检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈婷西北农林科技大学

学位级别：硕士

牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis virus，IBRV）感染导致牛的传染性鼻气管炎(IBR)，引起牛的急热性传染病，以严重的呼吸道和生殖道感染为主要症状，是我国出入境动物检疫部门必检对象。该研究以IBRV的gD基因... 详细信息

牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis virus，IBRV）感染导致牛的传染性鼻气管炎(IBR)，引起牛的急热性传染病，以严重的呼吸道和生殖道感染为主要症状，是我国出入境动物检疫部门必检对象。该研究以IBRV的gD基因为研究对象，通过蛋白的原核表达后，建立检测IBRV抗体的间接ELISA检测方法，并进行初步的应用，目的是期望能够应用于临床中快速检测和诊断牛传染性鼻气管炎病，为牛传染性鼻气管炎病的检验检疫和净化提供技术支持。 gD糖蛋白位于IBRV囊膜表面，能激发机体产生保护性抗体的抗原，被用来作为IBR诊断中的首选特异性抗原。该研究进行了如下两个方面的研究工作： 1、根据GenBank上发表的IBRV gD基因序列，设计合成一对特异性引物，利用PCR扩增出gD基因，并构建原核表达重组质粒pET-32a-gD。将其转入BL21（DE3）表达菌中，用IPTG诱导表达，经8mol/L的尿素溶液溶解，尿素梯度溶液透析复性纯化。酶切鉴定及基因测序证明原核表达载体构建成功；SDS-PAGE表明，gD融合蛋白以包涵体的形式在大肠埃希菌中高效表达，纯化后成功获得了大小为52ku的融合蛋白，与预测的蛋白分子量一致，纯化的重组蛋白浓度为0.471mg/ml；Westen blot证明纯化的gD融合蛋白能被标准IBR阳性血清所识别，具有良好的免疫原性。 2、以纯化的IBRV gD蛋白为包被抗原，成功建立检测IBRV抗体的间接ELISA检测方法。通过条件优化，最佳包被抗原浓度为9.42μg/mL，包被时间为37℃1.5h加4℃过夜，血清稀释度为1:20，血清反应条件为37℃1h，封闭液为3%BSA， HRP-兔抗牛IgG的最佳工作浓度为1:5000，底物最佳显色时间为15min，统计学分析后确定阴阳性的临界值为0.224。特异性和重复性试验表明该ELISA方法的特异性和重复性均良好。与病毒中和试验进行比较，结果表明建立的ELISA方法比较敏感。应用该方法对采自陕西省部分地区的422份牛血清进行检测，血清抗体阳性率为22.9%（97/422）。临床检测结果表明，该ELISA检测方法敏感性、特异性较好，应用前景广阔。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gD 表达间接 ELISA 检测

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牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白抗原表位多肽及其抑制剂和单抗及其应用

牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白抗原表位多肽及其抑制剂和单抗及其应...

引用

作者：倪宏波 570228 海南省海口市美兰区人民大道58号

本发明属于分子生物学和医药领域，具体公开了牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白抗原表位多肽及其在制备检测或治疗牛传染性鼻气管炎的试剂或药物中的用途。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的单克隆抗体，同时筛选出牛传染性鼻气... 详细信息

标准号: CN107586322B

本发明属于分子生物学和医药领域，具体公开了牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白抗原表位多肽及其在制备检测或治疗牛传染性鼻气管炎的试剂或药物中的用途。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的单克隆抗体，同时筛选出牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的抗原表位为³²³GEPKPGPSPDADRPE³³⁷(最短表位序列为³²³GEPKPGP³²⁹7个氨基酸肽段)，基于此抗原表位的重组蛋白可特异性的检测牛传染性鼻气管炎血清；另外基于此抗原表位所设计的小分子抑制药物可以阻断病毒的感染；同时基于此抗原表位所构建的多拷贝重复表位疫苗，在适宜的佐剂辅助下，可以诱发高滴度的gD蛋白抗体，并且具有较高的中和抗体效价。本发明为建立牛传染性鼻气管炎检测方法及疫苗研发奠定基础。

关键词：抗原表位牛传染性鼻气管炎病毒牛传染性鼻气管炎检测蛋白蛋白抗原表位中和抗体效价分子生物学氨基酸肽段单克隆抗体表位疫苗蛋白抗体医药领域抑制药物疫苗研发重组蛋白多拷贝高滴度小分子血清短表多肽构建佐剂制备诱发筛选病毒感染重复治疗

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牛传染性鼻气管炎病毒繁殖的冰冻蚀刻研究

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微生物学报 1986年第3期 216-220页

作者：王晓丁明孝翟中和鲁崎吾董仁杰北京大学生物学系中国科学院生物物理研究所

用冰冻断裂和蚀刻技术对牛传染性鼻气管炎病毒及其在细胞中的繁殖进行了观察。验证了Furlong等提出的疱疹病毒核壳体模型;同时发现在细胞膜上大片形成吞饮泡,细胞质泡状结构的膜上颗粒随机分布于PF和EF面。本文对这些现象与病毒繁殖及... 详细信息

