检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：卢伟锋复旦大学

学位级别：博士

第一部分同步辐射成像技术检测大鼠后肢微血管的实验研究目的：目前临床应用的血管成像技术无法检测直径在200微米以下的微小血管。同步辐射(Synchrotron Radiation, SR)成像技术的发展为检测更细的微血管提供了新的手段。本实验旨在利... 详细信息

第一部分同步辐射成像技术检测大鼠后肢微血管的实验研究目的：目前临床应用的血管成像技术无法检测直径在200微米以下的微小血管。同步辐射(Synchrotron Radiation, SR)成像技术的发展为检测更细的微血管提供了新的手段。本实验旨在利用同步辐射微血管成像技术对大鼠后肢的微血管进行成像观察,并且和传统的X线成像对比,为进一步的实验提供必要的成像参数和基础。材料和方法：利用同步辐射单色光对F344近交系大鼠的左后肢微血管进行活体和离体成像观察。活体成像为吸收成像,从对侧髂动脉穿刺置管至腹主动脉分叉,注射含碘造影剂同时造影成像,单色光能量设为33.4Kev。离体成像的标本制备采用硫酸钡和生理盐水作为对比剂注入大鼠后肢微循环,采用相位衬度成像,能量和物像距离分别为15Kev和800mm,同时进行微CT血管三维重建。活体成像和离体成像分别采用数字减影血管造影(Digital subtraction angiography,DSA)造影和普通x线摄片作为对照,比较血管的直径和造影评分的差异。同步辐射成像分别用分辨率为9μm/pixel和2.25μm/pixel的探测器进行检测。血管直径的计算和图像编辑用NIH Image-pro plus软件进行处理。结果：同步辐射微血管活体成像可清晰显示大鼠髂动脉的4级以上分支,最细血管直径约40μm；而普通DSA造影则无法显示如此清晰的微血管,只能显示髂动脉的3级分支。离体标本中,灌注生理盐水的标本可辨认血管,但衬度和“边缘增强”效应不明显。灌注硫酸钡的样本血管清晰可见,高分辨率CCD(2.25μm)可测量的最小血管直径为9μm。而标本经普通X光成像,血管显影差。活体和离体同步辐射成像的血管造影评分明显高于普通X线成像。对灌注硫酸钡的整体肢体进行同步辐射微血管三维成像发现,肢体血管树的三维结构清晰显示,可以测量和定位大鼠后肢中微米级别的微血管。结论：应用同步辐射成像技术以及合适的对比剂可清晰显示大鼠后肢的微循环,和普通X线成像相比,同步辐射血管成像可显示更为细微的内容,最细可检测到直径10μm左右的大鼠后肢血管。同步辐射成像技术可为进一步检测干细胞移植后生成的新生血管提供有效手段。第二部分大鼠骨髓间充质干细胞的培养和定向分化能力的研究目的：骨髓来源的间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)移植为治疗下肢缺血性疾病开辟了一个新的思路,但是关于它的分离培养方法以及定向分化能力目前仍然缺乏统一的观点。本实验旨在从大鼠骨髓中获取间充质干细胞并进行原代培养和鉴定,研究培养方法和接种密度对细胞形态和定向分化能力的影响,为进一步的干细胞移植实验提供基础。材料和方法：取6-8周龄F344大鼠的骨髓以全骨髓贴壁法进行原代培养,并以不同的比例和接种密度(3×10,3×102,3×103 cells/cm2)进行传代,观察接种密度对细胞形态和生长特点的影响。按适宜的接种密度对细胞进行传代,取第3代对数生长期的rMSCs,对其表面标志物用流式细胞仪和免疫荧光进行鉴定。同时在传代的rMSCs培养液中分别添加不同的化学试剂和细胞因子,观察细胞的形态结构变化,诱导其向成骨细胞、脂肪细胞和内皮细胞分化,并对分化的细胞用碱性磷酸酶、油红O和DiI-Ac-LDL吞噬实验进行鉴定。结果：原代培养的rMSCs呈较强的贴壁生长特性,形态上呈纺锤形或扁平多角形。当细胞按接种密度3×10 cells/cm2进行传代时,细胞的倍增速度最快,并且形态较均一,纺锤形的细胞数量多,呈菌落样生长。对低密度接种培养的rMSCs进行流式细胞仪和免疫荧光鉴定,提示rMSCs的表面抗原为CD34(-)、CD45 (-)、CD90(+)、CD29 (+)、CD105 (+)。定向分化实验表明,在不同的诱导条件下,低密度接种培养的rMSCs可以向成骨细胞、脂肪细胞和内皮细胞定向分化,分化后的细胞用碱性磷酸酶、油红O和DiI-Ac-LDL吞噬实验鉴定为阳性反应。结论：全骨髓贴壁培养法和较低接种密度培养可获得数量较多的相对较纯的大鼠骨髓间充质干细胞,其表面标志物符合间充质干细胞标准,并且具有多能定向分化能力。第三部分同步辐射技术检测干细胞移植后大鼠后肢新生血管生成的实验研究目的：目前干细胞移植后新生血管的生成缺乏切实有效的评价方法。本研究应用同步辐射技术检测大鼠骨髓间充质细胞(Rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells, rBMSC)移植到大鼠缺血肢体后新生血管(Neovascularization)的生成情况,观察分析干细胞移植后新生血管空间密度分布和形态结构的变化,为

