检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2021年第6期29卷 55-61页

作者：穆乐孙锦涵张健张淋然丁彦琴孙玉宁宁夏医科大学基础医学院银川750004 海南医学院临床医学院海口571199

为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导... 详细信息

为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行蛋白可溶性分析;用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以纯化的VP1N融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗VP1N多克隆抗体;通过ELISA的方法测定VP1N多克隆抗体效价,并采用Western blot和免疫荧光鉴定VP1N抗体的特异性。结果表明:重组蛋白VP1N可高效可溶性表达,分子量约为34 kDa;VP1N融合蛋白免疫兔后,ELISA法测定VP1N多抗效价达1∶1600 000;Western blot结果显示,VP1N多克隆抗体能够与MVC感染靶细胞后的天然VP1蛋白反应;细胞免疫荧光结果显示,该抗体也可与MVC感染WRD细胞中的天然VP1蛋白反应,且发现VP1大量分布于WRD细胞的胞核中。本研究所制备的VP1N抗体具有很好的反应性和特异性,为进一步深入研究VP1蛋白在博卡病毒致病性及感染机制中的研究提供实验基础。

关键词：犬博卡病毒 VP1结构蛋白多克隆抗体特异性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定

引用

吉林大学学报（医学版） 2015年第4期41卷 864-869,I0006页

作者：闫琰张茜马婧李建宁张薇孙玉宁宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系宁夏银川750004

目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘... 详细信息

目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。

关键词：犬博卡病毒 NP1基因多克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬博卡病毒流行病学调查及基因序列分析

引用

中国动物传染病学报 2023年第3期31卷 200-204页

作者：程群韩宏晓郁达义赵秋华孙安帮马福余陈美松王海根孙清上海市闵行区动物疫病预防控制中心上海201109

犬博卡病毒(CBoV)属于细小病毒科的无囊膜病毒,是一种从犬粪便中检测发现的新发病原,该病毒现已在多个国家和地区犬粪便中检测到,但其在上海地区的流行情况及其致病机制目前还不是很清楚。为了调查犬博卡病毒在上海犬中的流行情况,本研... 详细信息

犬博卡病毒(CBoV)属于细小病毒科的无囊膜病毒,是一种从犬粪便中检测发现的新发病原,该病毒现已在多个国家和地区犬粪便中检测到,但其在上海地区的流行情况及其致病机制目前还不是很清楚。为了调查犬博卡病毒在上海犬中的流行情况,本研究于2019年6月至2019年12月,从上海市采集犬新鲜粪便206份,通过PCR扩增方法进行鉴定并进一步通过进化树对其基因组进行分析。结果显示在所搜集的206份样品中有3份为CBoV阳性(1.5%),为了对检测出的CBoV基因组特性进行分析,我们扩增出CBoV的全基因组,发现其基因组共含有5246个核苷酸,其中包含大小为249 bp的5'UTR、4853 bp的开放阅读框和144 bp的3'UTR。从系统进化树中可以看出该病毒与其他亚洲分离株亲缘关系较近,处于同一个分支,同属于CBoV2。本研究通过对CBoV的流行情况进行调查,揭示了CBoV在上海犬中的感染情况,为进一步研究CBoV的致病性及潜在的CBoV传染病的预警和防控提供科学依据和理论参考。

关键词：犬博卡病毒基因特性进化树分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬博卡病毒GZHD15株全基因序列分析及PCR检测方法的建立与应用

犬博卡病毒GZHD15株全基因序列分析及PCR检测方法的建立与应用

引用

作者：陈意伟华中农业大学

学位级别：硕士

博卡病毒是一种可感染多种动物的小DNA病毒。近年来的研究逐步增多，主要是针对人博卡病毒（HBoV）、猪博卡病毒（PBoV）、牛博卡病毒（BPV）的检测方法、基因分型、细胞培养技术、致病性等方面的研究。但基因型复杂、检测方法滞后、致... 详细信息

