检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李士河南京农业大学

学位级别：硕士

水稻白叶枯病(Bacterial Blight of Rice)是水稻(Oryzae sativa)上最重要的病害之一,它是由水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)引起的。水稻白叶枯菌(Xoo)从被发现至今100多年的历史中,一直是植物病理学研究者关注的焦点。研... 详细信息

水稻白叶枯病(Bacterial Blight of Rice)是水稻(Oryzae sativa)上最重要的病害之一,它是由水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)引起的。水稻白叶枯菌(Xoo)从被发现至今100多年的历史中,一直是植物病理学研究者关注的焦点。研究水稻抗病基因(R)和Xoo无毒基因(A)的互作是阐明抗病基因和Xoo的致病性分化、鉴定小种、无毒基因、致病基因等的基本依据,也是发展有效的病害防治措施的需要。因此,研究水稻白叶枯病菌的无毒基因,将有助于鉴定和克隆水稻的抗病基因,进一步明确无毒基因与抗病基因互作的分子机制。\n Xoo中已克隆的avr基因有avrXa7、avrXa10、avrXa3、avrXa27和avrxa5,而本实验室筛选到一个弱毒性的菌株OS-198可能含有新的无毒基因,为此提取了OS-198的总DNA,经EcoRI部分酶切后,回收23-48.5Kb的片段,连接到用EcoRI完全酶切,去磷酸化的粘粒载体pUFR034上。用包装蛋白将上述连接混合物包装后,吸附到宿主菌S17-1中,构建了OS-198的基因组文库。\n Xoo基因组中存在着众多的avrBs3/pthA家族基因,为了了解这些基因在OS-198基因组中的存在特点,本实验利用来源于水稻白叶枯病菌菌株JXOⅢ的2.67Kb的无毒基因avrXa3重复区的1.4kb-SphⅠ片段作探针检测OS-198基因文库,通过斑点杂交及Southern杂交,将所得结果进行归类和分析,从64个阳性克隆中鉴定出15个不同的阳性克隆,它们在基因组中单独存在,或2个和2个以上串联排列。为今后进一步研究OS198的avrBs3/pthA家族基因提供了基本信息。\n 将800个OS-198/pUFR034文库的克隆用两型交配法逐一导入PXO99A中,得到的结合子和野生型菌株一起接种苗期水稻近等基因系,发现7个克隆导入受体菌后病斑长度与PXO99A差异显著。其中克隆592和519,377在水稻IRBB8和IRBB2,IRBB7上产生类似HR的反应,为将来进一步发掘OS-198中新的无毒基因提供了基础。

关键词：基因文库无毒基因水稻白叶枯病菌基因克隆两型交配法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌PXO99A中趋化受体基因的突变研究

水稻白叶枯病菌PXO99A中趋化受体基因的突变研究

引用

作者：许力丹广西大学

学位级别：硕士

水稻白叶枯病(rice bacterial leaf blight，BLB)是一种水稻细菌性病害，在世界范围内的多数稻区均有发生，造成水稻减产甚至绝收。其病原物为水稻黄单胞菌致病变种(Xanthomonas oryzae ***，Xoo），俗称水稻白叶枯病菌。该菌主要通过... 详细信息