关键词：同步辐射新生血管相位衬度成像干细胞移植微CT 间充质干细胞接种密度定向分化干细胞移植表面标志物同步辐射成像干细胞移植新生血管毛细血管密度激光多普勒血流灌注成像

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通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病大鼠下肢缺血的影响

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中医杂志 2015年第6期56卷 506-510页

作者：郭勇英高怀林孙颖郑国张军芳魏聪吴以岭河北医科大学研究生学院河北医科大学附属以岭医院南京中医药大学河北以岭医药研究院

目的观察通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血的疗效。方法采用高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立糖尿病大鼠模型,再结扎右下肢股动、静脉制造下肢缺血模型。100只造模成功大鼠随机分为模型组、通... 详细信息

目的观察通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血的疗效。方法采用高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立糖尿病大鼠模型,再结扎右下肢股动、静脉制造下肢缺血模型。100只造模成功大鼠随机分为模型组、通心络组、干细胞组、联合治疗组,每组20只,以同批次20只健康大鼠为正常组。通心络组和联合治疗组给予通心络超微粉0.4g/(kg·d)灌胃,连续治疗28天;干细胞组和联合治疗组于术后第3天在缺血下肢皮下肌层注射约0.4 ml细胞悬浊液(PB-MSCs1.0×106/ml),分8个位点,每个点注射0.05 ml;正常组、模型组和干细胞组大鼠以等体积的生理盐水灌胃,同点、同量肌肉注射无菌RPM1640培养液。分别于术前、术后、治疗7和28天行激光多普勒血流灌注成像检测计算双后肢血流差值,治疗28天后行下肢动脉造影检测下肢血流。结果与正常组同时间点比较,其余各组在术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值显著增高(P<0.01);与模型组同时间点比较,各治疗组在治疗7、28天示时双后肢血流差值明显降低,并且联合治疗组在治疗28天时较通心络组和干细胞组降低明显(P<0.05或P<0.01)。与本组术前比较,各治疗组术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值比显著升高(P<0.01),但各治疗组治疗7天和28天时双后肢血流差值均较本组术后降低,并且治疗后28天降低更明显(P<0.01)。动脉造影结果显示,模型组和各治疗组均有侧枝循环形成,毛细血管生成,且与已有的毛细血管相互连接形成毛细血管网,其中联合治疗组缺血侧下肢动脉最清晰。结论通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植能明显改善糖尿病大鼠下肢缺血状况,并且优于单纯干细胞移植。

关键词：糖尿病下肢缺血外周血间充质干细胞移植通心络超微粉激光多普勒血流灌注成像

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芪参益气滴丸对糖尿病大鼠微循环障碍的影响

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北京中医药 2019年第3期38卷 234-236,F0003页

作者：刘海丹王君金明中日友好医院体检中心北京100029 中日友好医院眼科北京100029

目的探讨参芪益气滴丸改善糖尿病大鼠微循环障碍的作用机制。方法 STZ腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、治疗组、阳性对照组,并设正常组。治疗组灌服芪参益气药液,对照组灌服羟苯磺酸钙溶液1 g/(kg·d),实验周期10个... 详细信息

