耗氧率随着氨氮浓度提高表现出显著性提高，但是，对照鱼的耗氧率随着氨氮浓度提高变化不显著。　　 (4)构建以鲤鱼β-actin启动子驱动的透明颤菌血红蛋白基因(VHb)的表达载体pCVCG，研制获得转VHb基因斑马鱼家系。低溶氧胁迫研究发现，在2.5％O2(0.91mg/l)条件下经过156h的低氧胁迫后，7日龄的F2代转VHb斑马鱼的生存率明显高于姊妹群对照鱼。同时，研究低氧胁迫下实验鱼的一些低氧应答的标志基因表达情况，这些基因的表达水平也成规律性变化，结果表明VHb可能有助于削弱低氧胁迫对斑马鱼的影响，进一步证实VHb能部分提高斑马鱼的低氧耐受能力。此外，8日龄F2代转基因鱼及其对照鱼的48h急性氨氮毒性胁迫实验发现，转基因鱼的半数致死浓度(LC50)高于对照鱼，结果表明转VHb基因斑马鱼增强了对氨氮胁迫的耐受能力。因此，通过转VHb基因有望研制具有耐受低溶氧和高氨胁迫的养殖鱼类新品种。　　 (5)用斑马鱼基因芯片(包含45220个基因/探针)检测了非离子氨浓度2.79±0.17mgN/L胁迫7天后斑马鱼脑组织的基因表达谱，发现3个生物学重复之间共有的显著性差异基因为1367个，其中上调表达的基因为1072个，下调表达的基因为295个。用网路工具GOstat和KOBAS对这些显著性差异基因进行基因功能注释和信号通路验证，统计方法为费舍尔的精确检验(Fisher'sExactTest)，这些差异表达基因经过GO富集和信号通路(pathway)富集，具有代表性的功能聚类主要集中在有关氮化合物代谢、碳水化合物代谢、凋亡、胁迫应答、对非特异免疫应答、半胱氨酸型肽酶和与神经发育几个方面。

关键词：转基因鱼氨氮毒性耐受机制基因芯片技术生理特性

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维生素C对氨氮胁迫下大鳞鲃幼鱼存活及鳃抗氧化酶活性的影响

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河南农业科学 2020年第1期49卷 157-164页

作者：梁俊平张静覃宝利王宣朋蔺玉华丁辰龙吴学军河南师范大学水产学院/河南省水产动物养殖工程技术研究中心河南新乡453007 江苏省农业科学院宿迁农科所江苏宿迁223800

为探究维生素C(Vc)对大鳞鲃幼鱼抗氨氮胁迫能力的影响,在水温(23.50±0.41)℃、pH值8.03±0.07条件下,选取体质量(3.71±0.60)g的大鳞鲃幼鱼,测定了氨氮对大鳞鲃幼鱼的24、48、72、96 h半致死质量浓度,分析了水体添加Vc对... 详细信息

为探究维生素C(Vc)对大鳞鲃幼鱼抗氨氮胁迫能力的影响,在水温(23.50±0.41)℃、pH值8.03±0.07条件下,选取体质量(3.71±0.60)g的大鳞鲃幼鱼,测定了氨氮对大鳞鲃幼鱼的24、48、72、96 h半致死质量浓度,分析了水体添加Vc对大鳞鲃幼鱼死亡率以及鳃抗氧化酶活性的影响。结果显示,氨氮对大鳞鲃幼鱼的24、48、72、96 h半致死质量浓度(LC 50)分别为34.95、33.84、31.42、30.02 mg/L,安全质量浓度(SC)为3.00 mg/L。在96 h氨氮全致死质量浓度胁迫下,大鳞鲃幼鱼死亡率随水体Vc添加量增加呈显著下降趋势。在1/2的96 h LC 50氨氮胁迫下(胁迫组),水体添加50 mg/L Vc后,大鳞鲃幼鱼超氧化物歧化酶(SOD)活性在24、96 h显著高于胁迫组(P<0.05),且与对照组无显著差异(P>0.05),过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性在48~96 h显著高于胁迫组(P<0.05);水体添加80 mg/L Vc后大鳞鲃幼鱼SOD活性在24~96 h显著高于胁迫组(P<0.05),且与对照组无显著差异(P>0.05),CAT和GSH-px活性在48~96 h均显著高于胁迫组(P<0.05),其中GSH-px活性在24~96 h与对照组无显著差异(P>0.05)。综上,氨氮胁迫下,大鳞鲃幼鱼的死亡率随氨氮质量浓度增加和胁迫时间延长呈线性增加,水体添加Vc可提高大鳞鲃幼鱼鳃抗氧化酶活性,增强其耐氨氮胁迫能力,降低大鳞鲃幼鱼死亡率。

关键词：大鳞鲃氨氮毒性维生素C 鳃死亡率抗氧化酶活性

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微生物对苦草氨氮耐受性的影响及机制

微生物对苦草氨氮耐受性的影响及机制

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作者：王爱丽南京大学

学位级别：硕士

近年来,越来越多的沉水植物从我国湖泊中退化甚至消失,而水体中高浓度氨氮被认为是沉水植物衰退的一个重要因素。传统的氨氮毒性测试均是在开放有菌体系中进行的,测试结果经常出现重复性低、时空差异性大等现象。本文重点探究了微生物... 详细信息

