检索结果-内蒙古大学图书馆

齐鲁工业大学学报 2013年第4期27卷 1-6,21页

作者：田囡王超刘新利齐鲁工业大学山东省微生物工程重点实验室山东济南250353

产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)属于黄单胞科,革兰氏阴性,对农作物的多种病原真菌具有拮抗作用,可以用于生物防治。热稳定抗真菌因子(Heat Stable Antifungal Factor,简称:HSAF)是产酶溶杆菌的次级代谢产物。HSAF能够抑制多种卵菌... 详细信息

产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)属于黄单胞科,革兰氏阴性,对农作物的多种病原真菌具有拮抗作用,可以用于生物防治。热稳定抗真菌因子(Heat Stable Antifungal Factor,简称:HSAF)是产酶溶杆菌的次级代谢产物。HSAF能够抑制多种卵菌和真菌,抑制附着孢的形成和孢子萌发,有效地改变真菌形态,包括扰乱菌丝分化和诱导细胞壁增厚异常,从而有望成为新一代杀菌剂或抗真菌药物。本文综述了HSAF的来源、化学结构特点、活性作用机理及其生物防治应用研究进展。

关键词：热稳定抗真菌因子产酶溶杆菌生物防治

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

产酶溶杆菌C3产生热稳定性抗真菌因子（HSAF）的研究

产酶溶杆菌C3产生热稳定性抗真菌因子（HSAF）的研究

引用

作者：田囡山东轻工业学院

学位级别：硕士

热稳定抗真菌因子(Heat Stable Antifungal Factor,简称HSAF)是产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)的次级代谢产物。产酶溶杆菌对农作物的多种病原真菌具有拮抗作用,可以用于生物防治。HSAF能够抑制多种真菌和卵菌,有效地改变真菌形态... 详细信息

热稳定抗真菌因子(Heat Stable Antifungal Factor,简称HSAF)是产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)的次级代谢产物。产酶溶杆菌对农作物的多种病原真菌具有拮抗作用,可以用于生物防治。HSAF能够抑制多种真菌和卵菌,有效地改变真菌形态,包括扰乱菌丝分化和诱导细胞壁增厚异常,抑制附着孢的形成和孢子萌发,有望成为新一代杀虫剂或抗真菌药物。 1、通过形态学观察结果表明：C3菌株单生,革兰氏染色反应阴性,菌体杆状,无鞭毛,长度随菌龄大小有变化。LB平板上菌落颜色浅黄色微显绿色,透明至半透明,菌落圆形至不规则形,边缘光滑或啮齿状,菌落边缘可见稀薄扩散边缘,呈粘稠,可以滑行运动,液体培养粘质。菌株生长温度5-35℃,最适生长温度为28-30℃。生理生化试验结果表明：C3菌株可以水解蛋白、几丁质、淀粉,不能水解纤维素。接种5h后,菌体生长进入对数生长期。 2、通过培养基优化设计,获得了C3菌株产HSAF的最佳发酵培养基配方(g/L)：乳糖1、胰蛋白胨15、大豆蛋白胨4、NaCl 5、K2HPO42.5。抗生素HSAF摇床发酵的最佳条件为：种龄15h,接种量1%,初始pH7.5,装液量100mL/三角瓶(300mL),发酵温度30℃,摇床转速160r/min。 3、HSAF 10 L发酵罐培养的最佳条件为：发酵罐搅拌转速150r/min,通气量为6 mL/min,初始pH7.5,发酵温度30℃。发酵结束后,用(NH4)2SO4沉淀发酵液,离心,用甲醇萃取沉淀。用硅胶柱层析、LH-20凝胶柱层析、HPLC、PTLC等手段对甲醇萃取物进行分离纯化,得到黄色粉末。经鉴定为HSAF。 4、C3菌株发酵液理化性质测定表明：其发酵液对温度、紫外线、自然光、酸碱有较好的耐受性,稳定性比较高。对实验室保藏细菌、真菌打孔法做抑菌谱,结果表明对革兰氏阳性菌有抑制作用,对阴性菌没有抑制作用；对某些真菌抑菌效果明显,对酿酒酵母没有抑制作用,抑菌谱较广。通过影响菌丝生长的实验表明：C3菌株能显著抑制病原菌菌丝生长和孢子萌发,并对菌丝和孢子萌发后的芽管有明显致畸作用。

关键词：产酶溶杆菌热稳定抗真菌因子生物防治

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗真菌物质HSAF发酵全合成培养基的筛选

引用

中国生物防治学报 2022年第3期38卷 645-652页

作者：汤宝王金子赵延存刘凤权江苏省农业科学院植物保护研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地南京210014 南京农业大学植物保护学院南京210095 江苏大学生命科学学院镇江212013 海南大学植物保护学院海口570228

