检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2007年第4期38卷 407-411页

作者：苏正元张彦明洪海霞刘建玲西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100

为寻求使猪主动脉血管内皮细胞增殖寿命延长的方法,本试验将含有人类端粒酶催化亚基端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过脂质体介导法导入猪主动脉血管内皮细胞(Porcine ... 详细信息

为寻求使猪主动脉血管内皮细胞增殖寿命延长的方法,本试验将含有人类端粒酶催化亚基端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过脂质体介导法导入猪主动脉血管内皮细胞(Porcine arterial endothelial cell,PAEC)。对转染后的血管内皮细胞进行Ⅷ因子和CD34鉴定,利用PCR-ELISA方法检测hTERT导入后细胞端粒酶活性的表达情况,探讨了转染后细胞的生长特性。结果显示,转染后的细胞Ⅷ因子和CD34均呈阳性,证明转染后细胞仍表达血管内皮细胞的特异性蛋白;导入hTERT后,细胞有较高的端粒酶活性,增殖寿命较对照细胞延长了20代。表明hTERT导入细胞能重建细胞端粒酶活性,从而延长细胞在体外培养的寿命。

关键词：猪血管内皮细胞人端粒酶逆转录酶脂质体转染猪

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利用SMART技术构建猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库

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中国兽医学报 2014年第6期34卷 865-868页

作者：宋江伟田宏吴锦艳陈妍尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室/国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

本研究旨在建立猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库,进而为研究猪瘟病毒的基因功能及致病机理提供良好的试验体系。体外培养猪血管内皮细胞,提取细胞总RNA,并用Oligotex mRNA Mini Kit纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA... 详细信息

本研究旨在建立猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库,进而为研究猪瘟病毒的基因功能及致病机理提供良好的试验体系。体外培养猪血管内皮细胞,提取细胞总RNA,并用Oligotex mRNA Mini Kit纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA)。经CHROMA SPINTM TE-400Column纯化后的dsDNA与线性化的pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞Y187中,以同源重组的方式在酵母细胞内构建猪血管内皮细胞cDNA文库。结果获得的文库容量在6×106 CFU/mL,随机挑选24个克隆进行PCR检测,插入的片段大小集中在400~2 000bp之间,平均插入长度为1 000bp左右,文库重组率为100%。本研究为从文库中高通量地筛选出与猪瘟病毒互作的重组子,即寻找与该病毒相互作用的受体蛋白奠定了坚实的基础。

关键词：猪血管内皮细胞 cDNA文库 SMART技术

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人血清对猪血管内皮细胞的细胞毒效应研究

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中华实验外科杂志 1998年第2期15卷 147-148页

作者：赵中辛杜竞辉王学浩钱建民武正炎南京医科大学第一附属医院普外科 210029

目的探讨异种〔猪/人)超急性排斥的发生机制。方法人血清为天然抗体和补体源。用四唑盐法行补体依赖的细胞毒反应,建立体外超急性排斥模型。结果正常人血清能溶解猪血管内皮细胞;而 Clq缺乏及B因子缺乏的人血清对猪血管内皮细胞的溶解... 详细信息

目的探讨异种〔猪/人)超急性排斥的发生机制。方法人血清为天然抗体和补体源。用四唑盐法行补体依赖的细胞毒反应,建立体外超急性排斥模型。结果正常人血清能溶解猪血管内皮细胞;而 Clq缺乏及B因子缺乏的人血清对猪血管内皮细胞的溶解率较低(P<0.01);同种猪血清及灭活补体的人血洁不溶解猪血管内皮细胞;将经典或旁路途径有缺陷的人血清等体积混合,其细胞毒作用恢复正常。结论治疗猪/人之间的超急性排斥应考虑补体旁路途径激活的问题。

关键词：猪血管内皮细胞人血清效应研究超急性排斥旁路途径细胞毒反应细胞毒作用发生机制天然抗体四唑盐法补体溶解率 B因子猪血清

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改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用

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科学通报 2003年第1期48卷 48-51页

作者：马业伟周小山赵清正杨军高新李艳春刘玉英王争中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所北京100021 军事医学科学院野战输血研究所北京100850

在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其... 详细信息

在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其克隆到真核表达载体pcDNA3中, 并转染猪血管内皮细胞(PAEC), 经G418筛选, 获得稳定表达细胞株. RT-PCR技术和细胞生长曲线分析, 证明E1AΔ基因能在PAEC中稳定表达, 且不影响细胞的正常生长, 并能抵抗肿瘤坏死因子-α (TNF-α)诱导的细胞凋亡. 报告基因分析表明, E1A(能抑制由TNF-α诱导的NF-κB活性, 其抑制率为53%, 对NF-κB信号转导途径下游的一个重要炎症基因--E-选择素基因的表达抑制率达63%. 综上, E1AΔ基因的这些功能基本符合异种器官移植中克服DXR的要求, 为利用E1AΔ基因克服DXR的可行性提供了实验依据.