博卡病毒是一种可感染多种动物的小DNA病毒。近年来的研究逐步增多，主要是针对人博卡病毒（HBoV）、猪博卡病毒（PBoV）、牛博卡病毒（BPV）的检测方法、基因分型、细胞培养技术、致病性等方面的研究。但基因型复杂、检测方法滞后、致病机制报道很少，严重限制博卡病毒流行调查、防控技术储备，尤其是犬博卡病毒(CBoVs)的研究相对较少。因此，本课题对实验室保存的犬博卡病毒株GZHD15进行全基因序列分析，并建立PCR检测方法。初步掌握了CBoVs在国内地区性的流行情况，对提高检测水平及CBoVs更深层次的研究提供基础的科学数据资料和思路，具有科学价值和意义。\n 本课题选择实验室保存的犬博卡病毒株GZHD15，对其进行分段扩增全基因组，再全基因组克隆，对测序结果进行拼接，获得一条全长5116bp的基因序列，将其与NCBI中的所有完整的CBoVs基因序列和其它博卡病毒部分完整基因序列构建进化树，经分析发现GZHD15株与CBoV2的亲缘关系最近，在CBoV2中，GZHD15株与香港株（登录号：JQ692588-JQ692590）和韩国株（登录号：KP281717）亲缘关系最近。运用NCBI中的在线软件对其进行开放阅读框（Open reading frame, ORF）预测，GZHD15株同其它CBOVs一样，共3个ORF，分别编码非结构蛋白NS1、NP1，结构蛋白VPI、VP2。在与NCBI中25条完整CBoVs基因全长比对中，GZHD15株与15株CBoV2的核苷酸同源性在92.6%-96.8%，与MVC同源性普遍低于61.2%，与CBoV3同源性55.7%。与26条CBoVs基因序列的病毒蛋白NS1、NP1、VP1、VP2进行核苷酸和氨基酸同源性对比，结果和整体基因序列的比对结果保持一致。\n 参考CBoVs结构蛋白VP2的基因序列，用引物设计软件Primer premier5.0设计一对检测引物，建立PCR检测方法，分别从退火温度、引物用量两方面对检测方法进行优化，并通过特异性实验、敏感性实验、重复性实验验证优化后的检测方法的准确性。运用优化后的PCR检测方法对广州市CBoVs的流行情况做了初步的调查，425份被检样品中仅测得1份阳性，经测序结果分析比对，该病毒株属于CBoVs。对初步调查结果进行分析，认为与样品的采集季节有很大关系。

关键词：犬博卡病毒全基因组分析 PCR检测方法流行特征

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬博卡病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

犬博卡病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

引用

作者：黄钰婧西南民族大学

学位级别：硕士

博卡病毒(Bocavirus)在临床上会引起多种动物及人的呕吐、腹泻等消化道症状,以及人、猪和牛的咳嗽、流涕等呼吸道症状。犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBoV)是在2012年被发现的新型病毒并且在世界范围广泛分布,已在中国、美国、德国、韩... 详细信息

博卡病毒(Bocavirus)在临床上会引起多种动物及人的呕吐、腹泻等消化道症状,以及人、猪和牛的咳嗽、流涕等呼吸道症状。犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBoV)是在2012年被发现的新型病毒并且在世界范围广泛分布,已在中国、美国、德国、韩国、泰国、越南、香港等多个国家和地区被发现并报道。目前报道的犬感染CBoV后的主要症状为腹泻,但由于对CBoV的报道时间尚短,国内外尚缺乏丰富的地区性流行病学资料,且尚无针对CBoV的荧光定量PCR方法建立。本试验的目的是建立针对CBoV的荧光定量PCR检测方法,利用该方法对成都地区CBoV的感染情况进行分子流行病学调查,为疾病的防控和诊断提供基础支持。1.通过对反应体系、反应条件的优化,成功建立了基于SYBR Green I的CBoV荧光定量PCR检测方法。试验表明,方法具备良好的特异性、敏感性及重复性,最低检测限为3.73×10 copies·μL。2.应用建立的荧光定量PCR方法对2021年3月至11月自四川成都地区采集的共330份犬的粪便样本进行检测,结果表明:成都地区CBoV的总阳性率为20.61%(68/330)。3.感染相关因素分析表明:CBoV的感染与犬混血或纯血品种有关(P<0.01),在纯血品种犬只样本中检出率较高;CBoV的感染与犬年龄相关,12月龄以上的成年犬检出率分别与≤3月龄犬检出率、4～12月龄犬检出率相比存在极显著差异(P<0.01),≤3月龄犬的检出率44.68%(42/94)虽高于4～12月龄犬的检出率26.47%(18/68)但两者间无统计学差异(P>0.05);有肠道感染症状的犬检出率35.93%(60/167)显著高于无肠道感染症状的犬检出率4.91%(8/163)(P<0.01),显示CBoV的感染与犬肠道感染密切相关;犬只感染CBoV与免疫状况有关,未免疫犬的检出率显著高于已免疫犬的检出率(P<0.05);CBoV的感染与季节有关,春季的检出率高于其他三季的检出率且有极显著差异(P<0.01);犬的性别与CBoV的感染无关(P>0.05)。本研究首次建立了针对CBoV的荧光定量PCR检测方法,为CBoV的检测提供了快速灵敏的工具,同时丰富了成都地区犬群的CBoV分子流行病学资料,为CBoV的防控提供一定的参考数据。

