检索结果-内蒙古大学图书馆

江西农业大学学报 2025年第1期47卷 32-40页

作者：胡昱颛程淑媛王全兴杜磊张金艺高欣语刘冰蒋军喜熊桂红江西农业大学农学院江西南昌330045

【目的】明确水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)外壳蛋白CP的自身互作,为揭示CP蛋白在RGSV侵染中的功能提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交(Y2H)技术鉴定RGSV CP与CP蛋白之间的互作。提取感染RGSV水稻叶片的总RNA,通过... 详细信息

【目的】明确水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)外壳蛋白CP的自身互作,为揭示CP蛋白在RGSV侵染中的功能提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交(Y2H)技术鉴定RGSV CP与CP蛋白之间的互作。提取感染RGSV水稻叶片的总RNA,通过RT-PCR扩增得到CP基因。将CP基因分别构建到酵母表达载体pGBKT7和pGADT7上,利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将酵母质粒组合pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照pGADT7-T/pGBKT7-53、阴性对照pGADT7-T/pGBKT7-Lam分别转化到酵母感受态细胞Y2HGold中,先后涂布于缺陷型培养基SD/-Leu/-Trp和SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上。通过观察酵母细胞在缺陷培养基上的生长和显色情况鉴定CP蛋白的毒性、自激活活性和自身互作关系。利用亚细胞定位和双分子荧光互补(BiFC)鉴定CP在本氏烟中的定位及互作。将CP构建到植物瞬时表达载体pEarleyGate101(101)、pEarleyGate202-YN(YN)、pEarleyGate202-YC(YC)上,并利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将阳性克隆101-CP、YN-CP、YC-CP、空载体YN、YC分别转化到农杆菌GV3101中。将含阳性质粒101-CP的农杆菌单独注射本氏烟叶片;将含阳性质粒YN-CP/YC-CP、阴性对照YN-CP/YC、YN/YC-CP的农杆菌共注射本氏烟叶片;利用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的发光和定位。【结果】RT-PCR扩增得到CP基因,其大小为978bp。成功构建酵母表达载体pGBKT7-CP和pGADT7-CP。含质粒pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照和阴性对照的酵母菌均能在缺陷培养基SD/-Leu/-Trp平板上生长,且含质粒pGBKT7-CP/pGADT7的酵母菌的生长情况与对照一致,说明CP蛋白对酵母菌无毒性。但仅含质粒pGBKT7-CP/pGADT7-CP的酵母菌和阳性对照可在缺陷培养基SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal平板上生长并显色,表明CP蛋白无自激活活性,且CP蛋白在酵母细胞中能够自身互作。成功构建CP基因的植物表达载体;亚细胞定位结果显示,CP蛋白主要定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜上。BiFC结果显示CP存在自身互作,且互作也定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜。【结论】水稻草状矮化病是由水稻草状矮化病毒引起的,给粮食产量造成了严重威胁。RGSVCP是该病毒的外壳蛋白,可能在病毒复制、装配、侵染等过程中发挥着重要的作用。通过亚细胞定位、Y2H和BiFC鉴定了RGSVCP的定位和自身互作,为CP蛋白的功能研究提供参考,为解析RGSV的致病机制提供依据。

关键词：水稻草状矮化病毒外壳蛋白载体构建酵母双杂交亚细胞定位双分子荧光互补蛋白互作

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水稻草状矮化病毒侵染寄主水稻差异表达蛋白的鉴定和分析

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中国农业科学 2014年第9期47卷 1725-1734页

作者：丁新伦谢荔岩吴祖建福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒重点实验室

【目的】对水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)侵染寄主水稻后其叶片的差异表达蛋白进行筛选、鉴定和生物信息学分析,为进一步研究RGSV和寄主水稻互作的分子机制提供线索。【方法】采用双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimension... 详细信息