关键词：器官移植延缓性免疫排斥反应猪血管内皮细胞 NF-кB 活性抑制腺病毒 5型E1A基因 TNF-α

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猪瘟病毒Shimen株侵染猪肺泡巨噬细胞与猪血管内皮细胞的转录组共表达基因分析

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动物医学进展 2018年第12期39卷 1-5页

作者：龚小程胡傲雪李雪鹏吴中兴何骏郭少敏宁蓬勃西安电子科技大学生命科学技术学院陕西西安710071 西北农林科技大学校医院陕西杨凌712100

猪瘟病毒(Classical swine fever,CSFV)引起的猪瘟对于全球养猪业具有广泛危害,其深层发病机制仍待阐明。该研究基于CSFV Shimen株侵染猪肺泡巨噬细胞和猪血管内皮细胞差异表达的转录组学数据,深度挖掘这两种宿主细胞共同应答CSFV Shime... 详细信息

猪瘟病毒(Classical swine fever,CSFV)引起的猪瘟对于全球养猪业具有广泛危害,其深层发病机制仍待阐明。该研究基于CSFV Shimen株侵染猪肺泡巨噬细胞和猪血管内皮细胞差异表达的转录组学数据,深度挖掘这两种宿主细胞共同应答CSFV Shimen株侵染的关键基因。结果显示,真核生物起始因子4A3(eukaryotic translation initiation factor 4A3,EIF4A3)、蛋白酶体β亚基3型(proteasome subunit beta3,PSMB3)等关键基因的异常表达可能影响宿主细胞的凋亡、周期调控等生理进程。GO(Gene Ontology)和KEGG分析表明,CSFV Shimen的侵染造成NF-κB等相关调控的生物学过程改变,并且DNA复制等信号通路出现显著性应答。联合组学分析很好地提示了CSFV Shimen对巨噬细胞及血管内皮细胞可能的共性损害,为更好地开展CSFV与宿主细胞的互作机制研究提供了有价值的信息。

关键词：猪瘟病毒猪肺泡巨噬细胞猪血管内皮细胞转录组学关联分析

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猪血管内皮细胞中的microRNA及其在猪瘟病毒感染中的作用

猪血管内皮细胞中的microRNA及其在猪瘟病毒感染中的作用

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中国畜牧兽医学会2011年学术年会

作者：张彦明郭抗抗张倩代晨邓文侯勃张旭唐青海西北农林科技大学动物医学院

引言/目的microRNA (miRNA)是近年发现的一类非编码的小分子RNA,作为一种调节分子,参与多种生命活动,近年的研究表明其参与细胞与病毒的相互作用。本研究的目的是建立猪血管内皮细胞的miRNA库,以发现新的miRNA,并探讨miRNA对猪瘟病毒增... 详细信息

引言/目的microRNA (miRNA)是近年发现的一类非编码的小分子RNA,作为一种调节分子,参与多种生命活动,近年的研究表明其参与细胞与病毒的相互作用。本研究的目的是建立猪血管内皮细胞的miRNA库,以发现新的miRNA,并探讨miRNA对猪瘟病毒增殖的调节作用,为揭示猪瘟病毒的感染的机理提供科学资料。

关键词：猪血管内皮细胞猪瘟病毒感染 microRNA

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酵母双杂交筛选猪血管内皮细胞中与猪瘟病毒NS2蛋白相互作用的蛋白

酵母双杂交筛选猪血管内皮细胞中与猪瘟病毒NS2蛋白相互作用的蛋白

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作者：康恺西北农林科技大学

学位级别：硕士

猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪瘟(Classical swine fever, CSF)被世界动物卫生组织(OIE)列为必须上报的动物传染病之一。由于CSFV体外培养增殖滴度低且不引起细胞病变,所以国内外对CSFV的研究大多侧重于病毒的检... 详细信息

猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪瘟(Classical swine fever, CSF)被世界动物卫生组织(OIE)列为必须上报的动物传染病之一。由于CSFV体外培养增殖滴度低且不引起细胞病变,所以国内外对CSFV的研究大多侧重于病毒的检测以及新型疫苗的研发,而对CSFV的致病机理研究相对较少。NS2蛋白为CSFV的一个非结构蛋白。现有资料表明,NS2蛋白通过与宿主细胞的相互作用对CSFV的复制有一定调节作用,并产生蛋白酶活性,切割NS2-3复合体释放NS3单体,而NS3单体的积聚会使接毒培养的细胞出现细胞病变(CPE)。但是目前对NS2蛋白与宿主细胞的相互作用以及调节病毒RNA复制的机制依然不很清楚。本文以研究NS2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用为目标,采用酵母双杂交技术,对CSFV宿主细胞猪血管内皮细胞(SUVEC)中与NS2蛋白相互作用的蛋白进行了筛选。获得了以下研究结果: (1)从pGFP-NS2绿色荧光表达载体中扩增得到NS2基因C末端360 bp的编码区,并构建到pGBKT7-NS2-C360诱饵表达载体中,获得了对酵母细胞无毒性且没有自激活性的pGBKT7诱饵表达载体。 (2)成功分离、纯化了猪血管内皮细胞双链cDNA,用来表达猎物文库的融合蛋白。 (3)将pGBKT7-NS2-C360载体、双链cDNA、猎物载体pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞,经过筛选获得16个阳性克隆。经PCR、测序、比对分析获得8种与CSFV具有相互作用的已知蛋白,分别为胞质溶胶非特异2肽酶(CNDP2)、热休克蛋白40(Hsp40)、CFTR相关配体(CAL)、E3泛激素连接酶、ATP合成酶6 (ATPase6)、NRAS相关蛋白、细胞凋亡调节基因(MOAP1)和核糖核蛋白H1。本试验筛选得到8种已知蛋白,其中Hsp40蛋白的重复性比较高,且现有资料表明,Hsp40参与调节病毒RNA的复制。所以Hsp40将作为所筛选蛋白进一步研究的重点。

关键词：猪瘟病毒 NS2蛋白酵母双杂交猪血管内皮细胞

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黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导后猪血管内皮细胞lncRNAs和miRNAs表达影响

黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导后猪血管内皮细胞lncRNAs和miRNAs表达...