关键词：犬博卡病毒荧光定量PCR 分子检测分子流行病学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

2014-2015年黑龙江三个地区犬博卡病毒的PCR检测及遗传变异分析

2014-2015年黑龙江三个地区犬博卡病毒的PCR检测及遗传变异分析

引用

作者：姚爽黑龙江八一农垦大学

学位级别：硕士

犬博卡病毒（Canine bocavirus,CBoV）与犬肠炎密切相关,为了探索CBoV在黑龙江地区的流行情况及遗传演化,于2014年5月份至2015年4月份,在黑龙江哈尔滨、大庆、牡丹江三个地区采集201份具有腹泻症状的犬粪便拭子,利用PCR扩增CBoV NS1基... 详细信息

犬博卡病毒（Canine bocavirus,CBoV）与犬肠炎密切相关,为了探索CBoV在黑龙江地区的流行情况及遗传演化,于2014年5月份至2015年4月份,在黑龙江哈尔滨、大庆、牡丹江三个地区采集201份具有腹泻症状的犬粪便拭子,利用PCR扩增CBoV NS1基因片段（440 bp）,进一步对CBoV阳性样品的VP2基因进行扩增,测序后进行进化树分析,从而对黑龙江地区CBoV病毒株的进化性进行分析。同时,利用PCR方法对CBoV阳性病料中犬细小病毒（CPV-2）、犬冠状病毒（CCoV）、犬嵴病毒（CaKV）进行检测。PCR检测结果显示,在201份样品中,15份样品为CBoV阳性（7.5%,15/201）。序列分析结果显示,15株CBoV的NS1片段在核苷酸水平的同源性为83.1%100%,推导的氨基酸水平的同源性为75.8%100%;5株CBoV VP2基因在核苷酸水平的同源性为82.9%96.8%,推导的氨基酸水平的同源性为90.4%99.1%。NS1基因的进化树分析显示,与韩国、美国、德国和中国香港的CBoV-2毒株相比,15个中国CBoV病毒株被分在CBoV-2毒株的不同亚群中;VP2基因的进化树分析表明,5个中国CBoV病毒株被分成三个不同的CBoV-2型种群,即CBoV-2HK群、CBoV-2C群和CBoV-2B群。对VP2基因重组分析显示,本研究选择的5个病毒株发生潜在的三个重组事件。在15个CBoV阳性样品中,CBoV与CPV-2、CCoV和Ca KV的混合感染率高达20%40%。上述结果表明,CBoV在中国黑龙江三个地区犬腹泻样品中阳性率为7.5%,并且CBoV毒株表现出遗传多样性、可能的重组事件和混合感染情况。

关键词：犬博卡病毒遗传多样性混合感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用

引用

安徽农业科学 2016年第10期44卷 148-149,285页

作者：陈意伟温肖会朱学良吕殿红翟少伦魏文康华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640

[目的]建立犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBo V)的PCR检测方法,了解其流行情况。[方法]根据Gen Bank数据库上CBo V的VP2基因序列合成1对引物,建立PCR检测方法,并运用该方法对临床样品进行检测。[结果]特异性试验中,除CBo V有目的条带出... 详细信息

