检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2009年第8期29卷 51-56页

作者：高芳銮范国成沈建国谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建省植物病毒学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所福州350002 福建省农业科学院果树研究所福州350013 福建出入境检验检疫局福州350001

为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDVP8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌***21... 详细信息

为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDVP8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌***21(DE3),在IPTG诱导下表达。利用表达的融合蛋白免疫家兔,制备了抗血清,并以RGDV、水稻矮缩病毒(RDV)、水稻条纹病毒(RSV)、水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)4种病毒作为供试材料进行特异性检测。分析显示P8蛋白在C端位置有一个典型的跨膜螺旋区,整个蛋白也具有Phytoreo P8家族共有的典型结构域Phytoreo P8 domain。SDS-PAGE和蛋白印记分析表明,RGDVP8融合蛋白分子量约为73kDa,以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清,为水稻瘤矮病毒的快速检测及P8蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词：水稻瘤矮病毒 P8蛋白结构分析融合蛋白抗血清

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水稻瘤矮病毒广东分离物基因组第10组分的序列分析及原核表达

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植物病理学报 2008年第4期38卷 352-356页

作者：赵芹阮小蕾陈秀刘福秀李华平华南农业大学资源环境学院广州510642

应用RT-PCR技术克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)广东分离物基因组的第10片段,并测定了全序列。结果表明,RGDV广东分离物S10(登录号EF532325)全长1 198 bp,含有一个ORF,编码一条由320氨基酸组成、推测分子量约36 kDa的... 详细信息

应用RT-PCR技术克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)广东分离物基因组的第10片段,并测定了全序列。结果表明,RGDV广东分离物S10(登录号EF532325)全长1 198 bp,含有一个ORF,编码一条由320氨基酸组成、推测分子量约36 kDa的多肽。与泰国分离物相应组分相比,基因结构基本一致,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.2%和98.8%;S10编码多肽与水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)S9编码蛋白及伤瘤病毒(Wound tumor virus,WTV)S11编码蛋白也分别具有29%和33%的相似性。本研究还将S10 cDNA克隆至原核表达载体pET28b(+)上,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达,并利用His. Bind树脂纯化得到电泳纯级制品。本工作为进一步研究S10编码蛋白的结构与功能奠定了一定的基础。

关键词：水稻瘤矮病毒序列分析原核表达蛋白纯化

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水稻瘤矮病毒P12蛋白抗血清制备及其应用

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植物保护学报 2013年第5期40卷 413-417页

作者：孟媛辛星羊健张恒木王建明陈剑平浙江师范大学化学与生命科学学院金华321004 山西农业大学农学院植物病理系太谷030801 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部植物保护与生物技术重点开放实验室浙江省植物病毒重点开放实验室杭州310021

为了进一步研究水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)P12的功能,将RGDV-GX P12编码区亚克隆至原核表达载体,并导入大肠杆菌诱导表达;重组的P12融合蛋白经Ni-NTA His·Bind Resins纯化后用于免疫小鼠制备抗血清,并进行Western b... 详细信息

为了进一步研究水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)P12的功能,将RGDV-GX P12编码区亚克隆至原核表达载体,并导入大肠杆菌诱导表达;重组的P12融合蛋白经Ni-NTA His·Bind Resins纯化后用于免疫小鼠制备抗血清,并进行Western blotting分析。结果显示,约41 kD大小的RGDV P12融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达;利用该重组蛋白所制备的抗血清可特异地与融合表达和非融合的P12蛋白发生强烈的免疫学反应。利用该特异性抗血清在病毒粒子样品中检测不到P12蛋白,而在病株总蛋白样品中可检测到1条与预期大小一致的明显条带,表明RGDV P12是一种非结构蛋白。