水稻白叶枯病(rice bacterial leaf blight，BLB)是一种水稻细菌性病害，在世界范围内的多数稻区均有发生，造成水稻减产甚至绝收。其病原物为水稻黄单胞菌致病变种(Xanthomonas oryzae ***，Xoo），俗称水稻白叶枯病菌。该菌主要通过水孔和伤口侵入叶片，并沿维管束系统进行定殖和扩展。对该菌致病机理的研究有助于开发新的防治病害的药物和方法。已有研究表明趋化性对细菌完成完整的侵染循环具有重要的作用，更在侵染宿主的前期阶段扮演重要角色。然而，由于趋化受体及其基因具有显著的菌种特异性和多样性，目前对Xoo的趋化受体的功能及作用机理尚未阐明。趋化受体，也称甲基化受体蛋白(methyl-accepting chemotaxis proteins，MCP)，在细菌趋化过程中负责接收并转导外界化学信号的作用。为了弄清Xoo中MCP的功能，本研究从全基因组水平，对水稻白叶枯病菌中的甲基化受体蛋白基因开展突变研究。主要结果如下:\n 1.通过生物信息学方法对Xoo PXO99A菌株的基因组进行分析，确认该菌株具有11个mcp基因，其中多数为典型的mcp基因，编码产物具有双重跨膜结构域、配体结合结构域和甲基接受结构域。而PXO_00916基因编码一类非典型的MCP。通过逆转录PCR的验证，证明了PXO_00916基因在基因组中注释的不完整性，新的预测中发现其携带了一个REC结构域，作为一种新型的MCP类型存在。\n 2.采用基于pK18mobsacB自杀质粒的双交换突变方法系统地构建了mcp基因的突变体。根据mcp基因上、下游侧翼序列设计引物，通过PCR方法获得上下游片段，克隆于pK18mobsacB质粒上，通过三亲本接合的方式将重组质粒导入到PXO99A菌株中，再通过筛选标记的筛选及PCR验证，构建了9个mcp基因的突变体（本实验室已有其余2个mcp基因突变体）以及一个包含了7个mcp基因的大片段缺失突变体。\n 3.采用毛细管法对Xoo PXO99A野生型菌株和突变体进行趋化鉴定。首先通过野生型菌株的趋化研究，表明PXO99A菌株对供试蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、木糖、果糖、乳糖、半乳糖、核糖、苹果酸、吲哚乙酸、脱落酸、水稻叶片提取物、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、苯丙氨酸、赖氨酸、谷氨酸具有明显的趋化性。随后，又通过对其11个mcp单基因敲除突变体和1个簇基因敲除突变体进行上述化合物趋化研究，初步鉴定出不同MCP响应的化合物。\n 4.通过对11个mcp单基因敲除突变体和1个簇基因敲除突变体进行多种表型检测，并对其中表型明显变化的突变体进行互补实验。发现PXO_00054基因的缺失影响了菌株在种子表面的定殖能力;PXO_00041、PXO_00045、PXO_06142基因的缺失导致细菌的游动性显著降低;PXO_00916、PXO_04751和PXO_06142基因的缺失导致细菌的集群性运动显著降低;PXO_00045、PXO_00046和PXO_00054基因的缺失后，菌株的抗SDS能力有轻微下降，而PXO_00916和PXO_04751基因缺失后菌株抗SDS能力显著增强;PXO_00039和PXO_00041基因对细菌的生物膜的形成能力有贡献，这两个基因缺失后菌株形成生物膜的能力降低。而mcp基因簇缺失突变体在种子表面定殖能力、运动性以及生物膜形成方面，均较野生型表现出显著性降低。\n 综上，本研究系统地对水稻白叶枯病菌PXO99A中趋化受体相关基因进行了突变，完成对PXO99A菌株的mcp基因功能的初探，为后续深入研究MCP功能提供线索，以及为白叶枯病害防治提供了参考。

关键词：水稻白叶枯病菌趋化受体基因基因突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

糖基转移酶基因rbfCxoo缺失突变导致水稻白叶枯病菌毒性表达增强

引用

微生物学报 2009年第6期49卷 740-745页

作者：孙艳伟文景芝吴茂森陈华民何晨阳中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 东北农业大学农学院植物保护学系哈尔滨150030

【目的】阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,简称Xoo)基因组中推导的脂多糖O抗原合成蛋白基因rbfCxoo(XOO2599)的结构和生物学功能。【方法】通过基因克隆、序列分析、缺失突变和表型测定,对rbfCxoo的分子特征及其功能... 详细信息

