检索结果-内蒙古大学图书馆

环境卫生学杂志 1992年第4期 241-242页

作者：王华

本文探索了使用3种淋巴细胞增殖试验作为毒物暴露生物标记的可能性,这3种试验是,B淋巴细胞对有丝分裂原脂多糖(LPS)的反应,T淋巴细胞对有丝分裂原刀豆素A(ConA)的反应以及在混合淋巴细胞培养(MLC)试验中T淋巴细胞对抗原刺激的反应。其... 详细信息

本文探索了使用3种淋巴细胞增殖试验作为毒物暴露生物标记的可能性,这3种试验是,B淋巴细胞对有丝分裂原脂多糖(LPS)的反应,T淋巴细胞对有丝分裂原刀豆素A(ConA)的反应以及在混合淋巴细胞培养(MLC)试验中T淋巴细胞对抗原刺激的反应。其目的在于评价这些试验的适用性和特异性,并研究毒物改变淋巴细胞增殖的机理。所有的研究均使用从Fischer 344大鼠中

关键词：脾细胞大鼠有丝分裂原试验 MLC 间接分裂毒物淋巴细胞增殖试验 ConA

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不同种属小鼠用于淋巴细胞增殖试验的比较研究

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药物分析杂志 2019年第8期39卷 1347-1353页

作者：陈亮穆钰峰邵安良魏丽娜屈树新徐丽明中国食品药品检定研究院北京102629 西南交通大学材料科学与工程学院成都611756

目的:对使用不同种属小鼠进行脾淋巴细胞增殖试验的适宜性和可比性进行研究。方法:分别获取BALB/c小鼠、野生型C57BL/6(简称C57)小鼠、Gal抗原缺失(C57背景,GGTA1基因被敲除)小鼠的脾淋巴细胞,在确定脾淋巴细胞数量与CCK8吸收度的线性... 详细信息

目的:对使用不同种属小鼠进行脾淋巴细胞增殖试验的适宜性和可比性进行研究。方法:分别获取BALB/c小鼠、野生型C57BL/6(简称C57)小鼠、Gal抗原缺失(C57背景,GGTA1基因被敲除)小鼠的脾淋巴细胞,在确定脾淋巴细胞数量与CCK8吸收度的线性范围后,设立阳性对照组(刀豆蛋白A,Con A)、不同稀释度的动物原材料匀浆液和脱细胞生物材料匀浆液等试验组,使用CCK8检测淋巴细胞增殖,流式细胞术测定淋巴细胞亚型百分比,以确定BALB/c小鼠、野生型C57小鼠和Gal抗原缺失小鼠在体外淋巴细胞增殖试验的适宜性和可比性。结果:C57小鼠脾淋巴细胞数量和CCK8的吸收度的线性范围要明显大于BALB/c小鼠,而BALB/c小鼠线性曲线的斜率明显大于C57小鼠。从CCK8检测的淋巴细胞增殖结果看,BALB/c小鼠与C57小鼠相比,2.5μg·mL-1的Con A对2种小鼠脾淋巴细胞增殖均出现明显刺激作用;牛跟腱(含低水平的Gal抗原)匀浆液对2种小鼠脾淋巴细胞增殖均显示刺激作用,并显示出量效关系;不同稀释度的胶原海绵(牛跟腱来源)匀浆液对2种小鼠脾淋巴细胞增殖均未显示刺激作用,表现了一致的结果,说明没有淋巴细胞促增殖作用。另外,来源于Gal抗原缺失小鼠与野生型C57小鼠的脾脏淋巴细胞对Con A、牛心包(含有高水平的Gal抗原)匀浆液均表现出强的增殖反应和相似的反应强度。流式细胞术检测结果显示牛心包匀浆原液组在Gal抗原缺失小鼠仅显示活化B细胞百分比与对照组相比有统计学显著性差异,而在野生型C57小鼠组其活化B细胞、活化T细胞、活化NK细胞、NKT细胞、CD4 T细胞百分比与对照组相比均有统计学显著性差异。结论:CCK8检测的各试验组淋巴细胞增殖率结果在C57小鼠与BALB/c小鼠、Gal抗原缺失小鼠与野生型C57小鼠间具有可比性,表明这些种属的小鼠均可用于体外淋巴细胞增殖试验。

