检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王前进浙江大学

学位级别：博士

水稻普通矮缩病是水稻上的一种重要病害,广泛分布于中国、日本、朝鲜、菲律宾、尼泊尔等水稻种植区,给水稻生产造成严重损失。水稻矮缩病毒（Rice dwarf virus,RDV）是水稻普通矮缩病的病原,属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）,植物呼肠孤... 详细信息

水稻普通矮缩病是水稻上的一种重要病害,广泛分布于中国、日本、朝鲜、菲律宾、尼泊尔等水稻种植区,给水稻生产造成严重损失。水稻矮缩病毒（Rice dwarf virus,RDV）是水稻普通矮缩病的病原,属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）,植物呼肠孤病毒属（Phytoreovirus）。黑尾叶蝉（Nephotettiixcincticeps）是RDV的主要传播介体,以增殖型持久性方式传播。本论文以RDV和黑尾叶蝉为主要对象,围绕介体昆虫-病毒-寄主植物三者之间的互作,研究感病寄主植物对介体昆虫生长发育、种群增长、取食和产卵行为的影响,分析病毒与介体昆虫“双重”为害的机制,并测定感病寄主挥发物、氨基酸及防御相关基因的变化,以揭示三者互作的生物学与生态学机制。主要结果如下:1感染RDV的水稻对黑尾叶蝉生物学参数及种群增长的影响叶蝉取食感病水稻TN1后,若虫发育历期和雄成虫寿命相对于健康处理显著缩短,其他生物学参数无显著差异。叶蝉取食感病水稻Xiushuill后,雌性若虫发育历期显著缩短,雄性成虫寿命显著延长,产卵量较健康处理显著增加,其他生物学参数无显著差异。综合分析RDV单因素对两个水稻品种上叶蝉生物学参数的影响,发现与取食健康水稻相比,若虫发育历期显著缩短,雌成虫寿命和产卵量分别显著延长和增加,而对其它生物学参数则无显著影响。RDV仅对黑尾叶蝉的净生殖率（R0）参数有显著影响,RDV-Xiushuill上最高,RDV-TN1上最低,对内禀增长率（rm）、世代平均历期（T）、种群加倍时间（DT）、周限增长率（λ）等生命表参数无显著影响。感病水稻上黑尾叶蝉种群增长更快,总成虫数量更多,在观测的第4、5、6个月时达到显著差异,但在观测的第7个月未达到统计学差异水平。2 RDV对黑尾叶蝉取食和产卵选择性的影响RDV侵染水稻会引起黑尾叶蝉取食选择性的改变,在试验观测的时间段内,随着时间延长,无毒叶蝉逐渐对感病水稻产生趋性,更多的叶蝉集中到感病水稻上取食。对于感染RDV的带毒介体黑尾叶蝉,在试验观测的时间段内,随着时间延长,带毒叶蝉逐渐对健康水稻产生趋性,更多的叶蝉集中到健康水稻上取食。RDV对无毒及带毒黑尾叶蝉的产卵选择性均无显著影响,每植株卵块数、每卵块的卵量及每植株上的总卵量,这三个参数均无显著差异。3 RDV对黑尾叶蝉嗅觉反应的影响用四臂嗅觉仪观测了带毒与无毒的介体黑尾叶蝉对感病与健康状态下的两种水稻挥发物的嗅觉反应。对于无毒叶蝉来说,相对于空白对照（空气）,单一的健康水稻处理或感病水稻处理的挥发物区域都能显著地吸引更多昆虫并长时间的滞留;两个气味源同时存在时,叶蝉则对感病水稻处理的挥发物所在区域表现出更强的趋性。对于带毒叶蝉来说,相对于空白对照（空气）,单一的健康水稻处理或感病水稻处理的挥发物区域也都能显著地吸引更多昆虫并长时间的滞留;而当两个气味源同时存在时,叶蝉则对健康水稻处理的挥发物所在区域表现出更强的趋性。表明RDV可以影响叶蝉的嗅觉行为,从而影响其取食趋性,并最终会对病毒的传播与扩散产生深远影响。4RDV对黑尾叶蝉取食行为影响的EPG测定无毒黑尾叶蝉在感病水稻上非取食波（NP）更短,韧皮部取食（Nc4）和木质部取食（Nc5）总持续时间更长,表明相对于健康的水稻处理,无毒黑尾叶蝉在感病水稻上更快的开始取食,并且在韧皮部和木质部总持续取食时间更长,有利于吸食更多的汁液以获取病毒;同时,带毒黑尾叶蝉在健康水稻上路径波（Nc2）更长,韧皮部取食（Nc4）和木质部取食（Nc5）持续时间相对较短,表明相对于感病水稻处理,带毒黑尾叶蝉吸食汁液的时间较短,但花费在唾液分泌及刺探路径上的时间更长,分泌唾液是传播病毒的先决条件,这也说明RDV的影响使得带毒黑尾叶蝉更容易在健康水稻上将病毒传播出去。综合结果表明RDV会对介体昆虫的刺探取食行为造成影响,最终有利于病毒的获取与传播。5 RDV对水稻挥发物、氨基酸含量及防御相关基因表达水平的影响通过收集和测定水稻挥发物,共鉴定出24种挥发物。其中大部分化合物为萜类化合物,共16种,醇类化合物3种、酮类和酯类化合物各1种,未知化合物 3 种。TN1 水稻感染 RDV 后,2-Heptanone（2-庚酮）、2-Heptanol（2-庚醇）和α-Cedrene（α-柏木烯）的含量显著提高;Xiushui11水稻感染RDV后,仅Linalool（芳樟醇）的含量显著高于健康水稻。对感病水稻叶片内的游离氨基酸进行了测定,共鉴定出18种游离氨基酸。TN1水稻感染RDV后,Ala（丙氨酸）和Met（甲硫氨酸）含量显著提高;Xiushui1 1水稻感染RDV后,Asp（天冬氨酸）和Met（甲硫氨酸）含量显著提高,而g-ABA（γ-氨基丁酸）含量显著降低。本研究中对不同病程点RDV含量的测定结果表明两个水稻品种病