关键词：水稻瘤矮病毒 P12 原核表达抗血清

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水稻瘤矮病毒S11基因沉默抑制子的原核表达及抗血清制备

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植物病理学报 2010年第6期40卷 574-578页

作者：赵芹沈文锦张翼翔刘福秀李华平华南农业大学植物病毒研究室广州510642 广东省农业科学院蔬菜研究所广州510640

以采自广东省水稻瘤矮病的典型病株为材料,通过RT-PCR法扩增和克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)S11组分核苷酸序列全长。序列分析结果表明,RGDV广东分离物S11(登录号EF532326)核苷酸序列全长1168bp,含有一个1068bp的开... 详细信息

以采自广东省水稻瘤矮病的典型病株为材料,通过RT-PCR法扩增和克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)S11组分核苷酸序列全长。序列分析结果表明,RGDV广东分离物S11(登录号EF532326)核苷酸序列全长1168bp,含有一个1068bp的开放阅读框,编码一条355个氨基酸的多肽,推测分子量约40kD,与泰国分离物基因结构基本一致,其核苷酸与氨基酸序列相似性分别为94.3%和98.8%。将广东分离物S11基因克隆至pBV221温敏表达载体上,在大肠杆菌DH5α中实现了高效表达。以诱导蛋白为抗原免疫家兔获得了抗血清。利用ELISA法测定抗血清的效价为1∶4096,Western blot分析结果表明,抗血清能与S11蛋白发生特异血清学反应。这可为进一步研究S11蛋白的结构和功能,揭示其抑制基因沉默的作用机制提供参考。

关键词：水稻瘤矮病毒基因沉默抑制子原核表达抗血清制备

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水稻瘤矮病毒S6和S7序列分析与S11抑制子鉴定

水稻瘤矮病毒S6和S7序列分析与S11抑制子鉴定

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作者：刘福秀华南农业大学

学位级别：博士

本文测定了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus，RGDV)S6、S7两个片段的序列，并对S11的功能进行了分析，为最终控制该病毒奠定了一定基础。根据已报道的RGDV各片段末端序列及其反向重复特性，通过巧妙的引物设计，采用多轮RT-PCR... 详细信息

本文测定了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus，RGDV)S6、S7两个片段的序列，并对S11的功能进行了分析，为最终控制该病毒奠定了一定基础。根据已报道的RGDV各片段末端序列及其反向重复特性，通过巧妙的引物设计，采用多轮RT-PCR 结合生物信息学的方法首次测定了该病毒基因组S6和S7两个片段的全长序列。序列测定结果表明，S6全长1651 bp，G+C含量为39.13％，包含一个长的开放阅读框(open reading frame，ORF，)，起始于第25位，终止于第1 497位，编码490个氨基酸，推测的分子量为53.3 kDa。该蛋白与WTV的P7的相似性为30.0％，与RDV的P7的相似性为31.7％。S7全长1 652 bp，G+C含量为40.01％，包含一个长的ORF，起始于第41位，终止于第1 576位，编码511个氨基酸，推测的分子量为57 kDa。该蛋白与WTV的 Pns7的相似性为18.9％，与RDV的Pns6的相似性为20.1％。 RNA沉默是高等动、植物抵抗病毒侵染的一种重要防御机制，许多病毒都编码RNA沉默抑制子通过干扰沉默途径的各个阶段，来克服这种抗性防御机制。本研究鉴定出了RGDV S11编码蛋白是一个RNA沉默抑制子，同时验证了S11编码蛋白抑制子的相关功能。采用农杆菌共渗透的方法感染转绿色荧光蛋白(GFP)基因的本生烟(Nicotiana benthamiana line 16c)后，通过对GFP基因的表型观察和分子检测，鉴定出了S11编码蛋白通过抑制沉默信号的产生或阻止沉默信号的传递能有效抑制正义GFP RNA引起的局部和系统基因沉默。用同样的方法本研究验证了S11编码蛋白能够增强转基因本生烟(*** line 16c)中源GFP基因的表达。采用PVX病毒载体侵染野生型本生烟(***)验证了S11编码蛋白是PVX系统中的一个致病决定子，该蛋白能够增强PVX病毒在寄主上的危害。同时实验证明，所有这些功能都是由S11编码蛋白、而非其RNA所实现的。

