检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2025年第5期58卷 907-917页

作者：徐元元贾东升宾羽魏太云福建农林大学植物保护学院/媒介病毒研究中心/福建省植物病毒学重点实验室

【目的】水稻矮缩病毒（rice dwarf virus,RDV）引起的水稻矮缩病是危害中国南方水稻生产的重要病害。结合前人的研究基础，利用分子生物学等手段，解析肽聚糖识别蛋白6(PGRP6)参与调控媒介昆虫黑尾叶蝉（Nephotettix cincticeps）体内... 详细信息

【目的】水稻矮缩病毒（rice dwarf virus,RDV）引起的水稻矮缩病是危害中国南方水稻生产的重要病害。结合前人的研究基础，利用分子生物学等手段，解析肽聚糖识别蛋白6(PGRP6)参与调控媒介昆虫黑尾叶蝉（Nephotettix cincticeps）体内共生菌携带RDV经卵垂直传播的机制，为水稻病毒病的生物防治提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与经卵传播相关蛋白（prp、Nasuia porin、P8）均互作的PGRP，并通过GST pull-down进一步验证其互作关系；利用实时荧光定量PCR技术测定相关基因在无毒和带毒虫体内的表达差异，并分析干扰PGRP6、prp后对共生菌增殖的影响，同时通过Western blot检测对昆虫体内共生菌膜蛋白积累的影响；分析抑制PGRP6表达对叶蝉存活率、子代带毒率、带毒子代的病毒核酸水平的影响，并利用荧光原位杂交（FISH）和免疫荧光标记观察叶蝉卵巢内prp、PGRP6、Nasuia及RDV的分布情况；通过抑菌圈和肽聚糖降解实验验证PGRP6的功能。【结果】黑尾叶蝉的PGRP6与prp、Nasuia porin、P8均存在互作；PGRP6和prp在RDV侵染的黑尾叶蝉中的表达量均显著升高；抑制PGRP6表达可促进共生菌Nasuia和Sulcia的增殖，而抑制prp降低了共生菌的增殖，其功能与PGRP6相反，当两者同时被干扰后对共生菌的增殖无显著影响；ds PGRP6处理导致黑尾叶蝉存活率显著降低，子代带毒率增加，子代昆虫体内的病毒量明显高于对照组；免疫荧光标记发现PGRP6与prp、Nasuia、RDV均在卵巢组织中分布并发生共定位，prp和Nasuia是包裹的位置关系；PGPR6存在抑菌功能，可发挥抑制共生菌增殖的作用。【结论】PGRP6通过抑制黑尾叶蝉体内共生菌的增殖维持卵巢组织内的稳态，其与prp的功能相拮抗，其既确保了黑尾叶蝉的生命活力，又调控了共生菌携带RDV的垂直传播。

关键词：水稻矮缩病毒黑尾叶蝉肽聚糖识别蛋白富脯氨酸蛋白共生菌卵巢经卵传播抑菌

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水稻矮缩病毒第一号组份基因和编码蛋白的序列分析

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微生物学报 1998年第5期38卷 348-358页

作者：肖锦李毅张净刘劲锋陈章良北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程重点实验室北京100871

水稻矮缩病毒（RiceDwarfVirus，简称RDV）是我国南方水稻病毒病的重要病原，属植物呼肠孤病毒。从中国福建分离物中克隆了基因组第一号片段（S1）的全长cDNA并对其进行全序列分析，结果表明RDV福建分离物S1克隆片段全长4422bp，含有一... 详细信息

水稻矮缩病毒（RiceDwarfVirus，简称RDV）是我国南方水稻病毒病的重要病原，属植物呼肠孤病毒。从中国福建分离物中克隆了基因组第一号片段（S1）的全长cDNA并对其进行全序列分析，结果表明RDV福建分离物S1克隆片段全长4422bp，含有一个长4332bp的开放阅读框架，编码一个由1444个氨基酸组成的多肽（P1），分子量为164kD．根据基因序列，对推测的P1氨基酸序列分析表明，序列中含有依赖于RNA的RNA聚合酶（RNA-dependentpolymerase-RDRP）保守序列：motifＩ（DXXXXD）、motifⅡ（SGXXXTXXXN）和motifⅢ（GDD），除此之外，在模式Ⅲ后还存在一个很保守的区域EXXKXY。由此说明RDVS1编码的蛋白P1可能是病毒的一种RDRP。将RDV福建分离物引核苷酸和编码蛋白氨基酸序列与日本流行株系相比，同源性分别为95％和97％。RDV福建分离物S1序列已被DenBank接受，号码为U73201。

