检索结果-内蒙古大学图书馆

应用昆虫学报 2018年第1期55卷 87-95页

作者：贺康郭金梦李飞林克剑王桂荣中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 南京农业大学植物保护学院南京210095

【目的】为明确水稻条纹叶枯病毒(Rice stripe virus,RSV)侵染对灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)生长发育的影响,本文比较研究了带毒与无毒灰飞虱发育历期及寿命、卵巢发育及体内相关酶活力等生物学特征和生理生化指标间的... 详细信息

【目的】为明确水稻条纹叶枯病毒(Rice stripe virus,RSV)侵染对灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)生长发育的影响,本文比较研究了带毒与无毒灰飞虱发育历期及寿命、卵巢发育及体内相关酶活力等生物学特征和生理生化指标间的差异。【方法】利用单管饲养法,比较分析了带毒与无毒灰飞虱若虫历期与成虫寿命;通过解剖灰飞虱卵巢,观察并统计不同卵子级别与数量,研究携带RSV病毒对灰飞虱卵巢发育的影响;利用多种酶活力测定方法,比较带毒与无毒灰飞虱若虫期5种相关酶活力的差异。【结果】无毒灰飞虱雌、雄若虫历期分别为(16.30±0.33)d和(15.62±0.21)d;带毒灰飞虱雌、雄若虫历期分别为(19.08±0.43)d和(18.50±0.58)d,表明RSV侵染显著延缓了灰飞虱若虫的生长发育(t-test,P<0.001);而无毒灰飞虱雌、雄成虫寿命分别为(10.74±0.81)d和(14.46±1.34)d;带毒灰飞虱雌、雄成虫寿命分别为(9.09±1.27)d和(13.55±2.38)d,表明RSV侵染对灰飞虱成虫发育没有显著影响。解剖羽化后的灰飞虱卵巢经统计分析后,发现RSV侵染后灰飞虱的卵巢发育及卵子发生并未受到明显影响。对发育至3龄若虫后12、24、120 h的无毒与带毒灰飞虱进行相关的酶活力测定,包括保护酶系超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT、解毒酶系谷胱甘肽-S转移酶GST和乙酰胆碱酯酶Ach E,发现RSV侵染对灰飞虱体内相关生化酶活力大小无明显影响,但可改变酶活力的变化趋势。【结论】RSV侵染显著延长灰飞虱若虫发育历期,但对成虫的寿命和卵巢发育无明显影响,对体内保护、解毒等相关代谢酶活力大小没有显著影响,但却可以改变酶活力的变化趋势,推测RSV与灰飞虱不存在典型的互惠互利关系。

关键词：灰飞虱水稻条纹叶枯病毒寿命卵巢发育酶活力

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水稻条纹叶枯病毒天津分离物中病害特异性蛋白编码基因的克隆及序列分析

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南开大学学报（自然科学版） 2010年第3期43卷 101-107页

作者：白雪亮朱晔荣周维李艳萍牛景王勇南开大学生命科学学院天津300071 天津市水稻研究所天津300112

采用RT-PCR的方法,对水稻条纹叶枯病毒天津分离物的病害特异性蛋白编码基因进行了扩增,将其克隆到pUCm-T载体后进行序列测定与分析.结果表明,该病毒分离物的病害特异性蛋白编码基因的开放阅读框由537个碱基组成,编码的蛋白含178个氨基酸... 详细信息

采用RT-PCR的方法,对水稻条纹叶枯病毒天津分离物的病害特异性蛋白编码基因进行了扩增,将其克隆到pUCm-T载体后进行序列测定与分析.结果表明,该病毒分离物的病害特异性蛋白编码基因的开放阅读框由537个碱基组成,编码的蛋白含178个氨基酸.与GenBank中已有的病害特异性蛋白编码基因进行序列比对,其与分离自北京双桥的SQ、河南原阳的YY、辽宁盘锦的PJ翻译产物只有143位的一个氨基酸的差异.