热稳定抗真菌因子是产酶溶杆菌OH11产生的一种抗真菌活性物质,可开发成环境友好型生物杀菌剂。为了进一步提高HSAF发酵产量,本研究通过单因素试验筛选出最佳碳源、氮源、金属离子及磷酸缓冲盐并进行正交试验优化,确定了最适的合成培养... 详细信息

热稳定抗真菌因子是产酶溶杆菌OH11产生的一种抗真菌活性物质,可开发成环境友好型生物杀菌剂。为了进一步提高HSAF发酵产量,本研究通过单因素试验筛选出最佳碳源、氮源、金属离子及磷酸缓冲盐并进行正交试验优化,确定了最适的合成培养基配方为葡萄糖8 g/L、(NH_(4))_(2)SO_(4)1 g/L、FeCl_(3)8 mg/L、K_(2)HPO_(4)1 g/L、KH_(2)PO_(4)0.5 g/L。在此培养基下,HSAF产量达到(215.46±6.85)mg/L,比优化前提高了92.24%。该培养基优势在于成分已知、含量稳定,不仅能避免培养基中复杂成分造成发酵产量的波动,而且有利于对胞内代谢特征和HSAF合成关键因素进行深入研究,进而提高产量并降低生产成本。

关键词：产酶溶杆菌热稳定抗真菌因子合成培养基生物杀菌剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

产酶溶杆菌rpfG基因的克隆与功能分析

引用

南京农业大学学报 2013年第2期36卷 45-50页

作者：刘轶儒徐菲菲钱国良范加勤胡白石刘凤权南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室江苏南京210095

为探索基因rpfG在产酶溶杆菌中的功能,以产酶溶杆菌OH11为研究对象,在基因组测序的基础上,通过同源比对,在OH11基因组中鉴定出rpfG的同源基因,并命名为rpfGLys。利用同源重组技术,对rpfG基因进行了定向敲除,获得了rpfG的缺失突变株。与... 详细信息

为探索基因rpfG在产酶溶杆菌中的功能,以产酶溶杆菌OH11为研究对象,在基因组测序的基础上,通过同源比对,在OH11基因组中鉴定出rpfG的同源基因,并命名为rpfGLys。利用同源重组技术,对rpfG基因进行了定向敲除,获得了rpfG的缺失突变株。与野生型相比,rpfG基因的突变降低了产酶溶杆菌重要抗菌物质———热稳定抗菌因子HSAF的产量和对腐霉的拮抗活性。荧光定量PCR显示,在rpfG突变株中负责生物合成HSAF的关键基因Lysegl002651的表达显著下调,与HSAF活性检测结果相吻合。然而,rpfG的突变不改变产酶溶杆菌4种胞外抗菌水解酶的活性。另外,rpfG突变导致产酶溶杆菌菌落表面干燥,但滑行能力提高。

关键词：产酶溶杆菌 rpfG基因热稳定抗真菌因子实时定量PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用HSAF生物产品防治梨黑斑病效果研究

引用

中国南方果树 2015年第4期44卷 96-98页

作者：杨晓平陈启亮田瑞张靖国范净胡红菊湖北省农业科学院果树茶叶研究所武汉430064

梨黑斑病是梨树重要的病害之一,本文以翠冠梨为试材,在生长季节喷施HSAF生物产品,研究HSAF在田间防治梨黑斑病的效果。结果表明,田间喷施HSAF 20μg/mL对翠冠梨黑斑病有显著的防治效果,控制翠冠梨的病情指数在3.80以下;喷施HSAF能够显... 详细信息

梨黑斑病是梨树重要的病害之一,本文以翠冠梨为试材,在生长季节喷施HSAF生物产品,研究HSAF在田间防治梨黑斑病的效果。结果表明,田间喷施HSAF 20μg/mL对翠冠梨黑斑病有显著的防治效果,控制翠冠梨的病情指数在3.80以下;喷施HSAF能够显著提高翠冠梨的果实品质,喷施后可溶性固形物含量提高1个百分点、可滴定酸含量提高0.02个百分点、可溶性糖含量提高1个百分点。

关键词：热稳定抗真菌因子梨黑斑病翠冠梨产酶溶杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

产酶溶杆菌第二信使c-di-GMP代谢相关蛋白的酶活检测及其功能研究

产酶溶杆菌第二信使c-di-GMP代谢相关蛋白的酶活检测及其功能研究

引用

作者：霍翠梅南京农业大学

学位级别：硕士

溶杆菌属于黄单胞科(Xanthomonadaceae),溶杆菌属(Lysobacter),是一类环境友好、但较难分离的有益革兰氏阴性细菌。产酶溶杆菌(***)是溶杆菌的一个典型种,也是目前研究较多的一种重要的生防细菌。HSAF(HeatStableAntifungal Factor)是... 详细信息