关键词：水稻矮缩病毒第一号片段序列分析编码蛋白

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水稻矮缩病毒基因组数据库的构建

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微生物学报 2001年第1期41卷 43-48页

作者：王建民罗静初李毅曲红吴光耀顾孝诚北京大学生命科学学院北京100871

二级数据库的构建是生物信息学新的重要领域。目前部分生物的基因组序列测定完成后 ,正在进行广泛而深入的结构和功能研究 ,使二级数据库的重要性显得日益突出。水稻矮缩病毒是一种在日本、中国和东南亚感染水稻的病原微生物 ,给农业生... 详细信息

二级数据库的构建是生物信息学新的重要领域。目前部分生物的基因组序列测定完成后 ,正在进行广泛而深入的结构和功能研究 ,使二级数据库的重要性显得日益突出。水稻矮缩病毒是一种在日本、中国和东南亚感染水稻的病原微生物 ,给农业生产造成很大损失。根据国际和国内对水稻矮缩病毒基因组的研究 ,利用已有的基因序列和结构、功能等方面的数据 ,以计算机网络为载体 ,参考国际通用数据库的格式 ,尝试建立一个简洁的、友好的通用性好而且专用性强的二级数据库 :水稻矮缩病毒基因组数据库。希望能够为研究普通水稻矮缩病毒的粒子结构、基因表达调控、致病机理和防治方法提供一个良好的工具 ,为从事水稻矮缩病理论和应用研究的工作者提供方便和帮助。

关键词：生物信息学二级数据库水稻矮缩病毒基因组

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水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达

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中国水稻科学 2019年第2期33卷 118-123页

作者：张洁宛柏杰尚鹏祥丁新伦杜振国吴祖建福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室/闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室福州350002 江苏沿海地区农业科学研究所江苏盐城224000

【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时... 详细信息

【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生质体中的积累量。【结果】病毒接种水稻原生质体48h后,Pns6蛋白在细胞质中可以形成类似于病毒原质(viroplasm)的点状内含体,P8蛋白也大量的表达。同时,病毒粒体在水稻原生质体中也形成内含体状的结构。病毒接种水稻原生质体12 h后,均可检测到Pns6和P8蛋白的表达,并且在36 h后达到最高值。病毒接种水稻原生质体后,Pns6 RNA在24 h时表达量达到最高,P8 RNA在36 h时表达量达到最高。【结论】RDV侵染水稻原生质体后,Pns6和P8蛋白均有表达,并且病毒也可能通过形成病毒原质来完成病毒在寄主细胞的复制和装配。

关键词：水稻矮缩病毒水稻原生质体 Pns6蛋白 P8蛋白

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水稻矮缩病毒对介体昆虫黑尾叶蝉生物学参数及种群增长的影响

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中国水稻科学 2018年第1期32卷 89-95页

作者：王前进党聪方琦叶恭银浙江大学昆虫科学研究所/水稻生物学国家重点实验室/农业部农业昆虫学重点实验室杭州310058

【目的】水稻矮缩病毒(RDV)是水稻普通矮缩病的病原。该病害主要依赖于黑尾叶蝉经卵以持久增殖方式传播,危害水稻。本研究旨在明确RDV对黑尾叶蝉存活、发育、繁殖和种群增长的影响,分析病毒对介体昆虫的间接影响。【方法】采用室内实验... 详细信息