【目的】对水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)侵染寄主水稻后其叶片的差异表达蛋白进行筛选、鉴定和生物信息学分析,为进一步研究RGSV和寄主水稻互作的分子机制提供线索。【方法】采用双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE)和Image Master 2D platinum 7.0分析软件寻找差异表达蛋白,MALDI-TOF-MS(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight tandem mass spectrometry)鉴定差异蛋白,利用BioTools软件搜索NCBI数据库,寻找匹配的相关蛋白质和功能查询。采用GOminer软件对差异蛋白进行GO(Gene ontology)聚类分析,KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)数据库分析差异蛋白所参与的生物通路。【结果】建立了RGSV侵染与未侵染水稻的叶片双向荧光差异凝胶电泳图谱,RGSV病株与健株相比,差异倍数大于1.5的差异蛋白质点有173个,其中表达丰度升高的点有72个,表达丰度下降的点有101个,质谱鉴定了44个差异蛋白质点,25个获得成功鉴定,分属于24种蛋白质,包括RGSV的2种蛋白20.6K非结构蛋白和P5蛋白,水稻中的蛋白推定的核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基、景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶前体、推定的酪氨酸磷酸酶、HAD超家族水解酶-亚族IA蛋白变体3蛋白、水稻核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶小亚基结合2-羧基阿拉伯糖醇-1,5-二磷酸复合体、类似C1结构域蛋白以及其他一些功能未知蛋白和假定蛋白。对已鉴定蛋白的生物信息分析显示,差异蛋白涉及氮素固定、氮循环代谢过程、含氮化合物代谢过程、单一生物体代谢过程、代谢过程和生物过程等6个生物学过程,在生物功能上分属7类,包括分子功能、酸胺连接酶活性、酰胺连接酶活性、催化活性、谷氨酸氨连接酶、连接酶活性和形成C-N键的连接酶活性,在细胞组件上,差异蛋白分布于不同的细胞位置,涉及细胞组分、细胞器、细胞、膜结合细胞器、囊(泡)、细胞部分、膜结合囊(泡)、胞内、胞内部分、胞内细胞器、细胞质、胞内膜结合细胞器、细胞质部分、质体、细胞质囊(泡)和细胞质膜结合囊(泡)。KEGG通路分析显示,差异蛋白参与了代谢途径、光合生物固碳反应、碳代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢、氨基酸生物合成、丙酮酸盐代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、谷胱甘肽代谢和氮代谢途径等10个KEGG代谢通路。【结论】RGSV侵染诱导了水稻差异蛋白质表达,获得了一些与RGSV侵染水稻相关的蛋白质分子,差异蛋白涉及到多个功能类别。其中与氮有关的生物学过程和光合作用过程变化较为明显。

关键词：水稻草状矮化病毒差异表达蛋白 2D-DIGE MALDI-TOF-MS

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水稻草状矮化病毒转录水平基因沉默抑制子的筛选

水稻草状矮化病毒转录水平基因沉默抑制子的筛选

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作者：王红福建农林大学

学位级别：硕士

水稻草状矮化病毒(Rice gray virus,RGSV)是纤细病毒属(Tenuivirus)的一个成员,由褐飞虱(Nilaparvatalugens Stal.)以持久增殖型方式传播,但不经卵传播。该病毒的自然寄主仅有水稻,人工接种可侵染稻属所有的种。水稻感染该病毒后,可导... 详细信息