溶杆菌属于黄单胞科(Xanthomonadaceae),溶杆菌属(Lysobacter),是一类环境友好、但较难分离的有益革兰氏阴性细菌。产酶溶杆菌(***)是溶杆菌的一个典型种,也是目前研究较多的一种重要的生防细菌。HSAF(HeatStableAntifungal Factor)是产酶溶杆菌体内合成的一种结构和作用方式新颖的小分子抗菌物质。该物质毒性低、对热稳定、广谱抗真菌卵菌,具有开发为新型生物杀菌剂或抗菌药物的应用前景。环二鸟苷酸(c-di-GMP)是细菌体内广泛存在的一种核酸类第二信使。该物质由2分子GTP在具有GGDEF保守结构域的鸟苷酸环化酶(DGCs)的催化下合成,并可被含有EAL或HD-GYP结构域的磷酸二酯酶(PDEs)降解。当细菌接受某些特定的信号后,会激活或抑制相应PDEs或DGCs的活性,从而改变胞内c-di-GMP含量,进而通过c-di-GMP下游特异的受体来调控细菌一系列重要的生理生化功能。过去十几年对c-di-GMP的研究多数集中在动植物病原细菌中,在生防细菌中c-di-GMP信号途径在小分子抗菌物质生物合成方面的研究鲜有报道。本研究以具有自主知识产权的产酶溶杆菌OH11为对象,旨在研究该菌株中c-di-GMP代谢蛋白(PDE和DGC)的酶活及其对HSAF生物合成的调控作用。主要研究结果如下:通过生物信息学分析,从产酶溶杆菌OH11的全基因组中鉴定了 26个负责c-di-GMP代谢的相关蛋白,包括14个仅含有GGDEF结构域的蛋白(即可能具有DGC活性);6个同时具有GGDEF和EAL结构域的蛋白(即可能同时具有DGC和PDE活性);1个只含有EAL结构域的蛋白(即可能的PDE);5个HD-GYP蛋白(可能的PDEs)。在此基础上,本文采用基于大肠杆菌MG1655及其衍生菌株(△yhjH)游动性的方法来检测每个代谢蛋白的酶活(DGC或PDE)。若待测蛋白为DGC,则这个蛋白的表达会使MG1655菌株的游动性显著降低;若待测蛋白为PDE,则该蛋白的表达可恢复或者部分恢复△yhjH突变株游动性丧失的表型。本文首先采用具有已知生化功能的DGC(Slr)和PDE(YhjH)验证了该检测体系的有效性。之后将产酶溶杆菌26个c-di-GMP代谢蛋白的编码基因逐一克隆至蛋白表达载体中,并分别导入MG1655和△yhjH中。基于菌体游动性的检测结果表明:待测的14个GGDEF蛋白中有9个具有较强的DGC活性,这些蛋白的表达导致MG1655的运动性较对照菌株相比显著下降;在6个GGDEF-EAL蛋白中,1个蛋白被检测出DGC活性,其余5个在所测条件下即无DGC也无PDE活性;在所测的6个潜在PDE中,只有1个HD-GYP蛋白被检测出具有较弱的PDE活性。在酶活检测的基础上,我们采用过量表达的方法研究了 26个基因对HSAF合成的调控作用。HSAF的定量检测结果表明,10个DGC的编码基因过表达后,HSAF的产量显著下降,揭示产酶溶杆菌中c-di-GMP抑制HSAF的生物合成。与此结果相吻合,在OH11菌株中过量表达1个已知的DGC(Slr)则可以显著下降HSAF的产量。同时,我们发现5个退化的GGDEF结构域蛋白(即没有检测到DGC活性)过表达后也能导致HSAF的产量下调,揭示这些蛋白有可能作为c-di-GMP的受体来调控HSAF的生物合成。本研究初步建立了产酶溶杆菌中c-di-GMP代谢蛋白的酶活检测体系,并鉴定了数个可调控HSAF生物合成的DGCs,为后续深入研究c-di-GMP信号途径调控HSAF合成的分子机理提供了方法、基因和菌株的支撑。

关键词：产酶溶杆菌热稳定抗真菌因子环二鸟苷酸二鸟苷酸环化酶磷酸二酯酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