【目的】阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,简称Xoo)基因组中推导的脂多糖O抗原合成蛋白基因rbfCxoo(XOO2599)的结构和生物学功能。【方法】通过基因克隆、序列分析、缺失突变和表型测定,对rbfCxoo的分子特征及其功能进行了鉴定。【结果】用特异性引物进行PCR扩增,从野生型菌株PXO99A基因组DNA中成功地获得了与己测序菌株KACC10331序列完全一致的全长基因序列;RbfCxoo序列N端和C端分别具有一个糖基转移酶的保守结构域(Glycos-transf-2)。用标记置换法获得了基因缺失突变体△rbfCxoo。与PXO99A相比,△rbfCxoo脂多糖O抗原合成能力并未发生变化,但鞭毛素糖基化能力有所降低。此外,△rbfCxoo鞭毛运动性、生物膜形成和胞外纤维素酶和木聚糖酶活性都无明显改变,但对水稻的致病性显著增强,毒性相关基因的表达也有所增加。【结论】RbfCxoo可能与细菌鞭毛素糖基化修饰以及毒性表达有关。

关键词：水稻白叶枯病菌 rbfCxoo 糖基转移酶鞭毛素糖基化毒性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***）小种鉴别标准化及其群体遗传结构的初步研究

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***）小种鉴别标准化及其群...

引用

作者：孙启明南京农业大学

学位级别：硕士

1999-2000年,该文利用已知抗病基因的两套近等基因系材料（分另来自IRRI和中国农业科学院）及八十年代使用的基本鉴别品种（计27个）对中国水稻白叶枯病菌不同菌株的致病力分化进行了研究.通过试验,系统比较了灿型近等基因系材料IRBB系... 详细信息

1999-2000年,该文利用已知抗病基因的两套近等基因系材料（分另来自IRRI和中国农业科学院）及八十年代使用的基本鉴别品种（计27个）对中国水稻白叶枯病菌不同菌株的致病力分化进行了研究.通过试验,系统比较了灿型近等基因系材料IRBB系列与粳型近等基因系材料CBB系列在小种鉴别研究中的应用价值.在此基础上,对水稻白叶枯病菌小种鉴别标准化的一些问题进行了讨论.

关键词：水稻白叶枯病菌小种鉴定近等基因系 rep-PCR 单模标样遗传多样性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌minCDE系统调控hrp基因表达的机理研究

水稻白叶枯病菌minCDE系统调控hrp基因表达的机理研究

引用

作者：王艳艳上海交通大学

学位级别：硕士

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***,Xoo）侵染寄主水稻,引起水稻白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB,是水稻上最严重的细菌病害之一。Xoo主要依赖hrp基因簇编码的III型分泌系统（Type III secretion system,T3SS）将效应蛋白（T3... 详细信息

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***,Xoo）侵染寄主水稻,引起水稻白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB,是水稻上最严重的细菌病害之一。Xoo主要依赖hrp基因簇编码的III型分泌系统（Type III secretion system,T3SS）将效应蛋白（T3SS effectors,T3SEs）注入水稻细胞中,激发水稻的抗（感）病性。为了准确在Xoo中进行hrp基因的转录表达和调控研究,本研究构建了3个启动子探针载体pHG1、pHG2和pHG3。通过3个hrp基因的表达分析,证明了启动子探针载体能够有效地进行hrp基因的转录表达分析,为后续Xoo毒性相关基因的表达调控研究提供了有效的工作体系。同源性搜索结果显示,一些已鉴定的毒性相关基因在Xoo的代表菌株PXO99A中保守存在。为了明确这些毒性基因对hrp基因表达调控的影响,本研究成功获得了14个毒性基因的突变体;利用已建立的hrp融合表达体系和荧光定量PCR技术,证明了双组分调控系统ColR/ColS、RpfC/RpfG和转录调控子Clp负调控hrpG和hrpB1的表达;Trh和XrvA通过HrpG-HrpX途径正调控hrpB1的表达;HpaR1和Fur不依赖于HrpG仅通过HrpX正调控hrpB1的表达。这些调控关系的鉴定为进一步解析hrp调控网络提供了新的线索。细菌的分裂受许多调控子的精细调控,包括由MinC、MinD和MinE组成的Min系统。从以hrpF::gusA为报道体系的突变体库中,获得突变体8-24,测序分析发现该突变体中Tn5转座子插在minC基因中。本研究构建了minC和minD的单基因缺失突变体PΔminC和PΔminD以及minC、minD和minE的3基因缺失突变体PΔminCDE。从转录和转录后水平证明minCDE系统通过HrpG-HrpX途径负调控hrp基因的表达,其中MinC负调控hrp基因的表达最明显。MinC和MinD不结合hrpG基因的启动子区,可正调控rpfG和clp基因的表达。电镜和荧光显微镜观察发现,PΔminC菌体较野生型明显变长。游动性和毒性测定结果显示,与野生型菌株相比,PΔminC在半固体培养基上的游动性明显降低,以及在感病寄主水稻上毒性也明显降低。本研究为首次报道minCDE系统涉及水稻黄单胞菌hrp基因的调控,为hrp调控网络的解析和minCDE新功能的挖掘提供了新的线索。