用冰冻断裂和蚀刻技术对牛传染性鼻气管炎病毒及其在细胞中的繁殖进行了观察。验证了Furlong等提出的疱疹病毒核壳体模型;同时发现在细胞膜上大片形成吞饮泡,细胞质泡状结构的膜上颗粒随机分布于PF和EF面。本文对这些现象与病毒繁殖及细胞骨架的关系进行了讨论。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒冰冻蚀刻

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牛传染性鼻气管炎病毒免疫学检测方法研究进展

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中兽医医药杂志 2023年第4期42卷 41-46页

作者：刘婧杨晨孙续丁学智杨峰中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、农业农村部兽用药物创制重点实验室、甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050

牛传染性鼻气管炎(传染性脓疱外阴阴道炎)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染引起的传染病,流行范围较广。该病在临床上主要有呼吸道和生殖道两种表现型,引发多种症状,给牛养殖业造成了巨大的经济损失。病毒侵入牛体后造成持续性感染,... 详细信息

牛传染性鼻气管炎(传染性脓疱外阴阴道炎)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染引起的传染病,流行范围较广。该病在临床上主要有呼吸道和生殖道两种表现型,引发多种症状,给牛养殖业造成了巨大的经济损失。病毒侵入牛体后造成持续性感染,病牛长期或终生带毒,给防控带来极大困难,IBR的综合防控依赖于精准的检测方法。基于抗原-抗体特异性识别反应的免疫学检测方法在特异性、敏感性、样品前处理简便性、现场适用性、检测效率等方面优势突出。IBRV的gB蛋白、gC蛋白、gE蛋白、gG蛋白等常被作为靶抗原进行检测试剂盒的研发,从IBRV的基因组结构、结构蛋白特点、选用的IBRV毒株、靶抗原的表达方式、酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法的建立、不同方法的符合率等方面综合论述了IBRV免疫学检测方法的研究进展,以期为该病原快速、精准、便捷的检测诊断试剂的研发提供参考。

关键词：牛传染性鼻气管炎牛传染性鼻气管炎病毒牛疱疹病毒1型免疫学检测酶联免疫吸附法胶体金免疫层析法

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牛传染性鼻气管炎病毒感染MDBK细胞的转录组差异表达分析

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经济动物学报 2024年

作者：马青霞汪婷婷刘宏莹许立慧刘莹玉崔珍珍宫庆龙李健明时坤冷雪杜锐吉林农业大学动物科技学院吉林农业大学中药材学院吉林省梅花鹿高效养殖和产品开发技术工程研究中心

牛感染牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhinotracheitis，IBR）感染牛后可引起免疫抑制，导致继发感染，包括细菌性肺炎和牛呼吸道疾病综合征，IBR给全球养牛业带来了巨大的经济损失。为了解IBRV感染宿主细胞后的分子水平变化，... 详细信息

牛感染牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhinotracheitis，IBR）感染牛后可引起免疫抑制，导致继发感染，包括细菌性肺炎和牛呼吸道疾病综合征，IBR给全球养牛业带来了巨大的经济损失。为了解IBRV感染宿主细胞后的分子水平变化，本研究将实验室分离并保存的IBRV NM8株接种MDBK细胞，通过高通量测序获得IBRV NM8株感染MDBK后的细胞差异转录组数据，并对差异表达基因进行功能富集。结果表明，与对照组相比，IBRV NM8株感染组的差异基因共3518个，其中上调基因2027个，下调基因1491个。通过GO注释和KEGG信号通路富集分析发现，IBRV NM8株感染组的差异基因主要参与的信号通路有病毒蛋白与细胞因子互作，溶酶体，p53信号通路等。通过流式细胞术发现IBRV NM8株感染MDBK细胞可引起细胞凋亡。本研究为深入分析IBRV的发病机理提供参考依据。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 MDBK细胞转录组分析

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牛传染性鼻气管炎病毒gI蛋白截短表达与单克隆抗体制备

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中国动物检疫 2022年第8期39卷 112-119页

作者：侯丽娜于明华刘春羽赵洪哲郑秉武温永俊王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 呼和浩特市动物园内蒙古呼和浩特010050

为获得牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gI蛋白单克隆抗体,构建了gI截短基因重组原核表达质粒pET-32a-gI,并对其进行了诱导表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blot验证了gI蛋白在大肠杆菌内的表达... 详细信息

为获得牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gI蛋白单克隆抗体,构建了gI截短基因重组原核表达质粒pET-32a-gI,并对其进行了诱导表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blot验证了gI蛋白在大肠杆菌内的表达情况。将纯化的gI蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选及亚克隆,得到针对IBRV gI蛋白的单克隆细胞株gI14。利用体内诱生法制备抗IBRV gI蛋白单克隆抗体腹水,使用Western blot和间接免疫荧光(IFA)对单克隆抗体特异性进行检测和验证。Western blot结果显示:原核表达的gI融合蛋白相对分子质量为34 ku,gI蛋白单克隆抗体与gI表达蛋白反应性良好,与pET-32a(+)空载体蛋白无特异性结合;天然表达的gI蛋白相对分子质量为45 ku,gI蛋白单克隆抗体与细胞内感染的IBRV所表达的gI蛋白反应性良好。IFA结果显示,gI蛋白单克隆抗体及阳性对照组IBRV多抗均能与细胞内感染的IBRV发生特异性结合,使细胞出现特异性绿色荧光信号,而空白及阴性对照组均未见绿色荧光信号。结果表明,本研究基于高效表达的gI蛋白,成功制备了1株能稳定表达gI单克隆抗体的细胞株gI14,获得的gI蛋白单克隆抗体与原核表达的gI蛋白及IBRV全病毒均能特异性结合,这为进一步研制IBRV诊断试剂盒及探究IBRV gI蛋白抗原表位及蛋白功能奠定了基础。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gI蛋白原核表达单克隆抗体