产酶溶杆菌群体感应系统的鉴定及功能分析

产酶溶杆菌群体感应系统的鉴定及功能分析

引用

作者：刘轶儒南京农业大学

学位级别：硕士

产酶溶杆菌（Lysobacter enzymogenes）OH11是由本实验室从辣椒根际土壤中分离得到的一种新型生防菌，属溶杆菌属（Lysobacter）、黄单胞科(Xanthomonadaceae)。该菌GC含量较高，有滑行现象，能产生多种胞外酶，包括几丁质酶、蛋白酶、... 详细信息

产酶溶杆菌（Lysobacter enzymogenes）OH11是由本实验室从辣椒根际土壤中分离得到的一种新型生防菌，属溶杆菌属（Lysobacter）、黄单胞科(Xanthomonadaceae)。该菌GC含量较高，有滑行现象，能产生多种胞外酶，包括几丁质酶、蛋白酶、纤维素酶、β-1，3-葡聚糖酶，此外，产酶溶杆菌可以产生许多重要的此生代谢产物，来抑制或者杀死病原物来发挥其生防作用，因此，产酶溶杆菌对许多植物病原真菌、卵菌具有很好的拮抗活性。本研究旨在明确产酶溶杆菌OH11是否存在DSF(diffusible signalfactor)型群体感应现象，以及DSF型群体感应如何发挥其作用的，与其他黄单胞科细菌rpfF基因功能的异同。\n 利用NCBI数据库中的黄单胞科细菌的基因组信息，结合同源比对的方法，首次在产酶溶杆菌OH11中发现了与DSF合成相关的rpf（regulation of pathogenicity factors）基因簇。序列和结果分析表明，产酶溶杆菌OH11的rpf基因与黄单胞细菌rpf因簇具有较高的同源性和相似的保守区域，这一结果表明产酶溶杆菌OH11可能与其他黄单胞细菌具有相同的功能，为了明确产酶溶杆菌rpf基因簇的功能，我们对其中两个重要的基因rpfF和rpfG进行了定向敲除。\n 在黄单胞科细菌中，DSF型QS系统具有重要的生物学功能，如:可以调控病菌在寄主上的致病性，病菌致病因子（如胞外酶和胞外多糖）的产生、生物膜形成、游动性等重要性状。产酶溶杆菌（Lysobacter enzymogenes）在分类地位上与植物黄单胞菌（Xanthomonas spp.）均属于黄单胞科（Xanthomonadaceae），但该菌为一种生防细菌，不具有致病性。在rpf基因簇中，rpfF基因主要负责DSF信号分子的合成，在rpf基因簇中发挥着重要的作用。将产酶溶杆菌OH11的rpfF基因导入到Xcc△rpfF中，结果发现rpfFLys基因可以恢复Xcc由于rpfF基因突变引起的蛋白酶活性下降和DSF产量下降的情况。这一结果表明，rpfFLys与其他黄单胞科细菌一样，是一个功能性的基因。为了深入了解产酶溶杆菌中rpfF的功能，对其进行了敲除和互补。与野生型相比，rpfF基因的突变降低产酶溶杆菌重要抗真菌物质——热稳定抗菌因子HSAF的产量和对腐霉的拮抗活性，高效液相色谱和荧光定量PCR与HSAF活性检测和腐霉拮抗结果相吻合;降低了WAP的产量，从而降低了对马铃薯环腐病的拮抗。除此之外，对野生型和rpfF突变体进行了基因芯片实验。基因芯片结果表明rpfF基因缺失会影响337个基因的表达。然而，rpfF的突变不改变产酶溶杆菌4种胞外抗菌水解酶的活性。有趣的是，rpfF突变导致产酶溶杆菌菌落表面干燥，但滑行能力提高。\n 在黄单胞科细菌中存在着rpfC/rpfG组成的双组份系统，用于植物黄单胞菌群体感应信号分子DSF的感知和传递。其中，rpfG负责DSF在胞内传递，具有调控黄单胞菌致病性的功能。为探索rpfG在产酶溶杆菌中功能，我们以OH11为研究对象，通过同源比对，在OH11基因组中鉴定出rpfG的同源基因，命名为rpfGLys。利用同源重组技术，对rpfG基因进行了定向敲除，获得了rpfG的缺失突变株。与野生型相比，rpfG基因的突变降低产酶溶杆菌重要抗菌物质——热稳定抗菌因子HSAF的产量和对腐霉的拮抗活性。荧光定量PCR显示在rpfG突变株中负责生物合成HSAF的关键基因PKS/NRPS显著下调，与HSAF活性检测结果相吻合。然而，rpfG的突变不改变产酶溶杆菌4种胞外抗菌水解酶的活性。另外，rpfG突变导致产酶溶杆菌菌落表面干燥，但滑行能力提高。

关键词：产酶溶杆菌 rpf基因簇热稳定抗真菌因子群体感应系统功能鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：