关键词：水稻矮缩病毒黑尾叶蝉生命表种群增长四臂嗅觉仪刺吸电位图谱挥发物氨基酸防御相关基因

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Ⅰ.水稻矮缩病毒第一号和第十一号基因组分的研究;Ⅱ.运用酵母二元杂交系统对水稻东格鲁棒病毒传播辅助因子基因定位的研究

Ⅰ.水稻矮缩病毒第一号和第十一号基因组分的研究;Ⅱ.运用酵母二...

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作者：肖锦北京大学

学位级别：博士

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Ⅰ.共抑制与RNA介导的病毒抗性的研究;Ⅱ.水稻矮缩病毒Pns9蛋白功能的研究

Ⅰ.共抑制与RNA介导的病毒抗性的研究;Ⅱ.水稻矮缩病毒Pns9蛋白功...

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作者：李艳北京大学

学位级别：博士

在转基因植物中,当外源转化基因与植物内源基因相同或同源性很高时,外源转化基因和与它同源的内源基因均不会得到表达,这种现象被称为共抑制(co-suppression)现象.将查尔酮合酶基因(chalconesynthase,chsA)转化矮牵牛会发生共抑制.转基... 详细信息

在转基因植物中,当外源转化基因与植物内源基因相同或同源性很高时,外源转化基因和与它同源的内源基因均不会得到表达,这种现象被称为共抑制(co-suppression)现象.将查尔酮合酶基因(chalconesynthase,chsA)转化矮牵牛会发生共抑制.转基因植物由RNA介导的对病毒的抗性(RNA-mediatedvirusresistance)与共抑制在许多方面有相似性.烟草花叶病毒(TMV)54-kDa蛋白基因(54K)可能能够以RNA的方式介导对TMV的抗病性.我们构建了54K基因的七个突变体,一个为进行了移码突变的全长54K基因,三个为分别覆盖N-端约2/3、C-端约2/3和基因内部261bp的缺失突变体.水稻矮缩病毒(ricedwarfvirus,RDV)是水稻普通矮缩病的病原,属呼肠孤病毒科,植物呼肠孤病毒属.其基因组由12条双链RNA片段S1-S12构成,其中S9编码一个非结构蛋白Pns9.将S9与绿色荧光蛋白GFP报告基因串联,在烟草叶片表皮细胞中进行瞬时表达,激光共聚焦显微镜观察到S9在烟草叶片表皮细胞的细胞质中有荧光存在.采集感染RDV的水稻叶片,做超薄切片,利用Pns9抗体作免疫胶体金试验,发现Pns9非结构蛋白定位于充满病毒核心粒子的病毒胞质中.