水稻草状矮化病毒(Rice gray virus,RGSV)是纤细病毒属(Tenuivirus)的一个成员,由褐飞虱(Nilaparvatalugens Stal.)以持久增殖型方式传播,但不经卵传播。该病毒的自然寄主仅有水稻,人工接种可侵染稻属所有的种。水稻感染该病毒后,可导致水稻产生叶片黄化,植株矮化,分蘖增多等症状,感病水稻基本不抽穗,对水稻生产造成严重危害。RGSV自1963年在菲律宾发现以来,至今已有55年的历史。然而,关于RGSV基因组编码蛋白的功能、致病机理及其与寄主的互作等方面的报道较少。为了分析RGSV的致病机制及其编码蛋白的功能,本研究利用马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)异源表达载体为骨架,分别构建了 RGSVP2、P3、PC3、P4、PC4、P5、PC5、P6和PC6等9个蛋白的PVX过表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的瞬时表达体系注射16c-TGS烟草,对RGSV编码蛋白的致病性及其可能参与的基因沉默机制进行探索。本研究以PVX空载体为阴性对照,以PVX-βC1载体为阳性对照。结果显示,注射后5天,阳性对照PVX-βC1注射烟草的系统叶开始表现出叶片卷曲、皱缩等症状,通过紫外灯下监测烟草中绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的信号并记录各病毒蛋白载体的表达情况。注射后12天,在紫外灯下检测绿色荧光蛋白的表达情况;同时,将样品取样,运用qRT-PCR和Western blot的方法分别检测基因和蛋白的表达情况。基于16c-TGS系统,利用紫外检测结果表明,RGSV编码的各蛋白注射16c-TGS烟草后,除了 PVX-P3和PVX-P5能检测到弱的绿色荧光外,其它蛋白并没有检测到绿色荧光蛋白信号。我们进一步对烟草中GFP的表达量进行Western blot检测,结果显示,阳性对照组PVX-βC1载体注射的烟草中GFP表达量最高,实验组中PVX-P3和PVX-P5注射的烟草中GFP的表达量比RGSV编码的其它蛋白显著提高,此外,我们又对GFP进行了 qRT-PCR的检测,结果与Western blot检测结果相符,这可能暗示RGSV编码的P3和P5具有弱的转录水平的沉默抑制活性。为了分析P5和P3是否与其它RGSV编码蛋白共同调控病毒的致病性,我们将P5、P3分别和RGSV的其它8个蛋白共注射烟草,观察烟草表型。结果表明,共注射后对各蛋白表型出现时间并没有太大影响,并且P5、P3与其它蛋白共注射后表现出P5和P3蛋白的致病症状,qRT-PCR对PVX外壳蛋白CP基因的检测结果表明,共注射与单独注射PVX-P5和PVX-P3载体对PVX的致病性增强并无影响。综上所述,RGSV编码的P3和P5可能具有转录水平的沉默抑制功能,并且P3和P5蛋白与其它蛋白共注射后对PVX的致病性增强并无明显影响。该研究利用PVX-烟草系统异源表达RGSV各个编码蛋白,分析其致病性,为解析RGSV编码蛋白可能参与的水稻病害症状形成和致病机理奠定了基础。

关键词：水稻草状矮化病毒基因沉默马铃薯X病毒致病机理

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水稻草状矮化病毒对褐飞虱翅型分化的影响

水稻草状矮化病毒对褐飞虱翅型分化的影响

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作者：何海芳福建农林大学

学位级别：硕士

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus, RGSV),是纤细病毒属的成员之一,可以引起水稻草状矮化病(Rice grassy stunt disease),简称水稻草矮病,是热带和亚热带地区水稻上的重要病害之一,严重时甚至可造成水稻的绝产。该病毒由昆虫... 详细信息

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus, RGSV),是纤细病毒属的成员之一,可以引起水稻草状矮化病(Rice grassy stunt disease),简称水稻草矮病,是热带和亚热带地区水稻上的重要病害之一,严重时甚至可造成水稻的绝产。该病毒由昆虫介体褐飞虱(Nilaparvata lugens)以持久、增殖性方式传播。褐飞虱是一种迁飞性害虫,成虫具有明显的翅二型现象。有研究表明,病毒的侵染会对褐飞虱的翅型分化产生影响。本课题通过生物学统计实验、荧光定量PCR实验、酵母双杂交实验、亚细胞共定位实验和原核表达实验对该问题进行了研究,研究结果如下：1、生物学统计实验的结果表明,褐飞虱携带RGSV种群和无毒种群成虫的翅型分化存在显著差异,其中无毒虫的短翅型比例为23.17±0.56%,长翅型比例为60.43±0.22%。而饲过毒的褐飞虱短翅型的比例为36.26±0.42%,长翅型比例为52.32±1.16%。2、通过实时荧光定量qRT-PCR实验对褐飞虱翅型分化相关基因flightin、 Tnc、Titin、LN-a2在褐飞虱体内的表达量进行了测定,结果表明,RGSV侵染后,各基因均表现为下调。3、成功的构建了酵母表达载体pGADT7-flightin。通过酵母双杂交实验得出褐飞虱flightin蛋白能够与RGSV的P1,P3,P5蛋白产生互作。4、成功构建了瞬时表达载体pEarly gate 101-flightin和pEarly gate 102-flightin。通过亚细胞共定位实验进一步验证了flightin与RGSV的P1,P3,P5蛋白之间的互作。5、成功构建了原核表达载体pDEST17-flightin,制备了褐飞虱flightin基因的多克隆抗体,Western blot实验的检测结果表明,所制备的抗血清能够特异性地检测褐飞虱体内的flightin蛋白,间接ELISA检测结果表明所制备的抗体效价为1：6400。综上所述,本研究基本明确了水稻草状矮化病毒对褐飞虱翅型分化的影响,并通过分子生物学相关实验筛选到部分关键基因,为进一步的研究奠定了良好的基础。