关键词：水稻瘤矮病毒基因组序列 RNA沉默抑制子鉴定

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水稻瘤矮病毒病毒样颗粒组装及Pns12蛋白的亚细胞定位

水稻瘤矮病毒病毒样颗粒组装及Pns12蛋白的亚细胞定位

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作者：范国成福建农林大学

学位级别：博士

水稻瘤矮病毒（Rice gall dwarf virus,RGDV）属于呼肠孤病毒科植物呼肠孤病毒属,自20世纪80年代初在泰国发现以来,已在马来西亚、中国、日本和韩国等水稻产区相继发生且有逐年加重的趋势,对水稻生产造成重大危害。目前虽然已经获得了R... 详细信息

水稻瘤矮病毒（Rice gall dwarf virus,RGDV）属于呼肠孤病毒科植物呼肠孤病毒属,自20世纪80年代初在泰国发现以来,已在马来西亚、中国、日本和韩国等水稻产区相继发生且有逐年加重的趋势,对水稻生产造成重大危害。目前虽然已经获得了RGDV基因组12个片段的全序列,但对其基因组各片段编码蛋白所进行的功能研究还不多。为此,本论文利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将P3和P8两个主要结构蛋白在昆虫细胞中进行表达,探讨其装配形成病毒样颗粒（Virus-like particles,VLPs）的特点,并对Pnsl2蛋白进行亚细胞定位研究。利用RT-PCR方法获得RGDV的内层衣壳蛋白基因S3,并克隆至pMD-18T载体,EcoRⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒pMD-S3,将S3基因亚克隆到pET-32a表达载体上,转化大肠杆菌（Escherichia coli）E coli Rosetta（DE3）Ⅱ,经IPTG诱导要S3基因获得了表达,SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量与预期的重组蛋白分子量相符。将获得的P3重组蛋白免疫大耳白兔制备了多克隆抗体,间接ELISA法测定抗血清效价为1:20480,Western blot印迹分析表明所制备的抗血清具有较强的特异性,可用于核心样颗粒（Core-like particles,CLPs）和病毒样颗粒的组装研究。将S3和S8基因分别克隆到杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBac中,构建二个重组转移质粒:pFB-S3和pFB-S8;将S3和S8基因同时克隆到供体质粒pFastBacDual中,首次构建成双价重组转移质粒pFD-S3/S8。分别将它们转化大肠杆菌DH10Bac,得到三种重组杆粒:rbpFB-S3、rbpFB-S8和rbpFD-S3/S8,经鉴定后分别转染Sf9（Spodoptera frugiperda,Sf9）细胞,获得三种重组病毒:rvpFB-S3、rvpFB-S8和rvoFD-S3/S8。通过四次再感染新鲜Sf9昆虫细胞,裂解后进行SDS-PAGE和Westernblot分析,发现重组病毒rvpFB-S3表达了分子量约为116 kDa的P3蛋白,重组病毒rvpFB-S8表达了分子量约为47 kDa的P8蛋白,重组病毒rvpFD-S3/S8既表达了P3蛋白又表达了P8蛋白,表明RGDV结构基因在昆虫细胞内获得成功表达。将重组病毒感染的Sf9昆虫细胞与昆虫细胞蛋白抽提液混合,10000 r/m离心10min,上清以磷钨酸负染,通过透射电镜观察,rvpFB-S3感染的细胞裂解上清可见到直径约40 nm单层衣壳的的核心样颗粒,共表达P3和P8蛋白的细胞裂解上清可观察到形态和大小都和RGDV病毒粒体一致的病毒样颗粒,但单独表达P8蛋白时并没有观察到病毒样颗粒结构,说明体外共表达P3和P8蛋白可以形成双层衣壳的病毒样颗粒结构。利用Overlap-PCR方法构建了S12基因及其缺失突变体与GFP融合的杆状病毒表达载体,并在Sf9昆虫细胞中对Pnsl2蛋白的亚细胞定位进行了研究。激光共聚焦显微镜观察发现绿色荧光集中于昆虫细胞的细胞核内,当预测的位于Pnsl2蛋白C末端的核定位信号序列(NLS,202KRRPR206)被缺失或碱性氨基酸突变为丙氨酸的突变体,绿色荧光则不能在细胞核中积累,而是与GFP空载体对照类似均匀分布于整个细胞,暗示Pnsl2蛋白具有核定位功能,所预测的NLS（Nuclear localization signal,NLS）可能是一个有功能的核定位信号序列,这是植物呼肠孤病毒属中核定位信号蛋白的首次报道。

