检索结果-内蒙古大学图书馆

中国植物病理学会2017年学术年会

作者：谢云杰张晓峰王娟王海涛魏太云福建省植物病毒学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所

水稻黄矮病毒（Rice yellow sturt virus,RYSV）是弹状病毒科,核弹状病毒属的成员,是负单链RNA病毒能够同时侵染水稻和介体叶蝉。该病毒编码的非结构蛋白P6在病毒侵染介体昆虫过程中的功能还不清楚。鉴于此,本研究通过免疫荧光技术在黑... 详细信息

水稻黄矮病毒（Rice yellow sturt virus,RYSV）是弹状病毒科,核弹状病毒属的成员,是负单链RNA病毒能够同时侵染水稻和介体叶蝉。该病毒编码的非结构蛋白P6在病毒侵染介体昆虫过程中的功能还不清楚。鉴于此,本研究通过免疫荧光技术在黑尾叶蝉培养细胞标记P6与各个蛋白之间的定位关系,结果发现P6分别能与病毒原质组分蛋白N、P在细胞核内发生共定位,并且利用酵母双杂交系统进一步验证了P6分别能与N、P发生明显互作。为了进一步明确P6在病毒复制增殖中发挥的作用,笔者利用了RNAi干扰技术,即在病毒侵染黑尾叶蝉培养细胞中干扰P6,用共聚焦显微镜观察病毒侵染率变化情况,利用RT-PCR实验检测N、P以及基质蛋白M的相对表达量。结果表明,干扰P6后,病毒侵染率从50%下降到25%,N与对照相比相对表达量下降约37%,P与对照组相比相对表达量下降约32%,M与对照组比相对表达量下降约48%,总体上病毒量发生明显下降。因此,笔者推测水稻黄矮病毒在介体昆虫体内形成病毒原质时,P6分别与N、P相互作用,利于病毒原质的形成,加快了病毒的复制,对病毒复制增殖起到了明显的促进作用。

关键词：水稻黄矮病毒 P6 黑尾叶蝉互作

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水稻黄矮病毒的分子生物学研究: L蛋白基因的结构分析及转N蛋白基因的分子鉴定

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植物病理学报 1997年第3期 96-96页

作者：赵珩中国农业大学

水稻黄矮病毒的分子生物学研究：Ｌ蛋白基因的结构分析及转Ｎ蛋白基因的分子鉴定ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＯＦＲＩＣＥＹＥＬＬＯＷＳＴＵＮＴＶＩＲＵＳ：ＳＴＲＵＣＴＵＲＥＯＦＴＨＥＬ（ＰＯＬＹＭＥＲ... 详细信息

水稻黄矮病毒的分子生物学研究：Ｌ蛋白基因的结构分析及转Ｎ蛋白基因的分子鉴定ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＯＦＲＩＣＥＹＥＬＬＯＷＳＴＵＮＴＶＩＲＵＳ：ＳＴＲＵＣＴＵＲＥＯＦＴＨＥＬ（ＰＯＬＹＭＥＲＡＳＥ）ＰＲＯＴＥＩＮＧＥＮＥＡＮ...

关键词：水稻黄矮病毒稻黄矮病毒分子生物学研究蛋白基因分子鉴定结构分析分析(力学)

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制备水稻黄矮病毒抗血清的初步研究

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微生物学报 1978年第2期 173-174页

水稻黄矮病我国最早于1964年发生于广东、广西等地,1966年在浙江省文成、平阳等县发生,1970—1971年间遍及浙江省大部地区造成危害。台湾省也有发生,称之为'黄叶病'。传毒试验证明,此病在广东等地由大斑黑尾叶蝉(Nephotettix ap... 详细信息

水稻黄矮病我国最早于1964年发生于广东、广西等地,1966年在浙江省文成、平阳等县发生,1970—1971年间遍及浙江省大部地区造成危害。台湾省也有发生,称之为'黄叶病'。传毒试验证明,此病在广东等地由大斑黑尾叶蝉(Nephotettix apicalis)、浙江由黑尾叶蝉(***-ceps)传播。病毒粒子弹形,电镜负染色观察粒子大小为88—100×120—136微米,超薄切片中粒子大小为50—75×100—125微米,粒子杆状。迄今未见有关水稻黄矮病毒抗血清制备之确切报道。1977年我们试制成水稻黄矮病毒抗血清,现将研究初步结果报道如下:

关键词：水稻黄矮病毒初步研究中孔特异性所得稻黄矮病毒中跨抗血清琼脂双扩散法水稻普通矮缩病

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我省杂交水稻黄矮病毒病的初步调查

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四川农业科技 1981年第2期 27-28页

一、黄矮病在我省的发生概况: 杂交水稻黄矮病(暂黄病)1977年在我省成都市金牛区零星发生,之后在温江、乐山两地进行调查,均有同样情况发生。据了解过去我省水稻从未发生类似情况,在我省还是一个新病害。我们曾作了移栽病株于室内进行... 详细信息

一、黄矮病在我省的发生概况: 杂交水稻黄矮病(暂黄病)1977年在我省成都市金牛区零星发生,之后在温江、乐山两地进行调查,均有同样情况发生。据了解过去我省水稻从未发生类似情况,在我省还是一个新病害。我们曾作了移栽病株于室内进行病症的发展分析,的确属当前杂交水稻推广地区的一种常见病害。

关键词：水稻黄矮病毒初步调查稻黄矮病毒杂交水稻黑尾叶蝉水稻

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应用Dot-ELISA快速检测黑尾叶蝉体内水稻黄矮病毒研究

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浙江万里学院学报 1993年第Z1期7卷 10-13页

作者：秦文胜高东明陈声祥何永喜毛军浙江省农科院病毒室杭州310021 浙江农村技术师专农学系宁波315101 浙江农业大学植保系杭州310029

本文给出了应用膜上斑点免疫吸咐试验(Dot—ELISA)检测黑尾叶蝉体内水稻黄矮病毒的方法,试验研究表明:使用该方法检测比ELISA法不仅操作简便、使用抗原少,而且快速、灵敏度更高并可长期保存结果。因此,作者认为该法可作为基层单位测报... 详细信息

本文给出了应用膜上斑点免疫吸咐试验(Dot—ELISA)检测黑尾叶蝉体内水稻黄矮病毒的方法,试验研究表明:使用该方法检测比ELISA法不仅操作简便、使用抗原少,而且快速、灵敏度更高并可长期保存结果。因此,作者认为该法可作为基层单位测报时应用。

关键词：水稻黄矮病毒黑尾叶蝉 Dot—ELISA

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水稻黄矮弹状病毒的分子生物学:M和G基因的序列及病毒基因转录物的新结构特征

水稻黄矮弹状病毒的分子生物学:M和G基因的序列及病毒基因转录物...

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作者：罗宗礼中国科学院微生物研究所

学位级别：博士

水稻黄矮病毒是一种含单链、负极性RNA基因组的植物弹状病毒.该研究利用基因3和基因6末端片段为探针,通过朝未知基因方向步进的方法,从RYSV基因组RNA的cDNA文库中筛选得到了覆盖RYSV M基因和G基因序列的克隆,并测定了它们的核苷酸序列.... 详细信息

水稻黄矮病毒是一种含单链、负极性RNA基因组的植物弹状病毒.该研究利用基因3和基因6末端片段为探针,通过朝未知基因方向步进的方法,从RYSV基因组RNA的cDNA文库中筛选得到了覆盖RYSV M基因和G基因序列的克隆,并测定了它们的核苷酸序列.M和G基因序列的测定促成了RYSV基因组的全序列分析:RYSV基因组全长14042个核苷酸,共含有七个基因,其中基因6是植物弹状病毒中发现的一个新基因.M基因共含913个核苷酸(nt),包括17nt的5′非编码区、789nt的编码区和107nt的3′非编码区.M基因编码的蛋白质含262个氨基酸,计算分子量29,125Da.血清学实验证明M基因编码RYSV的M蛋白.RYSV的M蛋白与其它弹状病毒M蛋白无明显的序列同源性,但它们的氨基酸组成及结构特点却很相似,如含有较多的碱性氨基酸、酸性氨基酸区与碱性氨基酸区相间排列等.G基因全长2158nt,包括45nt的5′非编码区、2010nt的编码区及103nt的3′非编码区.G基因编码的蛋白质分子量75,358Da,含669个氨基酸,具有典型的弹状病毒糖蛋白的结构特点,N端有一个由32个氨基酸组成的信号肽,C端含有一疏水性氨基酸组成的跨膜区,另外还存在10个糖基化位点和一些可能的磷脂结合域.用3′RACE和5′RACE的方法确定了RYSV所有基因的转录终止位点及部分基因的转录起始位点,证明RYSV各基因间存在保守的基因间隔序列并发现了基因转录物的新的结构特征:1)M、G、L基因和基因6的转录物的5′端存在非病毒来源的核苷酸序列;2)正链leader RNA 3′末端带有poly(A)尾.