关键词：水稻白叶枯病菌 hrp基因毒性基因 minCDE系统基因表达调控

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌Ⅲ型分泌系统抑制剂的筛选及作用靶标发现

水稻白叶枯病菌Ⅲ型分泌系统抑制剂的筛选及作用靶标发现

引用

作者：高冬倪华南农业大学

学位级别：硕士

水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***，Xoo）是一种革兰氏阴性菌，一般通过伤口或者水孔侵染水稻，引发水稻白叶枯病（Bacterial leaf blight，BLB）。BLB作为水稻生产破坏极大的细菌性病害，严重影响水稻产量和品质。传统防治技术... 详细信息

水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***，Xoo）是一种革兰氏阴性菌，一般通过伤口或者水孔侵染水稻，引发水稻白叶枯病（Bacterial leaf blight，BLB）。BLB作为水稻生产破坏极大的细菌性病害，严重影响水稻产量和品质。传统防治技术是使用靶向病原菌生长关键因子的抗生素，极易产生和富集具有抗药性的突变菌株。新型防治手段是开发针对细菌毒力因子且不影响细菌生长的新药剂。III型分泌系统（Type three secretion system，T3SS）是许多革兰氏阴性病原菌中高度保守的毒力因子，且不是细菌生长所必须中，因此它被认为是开发新型抗菌药物的理想目标。　　本论文基于实验室收集的菌株和载体，对实验室设计合成的两大系列化合物肉桂酸衍生物（L系列）和丙烯酸乙酯类衍生物（B系列）进行Xoo T3SS抑制剂的筛选。以抑制hpa1基因启动子和不影响细菌生长为基准，初步筛选Xoo T3SS抑制剂，并测定上述化合物对病原菌在烟草上诱导过敏反应的影响。结果发现，13个肉桂酸衍生物（L-14、L-15、L-17、L-18、L-20、L-21、L-22、L-23、L-25、L-26、L-28、L-29、L-32）和2个丙烯酸乙酯类衍生物（B9、B10）明显抑制烟草的过敏性反应。为了进一步揭示化合物抑制T3SS功能的分子机制，通过流式细胞仪检测化合物对T3SS关键基因hrpG、hrpX和下游基因hrcT的影响，利用qRT-PCR检测化合物对T3SS其他相关基因的影响。结果发现，化合物L-14、L-15、L-26、L-29和L-32可能直接或间接通过抑制HrpG-HrpX通路来调控下游基因的表达，其他10个化合物可能通过抑制T3SS的某个全局调控因子从而对上述基因均具有明显的抑制效果。检测化合物对Xoo在水稻致病性的影响，最终得到8个对Xoo防控效果优于阳性对照TS015（2-甲氧基肉桂酸）、2个对Xoo防控效果优于阳性对照TS006（2-羟基肉桂酸）的T3SS抑制剂。从中挑选出对T3SS具有较高抑制活性的化合物B9进行其他毒力因子的表型测试，由结果可知，化合物B9特异性靶向T3SS而不影响其他毒力因子。接下来选取T3SS抑制剂B9与高效降解黄单胞菌致病因子DSF信号分子的群体感应淬灭菌Ralstonia pickettii F20联用，实验结果表明，与单独使用单一药剂或者单一生防菌相比，药物与生防菌联用对Xoo在水稻上有更强的防控效果。　　为了进一步探究化合物的作用靶标，设计合成小分子探针，通过化学蛋白质组学分析、点击化学和pull down等技术发现了与T3SS抑制剂互作的靶标蛋白p31。新靶标的发现和作用机制的研究对于新型药物的研发和应用具有重要的意义。