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牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株及其应用

牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株及其应用

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作者：崔尚金赵占中梁琳 100193 北京市海淀区圆明园西路2号

本发明公开了牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株及应用，本发明的牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV‑B株)接种MDBK细胞，收获培养物，用β‑丙内酯(β‑propiolactone)灭... 详细信息

标准号: CN107299088A

本发明公开了牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株及应用，本发明的牛传染性鼻气管炎病毒IBRV‑B株具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV‑B株)接种MDBK细胞，收获培养物，用β‑丙内酯(β‑propiolactone)灭活后，与法国赛比克公司的商品化Montanide^TM ISA15AVG佐剂混合乳化制成牛传染性鼻气管炎病毒灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的牛传染性鼻气管炎病毒灭活疫苗免疫断奶健康阴性牛能够预防由牛传染性鼻气管炎病毒引起的疾病，而且此疫苗具有安全、产生抗体快、免疫期持久等优点。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒灭活疫苗免疫原性免疫期培养物抗体灭活内酯阴性佐剂乳化制备商品化接种疫苗疾病收获预防应用安全健康

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牛传染性鼻气管炎病毒部分糖蛋白的研究进展

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畜牧与饲料科学 2008年第4期29卷 59-61,64页

作者：胡文兵关平原李平安郝瑞峰内蒙古农业大学动物科学与医学学院塔里木大学动物科技学院新疆阿拉尔843300

牛传染性鼻气管炎又名牛疱疹病毒Ⅰ型感染症,是一种急性、热性、接触性传染病,该病能给养牛业造成重大经济损失。该病毒是双股DNA有囊膜的病毒,病毒囊膜糖蛋白对病毒的吸附、侵入和细胞间扩散是必需的,可刺激机体产生中和抗体。囊膜糖... 详细信息

牛传染性鼻气管炎又名牛疱疹病毒Ⅰ型感染症,是一种急性、热性、接触性传染病,该病能给养牛业造成重大经济损失。该病毒是双股DNA有囊膜的病毒,病毒囊膜糖蛋白对病毒的吸附、侵入和细胞间扩散是必需的,可刺激机体产生中和抗体。囊膜糖蛋白的研究不仅能了解病毒分子生物学的结构和功能,而且对该病的诊断和预防也具有重要意义。笔者就gB蛋白和gE蛋白的结构和分子生物学特性作一综述,并对其进行了展望。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒糖蛋白研究进展

来源：评论

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牛传染性鼻气管炎病毒gB、gE蛋白的研究概述

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畜牧与饲料科学 2008年第3期29卷 61-62,72页

作者：牛德料孟日增石建平山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

牛传染性鼻气管炎病毒(Infectiousbovine rhinotracheitis virus,IBRV)又名牛疱疹病毒Ⅰ型(bovine herpesvirus1,BHV-1)。BHV-1基因能编码11种糖蛋白,其中gB蛋白和gE蛋白在病毒致病过程和刺激机体产生抗体的过程中都起到较大的作用。笔... 详细信息

牛传染性鼻气管炎病毒(Infectiousbovine rhinotracheitis virus,IBRV)又名牛疱疹病毒Ⅰ型(bovine herpesvirus1,BHV-1)。BHV-1基因能编码11种糖蛋白,其中gB蛋白和gE蛋白在病毒致病过程和刺激机体产生抗体的过程中都起到较大的作用。笔者就关于gB、gE这2种糖蛋白的研究做一概述。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gB蛋白 gE蛋白

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牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立

引用

中国奶牛 2007年第8期 7-9页

作者：杨娟支海兵中国兽医药品监察所病毒室北京100081

根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列,合成GH-1、GH-2两条引物,分别以IBRV的BartaNu/67株、IBRV-BK125株基因组DNA为模板进行扩增,结果两株IBR病毒DNA均可扩增出362bp的特异性片段;对其同属的伪狂犬病毒(PRV)、火鸡疱疹病毒(HVT)及牛病... 详细信息

根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列,合成GH-1、GH-2两条引物,分别以IBRV的BartaNu/67株、IBRV-BK125株基因组DNA为模板进行扩增,结果两株IBR病毒DNA均可扩增出362bp的特异性片段;对其同属的伪狂犬病毒(PRV)、火鸡疱疹病毒(HVT)及牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)进行扩增均未见特异性条带;敏感性检测表明,该法对IBR病毒的检出限量为104.25TCID50/0.1mL。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 PCR

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