关键词：淋巴细胞增殖试验 BALB/c小鼠 C57BL/6小鼠 Gal抗原缺失小鼠 GGTA1基因敲除动物源性生物材料

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动物源性生物材料体外淋巴细胞增殖试验方法的建立

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药物分析杂志 2019年第8期39卷 1337-1346页

作者：陈亮穆钰峰邵安良魏丽娜屈树新徐丽明中国食品药品检定研究院北京102629 西南交通大学材料科学与工程学院成都611756

目的:建立可用于评价动物源性生物材料细胞免疫的体外淋巴细胞增殖试验方法。方法:采用C57小鼠脾脏淋巴细胞,通过淋巴细胞数量、阳性对照剂(刀豆蛋白A,Con A)浓度和培养时间等条件筛选,用CCK8试剂检测细胞增殖率,初步优化体外淋巴细胞... 详细信息

目的:建立可用于评价动物源性生物材料细胞免疫的体外淋巴细胞增殖试验方法。方法:采用C57小鼠脾脏淋巴细胞,通过淋巴细胞数量、阳性对照剂(刀豆蛋白A,Con A)浓度和培养时间等条件筛选,用CCK8试剂检测细胞增殖率,初步优化体外淋巴细胞增殖试验方法。采用牛心包组织(原材料)的浸提液和匀浆液,作为抗原特异性的阳性对照组考察样品前处理方式对试验体系的影响,并用流式细胞仪分析增殖后的淋巴细胞亚型百分比,考察样品制备方式对淋巴细胞亚型增殖影响的差异。结果:本试验中小鼠脾淋巴细胞体外增殖试验条件确定为每孔接种6×105个淋巴细胞,阳性对照孔Con A浓度为2.5μg·mL-1,培养时间为3 d。牛心包浸提液和匀浆液的淋巴细胞增殖率均约为细胞对照组的2倍,两者的淋巴细胞亚型百分比变化不同于Con A组,未出现T细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞百分比的增加。浸提液组与匀浆液组的活化NK细胞和NKT细胞百分比与对照组相比均明显升高,但浸提液组的升高幅度数倍高于匀浆液组,且仅浸提液组NK细胞百分比与对照相比出现了明显倍增。结论:本研究建立了以动物组织(原材料)为抗原特异性阳性对照的体外淋巴细胞增殖试验方法。动物组织(原材料)浸提和匀浆样品均可以产生淋巴细胞增殖阳性结果,其促进淋巴细胞增殖的机理(亚型分类)不同于Con A等有丝分裂原,提示使用作为动物组织(原材料)阳性对照更能反映试验体系的敏感性。

关键词：动物组织(原材料) 动物源性生物材料淋巴细胞增殖试验抗原特异性流式细胞术

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人外周血淋巴细胞增殖试验的优化及其应用

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药物分析杂志 2019年第8期39卷 1354-1361页

作者：邵安良穆钰峰屈树新陈亮徐丽明中国食品药品检定研究院北京102629 西南交通大学材料科学与工程学院成都611756

目的:优化人外周血淋巴细胞增殖试验条件;考察动物源材料的Gal抗原含量与淋巴细胞增殖效应的相关性;并比较人外周血淋巴细胞与小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验对动物源材料的敏感性差异。方法:从细胞接种量,阳性对照(刀豆球蛋白A,Con A)的工... 详细信息

目的:优化人外周血淋巴细胞增殖试验条件;考察动物源材料的Gal抗原含量与淋巴细胞增殖效应的相关性;并比较人外周血淋巴细胞与小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验对动物源材料的敏感性差异。方法:从细胞接种量,阳性对照(刀豆球蛋白A,Con A)的工作浓度与细胞培养时间,优化人外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件;利用优化的试验方法,通过人外周血淋巴细胞与动物源性材料的(牛跟腱或由牛跟腱纯化的胶原蛋白海绵)匀浆液或浸提液共培养,考察材料的不同前处理方式对人外周血淋巴细胞增殖的影响;参考标准YY/T 1561-2017,检测材料匀浆液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量与淋巴细胞增殖效应的相关性;同时参考标准YY/T 1465.1-2016,考察材料匀浆液与浸提液对小鼠脾脏淋巴细胞增殖效应的影响,并对比分析对动物源材料的敏感性差异。结果:人外周血淋巴细胞增殖试验最佳反应条件经优化确定为:细胞接种量为1×10^5,阳性对照(Con A)的终浓度选择5~10μg·mL^-1,培养时间为4 d。人外周血淋巴细胞与胶原蛋白海绵(匀浆组与浸提液组)共培养后,样品组与正常细胞对照组相比不存在明显差异;与牛跟腱匀浆液共培养后,与正常细胞对照组相比不存在显著性差异。胶原蛋白海绵(匀浆组与浸提液组)对小鼠脾脏淋巴细胞均无明显增殖效应。牛跟腱匀浆液在5倍稀释与50倍稀释后,对小鼠脾脏淋巴细胞均有明显增殖效应(增殖率为143.20%和128.71%)。牛跟腱匀浆液的Gal抗原含量为(3.98±1.06)×10^13个·mg^-1、胶原蛋白海绵匀浆液为(2.24±0.60)×10^13个·mg^-1、胶原蛋白海绵浸提液为(1.89±0.64)×10^13个·mg^-1。结论:淋巴细胞增殖效应与动物源性生物材料中残留Gal抗原含量的正向相关性不强。与小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验相比,采用人外周血淋巴细胞增殖试验评价含Gal抗原的动物源性生物材料细胞免疫的敏感性未见优势。淋巴细胞增殖试验是评价动物源生物材料细胞免疫的可用方法之一。