关键词：水稻条纹叶枯病毒天津分离物病害特异性蛋白序列分析

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水稻条纹叶枯病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2010年第1期31卷 76-80页

作者：戈林泉赵伟春祝树德娄永根浙江大学昆虫科学研究所浙江杭州310029 扬州大学园艺与植物保护学院江苏扬州225009 浙江中医药大学生物工程学院浙江杭州310053

以提纯的水稻条纹叶枯病毒(RSV)粒子作为抗原免疫BALB/c小鼠脾细胞,并与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆筛选,获得1株能稳定分泌针对RSV蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株1H2。利用该细胞株制备了腹水型单克隆抗体,经检测,该单克隆抗体的间接E... 详细信息

以提纯的水稻条纹叶枯病毒(RSV)粒子作为抗原免疫BALB/c小鼠脾细胞,并与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆筛选,获得1株能稳定分泌针对RSV蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株1H2。利用该细胞株制备了腹水型单克隆抗体,经检测,该单克隆抗体的间接ELISA效价达1∶1.024×106,且与水稻、灰飞虱、褐飞虱和白背飞虱的蛋白均不发生交叉反应,检测的灵敏度为抗原蛋白稀释1∶2.14×104倍,对应的抗原浓度为25.89μg.L-1。按常规饱和硫酸铵沉淀法纯化了单克隆抗体1H2,测定其IgG含量为6.05 g.L-1。该单克隆抗体可用于监测田间RSV的发生动态。

关键词：灰飞虱水稻条纹叶枯病毒单克隆抗体 ELISA

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水稻条纹叶枯病毒的土传媒介研究

水稻条纹叶枯病毒的土传媒介研究

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作者：万宇南京农业大学

学位级别：硕士

水稻条纹叶枯病(rice stripe)由水稻条纹病毒(rice stripe virus, RSV)引起,是当前在我国水稻生产中分布广,发生重,为害大的重要病毒病。近年来对我国水稻生产造成严重威胁和巨大的经济损失,现已成为江苏省水稻生产上的主要病害之一。... 详细信息

水稻条纹叶枯病(rice stripe)由水稻条纹病毒(rice stripe virus, RSV)引起,是当前在我国水稻生产中分布广,发生重,为害大的重要病毒病。近年来对我国水稻生产造成严重威胁和巨大的经济损失,现已成为江苏省水稻生产上的主要病害之一。江苏省主要粮食产区多为稻-麦轮作为主的一年两熟制,近年来水稻条纹叶枯病在江淮地区流行有明显加重的趋势。小麦条纹病毒病与水稻条纹叶枯病为同一病毒所致,因而也有人认为,是长年的稻麦轮作、两种病害交替发生,促使了水稻条纹叶枯病的爆发或加重。自水稻条纹叶枯病在中国有研究报道以来,学术界普遍认同水稻条纹叶枯病是由灰飞虱(Laodelphaxstriatellu)传播的一种虫媒病害,有关该病传播途径的研究也全部集中在灰飞虱上。然而,高效农药和连年高强度的杀虫措施似乎并没能遏制该病近年来加重的趋势。我们在对稻麦多年轮作的试验田的中注意到,水稻条纹叶枯病不仅有逐年加重的趋势而且也具备一些与土传病害类似的特征。为了确定水稻感条纹叶枯病毒病除了灰飞虱刺吸传毒外,是否存在着土传途径,我们从南京农业大学水稻所网室连年高发条纹叶枯病的稻池土壤中,分离出42种不同形态特征的菌株,其中放线菌7种,霉菌3种,细菌32种。对所有这些菌株均以RSV的CP基因引物进行了PCR检查,发现有一个细菌菌株能扩增出与发病水稻叶片RNA的RT-PCR产物类似的单一和清晰的990bp±的特异性条带,而其余各种菌株都没有相应的PCR产物。将该菌株送两家不同商业测序公司进行细菌16S-rRNA测序定名,两家公司结果均为与Chryseobacterium aquaticum ***.100%同源,确定该菌株为金黄杆菌属的水生金黄杆菌。采用盆栽根系接种鉴定的方法,进行了8次稻苗根系接种水生金黄杆菌试验,其中感条纹叶枯病品种(日本晴、R109、武育梗)共七次、抗条纹叶枯病品种(IR36)一次。接菌后逐日观察记录发病情况,结果显示感病品种的7次接菌试验的4周发病株率为18.1～25%,平均发病株率22%,发病时间持续10天左右；而7次不接菌对照的4周发病株率仅为0～2.5%,平均发病株率0.96%。不同感病品种在不同时期的接种发病率没有太大的波动,基本上在20%左右。抗条纹叶枯病品种IR36无论接菌与否均不发病。这表明用水生金黄杆菌根部接种确能诱发水稻条纹叶枯病毒病,而抗病品种的抗条纹叶枯病基因对于根部接菌也表现出了充分的抗病性。为了确定接种水生金黄杆菌后发病株是否有条纹叶枯病毒,我们对参试的所有植株都进行了RT-PCR检查。结果发现所有接种试验的发病植株不仅病状与田间自然发病株相同,而且其病叶用RSV病毒的外壳蛋白基因引物都可以扩出一条单一清晰的990 bp的条带,用RSV病毒的毒蛋白基因引物都能扩出500bp的条带,这些条带经外送商业公司测序表明是对应的条纹叶枯病毒序列。而不接菌对照和无典型心叶卷曲病状的接菌后植株除有个别的能扩出这两条带之外其余植株均没有PCR产物。从而初步确定,水稻条纹叶枯病也是一种土传性病害,其病原病毒的介体是水生金黄杆菌。