【目的】水稻矮缩病毒(RDV)是水稻普通矮缩病的病原。该病害主要依赖于黑尾叶蝉经卵以持久增殖方式传播,危害水稻。本研究旨在明确RDV对黑尾叶蝉存活、发育、繁殖和种群增长的影响,分析病毒对介体昆虫的间接影响。【方法】采用室内实验比较了黑尾叶蝉在健康水稻及感病水稻上的发育繁殖情况,组建了实验种群生命表,并调查了RDV对种群增长的影响。【结果】与健康水稻相比,感病水稻上叶蝉若虫期存活率更高,雌若虫发育历期显著缩短,雄成虫寿命显著延长,产卵量显著增加,其他生物学参数无显著差异。五个生命表参数仅净生殖率(R_0)存在显著差异,感病水稻上叶蝉R_0显著高于健康水稻。饲喂感病水稻的养虫笼内叶蝉种群增长更快,总成虫数量更多,在接虫后的第4、5和6月显著高于健康水稻上的数量。【结论】水稻矮缩病毒可以提高黑尾叶蝉的存活率和产卵量,并促进种群的增长。

关键词：水稻矮缩病毒黑尾叶蝉生物学参数生命表种群增长

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水稻矮缩病毒外壳蛋白基因S8在昆虫细胞中的表达

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微生物学报 2001年第2期41卷 162-166页

作者：李胜刘慧君陈章良李毅北京大学生命科学学院北京100871

将水稻矮缩病毒 (RiceDwarfVirus,RDV)外壳蛋白基因S8克隆到杆状菌毒转移载体 pVL1 393中 ,重组转移载体 pVL1 393 S8与线性杆状病毒RP2 ***共转染草地夜蛾细胞sf9,经过细胞体内同源重组、PCR筛选得到重组病毒RP2 3 S8。重组病毒RP2 3 S... 详细信息

将水稻矮缩病毒 (RiceDwarfVirus,RDV)外壳蛋白基因S8克隆到杆状菌毒转移载体 pVL1 393中 ,重组转移载体 pVL1 393 S8与线性杆状病毒RP2 ***共转染草地夜蛾细胞sf9,经过细胞体内同源重组、PCR筛选得到重组病毒RP2 3 S8。重组病毒RP2 3 S8感染sf9细胞后 ,收集细胞 ,并进行SDS PAGE及Western blot检测。结果表明 ,S8基因在昆虫细胞中成功表达 ,且在感染后

关键词： RDV 杆状病毒昆虫细胞表达 Western-blot 水稻矮缩病毒

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水稻矮缩病毒第四号片段序列及编码蛋白的功能分析

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微生物学报 1996年第2期36卷 93-102页

作者：赵晓岚李毅刘一飞梁晓文陈章良北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京100871

从水稻矮缩病毒(rice dwarf virus,RDV)中国福建分离物中分离出第四号片段S4的双链RNA。以人工合成的两段寡聚核苷酸链为引物,经反转录合成cDNA,然后利用PCR技术扩增了编码区cDNA,将扩增产物分成两段克隆到pGEM3Zf(-)和pBluescript上。... 详细信息

从水稻矮缩病毒(rice dwarf virus,RDV)中国福建分离物中分离出第四号片段S4的双链RNA。以人工合成的两段寡聚核苷酸链为引物,经反转录合成cDNA,然后利用PCR技术扩增了编码区cDNA,将扩增产物分成两段克隆到pGEM3Zf(-)和pBluescript上。经限制性内切酶分析,进而进行亚克隆和序列测定。将这两段克隆进行连接,得到了具有S4编码区全长cDNA的克隆。对S4编码区全长序列及其相应的氨基酸序列用DNASIS和PROSIS软件系统进行分析,结果表明:(1)S4克隆片段全长由2217个碱基组成,包含一个编码727个氨基酸的完整开放阅读框架,与RDV日本分离物S4相比,核苷酸和氨基酸序列的同源率分别为92.2％和93.9％;(2)S4编码蛋白序列含有GTP-binding模式,以及两段符合Zinc-finger模式韵序列,但这个GTP-binding模式和其中之一Zinc-finger模式并不存在于伤瘤病毒(WTV)S4编码的蛋白的序列中。

关键词：水稻矮缩病毒第四号片段序列分析编码蛋白

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水稻矮缩病毒基因组第八号片段的cDNA克隆序列分析及在大肠杆菌中的表达