关键词：共抑制查尔酮合酶矮牵牛 TMV54K RNA介导病毒抗性水稻矮缩病毒

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Ⅰ.水稻矮缩病毒及转基因水稻的研究;Ⅱ.类查尔酮全酶基因D5的功能研究

Ⅰ.水稻矮缩病毒及转基因水稻的研究;Ⅱ.类查尔酮全酶基因D5的功...

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作者：郑宏红北京大学

学位级别：博士

通过基因枪转化法,将水稻矮缩病毒外壳蛋白基因(S8)、核心蛋白基因(S7)以及非结构蛋白基因(S6)导入到水稻中,分别获得了转基因水稻,基因组DNA的Southern杂交分析表明外源基因已经成功地整合到水稻的基因组中.该文研究工作的另一部分是... 详细信息

通过基因枪转化法,将水稻矮缩病毒外壳蛋白基因(S8)、核心蛋白基因(S7)以及非结构蛋白基因(S6)导入到水稻中,分别获得了转基因水稻,基因组DNA的Southern杂交分析表明外源基因已经成功地整合到水稻的基因组中.该文研究工作的另一部分是关于一个类查尔酮合酶基因D5在花粉发育过程中的功能的研究.为了研究其功能,研究人员将水稻肌动蛋白基因(Actin 1)启动子驱动的D5正义及反义基因分别转入水稻中.通过对转基因水稻花粉不同发育时期进行观察,发现表达了反义D5基因的花粉,其形态表现明显不正常,由此可以推测出D5基因对于花粉的发育起重要作用.

关键词：水稻矮缩病毒转基因水稻病毒样粒子花粉发育

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一种利用水提物快速检测水稻矮缩病毒的方法

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安徽农业科学 2010年第8期38卷 4110-4111页

作者：许曼琳杨金广菏泽学院资源与环境系山东菏泽274000 农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室山东青岛266101

由水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus,RDV)侵染所致的水稻普通矮缩病是我国水稻上主要的病毒病之一,广泛分布于我国水稻种植区。研究了一种快速简捷的检测水稻和传播介体中RDV的方法,整个检测过程仅需20min。利用无菌水(100μl)研磨RDV侵... 详细信息

由水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus,RDV)侵染所致的水稻普通矮缩病是我国水稻上主要的病毒病之一,广泛分布于我国水稻种植区。研究了一种快速简捷的检测水稻和传播介体中RDV的方法,整个检测过程仅需20min。利用无菌水(100μl)研磨RDV侵染后的水稻病叶(10mg)和带毒传播介体黑尾叶蝉(Nephotettix cincticeps)(10mg),取上清液进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,可稳定地检测到5条特异性电泳条带,大小在1000～5000bp,而在健康水稻叶片和无毒叶蝉水提物中检测不到任何电泳条带的存在。该方法可方便快速地检测到水稻和叶蝉中RDV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测(RT-PCR和Western-blot)等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤。

关键词：水稻矮缩病毒水提物快速检测

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抗水稻矮缩病毒的反义核酶及复制酶部分序列的合成、克隆及其水稻表达载体的构建

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中国病毒学 1996年第2期11卷 164-169页

作者：王苏燕盛刚刘伟平叶寅田波中国科学院微生物研究所

采用反转录－聚合酶链式反应方法（ＲＴＰ－ＣＲ），在人工合成的引物引导下，扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段（Ｓ１）全长序列及第五片段的部分序列（ＳＳⅢ）．将扩增的片段分别克隆到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）及ｐＵＣ１９的... 详细信息

采用反转录－聚合酶链式反应方法（ＲＴＰ－ＣＲ），在人工合成的引物引导下，扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段（Ｓ１）全长序列及第五片段的部分序列（ＳＳⅢ）．将扩增的片段分别克隆到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）及ｐＵＣ１９的ｓｍａｌ位点上，并进行了序列测定。在此基础上，利用ｐＣＲ引入的方法将核酶序列引入到Ｓ５Ⅲ片段反义链上以构成反义核酶基因Ｓ５ⅢＲ，将Ｓ１片段５＇端部分序列（Ｓ１－１）及Ｓ５ⅢＲ基因克隆到植物表达载体ｐＲＯＫⅡ上，构建成水稻转化载体ｐＲＯＫ－Ｓ１－１＇及ｐＲＯＫ－Ｓ５ⅢＲ。

关键词：水稻矮缩病毒反义核酶基因表达载体植物病毒

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水稻矮缩病毒基因组第五号片段编码区的cDNA克隆及序列分析

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应用基础与工程科学学报 1994年第Z1期2卷 109-116页