关键词：水稻黄矮病毒弹状病毒 M基因 G基因核苷酸序列转录物

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水稻黄矮弹状病毒基因功能的研究

水稻黄矮弹状病毒基因功能的研究

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作者：黄彦威中国科学院微生物研究所

学位级别：博士

本论文对基因3的产物P3蛋白进行了研究，生物信息学分析表明它是属于30K运动蛋白超家族的成员。在Northwestern实验中，P3蛋白表现出对单链RNA的非特异性结合，这是30K超家族成员的常见性质。在GST-pull-down实验中，P3蛋白表现出了与病... 详细信息

本论文对基因3的产物P3蛋白进行了研究，生物信息学分析表明它是属于30K运动蛋白超家族的成员。在Northwestern实验中，P3蛋白表现出对单链RNA的非特异性结合，这是30K超家族成员的常见性质。在GST-pull-down实验中，P3蛋白表现出了与病毒N蛋白的结合活性，它与N蛋白的结合区域被定位在61-90位氨基酸之间。由于N蛋白是弹状病毒复制和细胞间移动的基本单位-核酸核蛋白核芯(ribonucleoproteincore)的组成部分，P3与N蛋白的结合活性可能参与了病毒的细胞间运动。这是首次在植物弹状病毒中确认了运动蛋白的存在。\n　　本论文证明了基因6的产物P6蛋白在病毒颗粒和传毒的中间宿主(叶蝉)中存在。这是在弹状病毒中首次证明G基因和L基因之间的小基因所编码的蛋白是病毒的结构蛋白。体外的磷酸化实验表明，P6蛋白可以被CKⅡ磷酸化，磷酸化发生在Ser和Thr上。P6蛋白在病毒复制、形态构成或昆虫传毒中的功能尚不清楚。\n　　本论文开展了建立水稻黄矮病毒反向遗传学系统的研究，已经完成了minigenome策略所需的基本质粒的构建，即含有GUS报道基因的水稻黄矮病毒minigenome、水稻黄矮病毒RNA复制所需的L、N、P蛋白的植物表达载体，目前正在试图建立一个有效的转化和检测体系。

关键词：水稻黄矮病毒弹状病毒运动蛋白病毒结构蛋白反向遗传学

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水稻黄矮病P3蛋白功能研究水矮黄矮病反向遗传学系统的构建

水稻黄矮病P3蛋白功能研究水矮黄矮病反向遗传学系统的构建

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作者：应晓宝北京师范大学

学位级别：硕士

水稻黄矮病毒是一种植物弹状病毒,属于单链的负链RNA病毒.它的基因组从3\'端依次为leader,编码蛋白的基因N,P,3,M,G,6,L和5′端trailer.N基因编码核衣壳蛋白,P基因编码磷酸化蛋白,M基因编码基质蛋白,G基因编码糖蛋白,L基因编码RNA... 详细信息

水稻黄矮病毒是一种植物弹状病毒,属于单链的负链RNA病毒.它的基因组从3\'端依次为leader,编码蛋白的基因N,P,3,M,G,6,L和5′端trailer.N基因编码核衣壳蛋白,P基因编码磷酸化蛋白,M基因编码基质蛋白,G基因编码糖蛋白,L基因编码RNA聚合酶.基因6编码的蛋白功能尚未知道.基因3位于P基因和M基因之间.在其它植物弹状病毒(Lettucenecrotic yellow virus,Northern cereal mosaic virus,Sonchus yellow net virus)的相同位置也具有开放读码框,这样的基因在动物弹状病毒中却未发现.植物病毒在侵染寄主时面临着动物病毒所没有的障碍即植物细胞壁对病毒扩散的限制,植物病毒在长期的进化中发展出了运动蛋白来实现病毒对植物入侵后的胞间运动和系统感染.由此在上述的几种植物弹状病毒中存在而在动物弹状病毒中没有的基因其编码的蛋白可能和植物病毒的系统侵然有关.目前发现的植物病毒的运动蛋白至少分为五类:一,30K超级家族蛋白;二,三基因连锁编码的蛋白;三,芜箐花叶病毒组运动蛋白;四,HSP-like蛋白;五,一系列小于10kDa的蛋白.在30K超家族的植物病毒中存在两种病毒胞间运动机制.第一种胞间运动机制和TMV运动机制相似,运动蛋白介导病毒胞间运动不需要衣壳蛋白的参与;第二种胞间运动机制依赖于管状结构,运动蛋白介导病毒胞间运动需要衣壳蛋白的参与.水稻黄矮病毒P3蛋白由294个氨基酸组成,分子量约32kDa.通过反式互补运动缺陷PVX的实验证实了P3是运动蛋白.二级结构预测发现P3蛋白中央区包含6个β-折叠和4个α-螺旋片段,组成了三个30K超家族所具有的核心结构.P3蛋白中央区的两侧有一个短的C端和一个较长的N端.其N端二级结构与CaMV的N端二级结构很相近.在序列比对中发现P3的Ile-Gln-Asp(162-164)和Gly(232)构成了在一些30K超家族成员中发现的LXDX71G基序.这些结果说明P3蛋白是属于30K超家族的运动蛋白.进一步研究表明P3蛋白具有同单链RNA的结合活性而且这种结合没有序列特异性.同时,P3蛋白还具有与RYSV N蛋白特异性蛋白结合活性.通过缺失突变分析,P3蛋白与N蛋白的结合需要第61-90位氨基酸的参与.在GFP-3融合蛋白转基因植物中发现GFP-3融合蛋白定位在细胞核中.反向遗传学是指已知基因序列进而研究基因功能的策略.弹状病毒是负链RNA病毒其生活周期中并无DNA阶段,因此对它们基因的功能研究有想当难度.利用反向遗传学系统通过加入DNA环节可以实现在DNA水平对弹状病毒基因组的分子操作,为研究弹状病毒提供了方便.动物弹状病毒狂犬病病毒已利用反向遗传学技术从cDNA克隆得到了有侵染性的病毒,而在植物弹状病毒中尚无反向遗传学系统的报道.为了便于研究水稻黄矮病毒基因的功能,我们构建了由表达RYSV的N蛋白、P蛋白和L蛋白的表达质粒和含有报道基因的minigenome组成的反向遗传学系统.正在可以用它来研究leader和trailer的功能和基因3的功能等,从而了解RYSV的生活周期中各个基因的功能和地位.