关键词：水稻草状矮化病毒褐飞虱翅型分化 flightin基因

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水稻草状矮化病毒和水稻锯齿叶矮缩病毒的分子检测

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生物灾害科学 2022年第4期45卷 469-474页

作者：胡昱颛宋水林宋东海刘玥熊桂红江西农业大学农学院江西南昌330045 江西农业大学江西省薯芋生物学重点实验室江西南昌330045

【目的】明确采自福州水稻基地中水稻的病毒种类,为生产上有效防控水稻病毒病提供科学依据。【方法】从福建省福州市仓山区水稻基地采集有矮缩、黄化、分蘖增多等症状的水稻样品共9株,采用RT-PCR方法对其病原进行鉴定。根据水稻草状矮化... 详细信息

【目的】明确采自福州水稻基地中水稻的病毒种类,为生产上有效防控水稻病毒病提供科学依据。【方法】从福建省福州市仓山区水稻基地采集有矮缩、黄化、分蘖增多等症状的水稻样品共9株,采用RT-PCR方法对其病原进行鉴定。根据水稻草状矮化病RGSV P6和水稻锯齿叶矮缩病RRSV P10的基因序列分别设计一对特异性引物,提取感病水稻样品和健康水稻叶片的总RNA,并进行RT-PCR扩增和测序。【结果】在9株水稻样品中,均扩增到500 bp左右的片段,与RGSV预期片段大小一致;有1株同时扩增到750 bp左右的片段,与RRSV预期片段大小一致,而健康水稻中均未扩增到相关条带。【结论】水稻病毒田间的毒源种类比较多,也常常出现复合侵染和隐症现象,因此仅通过病害症状表现很难诊断病毒病,需借助分子生物学手段才能作出正确的诊断。RT-PCR鉴定结果表明采集的9株矮缩水稻样品均感染RGSV,有一株复合感染RRSV。水稻病毒病病原的鉴定将为水稻病害的防治提供参考依据。

关键词：水稻草状矮化病毒水稻锯齿叶矮缩病毒 RT-PCR 病毒检测

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水稻草状矮化病毒侵染下水稻根发育相关基因的表达分析

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中国农学通报 2014年第36期30卷 120-123页

作者：丁新伦谢荔岩潘贤吴祖建福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒重点实验室/农业部闽台作物有害生物综合治理重点实验室福州350028

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)引起的水稻草矮病是热带和亚热带稻区的重要病害,RGSV侵染引起水稻植株根系严重发育不良。为解析RGSV侵染引致水稻根系发育不良的分子机制,以水稻品种‘汕优63’为材料,通过实时荧光定量... 详细信息

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)引起的水稻草矮病是热带和亚热带稻区的重要病害,RGSV侵染引起水稻植株根系严重发育不良。为解析RGSV侵染引致水稻根系发育不良的分子机制,以水稻品种‘汕优63’为材料,通过实时荧光定量RT-PCR技术分析水稻经RGSV侵染后根系发育相关基因Os PHR2、QHB、Os RR1、Os EXPB5、Crl-5和Os EXPA17等基因的m RNA表达量变化。结果表明,RGSV侵染引起Os PHR2和Crl-5基因表达下调,下调比率分别为2.18和4.86,而水稻病株QHB、Os RR1、Os EXPB5和Os EXPA17等基因的表达量与健株相比,各基因差异比率分别为1/1.49、1.01、1.39、1/1.37,表明RGSV侵染未引起这些基因的表达量发生变化。RGSV可能通过直接或间接调控根系发育相关基因表达水平而使根系发育异常。

关键词：水稻草状矮化病毒根发育相关基因实时荧光定量RT-PCR

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DNA甲基化介导的水稻草状矮化病毒致病机制

DNA甲基化介导的水稻草状矮化病毒致病机制

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作者：石超南福建农林大学

学位级别：硕士

DNA甲基化作为一种保守的表观遗传修饰途径能够引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及其与蛋白质的相互作用的改变,进而调控基因表达,在植物生长发育、植物响应生物胁迫和非生物胁迫等多个生命过程发挥重要调控作用。水稻草状矮化病毒(R... 详细信息