[目的]建立犬博卡病毒(Canine bocavirus,CBo V)的PCR检测方法,了解其流行情况。[方法]根据Gen Bank数据库上CBo V的VP2基因序列合成1对引物,建立PCR检测方法,并运用该方法对临床样品进行检测。[结果]特异性试验中,除CBo V有目的条带出现外,犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬传染性肝炎(ICHV)、犬副流感病毒(CPIV)、猫瘟热(FDV)等均无条带出现。敏感性试验表明,此检测方法对CBo V的最低检测量为4.806 2 pg/μL。重复性试验表明,多次重复试验结果一致,表明此方法重复性好。425份样品中仅有1份样品扩增出目的条带,经测序比对鉴定为CBo V。初步的流行病学调查结果表明,CBo V在犬中的流行率与感染率极低。[结论]建立的PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、可重复性强等特点。

关键词：犬博卡病毒 PCR检测方法应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

2014～2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查

引用

黑龙江八一农垦大学学报 2016年第5期28卷 47-50页

作者：姚爽王志慧滕井胜李春秋张思瑶边秀东张立春郭东华黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 黑龙江农业经济职业学院

为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳... 详细信息

为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳性（20%,8/40）;在8份CBoV阳性样品中,与CPV-2、CCoV、CaKV混合感染率分别为37.3%（3/8）、25%（2/8）、25%（2/8）。序列分析表明,8个CBoV毒株的NS1片段在核苷酸水平的同源性为94.2%～100%,在氨基酸水平的同源性为91.7%~100%。进化树分析显示,与韩国、美国、德国和中国香港的CBoV毒株相比,8个中国CBoV毒株表现出遗传多样性。研究揭示了黑龙江牡丹江地区流行的CBoV毒株显示出遗传多样性以及与其他肠道病毒的混合感染情况。

关键词：犬博卡病毒混合感染遗传多样性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RNA解旋酶DDX3X抑制剂RK-33抑制博卡病毒MVC复制增殖的功能研究

RNA解旋酶DDX3X抑制剂RK-33抑制博卡病毒MVC复制增殖的功能研究

引用

作者：陈伟然湖北大学

学位级别：硕士

犬博卡病毒MVC(Minute Virus of Canines)属于细小病毒科(Family Parvovirinae),博卡病毒属((Genus Bocaparvovirus),是一类无包膜的单链DNA病毒,能够感染不同年龄段家犬,引起新生幼崽呼吸困难、腹泻性肠炎甚至造成胚胎死亡。DDX3X((DEA... 详细信息

犬博卡病毒MVC(Minute Virus of Canines)属于细小病毒科(Family Parvovirinae),博卡病毒属((Genus Bocaparvovirus),是一类无包膜的单链DNA病毒,能够感染不同年龄段家犬,引起新生幼崽呼吸困难、腹泻性肠炎甚至造成胚胎死亡。DDX3X((DEAD-Box Helicase 3 X-Linked)是DEAD-box RNA解旋酶家族成员之一,几乎在真核生物RNA代谢的所有阶段都发挥作用,可通过调控病毒基因的表达或宿主细胞的天然免疫反应影响病毒的复制增殖过程,是一种新发现的重要抗病毒靶标。本研究通过观察RK-33(DDX3X解旋酶抑制剂)对MVC在细胞中病毒基因的复制和表达、病毒颗粒形成的影响;以及分析MVC感染的WRD细胞使用RK-33处理前后转录组学变化,以此来探究DDX3X对MVC复制增增殖的调控作用。具体研究内容如下: 1.采用CCK-8法确定RK-33在细胞中使用的安全剂量,确定以1μg/ml RK-33对细胞进行处理,并使用感染复数MOI=5的MVC感染WRD细胞。采用Southern blot检测发现RK-33抑制病毒基因组DNA复制,同时Western blot和RT-q PCR表明病毒非结构蛋白NS-66、NP1以及结构蛋白VP基因表达水平下调,q PCR检测RK-33处理后MVC子代病毒粒子的拷贝数下降。表明DDX3X解旋酶活性被抑制后,MVC在细胞中复制增殖能力减弱。 2.通过转录组学测序比较RK-33处理受感染细胞前后的细胞转录组变化情况。测序结果筛到1021个差异表达基因,对这些差异表达基因进行GO功能富集和KEGG通路富集,在RK-33处理组中差异表达基因中除了对病毒与肿瘤免疫相关基因上调外,有丝分裂,信号转导等通路也有明显差异。我们挑选了干扰素刺激基因ISG15及其他干扰素诱导蛋白进行RT-q PCR验证,结果与RNA-seq一致,RK-33处理后这些基因表达水平上升。综上所述,本研究确定RK-33抑制犬博卡病毒MVC在细胞中的复制增殖,证明了RK-33增强细胞对病毒的免疫反应;MVC感染WRD细胞后会通过拮抗DDX3X帮助自身变异逃逸,同时还会导致DDX3X转录本发生异常剪切。本课题将有助于探究博卡病毒与宿主间的相互作用,有助于增强对博卡病毒复制感染机制的了解,进而为抗病毒靶标的筛选和病毒疫苗制备过程的成本控制奠定理论基础,更为重组博卡病毒载体在基因治疗中的应用提供理论支持。