关键词：水稻瘤矮病毒杆状病毒表达系统病毒样颗粒自我组装亚细胞定位

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水稻瘤矮病毒经介体昆虫水平和垂直传播的机制

水稻瘤矮病毒经介体昆虫水平和垂直传播的机制

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作者：毛倩卓福建农林大学

学位级别：博士

由水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)引起的水稻瘤矮病在我国南方稻区一直处于持续流行态势,是重要的水稻病害之一。RGDV由介体电光叶蝉以持久增殖型的方式进行传播,并且可以垂直传播。病害的流行与介体昆虫的传播有着直接的关... 详细信息

由水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)引起的水稻瘤矮病在我国南方稻区一直处于持续流行态势,是重要的水稻病害之一。RGDV由介体电光叶蝉以持久增殖型的方式进行传播,并且可以垂直传播。病害的流行与介体昆虫的传播有着直接的关系,因此本论文对RGDV突破介体昆虫唾液腺屏障水平传播至植物以及经介体昆虫生殖系统垂直传播至子代的机制进行了研究,探讨了不同传播方式对田间病害流行的影响。持久性病毒在介体昆虫内侵染循环,最后到达唾液腺,跨过唾液腺细胞中的内腔质膜释放到唾液中。围成内腔的质膜作为病毒在虫体内的最后一道膜屏障,对于病毒的传播起着决定作用。本研究首先利用电镜技术和免疫荧光标记技术,观察了 RGDV突破唾液腺释放屏障的过程,发现RGDV侵入电光叶蝉唾液腺后,自身编码的非结构蛋白Pns11可以形成纤维状结构,这一结构通过与质膜的主要组分肌动蛋白(actin)互作,一侧结合在质膜上,另一侧附着了病毒粒体,凹陷并形成小泡,以类似"胞吐"的方式介导病毒跨过质膜释放到唾液中。我们利用RNA干扰技术进一步验证Pns11纤维结构在病毒突破唾液腺释放屏障中的作用。通过微针注射针对Pns11基因的dsRNA抑制Pns11纤维结构在唾液腺中的形成,有效地减少了病毒向唾液腺内腔中的释放,并且降低了介体昆虫的传毒率。因此,病毒非结构蛋白Pns11可以在唾液腺细胞中形成纤维结构,是介导病毒跨过内腔质膜释放屏障的"交通工具"。这种病毒利用自身形成的内含体结构跨过内腔质膜的方式是虫传病毒突破唾液腺屏障的新模型。病毒随着唾液一起传播到植物,唾液作为病毒从昆虫进入植物的载体,对于病毒-介体昆虫-植物三者之间的互作起着"桥梁"的作用。本研究分别收集了带毒和无毒电光叶蝉的水状唾液,利用蛋白质非标记定量技术(Label-free technology)进行了测定,通过与电光叶蝉唾液腺转录组数据比对,共鉴定获得了 955个蛋白。通过定量分析发现,获得的蛋白中有209个为带毒昆虫的唾液所特有,有237个是无毒昆虫的唾液特有,其分子功能的类别主要富集在氧化还原酶相关的条目中,这类酶可以帮助昆虫对抗植物因被取食而产生的具有毒害作用的酚类物质,具有一定的"解毒"作用,影响着昆虫的取食。因此RGDV的侵染使介体电光叶蝉的唾液组分发生了变化,并且可能影响昆虫取食的效率。病毒从亲代传递给子代,叫做垂直传播。