关键词：水稻白叶枯病菌 Ⅲ型分泌系统抑制剂药剂筛选药物靶标

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌T3SS抑制剂的设计、合成与生物活性研究

水稻白叶枯病菌T3SS抑制剂的设计、合成与生物活性研究

引用

作者：李辉华南农业大学

学位级别：硕士

水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)是一种能够引起水稻白叶枯病的农业病原微生物,其能使水稻叶片失绿并影响光合作用,从而导致水稻减产甚至绝收,已对我国农业造成了重大的影响。目前化学防治是防控水稻白叶枯病最常用的手段,... 详细信息

水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)是一种能够引起水稻白叶枯病的农业病原微生物,其能使水稻叶片失绿并影响光合作用,从而导致水稻减产甚至绝收,已对我国农业造成了重大的影响。目前化学防治是防控水稻白叶枯病最常用的手段,然而长期单一地使用杀菌剂易对病原菌群体施加选择性压力,已造成了严重的细菌耐药性问题。Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)是Xoo向寄主细胞分泌效应蛋白的关键装置,高度保守且不是细菌生长所必须。因此,以T3SS作为作用靶标,针对病原菌的侵染能力而不影响细菌生长的抗菌药物研发,有望成为防治水稻白叶枯病的新策略。本课题组前期发现了一类基于“β-硝基苯丙烯酸乙酯”为结构骨架的新型T3SS抑制剂。为获得更加详细的构效关系,本论文以T1等为先导化合物,对其结构中的苯环进行了系统的结构修饰,设计并合成20个3-芳基-2-硝基丙烯酸乙酯类衍生物(A系列目标化合物)。在此基础上,本论文继续对A系列化合物中的芳基进行骨架跃迁,设计并合成了15个以呋喃联苯为基础骨架的3-芳基-2-硝基丙烯酸乙酯类衍生物(B系列目标化合物)。上述两类目标分子的合成工艺简单易行,其结构均利用核磁共振氢、碳谱进行表征。本论文综合利用hpa1基因启动子抑制测试、生长曲线测试和水稻成株抗致病性测试等实验确定了上述两类目标分子可作为潜在的结构新颖的T3SS抑制剂。研究结果表明A系列化合物A10、A12、A20和B系列化合物B2、B7、B10能在不影响Xoo生长的条件下,有效下调hpa1基因启动子表达及减弱Xoo的致病性,且效果优于阳性对照药TS006。进一步的作用机制研究发现A10、A12、A20能有效下调hrp G、hrp X、hrc T基因的表达,通过影响Hrp G-Hrp X调控通路实现降低Xoo致病性作用。此外,表型实验测试结果表明A12和A20不以T2SS毒性因子为靶点,而A10可能同时靶向T3SS和胞外多糖。综上所述,3-芳基-2-硝基丙烯酸乙酯类衍生物是一类结构新颖的T3SS抑制剂,其对水稻白叶枯病的防治具有较好的效果,显示出良好的应用前景。本论文的研究结果为后续Xoo T3SS抑制剂的应用与研究提供了实验依据及理论支持。

关键词：水稻白叶枯病菌 Ⅲ型分泌系统 T3SS抑制剂 3-芳基-2-硝基丙烯酸乙酯构效关系分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号蛋白分子鉴定及功能分析