DNA甲基化作为一种保守的表观遗传修饰途径能够引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及其与蛋白质的相互作用的改变,进而调控基因表达,在植物生长发育、植物响应生物胁迫和非生物胁迫等多个生命过程发挥重要调控作用。水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)是布尼亚病毒科(Bunyaviridae)纤细病毒属(Tenuivirus)的成员,该病毒以介体褐飞虱(Nilaparvata lugens(Stal))以持久增殖型方式传播,可侵染水稻导致植株矮化、分蘖增多、叶片黄化等典型病害症状。然而,关于RGSV的致病机理尚不清楚。本研究通过水稻遗传转化体系获得该病毒编码蛋白的转基因过表达株系。结果显示P3过表达导致水稻出现植株矮化、分蘖增多、谷穗谷粒变小等类似于RGSV诱导的病害症状的发育表型。我们利用酵母双杂交、免疫共沉淀以及荧光素酶裂解实验等证明了P3与RNA介导的DNA甲基化通路(RNA-directed DNA methylation,Rd DM)中的关键因子植物特异性RNA聚合酶Ⅳa(Plant-specific RNA polymeraseⅣa,PolⅣa)互作。深入研究发现,P3可以在农杆菌介导的烟草瞬时表达系统中通过泛素蛋白酶体途径降解PolⅣa。通过RNAi技术获得了PolⅣa的Knockdown转基因水稻,验证了PolⅣa也具有调控水稻株高、分蘖、谷穗谷粒大小等重要农艺性状的生物学功能。鉴于PolⅣa是Rd DM路径的重要参与者,我们通过重硫酸盐测序得出,RGSV侵染水稻、P3过表达和PolⅣa RNAi转基因水稻与野生型水稻相比,其全基因组DNA甲基化水平显著降低。其中,CHH类型的DNA甲基化水平的降低尤为明显。综上所述,我们得出结论:RGSV编码的P3蛋白可能通过泛素蛋白酶体途径降解PolⅣa,抑制水稻Rd DM途径导致DNA低甲基化进而诱导植株矮化、分蘖增多和谷穗谷粒变小等病害症状的形成。DNA甲基化通常作为一种植物抵御DNA病毒侵染的调控机制,然而RGSV作为一个负单链RNA病毒可能通过劫持Rd DM通路诱导病害症状发生,具有一定的理论创新性;另外,本研究初步解析了RGSV编码的P3蛋白介导的致病机制,为水稻抗病毒分子育种提供了新的靶标。

关键词： DNA甲基化水稻草状矮化病毒泛素蛋白酶体致病机制

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水稻条纹病毒的病原性质、致病性分化及分子变异

水稻条纹病毒的病原性质、致病性分化及分子变异

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作者：林含新福建农业大学

学位级别：博士

水稻条纹病毒(RSV)是纤细病毒属(Tenuicirus)的典型成员,分布于我国十六个省市,给我国水稻生产造成严重损失.该文在对我国RSV化学组成和血清学特性研究的基础上,初步揭示了我国RSV的株系分化和分子变异情况.根据RSV介体昆虫的迁飞能力... 详细信息

水稻条纹病毒(RSV)是纤细病毒属(Tenuicirus)的典型成员,分布于我国十六个省市,给我国水稻生产造成严重损失.该文在对我国RSV化学组成和血清学特性研究的基础上,初步揭示了我国RSV的株系分化和分子变异情况.根据RSV介体昆虫的迁飞能力、列同源性、碱基变异特征、中日两国病害发生流行地点和时间及亚洲季风气候特点,该文就RSV的起源和流行传播途径进行了坟论.根中分离物CP和SP氨基酸序列一致性,对应各分离物之间的致病性差异,该文还讨论了CP和SP的功能,可能与症状严重度和昆虫介体的识别有关.

关键词：水稻条纹病毒水稻草状矮化病毒外壳蛋白相互关系株系分化

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水稻草矮病毒各基因对水稻的遗传转化

水稻草矮病毒各基因对水稻的遗传转化

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作者：王开放福建农林大学

学位级别：硕士

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus, RGS V)引起的水稻草状矮化病,简称水稻草矮病,是热带、亚热带稻区的重要病害之一。该病毒引起的症状主要是水稻植株分蘖增多、矮化、新叶褪绿以及锈斑。该病毒可以编码12个蛋白,其中一个是RN... 详细信息