关键词：淋巴细胞增殖试验人外周血淋巴细胞小鼠脾脏淋巴细胞牛跟腱胶原蛋白海绵 Gal抗原

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基于CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立

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中国免疫学杂志 2009年第2期25卷 159-163页

作者：赵和平孙元袁远仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

目的:建立一种方便可靠的评价猪只细胞免疫水平的试验方法。方法:用终浓度分别为3、6、9和12μg/ml的刀豆素A(ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3、5和7天,然后用荧光标记的单克隆抗体对C... 详细信息

目的:建立一种方便可靠的评价猪只细胞免疫水平的试验方法。方法:用终浓度分别为3、6、9和12μg/ml的刀豆素A(ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3、5和7天,然后用荧光标记的单克隆抗体对CD4+和CD8+细胞进行标记,最后利用流式细胞术分析。结果:不同浓度ConA刺激后,猪PBMC增殖能力不同,ConA浓度为6μg/ml时CD4+和CD8+细胞的细胞分裂指数最大,用MTT试验也获得相似结果。对PBMC刺激5天后进行分析相对较好。结论:建立了一种基于活细胞染料CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法,该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后CD4+和CD8+细胞亚群的增殖水平,进而评价细胞免疫水平。

关键词：猪淋巴细胞细胞免疫 CFSE染色淋巴细胞增殖试验

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鸡脾脏T淋巴细胞增殖试验优化条件的筛选

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动物医学进展 2008年第7期29卷 47-49页

作者：何玉琴杨小燕林淑慧黄其春李焰福建龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000 福建农林大学动物科学学院福建福州350002

为了建立鸡脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对细胞浓度、小牛血清及刀豆蛋白A(ConA)的浓度,以及培养时间等4个参数进行研究。结果表明,采用5×106/mL细胞、100mL/L小牛血清、10μg/mL的ConA及48... 详细信息

为了建立鸡脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对细胞浓度、小牛血清及刀豆蛋白A(ConA)的浓度,以及培养时间等4个参数进行研究。结果表明,采用5×106/mL细胞、100mL/L小牛血清、10μg/mL的ConA及48h培养时间可获得最大的OD570吸光值。

关键词：淋巴细胞增殖试验 MTT法鸡

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基于CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立

基于CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：赵和平孙元袁远仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

本研究旨在建立一种方便可靠的评价猪只细胞免疫水平的试验方法。用终浓度分别为3μg/mL、6μg/mL、9μg/mL和12μg/mL的刀豆素A(ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3d、5d和7d,然后用荧... 详细信息

本研究旨在建立一种方便可靠的评价猪只细胞免疫水平的试验方法。用终浓度分别为3μg/mL、6μg/mL、9μg/mL和12μg/mL的刀豆素A(ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3d、5d和7d,然后用荧光标记的单克隆抗体对CD4+和CD8+细胞进行标记,最后利用流式细胞术分析。结果表明,不同浓度ConA刺激后,猪PBMC增殖能力不同,ConA浓度为6μg/mL时CD4+和CD8+细胞的细胞分裂指数最大,用MTT试验也获得相似结果。对PBMC刺激5d后进行分析相对较好。本研究建立了一种基于活细胞染料CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法,该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后CD4+和CD8+细胞亚群的增殖水平,进而评价细胞免疫水平。