水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号蛋白分子鉴定及功能分析

引用

作者：梁士敏东北林业大学

学位级别：硕士

环鸟苷二磷酸(e-di-GMP)是一种新发现的细菌的新第二信使,并发现了鸟苷酸环化酶(DGC)和磷酸二脂酶(PDE)分别控制其合成和水解,而GGDEF结构域和EAL或HD-GYP结构域分别是DGC和PDE的活性中心。在细菌的基因组中存在着大量的GGDEF、EAL和HD-... 详细信息

环鸟苷二磷酸(e-di-GMP)是一种新发现的细菌的新第二信使,并发现了鸟苷酸环化酶(DGC)和磷酸二脂酶(PDE)分别控制其合成和水解,而GGDEF结构域和EAL或HD-GYP结构域分别是DGC和PDE的活性中心。在细菌的基因组中存在着大量的GGDEF、EAL和HD-GYP结构域,如38个结构域存在于铜绿假单胞杆菌中、98个结构域存在于沙雷杆菌中、53结构域个存在于霍乱弧菌中和29结构域个存在于大肠杆菌中。另外发现,细菌的多种生物学功能受c-di-GMP调控,如：毒性、运动性和运动性等。水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,简称Xoo)是重要的水稻致病菌。然而在其侵染水稻的过程中可能某些信号调控起着至关重要的作用,进而对其致病性具有决定性作用。但是,现在信号究竟是通过何种手段对Xoo的致病性及相关基因的表达进行调控的仍没有明确报道。多年研究发现,环鸟苷二磷酸(c-di-GMP)是一种新发现的、广泛存在于细菌中调控着细菌多种生物学功能的第二信使。水稻白叶枯病菌有25-31个GGDEF、EAL和HD-GYP结构域。然而,至今仍不清楚部分信号蛋白基因的生物学功能。本研究着重对c-di-GMP系统中重要的3个基因(PXO-02944、PXO-04753和PXO-03877)进行了分子鉴定和功能分析。通过对PXO-02944、PXO-04753和PXO-03877进行分子克隆、序列分析、缺失突变和互补及其表型特征的鉴定；利用RT-Q-PCR方法,定量测定了A02944xoo、△04753xoo和Δ03877xoo毒性相关基因的表达。研究目的在于从Xoo中鉴别出相应的结构域蛋白基因、揭示其生物学功能,为全面阐明c-di-GMP代谢调控机理提供科学依据。采用基因标记置换方法,分别构建推测了具有c-di-GMP合成活性的鸟苷酸环化酶活性基因(PXO-02944)和降解活性的磷酸二酯酶基因(PXO-04753和PXO-03877)缺失突变体。与PXO99A相比,△02944xoo胞外多糖和生物膜合成能力以及对水稻的毒性显著增强；△03877xoo的生物膜、胞外多糖形成能力和对水稻的致病性明显减弱；△04753对烟草的致敏性和生物膜形成显著降低。总之,本研究阐述了PXO-02944、PXO-04753和PXO-03877作为c-di-GMP信号途径应答调控因子,分别调控了Xoo的多种生物学功能及其相关基因的表达。

关键词：水稻白叶枯病菌环鸟苷二磷酸 PXO-02944 PXO-04753 PXO-03877 生物学功能

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻白叶枯病菌FtsZ的体外表达及炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对其作用研究

水稻白叶枯病菌FtsZ的体外表达及炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对其作...

引用

作者：陈洋江西师范大学

学位级别：硕士

炭样小单孢菌菌株JXNU-1是一株从土壤中分离得到的放线菌,所产单一组分的广谱抗生素对常见的G+和G-均有抑制作用,但其抗菌机制尚不明确。本研究以引起水稻生产严重病害的水稻白叶枯病菌为例,研究了炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对水稻白叶... 详细信息