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病毒学报 1995年第1期11卷 56-62页

作者：李玮李毅张旭储瑞银陈章良北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室

从水稻矮缩病毒（ＲＤＶ）中国福建分离物中分离出基因组第八号片段ｄｓＲＮＡ，经逆转录合成ｃＤＮＡ，应用聚合酶链式反应技术扩增了编码区ｃＤＮＡ，并克隆在ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）载体上。该片段编码病毒外层外壳蛋白。对重组子进行... 详细信息

从水稻矮缩病毒（ＲＤＶ）中国福建分离物中分离出基因组第八号片段ｄｓＲＮＡ，经逆转录合成ｃＤＮＡ，应用聚合酶链式反应技术扩增了编码区ｃＤＮＡ，并克隆在ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）载体上。该片段编码病毒外层外壳蛋白。对重组子进行限制性内切酶分析，亚克隆及全序列测定，结果表明，克隆片段全长１３５ｂｐ含有一个１２６６ｂｐ的阅读框架，编码一个含有４２１个氨基酸的多肽。与日本流行株相应片段比较，核苷酸和氨基酸水平的同源率分别为９４．４％和９７．９％。另外，我们所克隆的片段在距起始密码子５３２一５３４处较日本株系多了３个核苷酸，导致ＲＤＶ中国福建分离物外层外壳蛋白比日本株多出一个氨基酸。将该编码区ｃＤＮＡ克隆到原核表达载体ｐＴｒｃＨｉｓＡ上，经ＩＰＴＧ诱导，用ＲＤＶ抗体进行蛋白Ｗｅｓｔｅｍ印迹分析表明，该基因在大肠杆菌中得到高效表达。这项工作为以后进一步开展水稻抗矮缩病基因工程，研究ＲＤＶ与传毒介体昆虫之间的识别关系奠定了基础。

关键词：水稻矮缩病毒第八号片段序列分析 cDNA

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水稻矮缩病毒第11号组分基因序列和编码蛋白的功能分析

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生物工程学报 1996年第3期12卷 361-366页

作者：肖锦李毅全胜顾红雅陈章良蛋白质工程及植物基因工程重点实验室北京大学生命科学学院北京100871

水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus-RDV)广泛分布于中国、日本及东南亚地区,侵染水稻和禾本科其它一些作物,是造成水稻减产的主要原因之一,对农作物危害极大。RDV属于呼肠孤病毒科(Re-oviridae)中的植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus)成员,... 详细信息

水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus-RDV)广泛分布于中国、日本及东南亚地区,侵染水稻和禾本科其它一些作物,是造成水稻减产的主要原因之一,对农作物危害极大。RDV属于呼肠孤病毒科(Re-oviridae)中的植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus)成员,其病毒粒子直径70nm,为20面体。

关键词：水稻矮缩病毒第11号组分基因编码蛋白序列

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水稻矮缩病毒对3种内源激素含量及代谢相关基因转录水平的影响

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植物病理学报 2010年第2期40卷 151-158页

作者：吴建国王萍谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州350002

本文以抗病品种宜香2292(Oryzas ativa L. ssp. indica cv. Yixiang 2292)为材料,采用高效液相色谱技术(HPLC)和Real-time PCR技术研究了水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)胁迫下水稻内源赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)的动态变化。结果表明,受RDV侵染后,病株体内GA3含量显著低于健株,在显症后的第1d和第10d最为明显,分别较健株低6.28和5.92倍;IAA含量呈现波动变化,但病株体内的IAA含量始终较健株低,在显症后的10d最为明显,比健株低3.58倍;与GA3和IAA相反,病株体内ABA的含量始终高于健株,显症后的第1d和第13d最为明显,分别较健株高2.29和2.84倍。Real-time PCR定量检测了植物内源激素相关基因mRNA的表达,结果显示,GA3代谢相关的氧化还原酶基因表现为下调,而IAA和ABA代谢相关的Cullin-1和P-glycoprotein1基因表现出不同程度的上调。以上结果表明:水稻矮缩病的症状表现可能与病株体内的植物内源激素失调有关。

关键词：水稻矮缩病毒植物内源激素赤霉素生长素脱落酸

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