近年来,越来越多的沉水植物从我国湖泊中退化甚至消失,而水体中高浓度氨氮被认为是沉水植物衰退的一个重要因素。传统的氨氮毒性测试均是在开放有菌体系中进行的,测试结果经常出现重复性低、时空差异性大等现象。本文重点探究了微生物对氨氮毒性测试的影响,以沉水植物苦草作为受试生物,通过比较有菌开放体系与无菌体系下苦草对氨氮耐受的差异,阐明微生物对氨氮毒性测试的重要影响。进一步在特定条件下,通过向体系中外加碳源,促进微生物在短期内迅速生长,着重观察苦草的生理响应、体系理化指标的改变以及微生物群落结构的变化,以期探明微生物对苦草氨氮耐受性影响的机制。研究结果表明:(1)在无菌条件下,苦草对氨氮的耐受值(>75.94 mg/L)要远高于有菌开放体系下的耐受阈值(22.50 mg/L)。在有菌开放体系暴露下,7.50 mg/L的氨氮已经对苦草体内的碳和氮代谢造成干扰,22.50 mg/L的氨氮暴露则使苦草叶片出现枯黄症状。(2)氨氮可促进体系微生物的增殖,尤其当体系中存在有利于微生物生长的环境因子时(如外加碳源),短暂的暴露(2d)即造成苦草的衰亡。同时,水体的DO迅速降低(低至0 mg/L)以及NO2--N不断积累(高达13.38 mg/L)。(3)经验证无菌条件下短期的低氧胁迫并不会造成苦草的迅速死亡,但氧气的通入会在很大程度上缓解体系中大量微生物滋生造成的低氧胁迫。(4)同时,在无菌条件下,高浓度亚硝态氮(15 mg/L)对苦草毒性较低。不含亚硝态氮的代谢产物在短期内对苦草的毒性作用很微弱。然而,当代谢产物中含有大量亚硝态氮(15 mg/L)时,两者的联合作用会造成苦草迅速死亡(2 d),这是造成有菌条件下植物氨氮耐受性降低的一个重要因素。(5)通过测定微生物数量及群落结构的变化发现,氨氮虽然会促进微生物数量的增加,但会降低微生物菌群的多样性,促进单一微生物的生长如,Y-变形菌,这类微生物会代谢产生大量NO2-N的积累以及其他的代谢产物,并造成低氧胁迫的环境。代谢产物的联合毒性效应是造成有菌体系下植物氨氮耐受性降低的一个重要因素,而微生物对体系中一些理化指标改变的作用,如低溶氧,则进一步加强了其胁迫效应。因而,在利用水生植物进行氨氮的生态毒理学风险评价时要充分考虑微生物的作用。

关键词：微生物氨氮毒性苦草微生物代谢产物微生物群落结构

来源：评论

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氨氮胁迫诱发黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)谷氨酰胺累积、氧化损伤及免疫抑制的研究

氨氮胁迫诱发黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)谷氨酰胺累积、氧...

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第十届世界华人鱼虾营养学术研讨会

作者：袁莉霞黎明孟庆珍黎庆王日昕宁波大学海洋学院宁波315211

本研究拟通过为期28天的毒性实验，查明亚致死浓度的氨氮(5.70 mg/L)胁迫对黄颡鱼幼鱼生理机能的响应.结果发现，实验鱼大脑中的氨氮含量在实验开始后迅速升高，在1d时升高了19倍(7.36 μmol/g)，相比之下，肝脏中的氨氮含量在12h时已... 详细信息

本研究拟通过为期28天的毒性实验，查明亚致死浓度的氨氮(5.70 mg/L)胁迫对黄颡鱼幼鱼生理机能的响应.结果发现，实验鱼大脑中的氨氮含量在实验开始后迅速升高，在1d时升高了19倍(7.36 μmol/g)，相比之下，肝脏中的氨氮含量在12h时已达到最高水平(15.48 μmol/g);尽管实验鱼大脑和肝脏中的谷氨酰胺含量在为期28天的实验过程中持续升高，但谷氨酸含量却始终未发生改变;实验鱼大脑中的总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶活性从0h至28 d逐渐降低，而肝脏中总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶活性在12h时达到最高，之后逐渐降低;在整个实验过程中，实验鱼大脑和肝脏中的硫代巴比妥酸含量逐渐升高;实验鱼肝脏中的溶菌酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性在14 d时达到最低.结果提示，大脑中谷氨酰胺积累并不是导致鱼类氨中毒的主要原因;有毒的自由基并不能被机体的抗氧化酶体系完全清除;免疫抑制的发生需要经历免疫抑制因子逐渐积累的过程.本研究认为，鱼类氨中毒是由多因素联合效应导致的.

关键词：氨氮毒性星状胶质细胞肿胀氧化应激免疫抑制黄颡鱼

来源：评论

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