作者：李玮李毅潘乃穟陈章良北京大学生命科学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京100871

水稻矮病毒(RDV)基因组第五号片段S5编码病毒的外层外壳蛋白(outer layer coatprotein)。从RDV中国福建分离物中分离出S5的双链RNA,反转录成cDNA,再利用PCR扩增了编码区cDNA,将扩增产物克隆到载体pBluescript上。经限制性内切酶分析,进... 详细信息

水稻矮病毒(RDV)基因组第五号片段S5编码病毒的外层外壳蛋白(outer layer coatprotein)。从RDV中国福建分离物中分离出S5的双链RNA,反转录成cDNA,再利用PCR扩增了编码区cDNA,将扩增产物克隆到载体pBluescript上。经限制性内切酶分析,进而进行亚克隆和序列测定。结果表明,克隆片段全长2449bp,包含一个编码801个氨基酸的完整开放阅读框架。与RDV日本分离物S5相比,核苷酸和由此推出的氨基酸的同源率分别为94.5％和97.5％。与同组伤瘤病毒(WTV)相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别高达58.1％和51.1％,S5是RDV与WTV基因组中同源性最高的片段。

关键词：水稻矮缩病毒第五号片段序列分析

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16个水稻品种对水稻矮缩病毒抗性的鉴定

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福建农林大学学报（自然科学版） 2010年第1期39卷 10-14页

作者：吴建国巴俊伟李冠义林奇英吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福建福州350002

16个水稻品种对水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)的抗性鉴定结果表明:不同水稻品种对RDV的抗性存在明显差异.根据各品种的发病率划分其抗性等级.免疫品种1个,占供试品种的6.25%;中抗品种6个,占37.50%;中感品种3个,占18.75%;高感品种6... 详细信息

16个水稻品种对水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)的抗性鉴定结果表明:不同水稻品种对RDV的抗性存在明显差异.根据各品种的发病率划分其抗性等级.免疫品种1个,占供试品种的6.25%;中抗品种6个,占37.50%;中感品种3个,占18.75%;高感品种6个,占37.50%.感病品种潜育期较短,为11-15 d左右;抗病品种潜育期较长,为15-20 d左右.水稻品种的发病率与叶蝉带毒率密切相关,相关系数为99.99%.协优46兼具抗虫性和抗病性;宜香2292仅具抗病性;冈优734为免疫品种,是水稻矮缩病抗性育种的良好材料.

关键词：水稻矮缩病毒品种抗性叶蝉抗病性抗虫性

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对水稻矮缩病毒传毒能力存在差异的叶蝉群体mRNA差异表达分析

对水稻矮缩病毒传毒能力存在差异的叶蝉群体mRNA差异表达分析

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作者：巴俊伟福建农林大学

学位级别：硕士

水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV),属于呼肠孤病毒科(Reoviridae),植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus),是水稻矮缩病的病原,广泛分布于中国、日本、朝鲜、菲律宾、尼泊尔等水稻种植区,给水稻生产造成严重损失。该病毒可由黑尾叶蝉(Neph... 详细信息

水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV),属于呼肠孤病毒科(Reoviridae),植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus),是水稻矮缩病的病原,广泛分布于中国、日本、朝鲜、菲律宾、尼泊尔等水稻种植区,给水稻生产造成严重损失。该病毒可由黑尾叶蝉(Nephotettix cincticeps)作为昆虫介体,它是一种经卵以持久方式传播的病毒。本研究构建了两个黑尾叶蝉群体,它们对水稻矮缩病毒传毒能力有显著差异。并利用mRNA差异显示(differential display RT-PCR, DDRT-PCR)技术对这两个群体进行差异分析,找到差异片段,尝试探讨叶蝉高效率传毒的分子机制。在构建高低亲和性黑尾叶蝉方面,无毒的黑尾叶蝉经过连续多代饲毒,传毒后,得到了对RDV传毒效率差异明显的两个黑尾叶蝉群体,通过生物学方法鉴定,高亲和性黑尾叶蝉群体的发病率一直保持在90.0%左右。低亲和性黑尾叶蝉群体的发病率维持在1%-4%。高亲和性群体在F7代的传毒率是87.7%,表明基本成功构建成一个高传毒的叶蝉群体,但是群体的高传毒特性只是在3个月无人工选择压力下的结果,在长时间内是否能保持这一搞得传毒特性还有待进一步的生物学验证。运用mRNA差异显示技术筛选高、低亲和性黑尾叶蝉群体的差异基因,经差异显示,共筛选出差异条带42条,挑选差异显著、重扩增效果好的12条进行RNA斑点杂交验证,获得7个阳性片段,其中DD3、DD5、DD6、DD7和DD8等5个片段为高亲和性黑尾叶蝉群体所特有,DD2、DD11两个片段为低亲和性黑尾叶蝉群体特有。对阳性片段克隆、测序和同源性比较分析,揭示高亲和黑尾叶蝉群体所特有的DD5片段与人类20号染色体RP11-459I16克隆的DNA序列部分基因同源性高达99%;DD6片段与RDV的RNA2上的RNA结合蛋白部分基因同源性达94%,DD8片段序列与黑腹果蝇泛素部分基因有92%的同源性;DD3和DD7片段序列与已知序列同源性较低,推测是新的基因片段。DD2和DD11片段序列是低亲和性黑尾叶蝉群体特有,比对后发现与已知的序列同源性较低,同样推测是新的基因片段。