关键词：水稻水稻条纹叶枯病毒土传性土传媒介水生金黄杆菌

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单头灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速检测

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植物学通报 2008年第4期25卷 459-464页

作者：曲志才沈大棱曲阜师范大学生命科学学院曲阜273165 复旦大学遗传学研究所上海200433

利用RT-PCR检测感病植株和单头带毒灰飞虱,均扩增出水稻条纹叶枯病毒特有的一个长540 bp的片段,且人工饲毒虫的病毒含量高于自然感病稻田虫。以病毒S蛋白的多克隆抗血清,采用Western印迹技术从单虫体内检测到病毒抗原的2个专一性条带,... 详细信息

利用RT-PCR检测感病植株和单头带毒灰飞虱,均扩增出水稻条纹叶枯病毒特有的一个长540 bp的片段,且人工饲毒虫的病毒含量高于自然感病稻田虫。以病毒S蛋白的多克隆抗血清,采用Western印迹技术从单虫体内检测到病毒抗原的2个专一性条带,大小分别为20.7和19.7 kDa。DIBA(dot immunobinding assay)检测法快速、简便,但专一性和灵敏度不及RT-PCR与Western印迹检测。对不同检测方法所得昆虫带毒率差异的原因进行了探讨。

关键词：灰飞虱水稻条纹叶枯病毒病毒检测

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水稻条纹叶枯病毒RNA干扰载体的构建及遗传转化

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山东农业科学 2011年第2期43卷 1-6页

作者：李海青柳絮李臻姚方印刘炜山东师范大学生命科学学院山东济南250014 山东省农业科学院高新技术研究中心/山东省作物遗传改良与生物技术重点实验室山东济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100

利用已知的水稻条纹叶枯病毒的序列设计了12对引物,利用这些引物经RT-PCR获得了5条序列,经BLAST分析,它们均与水稻基因组内的序列完全不匹配,可以用来作为干扰序列。将这5个序列构建入由pUC19改造的一段内含子两侧各含有一对同尾酶的干... 详细信息

利用已知的水稻条纹叶枯病毒的序列设计了12对引物,利用这些引物经RT-PCR获得了5条序列,经BLAST分析,它们均与水稻基因组内的序列完全不匹配,可以用来作为干扰序列。将这5个序列构建入由pUC19改造的一段内含子两侧各含有一对同尾酶的干扰载体中,然后再将整个RNA干扰片段构建入经改造的以玉米泛素Ubi为启动子、以生物安全性的bar基因为选择标记的植物双元表达载体pCAMBIA1300中,经农杆菌介导对黄淮稻区主栽水稻品种圣稻13进行遗传转化,为抗条纹叶枯病水稻新品种的培育提供了候选材料。

关键词：水稻条纹叶枯病毒 RNA干扰载体 Ubi启动子 bar基因抗病水稻品种

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灰飞虱体内微生物群落多样性以及Wolbachia与水稻条纹叶枯病毒（RSV）的互作关系的研究

灰飞虱体内微生物群落多样性以及Wolbachia与水稻条纹叶枯病毒（R...