目的探讨参芪益气滴丸改善糖尿病大鼠微循环障碍的作用机制。方法 STZ腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、治疗组、阳性对照组,并设正常组。治疗组灌服芪参益气药液,对照组灌服羟苯磺酸钙溶液1 g/(kg·d),实验周期10个月。利用激光多普勒血流灌注成像仪观察糖尿病大鼠耳廓、四肢及虹膜微循环状态。结果模型组耳廓、四肢皮肤及虹膜血管单位面积血流量较正常组和治疗组均明显减低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),但与阳性对照组差异无统计学意义(P<0.05)。结论芪参益气滴丸可以增加糖尿病大鼠耳廓、四肢及虹膜单位面积血流量,改善末梢循环缺血状态。

关键词：糖尿病芪参益气滴丸激光多普勒血流灌注成像微循环大鼠

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成人腕部正中神经断裂后靶皮肤血流灌注的初步研究

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南通大学学报（医学版） 2012年第3期32卷 177-179,F0002页

作者：顾晨胡文邓爱东顾晓松顾剑辉南通大学附属医院手外科南通226001 南通大学江苏省神经再生重点实验室

目的:初步了解成人周围神经断裂后靶皮肤的血流灌注特点。方法:采用激光多普勒血流灌注成像技术,检测成人腕部正中神经断裂缝合后早期受损神经支配区皮肤的基础血流灌注及在冷、热等刺激后的血流灌注变化,采用两点辨别觉和单丝触觉评定... 详细信息

目的:初步了解成人周围神经断裂后靶皮肤的血流灌注特点。方法:采用激光多普勒血流灌注成像技术,检测成人腕部正中神经断裂缝合后早期受损神经支配区皮肤的基础血流灌注及在冷、热等刺激后的血流灌注变化,采用两点辨别觉和单丝触觉评定感觉功能。结果:神经断裂缝合后22～37 d,患侧手掌桡侧半皮肤及示、中指指腹基础血流灌注较正常减少约90%,且以0℃冰水或45℃温水刺激30 s后局部血流灌注无明显变化。患侧示、中指指腹不能感知规格6.65单丝触压,两点辨别觉超过25 mm。结论:失神经皮肤区域处于低血流灌注状态,且对冷、热等刺激无反应。

关键词：周围神经损伤皮肤血流灌注激光多普勒血流灌注成像人

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大鼠坐骨神经缺损自体神经桥接修复后靶皮肤局部控温调节功能重建初步研究

大鼠坐骨神经缺损自体神经桥接修复后靶皮肤局部控温调节功能重建...

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：胡文常景建杨旻顾天文沈钟一王亚先顾晓松南通大学神经再生重点实验室南通大学医学院

目的探讨周围神经损伤修复后靶皮肤局部控温调节功能的重建。方法本研究采用大鼠坐骨神经10 mm缺损自体神经桥接修复模型,以神经缺损组作为对照,于术后即时和术后1、3、6个月,应用激光多普勒血流灌注成像仪动态分析足底皮肤血流灌注情... 详细信息

目的探讨周围神经损伤修复后靶皮肤局部控温调节功能的重建。方法本研究采用大鼠坐骨神经10 mm缺损自体神经桥接修复模型,以神经缺损组作为对照,于术后即时和术后1、3、6个月,应用激光多普勒血流灌注成像仪动态分析足底皮肤血流灌注情况及其对冷刺激的反应,并采用红外热痛阈测定仪评定足底皮肤痛觉;于术后6个月时采用电生理检测、靶肌湿重比、神经与皮肤免疫组织化学染色等方法评价神经再生情况。结果坐骨神经缺损后靶皮肤血流灌注骤然上升达基础水平的4.5倍左右,但冰水刺激并不引起灌注进一步增加;术后1个月,自体神经修复组和缺损组冰水刺激引起皮肤血流灌注改变量均较新鲜损伤时增加,但明显低于正常水平;术后3个月和6个月,自体神经修复组冰水刺激引起的灌注改变量与对侧正常皮肤相当,但缺损组则明显低于正常水平,这与痛觉测定结果一致;术后6个月时自体神经修复组神经干动作电位振幅恢复率、靶肌湿重比达75%左右,桥接段远侧神经纤维再生及靶皮肤再支配良好。结论自体神经桥接修复大鼠坐骨神经缺损后靶皮肤局部控温调节功能得以较好重建。

关键词：神经损伤功能重建皮肤局部控温调节激光多普勒血流灌注成像大鼠

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