水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus, RGS V)引起的水稻草状矮化病,简称水稻草矮病,是热带、亚热带稻区的重要病害之一。该病毒引起的症状主要是水稻植株分蘖增多、矮化、新叶褪绿以及锈斑。该病毒可以编码12个蛋白,其中一个是RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP),其余1 1个蛋白为功能蛋白。为了研究该病毒的11个基因与该病毒引起的症状之间的关系,我们将该病毒的各个基因对水稻进行遗传转化,在水稻体内研究草矮病毒的各个基因与水稻植株之间的关系。将RGSV基因构建到PCAMBIA2300-Actin-ocs (PXQ-act)载体上,获得重组子PXQ-P1、PXQ-P2、PXQ-P3、PXQ-P4、PXQ-P5、PXQ-P6、PXQ-PC3、 PXQ-PC4、PXQ-PC5、PXQ-PC6,然后转化农杆菌EHA105,对水稻愈伤进行侵染,随后进行筛选、分化。最后对转基因植株进行PCR鉴定,Southern杂交鉴定,结果获得了P2、P3、P4、P5、PC3、PC5、PC6的转基因阳性植株。其中P3的转基因植株分蘖明显增多,症状与感染RGSV症状相似,这表明P3基因可能与该病毒的致病性直接相关。仅有一株PC5(暂命名为PC5.1)的转基因植株表现了生长发育缓慢、半边叶、卷叶等症状,而其他基因的转基因植株未有明显的表型。利用荧光定量PCR (Real Time PCR)技术检测了P3转基因植株中POL4、 P3基因mRNA的表达量。POL4是与水稻分蘖密切相关的一个基因。结果表明POL4与P3基因的表达量变化趋势一致,两者与水稻分蘖数的变化是负相关。同时为了研究PC5-1的症状是否与PC5基因相关,我们用荧光定量PCR检测了正常的PC5转基因植株与PC5-1中PC5基因的表达量,结果表明PC5的表达量没有差异。然后我们应用反向PCR技术获得了PC5基因在水稻基因组中插入位置的侧翼序列,克隆到一功能未知的水稻基因,命名为nCOX4 。检测nCOX4在PC5-1及其他转基因植株、非转基因植株中的表达量,发现PC5-1中nCOX4的表达被显著的抑制了,结果表明nCOX4可能是水稻形态建成中又一重要的基因。

关键词：水稻草状矮化病毒水稻遗传转化症状分蘖

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水稻MYB基因家族特征及其在RGSV和RRSV侵染后的响应

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植物病理学报 2023年第2期53卷 258-266页

作者：徐荣荣常青魏莹李霞吴建国赵珊珊福建农林大学虫媒介病毒研究中心福建省植物病毒学重点实验室闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室福州350002

MYB基因家族作为植物体内最大的转录因子家族之一,在调节植物生长发育以及抗逆境胁迫方面发挥着至关重要的作用。然而,OsMYBs在水稻抗病毒通路中的作用还尚不清楚。为了探究OsMYBs家族在水稻抗病毒通路中所扮演的角色,对其结构、特征,... 详细信息

MYB基因家族作为植物体内最大的转录因子家族之一,在调节植物生长发育以及抗逆境胁迫方面发挥着至关重要的作用。然而,OsMYBs在水稻抗病毒通路中的作用还尚不清楚。为了探究OsMYBs家族在水稻抗病毒通路中所扮演的角色,对其结构、特征,以及对已报道的单链RNA病毒水稻草状矮化病毒(rice grassy stunt virus,RGSV)和双链RNA病毒水稻锯齿叶矮缩病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)侵染后的表达谱进行分析,发现51个响应RGSV侵染,50个响应RRSV侵染。进一步分析发现,26个OsMYBs可同时响应两种不同类型病毒。从中筛选出10个表达量相对较高且差异倍数较大的基因进行实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR)验证,结果表明,OsMYB30、LOC_Os02g42850、LOC_Os02g47744、LOC_Os05g37050、LOC_Os06g43090和LOC_Os08g33150在响应两种病毒侵染后表达量下调;而LOC_Os05g38460在响应两种病毒侵染后表达量上调。LOC_Os05g51160和LOC_Os09g26170在RGSV侵染后表达量上调,在RRSV侵染后表达量下调;而LOC_Os08g05520在RGSV侵染后表达量下调,在RRSV侵染后表达量上调。这10个基因中有7个在两种病毒侵染后表达量变化趋势相同,表明这些基因可能对病毒响应具有广谱性。这为深入解析OsMYBs在水稻与病毒互作中的功能提供了有用的信息。

关键词：水稻MYB基因水稻草状矮化病毒水稻锯齿叶矮缩病毒

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