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作者：张旭南京农业大学

学位级别：博士

昆虫体内存在着多种微生物,它们与寄主在长期的进化过程中形成了复杂的关系。研究昆虫体内微生物的组成与结构,有助于更好地了解微生物与寄主之间的相互关系、深入挖掘微生物资源以及利用微生物防控害虫。灰飞虱Laodelphax striatellus(... 详细信息

昆虫体内存在着多种微生物,它们与寄主在长期的进化过程中形成了复杂的关系。研究昆虫体内微生物的组成与结构,有助于更好地了解微生物与寄主之间的相互关系、深入挖掘微生物资源以及利用微生物防控害虫。灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)是我国重要的农业害虫,是我国水稻上为害最严重的三种飞虱之一。灰飞虱传播的水稻条纹叶枯病毒造成了巨大的经济损失。在灰飞虱体内存在大量的微生物,这些微生物在与灰飞虱共同进化过程中形成了复杂的关系。但是,灰飞虱体内微生物群落的具体组成与结构以及微生物与寄主灰飞虱之间的互作机制尚不清楚。考虑到灰飞虱的爆发与为害特性,以及微生物在害虫防控中的应用潜力,需要系统全面的研究灰飞虱体内微生物群落的组成与结构以及与寄主之间的互作机制。在本研究中,我们首先利用16S rRNA高通量测序技术对灰飞虱体内的微生物群落进行了测定,分析了微生物群落的组成与结构;其次,我们又进一步分析了灰飞虱三个重要部位(头部、肠道和卵巢)内的微生物组成与多样性,并对不同部位中的微生物群落的功能进行了分析;随后,我们分析了环境影响因子抗生素(四环素)对灰飞虱体内微生物多样性的影响,并进一步探究四环素处理对灰飞虱体内微生物群落功能的影响;最后,我们研究了灰飞虱中重要共生菌Wolbachia与灰飞虱携带的水稻条纹叶枯病毒(RSV)的互作关系,尝试寻找灰飞虱中的一些重要微生物对灰飞虱为害进行防治。研究结果如下:1.灰飞虱体内微生物群落的组成与结构我们利用16S rRNA高通量测序技术,对灰飞虱体内的微生物群落进行了系统的研究与分析。研究发现,在灰飞虱中变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度较高,占灰飞虱体内所有细菌总丰度的99%以上;在纲水平,α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)、芽孢杆菌纲(Bacilli)、拟杆菌纲(Bacteroidia)、梭菌纲(Clostridia)、放线菌纲(Actinobacteria)和丹毒丝菌纲(Erysipelotrichia)的相对丰度较高;在属水平,Asaia和Wolbachia在灰飞虱体内的相对丰度较高,占灰飞虱体内所有细菌总丰度的77%左右,其他相对丰度较高的细菌为 Bacteroides、Enterococcus、unclassified f Enterobacteriaceae、Acinetobacter、Streptococcus和Lactobacillus。结果表明灰飞虱体内含有丰富的微生物,对挖掘灰飞虱体内的微生物资源提供了依据。2.灰飞虱不同部位中微生物群落的组成与结构多样性在前一章中对灰飞虱体内的微生物群落做了分析后,我们又进一步对灰飞虱比较重要的三个部位(头部、肠道和卵巢)中的微生物群落进行了研究,以便揭示微生物在灰飞虱不同部位之间的功能与影响。通过比较三个部位之间微生物群落的组成与结构多样性,我们发现变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门是灰飞虱三个部位中的优势细菌类群;PCoA分析显示,细菌群落根据灰飞虱不同部位(肠道、头部和卵巢)有一定的聚类性,肠道内的细菌群落区分于头部和卵巢;而三个部位中的优势微生物也不相同,在肠道中Asaia的相对丰度最高,而头部和卵巢中Wolbachia的相对丰度更高。通过对三个部位微生物群落的功能分析发现,在一些营养代谢通路中,三个部位差异显著。结果表明了灰飞虱不同部位内的微生物群落组成与多样性存在差异,并且在不同部位中的微生物对灰飞虱的影响也不相同,进一步说明了不同部位的微生物对寄主的影响不同。3.抗生素处理对灰飞虱体内微生物群落组成与结构多样的影响在对灰飞虱体内及不同部位微生物做了系统的研究后,我们又对环境因子抗生素是否会影响灰飞虱体内微生物进行了探究。我们利用16S rRNA高通量测序技术,检测分析了四环素处理对灰飞虱微生物群落多样性的影响。结果表明,抗生素处理能够改变灰飞虱体内细菌群落的组成与多样性以及一些细菌的相对丰富度。四环素处理后,灰飞虱体内的厚壁菌门和拟杆菌门细菌的相对丰度显著下降,但变形菌门细菌的相对丰度显著上升。四环素处理降低了Wolbachia、拟杆菌和肠球菌的相对丰度,但是Asaia的相对丰度变化不大。四环素处理后,头部和卵巢中的变形菌门细菌的相对丰度明显减少,而肠道中的变形菌门细菌的相对丰度反而增加,此外,厚壁菌门和拟杆菌门细菌在肠道中的相对丰度显著低于头部和卵巢,功能分析结果表明抗生素对肠道影响较大。这些结果揭示了抗生素处理对灰飞虱细菌群落组成及多样性有显著影响,结果对灰飞虱的防控提供了一种新的思路。4.灰飞虱中共生菌Wolbachia与水稻条纹叶枯病毒(RSV)间的互作关系