关键词：水稻黄矮病毒 P3蛋白运动蛋白反向遗传学系统

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广东水稻黄矮病初侵染源和媒介昆虫的初步研究

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华南农学院学报 1980年第1期 2-20页

作者：范怀忠斐文益华南农学院植物保护系华南农学院越南研究生

根据1964-1966年间的调查研究结果,水稻黄矮病毒只能侵染水稻,不能通过病稻的种子传给后代,用病叶汁液磨擦法不能传病,病株“恢复”后其体内仍保持有病毒。晚稻病株“再生稻”存活越冬后,其体内亦保持有病毒,所以越冬病株再生稻是本病... 详细信息

根据1964-1966年间的调查研究结果,水稻黄矮病毒只能侵染水稻,不能通过病稻的种子传给后代,用病叶汁液磨擦法不能传病,病株“恢复”后其体内仍保持有病毒。晚稻病株“再生稻”存活越冬后,其体内亦保持有病毒,所以越冬病株再生稻是本病在广东的一个初侵染源,但其重要性还有待进一步调查研究。此病毒的媒介昆虫为大斑黑尾叶蝉和二点黑尾叶蝉(黑尾叶蝉当时无发现)。大斑黑尾叶蝉的最短获毒饲育期少于5分钟,循回期一般为11天左右,最短为4～5天,最长为27天。保毒虫能继续传毒至死。但在开始传毒1～2天后,有些个体有一天(个别二天)的间歇传毒现象。大斑黑尾叶蝉最短传毒饲育期少于3分钟。此病毒不能通过带毒叶蝉所产的卵而传给若虫。孵化后立即在病株上取食的若虫,在第二令以后就能传毒。若虫的传毒能力与成虫差异不大,其循回期似比成虫的稍短。由于媒介叶蝉在广东的冬季还可发生1～2代,不能以带毒若虫或成虫越过整个冬季,所以在广东的媒介叶蝉不成为本病的初侵染源,因而广东早稻往往发病较迟较少。1966年曾在广州华南农学院农场(1955年晚稻发病较多)进行大田带毒虫率调查,从2月至5月上旬没有发现任何带毒叶蝉。从5月13日开始才发现少数带毒虫,这进一步证明了广东当地越冬后的媒介叶蝉是不带黄矮病毒的。因此

关键词：珍珠矮初侵染源初步研究农学院华南水稻黄矮病毒稻黄矮病毒稻苗水稻媒介昆虫病媒昆虫广东

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应用酶联法快速检测水稻黄矮病媒介昆虫的研究

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浙江农业科学 1983年第4期 194-198页

作者：高东明浙江省农科院植保所

水稻黄矮病(Rice transitory yellowing)是本世纪60～70年代我国南方稻区广为流行的主要病毒病害,主要由黑尾叶蝉(Nephotettix cincticeps)传病,近年在云南、湖南、安徽等省的局部地区发病仍很严

关键词：媒介昆虫黄矮病带毒率快速检测酶联法接种法病媒昆虫矮化病黑尾叶蝉稻黄矮病毒水稻黄矮病毒

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