关键词：水稻矮缩病毒黑尾叶蝉传毒机制 mRNA差异显示

来源：评论

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水稻、黑尾叶蝉与水稻矮缩病毒三者间关系的初步研究

水稻、黑尾叶蝉与水稻矮缩病毒三者间关系的初步研究

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作者：梁莉浙江大学

学位级别：硕士

本论文旨在研究水稻矮缩病毒对黑尾叶蝉生殖生理影响的基础上,结合生物学特性以及分子生物学等方面的技术,研究了黑尾叶蝉在携带RDV后生殖生理上的变化,以此揭示RDV潜在蔓延的机制。主要内容概括如下：1.水稻矮缩病毒对黑尾叶蝉生物学... 详细信息

本论文旨在研究水稻矮缩病毒对黑尾叶蝉生殖生理影响的基础上,结合生物学特性以及分子生物学等方面的技术,研究了黑尾叶蝉在携带RDV后生殖生理上的变化,以此揭示RDV潜在蔓延的机制。主要内容概括如下： 1.水稻矮缩病毒对黑尾叶蝉生物学特征的影响与取食健康稻株相比,取食感染RDV稻株的黑尾叶蝉寿命延长、产卵量增加。稻株感染RDV后可能通过改变水稻的生理状态,于早期吸引黑尾叶蝉取食,随后扩散至健康水稻,加剧水稻普通矮缩病的流行。在健康稻株和感染RDV稻株上取食的黑尾叶蝉卵粒数、卵块数无显著差异。黑尾叶蝉对有机磷类杀虫剂毒死蜱和敌敌畏存在较高的耐药性而对新型杀虫剂则有高敏感性,说明RDV对黑尾叶蝉耐／抗药性的发生与发展有促进作用。 2.黑尾叶蝉取食感染水稻矮缩病毒稻株后其卵巢发育的变化在观察黑尾叶蝉卵巢形态及其发育特征的基础上,就该叶蝉取食感染水稻矮缩病毒稻株后卵巢发育与产卵量的变化进行了系统研究。结果表明,与取食健康稻株的相比,虽然取食感染水稻矮缩病毒稻株的卵巢管长度明显缩短、Ⅲ级卵的比率减少、Ⅱ卵和成熟卵(Ⅳ级卵)的比率无显著变化,但其卵巢管数、卵子总数和Ⅰ级卵的比率则显著增多,说明生殖潜能明显得到提高。同样,取食感染水稻矮缩病毒稻株的产卵量也显著增加。总体而言,水稻矮缩病毒通过感染水稻而影响该叶蝉的卵巢发育并明显提高其产卵量。 3.黑尾叶蝉交配传毒及精子传毒的检测经研究发现：通过交配方式,雌虫可将病毒传播给雄虫而雄虫则不能将病毒传播给雌虫。透射电镜下观察黑尾叶蝉雄成虫睾丸中存在RDV病毒粒子,但电镜照片中只能看到发育不完整的RDV病毒粒子。以RDV外壳蛋白P2的抗体,利用Western-blot方法来检测黑尾叶蝉雄成虫睾丸的带毒情况,结果没有发现含有外壳蛋白的RDV病毒粒子,这说明存在于黑尾叶蝉精子内的RDV病毒粒子没有传毒能力,并不能通过交配方式将病毒传给雌成虫也不能传播于后代。

关键词：黑尾叶蝉水稻矮缩病毒水稻卵巢发育精子超微结构电镜

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