病毒经介体昆虫的垂直传播对毒源的维持和病害的发生具有重要意义。前期研究发现,RGDV从亲代到子代昆虫的垂直传播效率高达80%以上,但是带毒雌虫卵巢的侵染率仅有25%左右。本研究首先通过带毒和无毒昆虫的交配实验,发现带毒雌虫与带毒雄虫(V♀×V♂)交配后的子代昆虫带毒率约为81%,无毒雌虫与带毒雄虫(N♀×V♂)交配后的子代昆虫带毒率约为73%,而带毒雌虫与无毒雄虫(V♀×N♂)交配的子代昆虫带毒率仅为22%,因此RGDV可以经父本进行垂直传播,并且这种垂直传播方式非常高效且处于主导地位。利用电镜和免疫荧光标记技术进一步研究了 RGDV经父本进行垂直传播的路径。我们发现,RGDV附着在电光叶蝉精子的头部,被精子携带通过交配进入雌虫,在产卵时随精子通过授精作用进入卵中传递至子代。体外孵育实验发现,RGDV的主要外壳蛋白P8可以特异结合在精子头部。通过GST pull-down钓取与P8互作的精子蛋白,获得了硫酸乙酰肝素糖蛋白(heparan sulfate proteoglycans,HSPG)候选受体。进一步通过酵母双杂交实验和pull-down实验,明确了 P8与HSPG的结构功能域III存在互作。免疫荧光标记结果显示,HSPG分布在精子头部的质膜上,病毒粒体结合在HSPG上。利用HSPG抗体孵育精子后可以体外阻断病毒与精子的结合。因此,RGDV通过外壳蛋白P8与电光叶蝉精子头部质膜的HSPG蛋白互作,介导精子携带病毒通过交配传至子代。生物学实验发现,RGDV的侵染会显著缩短电光叶蝉雌性成虫的寿命,但对雄性成虫的寿命和交配能力不造成显著影响。无毒雌虫与带毒雄虫交配(N♀×V♂)产下的卵,其孵化率和形态与无毒虫间交配(N♀×N♂)产下的卵接近,明显优于带毒雌虫与无毒雄虫交配所产的卵。因此推测RGDV更适合于在雄虫中存在,RGDV经雄虫垂直传播对种群的不利影响较小。田间调查结果显示,电光叶蝉是田间的主要介体昆虫,其带毒率与田间发病程度有一定相关性,且雄虫的带毒率显著高于雌虫。越冬期田间缺少寄主植物,越冬代昆虫的带毒率直接影响着次年水稻种植期的叶蝉带毒率和田间发病程度,因此病毒在电光叶蝉中的垂直传播对毒源维持和病害发生具有重要意义。综上所述,本论文明确了 RGDV在电光叶蝉中突破唾液腺释放屏障进行水平传播的机制,分析了 RGDV侵染对介体昆虫唾液蛋白造成的变化,发现

关键词：水稻瘤矮病毒介体昆虫唾液腺屏障垂直传播精子

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水稻瘤矮病毒S9基因的生物信息学分析及原核表达蛋白的抗血清制备

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热带作物学报 2010年第12期31卷 2153-2158页

作者：赵芹邓永枢阮小蕾李华平华南农业大学植物病毒研究室广东广州510642 广东省农业科学院蔬菜研究所广东广州510640

以广东德庆市水稻瘤矮病的典型病株为材料,RT-PCR扩增并克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)的第9组分全长核苷酸序列。生物信息学分析表明,其基因结构特征与已报道的其他分离物基本一致。Pns9蛋白为细胞膜外蛋白,在植物呼... 详细信息