炭样小单孢菌菌株JXNU-1是一株从土壤中分离得到的放线菌,所产单一组分的广谱抗生素对常见的G+和G-均有抑制作用,但其抗菌机制尚不明确。本研究以引起水稻生产严重病害的水稻白叶枯病菌为例,研究了炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对水稻白叶枯病菌FtsZ蛋白的作用,具体内容和结果如下：(1)以水稻白叶枯病菌总DNA为模板,采用巢式PCR方法扩增获得水稻白叶枯病菌FtsZ基因,构建FtsZ基因的表达载体pET-22b-fteZ,转化表达宿主E. coli BL21后,经PCR、Nde I/Xho I双酶切及测序鉴定、阳性克隆子经IPTG诱导表达,FtsZ蛋白经镍柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blotting分析鉴定,获得了电泳纯的FtsZ蛋白；(2)以单因素实验法优化了重组大肠杆菌表达FtsZ蛋白的条件,即在诱导的菌体浓度(以OD600表示)为0.8,IPTG浓度为1.0 mmol/L,温度为37℃,诱导时间为3h,FtsZ蛋白有最大可溶性表达；(3)利用生物信息学方法分析了水稻白叶枯病菌FtsZ蛋白的结构,结果表明,水稻白叶枯病菌FtsZ为结构稳定的亲水性蛋白,含414个氨基酸残基,C端起第15至第187个氨基酸残基决定其GTPase活性,蛋白含细菌FtsZ蛋白共有的GTP结合位点GGGTGTG,FtsZ蛋白二级结构中,螺旋结构为30.4%,折叠结构为11.8%。(4)采用酶学方法研究了FtsZ蛋白的GTPase特性,结果表明其最适温度为50℃,在温度为60℃时迅速失活,最适pH值为7.0,Mg2+存在时活性最强,其Km值为5.78 mmol/L(5)炭样小单孢菌JXNU-1抗生素可抑制水稻白叶枯病菌的生长,并导致水稻白叶枯病菌出现丝化现象,同时可明显抑制FtsZ蛋白的GTPsae活性。上述研究结果表明,炭样小单孢菌JXNU-1产抗生素的抗菌作用可通过抑制水稻白叶枯病菌的FtsZ蛋白的GTPsae活性,进而抑制细胞的分裂。

关键词：炭样小单孢菌抗生素水稻白叶枯病菌 FtsZ蛋白抗菌机理

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

贝莱斯芽孢杆菌Bv-303对水稻白叶枯病菌的拮抗活性及其应用

引用

生物工程学报 2023年第2期39卷 741-754页

作者：刘霞陆喆晓马紫程余婷婷陈浩天王璐陈析丰浙江师范大学生命科学学院浙江金华321000

本研究明确了一株新型贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Bv-303菌株对黄单胞杆菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)的拮抗活性及其对水稻白叶枯病(bacterial-blight,BB)的生物防治效果。采用牛津杯法测定了菌株Bv-303发酵上... 详细信息

本研究明确了一株新型贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Bv-303菌株对黄单胞杆菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)的拮抗活性及其对水稻白叶枯病(bacterial-blight,BB)的生物防治效果。采用牛津杯法测定了菌株Bv-303发酵上清液(cell-free supernatant,CFS)对白叶枯病菌体外拮抗的活性及其稳定性;通过对接种白叶枯病菌的水稻叶片进行喷雾处理,在水稻体内测试了该菌株发酵液(cell-culture broth,CCB)、发酵上清液及菌悬液(cell-suspension water,CSW)对白叶枯病菌的抑制效果;并统计了该菌株对水稻种子发芽率与幼苗生长的影响。结果表明,在体外,菌株Bv-303发酵上清液对白叶枯病菌的生长抑制率可达85.7%–88.0%,对热、酸、碱、紫外线等具有较好的稳定性;在水稻叶片上,喷施该菌株的发酵液、发酵上清液及菌悬液均能提高植株对白叶枯病的抗性,其中发酵液的效果最佳,抗病性提高率高达62.7%;且发酵液对水稻种子萌发和幼苗生长均没有副作用。因此,菌株Bv-303对水稻白叶枯病害的生物防治具有较好的应用潜力。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌拮抗菌水稻白叶枯病菌生物防治

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：