关键词：猪淋巴细胞细胞免疫 CFSE染色淋巴细胞增殖试验

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用淋巴细胞增殖试验作为铬接触过敏的辅助诊断方法

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International Journal of Dermatology And Venereology 1992年第5期 306-306页

作者：刘一萍

对铬过敏是职业接触性皮炎的重要病因,特别是在建筑业。作者研究了这种病人的淋巴细胞对3价、6价铬化合物的增殖应答。选择8例病例(7男),年龄24～64岁,对照8例(男),年龄36～63岁,6例病人和8名对照者都从事建筑工业,全部病人和7名对照者... 详细信息

对铬过敏是职业接触性皮炎的重要病因,特别是在建筑业。作者研究了这种病人的淋巴细胞对3价、6价铬化合物的增殖应答。选择8例病例(7男),年龄24～64岁,对照8例(男),年龄36～63岁,6例病人和8名对照者都从事建筑工业,全部病人和7名对照者有手湿疹病史。分别用不同浓度的重铬酸钾(0.5%,0.1%,0.01%)和氯化钴(1%,0.1%,0,01%),作斑贴试验,检验其对铬的敏感性。封包2天,

关键词：斑贴试验阳性病人 LPT 敏感性表皮细胞淋巴细胞增殖试验

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郑氏植物蛋白及其抗体对食管（贲门）癌患者淋巴细胞增殖的研究

郑氏植物蛋白及其抗体对食管（贲门）癌患者淋巴细胞增殖的研究

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作者：王瑞河北医科大学

学位级别：硕士

目的:本试验目在探讨是郑氏植物蛋白及其兔抗郑氏植物蛋白抗体对肿瘤患者淋巴细胞转化增殖的影响.结论:以上结果显示,该植物蛋白及其抗体对肿瘤患者淋巴细胞具有明显的激活作用,该活性对肿瘤的早期诊断及特异性主动免疫治疗有重要意义,... 详细信息

目的:本试验目在探讨是郑氏植物蛋白及其兔抗郑氏植物蛋白抗体对肿瘤患者淋巴细胞转化增殖的影响.结论:以上结果显示,该植物蛋白及其抗体对肿瘤患者淋巴细胞具有明显的激活作用,该活性对肿瘤的早期诊断及特异性主动免疫治疗有重要意义,其抗体可望用于肿瘤靶向治疗的载体,活化Th细胞,增强免疫反应,克服免疫耐受,在肿瘤主动免疫治疗中发挥作用.

关键词：植物蛋白抗体淋巴细胞增殖试验特异性主动免疫治疗靶向治疗

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猪白细胞介素-2在BHK-21细胞中表达及其活性分析

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中国预防兽医学报 2011年第5期33卷 378-382页

作者：王大伟乔军张辉胡圣伟丁波陈创夫 f石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

为鉴定BHK-21细胞中稳定表达猪白细胞介素-2(PoIL-2)的活性,本研究利用RT-PCR技术从猪的淋巴细胞中克隆PoIL-2基因,将其连接于pcDNA3.1载体中,并转染BHK-21细胞。经过G418筛选及RT-PCR鉴定,获得稳定表达PoIL-2基因的BHK-21细胞系。采用... 详细信息

为鉴定BHK-21细胞中稳定表达猪白细胞介素-2(PoIL-2)的活性,本研究利用RT-PCR技术从猪的淋巴细胞中克隆PoIL-2基因,将其连接于pcDNA3.1载体中,并转染BHK-21细胞。经过G418筛选及RT-PCR鉴定,获得稳定表达PoIL-2基因的BHK-21细胞系。采用实时定量PCR及ELISA测定PoIL-2在BHK-21细胞内的表达,同时以淋巴细胞增殖试验(MTT)检测PoIL-2蛋白活性。试验结果表明稳定整合PoIL-2基因的BHK-21细胞系其PoIL-2mRNA的转录效率是阴性对照组1.43倍,蛋白表达量是阴性对照组1.29倍。MTT试验表明真核表达的PoIL-2促淋巴细胞增殖活性与阴性对照组相比差异极显著(p<0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIL-2具有良好的生物学活性。本研究为开发新型基因工程疫苗佐剂和抗病毒制剂奠定了基础。

关键词：猪白细胞介素2 真核表达实时定量PCR 淋巴细胞增殖试验

来源：评论

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