检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：孔德印山东农业大学

学位级别：硕士

黑皮鸡枞（Oudemansiella raphanipes）作为人工栽培的食用菌珍稀品种,营养和药用价值可观,市场前景广阔。黑皮鸡枞种植后,菌棒上层覆土中残留的菌根理论上仍为黑皮鸡枞子实体的一部分,但目前并没有得到充分的利用,并且关于其如何利用... 详细信息

黑皮鸡枞（Oudemansiella raphanipes）作为人工栽培的食用菌珍稀品种,营养和药用价值可观,市场前景广阔。黑皮鸡枞种植后,菌棒上层覆土中残留的菌根理论上仍为黑皮鸡枞子实体的一部分,但目前并没有得到充分的利用,并且关于其如何利用也没有相关文献报道。结合食用菌多糖具有的生物活性以及溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）近年来在我国的高发现象,本课题提出了使用黑皮鸡枞菌根中提取的多糖来治疗溃疡性结肠炎的设想,希望同时解决菌根的利用和溃疡性结肠炎的治疗问题。本课题通过提取优化试验得到黑皮鸡枞菌根多糖（Polysaccharides from root of ***,PRO）的最佳提取条件,并初步探究了其一级结构和体外抗氧化能力,并通过动物试验,检测PRO在3%葡聚糖硫酸钠（Dextran sodium sulfate,DSS）诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型中的调节效果。主要结果如下:（1）PRO的提取条件优化。本课题利用Plackett-Burman（PB）试验首先在9个提取条件中筛选出对PRO得率影响最大的3个,再通过响应面（Response surface methodology,RSM）试验进一步得出在提取温度85.69℃,乙醇浓度86.99%,醇沉时间22.69h条件下,PRO最佳得率为3.40%,且三者两两之间的交互作用不显著,并通过了实际验证。（2）PRO的结构分析。通过高效凝胶渗透色谱法（High-performance gel-permeation chromatography,HPGPC）得到PRO的重均分子量为1.99×10～4Da;高效液相色谱法（High performance liquid chromatography,HPLC）结果显示其单糖组成主要有甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和岩藻糖共6种单糖,质量分数分别为6.57%、0.66%、44.26%、40.24%、0.57%和7.50%,摩尔比为10.73:1.00:72.26:65.69:1.12:13.44;傅立叶红外光谱法（Fourier-transform infrared spectroscopy,FT-IR）分析结果显示,其在880cm-1、800cm-1和599cm-1附近的吸收峰表示PRO应为具有α和β构型的吡喃型多糖。（3）PRO的体外抗氧化能力测定。结果显示PRO在1000mg/L浓度下对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别达到66.2±2.61%、66.8±2.64%和53.7±2.77%,还原力为0.819±0.059,展现出了相对较强的体外抗氧化能力。（4）PRO对DSS诱导的溃疡性结肠炎的影响。体表形态上,PRO可以改善溃疡性结肠炎小鼠的体重下降和疾病活动指数（Disease activity index,DAI）评分上升现象;结肠形态变化上,PRO减轻了小鼠结肠长度缩短的趋势,并且修复了小鼠结肠组织中出现的黏膜组织受损,腺体、隐窝及杯状细胞缺失和炎症因子的溢出;血清中炎症因子活性的测定中,PRO可以显著降低溃疡性结肠炎小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、γ干扰素（Interferon-γ,IFN-γ）等促炎因子的活性和炎症介质一氧化氮（Nitric oxide,NO）的含量,调节小鼠由于DSS引起的炎症浸润;从氧化应激状态角度来看,PRO可以通过下调小鼠结肠中丙二醛（Malondiadehyde,MDA）、脂质过氧化物（Lipid peroxidase,LPO）和髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）的活性和活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的水平,来调节小鼠结肠组织中的氧化应激状态;从抗氧化酶体系角度看,PRO可以通过提高谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）等抗氧化酶活性,来改善小鼠结肠中的抗氧化酶体系。综上所述,PRO可以通过调节小鼠结肠中的炎症因子的表达、氧化应激状态和抗氧化酶体系,起到调节溃疡性结肠炎的效果,这种功效可能与其单糖组成等一级结构相关。因此,可以通过高效的提取黑皮鸡枞菌根中的多糖成分,经过某种加工方法,进而得到可以调节溃疡性结肠炎的产品,使黑皮鸡枞的菌根得到充分利用。

关键词：黑皮鸡枞菌根多糖提取优化溃疡性结肠炎小鼠模型

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低聚果糖对溃疡性结肠炎模型小鼠肠黏膜屏障影响的研究

引用

中国微生态学杂志 2017年第2期29卷 139-141页

作者：韩桂华王春敏孙雪丹遇常红郑强陈刚颜玉鲍秀琦佳木斯大学第一附属医院黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学基础医学院微生物教研室黑龙江佳木斯154007 哈尔滨二四二医院黑龙江哈尔滨154001

目的探讨低聚果糖对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠肠黏膜屏障的调节作用及可能机制。方法小鼠随机分成3组:正常对照(NC)组、模型(MD)组和低聚果糖(FOS)组,采用葡聚糖硫酸钠制作UC小鼠模型。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7... 详细信息

目的探讨低聚果糖对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠肠黏膜屏障的调节作用及可能机制。方法小鼠随机分成3组:正常对照(NC)组、模型(MD)组和低聚果糖(FOS)组,采用葡聚糖硫酸钠制作UC小鼠模型。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7d。采用细菌定量测定法检测肠道菌群,放射免疫法检测肠黏膜sIgA,ELISA法检测小鼠肠黏膜IL-10、TNF-α和IL-6水平。结果模型组小鼠存在肠道菌群失调(t=2.088,2.036,2.203,2.109,P<0.05),其TNF-α、IL-6水平高于正常对照组(t=1.734,1.801,P<0.05),肠黏膜sIgA、IL-10低于正常对照组(t=1.820,1.806,P<0.05);低聚果糖组肠道菌群失调状况较模型组有所改善,其TNF-α、IL-6水平低于正常对照组(t=1.980,1.816,1.936,1.920,1.969,1.893,P<0.05),肠黏膜sIgA、IL-10高于正常对照组(t=1.801,1.796,P<0.05)。结论低聚果糖可改善溃疡性结肠炎模型小鼠肠道菌群屏障功能,可以提高肠黏膜sIgA和抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α和IL-6的水平,通过调节肠道过度的免疫反应,使免疫屏障功能得到一定恢复。

关键词：低聚果糖溃疡性结肠炎小鼠模型肠黏膜屏障

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