以广东德庆市水稻瘤矮病的典型病株为材料,RT-PCR扩增并克隆了水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)的第9组分全长核苷酸序列。生物信息学分析表明,其基因结构特征与已报道的其他分离物基本一致。Pns9蛋白为细胞膜外蛋白,在植物呼肠孤病毒属内没有发现同源蛋白,与霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的入口蛋白(portal protein)及姜氏军团菌(Legionella drancourtii LLAP12)的假设蛋白(hypothetical protein LDG_3259)分别有33%和24%的氨基酸序列相似性,功能尚待确定。将S9基因克隆至原核表达载体pET-28b(+)得到高效表达,融合蛋白经亲和层析纯化后,免疫新西兰大白兔制备抗血清。Western blot和ELISA分析表明制备的兔抗为特异抗血清,效价为1∶13 1072。

关键词：水稻瘤矮病毒 S9 原核表达抗血清制备

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水稻瘤矮病毒S3和S8基因共表达杆状病毒转移载体构建及重组病毒的鉴定

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福建农林大学学报（自然科学版） 2011年第2期40卷 151-155页

作者：范国成高芳銮黄美英谢荔岩吴祖建林奇英谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建福州350002 福建省农业科学院果树研究所福建福州350013 福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002

为构建携带水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)主要内层衣壳蛋白S3基因和外层衣壳蛋白S8基因的重组杆状病毒,将目的基因(S3和S8)分别亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual多角体启动子(PH)和p10启动子的下游.经酶切和确证性序... 详细信息

为构建携带水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)主要内层衣壳蛋白S3基因和外层衣壳蛋白S8基因的重组杆状病毒,将目的基因(S3和S8)分别亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual多角体启动子(PH)和p10启动子的下游.经酶切和确证性序列测定,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组杆粒rbpFBDS3-S8,采用脂质体转染法,将rbpF-BDS3-S8转染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf9细胞包装病毒,PCR筛选鉴定重组病毒.结果表明:Sf9昆虫细胞被侵染72 h后,倒置显微镜下观察到细胞增大,培养液和细胞内出现颗粒状物质,部分细胞破裂甚至裂解,说明S3和S8基因已整合到重组杆状病毒基因组中,这为开展RGDV主要结构蛋白在昆虫细胞中的表达及其功能研究奠定了基础.

关键词：水稻瘤矮病毒外层衣壳蛋白内层衣壳蛋白杆状病毒表达系统 Sf9昆虫细胞

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水稻瘤矮病毒P3、P7、P8、Pn9、Pn10、Pn11、Pn12的酵母双杂交载体的构建及自激活效应检测

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热带作物学报 2009年第9期30卷 1364-1368页

作者：吴建国蔡丽君胡梅群谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002

将编码水稻瘤矮病毒P3、P7、P8、Pn9、Pn10、Pn11、Pn12的S3,S7,S8,S9,S10,S11和S12基因分别克隆到酵母表达载体pGBKT7和pGADT7中,转化AH109酵母细胞,结果显示:除pGBK-S10转化子可以在SD/-Trp和SD/-His营养缺陷固体培养基上正常生长外,其它转化子均只能在SD/-Trp或SD/-Leu营养缺陷固体培养基上正常生长。通过α-半乳糖苷酶活性分析揭示,除pGBK-S10可以在SD/-Trp/X-α-Gal平板上生长并变蓝外,其它均不变蓝。结果证实:RGDVPn10在酵母细胞中具有转录激活活性,融合GAL4的RGDVPn10蛋白可以在酵母细胞内激活HIS3和MEL1报告基因的表达。暗示该蛋白可能在病毒的侵染和复制过程中参与调控病毒或寄主基因的转录表达。

关键词：水稻瘤矮病毒转录激活活性酵母表达载体 Pn10

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