目的:测定活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AI-CDA)在骨癌痛-吗啡耐受大鼠脊髓中的表达,探讨AI-CDA参与骨癌痛-吗啡耐受的可能机制。方法:30只wister实验大鼠依照随机数字表法分为三组,各组10只(n=10):生理盐水对照组(I组),骨癌痛组(II组)和骨癌痛-吗啡耐受组(III组)。给II组和III组大鼠接种鼻咽癌HONE1细胞,同时在I组大鼠相同部位注射等体积无菌无污染的生理盐水,制备骨癌痛模型,每天测定各组大鼠的MWT值。接种术后第14天行辅助检查帮助诊断骨癌。接种术后第15天~第21天给III组行吗啡治疗,I组和II组给予等容积无菌无污染的生理盐水。术后第21天观察胫骨的病理切片,并提取L4L6脊髓组织的RNA,用RT-PCR法测定脊髓组织中AI-CDA m RNA的表达。结果:(1)MWT值改变:与II组比较,给予吗啡镇痛治疗后第1天~第3天III组大鼠MWT明显高于II组,差异有统计学意义(P<0.05),III组大鼠在给予镇痛药吗啡注射后第4天~第6天与第1天~第3天相比前者MWT下降,差异有统计学意义(P<0.05);(2)影像学检查:与I组相比,II组和III组术侧胫骨X光片均显示骨组织被破坏;(3)病理切片检查:显微镜下能观察到有癌细胞出现在II组和III组骨髓腔内;(4)AI-CDA m RNA的表达:与II组比较,III组L4L6脊髓组织中的AI-CDA m RNA表达升高,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AI-CDA在骨癌痛-吗啡耐受的大鼠脊髓中表达增加,AI-CDA可能参与大鼠骨癌痛-吗啡耐受机制的形成。
第一部分:活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶基因在白血病中的表达目的:本研究探讨活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AID)基因在急性白血病(AL)、慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)和急变期(CML-BC)患者及白血病细胞株中的表达特点。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)患者、79例初诊急性髓系白血病(AML)患者、5例CML-BC患者、5例CML-CP患者和白血病细胞株NB4、THP-1、KG-1、Raji、K562中AID m RNA的表达,以16名健康供者骨髓单个核细胞作为对照。结果:89例ALL患者和79例AML患者AID m RNA的中位表达水平分别为3.785(0.006~7463.175)、1.812(0.005~69.107),健康对照组AID m RNA的表达水平为1.483(0.146~4.707)。ALL、B-ALL、Burkitt白血病、Raji细胞株和M4的AID m RNA表达水平较健康对照组升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),而M3、NB4和KG-1细胞株的AID m RNA表达水平较健康对照组下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。K562细胞株的AID m RNA表达水平较CML-CP患者升高,差异有统计学意义(P=0.025)。CML-BC、CML淋系急性变(CML-LBC)和CML髓系急性变(CML-MBC)患者的AID m RNA表达水平也高于CML-CP患者。结论:AID在B-ALL、Burkitt白血病及M4中高表达,在M3和KG-1细胞株中低表达,在CML-BC中表达水平显著升高。第二部分:成人B细胞急性淋巴细胞白血病患者AID基因、mi R-181b及mi R-155的表达特点及预后意义目的:本研究探讨活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AID)基因、mi R-181b及mi R-155在初诊成人B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者中的表达特点及预后意义。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测76例成人初诊B-ALL患者和16例正常对照者AID基因、mi R-181b及mi R-155的表达水平。结果:B-ALL患者的AID基因及mi R-155表达水平高于正常对照者,但mi R-181b表达水平低于正常对照者。Ph+B-ALL患者的AID基因表达水平高于Ph—B-ALL者,并且AID高表达与BCR-ABL表达有关。此外,AIDhigh/mi R-181blow表达B-ALL患者总体生存(OS)缩短。AIDhigh+mi R-181blow、AIDhigh+mi R-155low、mi R-181blow+mi R-155low、AIDhigh+mi R-181blow+mi R-155low表达患者OS亦缩短。对于OS的预测,AID、mi R-181b及mi R-155三个指标的组合相较于单个指标更可靠。结论:AID、mi R-181b及mi R-155在成人初诊B-ALL患者具有临床预后价值,并且有可能定义B-ALL的分子预后分层。
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