关键词：犬博卡病毒 DDX3X RK-33 转录组学复制增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

博卡病毒MVC结构蛋白VP2多克隆抗体的制备与鉴定

博卡病毒MVC结构蛋白VP2多克隆抗体的制备与鉴定

引用

作者：马婧宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的犬博卡病毒MVC(Minute Virus of canine)是细小病毒家族博卡病毒亚家族的成员之一。而VP2作为MVC病毒的结构蛋白,不仅是构成衣壳蛋白的主要成分,更是细小病毒的主要免疫原性抗原,其具有凝血活性的物质,是作为决定宿主范围以及宿主... 详细信息

目的犬博卡病毒MVC(Minute Virus of canine)是细小病毒家族博卡病毒亚家族的成员之一。而VP2作为MVC病毒的结构蛋白,不仅是构成衣壳蛋白的主要成分,更是细小病毒的主要免疫原性抗原,其具有凝血活性的物质,是作为决定宿主范围以及宿主与病毒之间相互作用的关键影响因素。因此,本文通过构建MVC的VP2结构蛋白的原核表达载体,通过诱导表达、纯化目的蛋白,免疫兔子、制备针对VP2的多克隆抗体,为进一步研究VP2在MVC病毒致病及感染中的作用,深入揭示MVC病毒致病及感染的分子机制奠定研究基础。方法(1)以本实验室保存的博卡病毒MVC的感染性克隆载体p IMVC为模板PCR扩增VP2基因,并将其产物纯化。将纯化产物与表达载体p ET32a(+)经EcorⅠ、XhoⅠ同时双酶切,经T4连接酶连接,转化到克隆菌株***5α以及表达菌株***21,通过双酶切鉴定正确后,进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测和鉴定目的蛋白的表达。目标蛋白经大量表达后,回收细菌超声裂解并Ni柱纯化,以纯化产物作为完全抗原免疫新西兰大白兔。(2)ELISA检测抗体效价。(3)以MVC感染WRD(Walter Reed Dog)嗜性细胞,然后运用Western blot和免疫荧光技术鉴定抗体特异性。结果(1)DNA序列测定及双酶切鉴定结果均显示MVC-VP2基因成功构建至原核表达载体p ET32a(+)上,原核表达产物经SDS-PAGE鉴定后证实成功表达一相对分子量(Mr)约为39kd的目的蛋白条带,VP2目的蛋白主要以可溶性蛋白形式存在。(2)以纯化得到的MVC-VP2重组蛋白免疫制备得到兔血清,ELISA方法测得其效价为1:200 000。(3)Western blot、免疫荧光方法证实VP2多抗血清能够成功检测MVC感染的WRD细胞,并且具有特性。结论成功构建了MVC结构蛋白基因VP2的原核表达载体p ET32a(+)-VP2,并表达了相应的可溶性蛋白。制备了高效价博卡病毒MVC的VP2多克隆抗体,具有很好的特异性。

关键词：犬博卡病毒 VP2蛋白原核表达多克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：