关键词：灰飞虱微生物群落 16S rRNA Wolbachia 水稻条纹叶枯病毒

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水稻条纹叶枯病毒的寄主植物

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植物保护 1984年第3期 22-23页

作者：阮义理金登迪许如银浙江省农科院植物保护研究所

近年来我国水稻条纹叶枯病有明显加重趋势,在苏南、上海、北京市郊和云南省的部分地区尤为严重,已成为水稻的主要病害之一。为了解其病毒的侵染循环和流行因素,我们于1981年至1983年对本病的寄主范围进行了研究。

关键词：寄主植物水稻条纹叶枯病毒灰稻虱

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灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速检测及Wolbachia KefKL功能研究

灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速检测及Wolbachia KefKL功能研究

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作者：蔡丽君复旦大学

学位级别：硕士

水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus, RSV)是单链负义编码的RNA病毒,它能引发水稻条纹叶枯病,导致水稻产量严重下降.这种病毒主要经灰飞虱传播,可以在灰飞虱体内复制并经卵传给下一代.所以,灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速而准确的... 详细信息

水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus, RSV)是单链负义编码的RNA病毒,它能引发水稻条纹叶枯病,导致水稻产量严重下降.这种病毒主要经灰飞虱传播,可以在灰飞虱体内复制并经卵传给下一代.所以,灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速而准确的检测对水稻条纹叶枯病的预测和防治都具有重要的意义.在这里,我们采用RT-PCR的方法对单个传毒灰飞虱体内的水稻条纹叶枯病毒进行了检测.用位于水稻条纹叶枯病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶基因上的一对引物,我们从带毒灰飞虱和染病水稻叶上都特异性地得到了445bp的PCR产物.同时,在灰飞虱actin基因内含子和外显子相连处设计了一对引物,其PCR产物做为RNA特异的阳性对照,从而保证RT-PCR结构的准确性.我们还优化了双重RT-PCR的条件,即一次PCR反应得以同时检测水稻条纹叶枯病毒和灰飞虱actin基因的存在.我们的实验结果表明RT-PCR方法可以快速而准确地检测出灰飞虱带毒与否,从而得以对水稻条纹叶枯病的爆发进行早期监测.

关键词：水稻条纹叶枯病毒灰飞虱 RT-PCR Wolbachia KefKL KefB 丙酮醛

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嘉兴灰飞虱携带及传播水稻条纹叶枯病毒研究

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中国稻米 2013年第3期19卷 52-54页

作者：曹奎荣朱金良陶献国王华弟钟雪明孙祥良浙江省嘉兴市农科院浙江嘉兴314016 浙江省嘉兴市农经局浙江嘉兴314050 浙江省嘉兴市秀洲区农经局浙江嘉兴314001 浙江省植物保护检疫局浙江杭州310029

为了掌握浙江嘉兴各地灰飞虱对水稻条纹叶枯病毒的携带和传播规律,2006-2011年笔者采用生物测定法测定了灰飞虱对水稻条纹叶枯病病毒的传毒率,并对2008-2011年的灰飞虱采用斑点免疫法测定了其对该病毒的带毒率。检测结果表明,灰飞虱带... 详细信息

为了掌握浙江嘉兴各地灰飞虱对水稻条纹叶枯病毒的携带和传播规律,2006-2011年笔者采用生物测定法测定了灰飞虱对水稻条纹叶枯病病毒的传毒率,并对2008-2011年的灰飞虱采用斑点免疫法测定了其对该病毒的带毒率。检测结果表明,灰飞虱带毒率和传毒率在嘉兴不同县、市间均存在差异,且年份间高低有变化。

关键词：灰飞虱水稻条纹叶枯病毒检测方法

来源：评论

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