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作者：张云非武汉轻工大学

学位级别：硕士

副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,GPS)常在猪场中引起副猪嗜血杆菌病。副猪嗜血杆菌为全世界危害养殖业主要细菌之一,表现症状为高热、呼吸困难、腹膜炎、心包炎和脑膜炎。在全球饲料中禁抗趋势下,且疫苗效果不稳定,亟待寻找一种新... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,GPS)常在猪场中引起副猪嗜血杆菌病。副猪嗜血杆菌为全世界危害养殖业主要细菌之一,表现症状为高热、呼吸困难、腹膜炎、心包炎和脑膜炎。在全球饲料中禁抗趋势下,且疫苗效果不稳定,亟待寻找一种新的抗生素替代物。副猪嗜血杆菌可以引起血管损伤和炎症,但目前血管损伤机制尚不完全清楚。lncRNAs(long non-coding RNA)和miRNAs(micro RNA)能调节炎症免疫反应已有报道。黄芩苷为黄芩主要活性成分,具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、治疗及预防糖尿病、保护心脑血管和神经、保护肝脏、增强免疫及抑制变态反应等作用。因此,本试验研究GPS感染猪血管内皮细胞后对lncRNAs和miRNAs表达的影响,并研究黄芩苷对lncRNAs和miRNAs表达的调节作用。通过高通量测序,发现黄芩苷可以调节副猪嗜血杆菌感染后lncRNAs和miRNAs表达,从而抑制血管炎症。1.黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导猪血管内皮细胞的转录组和lncRNA表达的影响试验设置3个组:空白对照组、GPS模型组、GPS+黄芩苷药物处理组。每组3个重复。分离原代血管内皮细胞,用10%胎牛血清M-199无双抗培养基重悬计数、稀释,使体系内细胞浓度为1×10～6个/m L,每个重复加入1 m L细胞悬液,1 m L无双抗培养基,黄芩苷处理组中加入500μg/m L黄芩苷0.25 m L。预处理1 h后,黄芩苷组,GPS模型组加入稀释到4×10～6 CFU/m L的对数期的副猪嗜血杆菌0.25 m L,空白组对照组用培养基补齐至2.5 m L,共培养12 h后,收集细胞,提取RNA,用Illumina Hiseq 2000平台进行测序。转录组结果表明,副猪嗜血杆菌刺激血管内皮细胞后,4067个基因差异表达(Fold change>2,P<0.05),其中1499个基因表达上调,2568个基因表达下调。KEGG分析显示差异基因主要富集在Toll样通路和肿瘤坏死因子通路。与副猪嗜血杆菌感染组相比,黄芩苷处理后,492个基因差异表达(Fold change>2,P<0.05),其中260个基因上调,232个基因下调;KEGG分析,富集的通路主要集中在细胞因子-细胞因子受体相互作用、肿瘤坏死因子信号通路等。通过PPI图进行分析,发现TLR2、CCL5、CXR4、CD40等基因位于蛋白质-蛋白质相互作用枢纽中心。对PPI网络中连接程度最高的30个基因进行KEGG富集分析,发现这些基因主要参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、趋化因子信号通路。Q-RT PCR结果显示,副猪嗜血杆菌感染血管内皮细胞后,CCL5、GBP1、SAMHD1表达上调,而黄芩苷处理后,这些基因表达下调。因此我们推测黄芩苷可通过改变CCL5、GBP1、SAMHD1等基因的表达,抑制基因所参与的细胞因子与细胞因子受体、TNF信号通路,减轻副猪嗜血杆菌感染。lncRNA结果表明:在副猪嗜血杆菌感染后,有584个lncRNAs差异表达,其中294个lncRNAs表达上调,290个lncRNAs表达下调(Fold change>2,P<0.05)。与副猪嗜血杆菌感染组相比,经黄芩苷处理后,27个lncRNAs的表达有显著差异,其中11个lncRNAs表达上调,16个lncRNAs表达下调。本试验通过顺式与反式对lncRNA靶基因进行预测,共获得18407个靶基因,其中264个靶基因为顺式预测,18167个靶基因为反式预测。对差异lncRNAs的靶基因进行KEGG分析发现,副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后,对应靶基因主要集中参与了肿瘤坏死因子信号通路、细胞凋亡、NF-κB信号通路、N-聚糖生物合成。与副猪嗜血杆菌组相比,黄芩苷处理后,对应的靶基因主要参与了丙酸代谢、嘧啶代谢、肿瘤坏死因子信号通路。对lncRNAs与靶基因互作结果进行Q-RT PCR验证结果表明,副猪嗜血杆菌感染后,lncRNA ALDBSSCT0000001677、ALDBSSCT0000001353、MSTRG.10724.2和ALDBSSCT0000010434表达均显著上调,黄芩苷处理后,这4个lncRNAs表达均极显著下调,与测序结果一致。我们推测,黄芩苷可能通过调节lncRNA ALDBSSCT0000001677、ALDBSSCT0000001353、MSTRG.10724.2和ALDBSSCT0000010434的表达作用于GBP1、SAMHD1、CCL5等靶基因,减轻副猪嗜血杆菌感染所引起的血管炎症。2.黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导猪血管内皮细胞的miRNAs表达的影响按照相同实验处理,收集细胞进行miRNA表达谱分析。在3组(空白对照组、副猪嗜血杆菌感染组和黄

关键词：黄芩苷副猪嗜血杆菌猪血管内皮细胞转录组测序 lncRNA miRNA

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四环素诱导表达NF-kB信号通路抑制因子p65RHD在猪血管内皮细胞中的研究

四环素诱导表达NF-kB信号通路抑制因子p65RHD在猪血管内皮细胞中...

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作者：桂端华中农业大学

学位级别：硕士

由于目前世界上供体器官严重的不足,异种器官移植逐渐发展成为一项热门研究。猪作为人类器官移植的理想供体已在世界上获得一致认可,它不仅与人类进化关系近,更重要的是器官大小相当而且经济、量大。猪的器官直接移植人体会导致免疫排... 详细信息

由于目前世界上供体器官严重的不足,异种器官移植逐渐发展成为一项热门研究。猪作为人类器官移植的理想供体已在世界上获得一致认可,它不仅与人类进化关系近,更重要的是器官大小相当而且经济、量大。猪的器官直接移植人体会导致免疫排斥反应。其中,血管内皮细胞的激活是异种移植中产生的一个普遍现象。为了抑制血管内皮细胞的激活,本实验构建了一个缺乏转录活性的NF-κB的亚基p65/RelA。当内皮细胞被激活时,该转录因子主要诱导粘附因子、细胞活素及促凝血因子的表达。p65RHD蛋白缺少转录活性,但是由于保留了RelA亚基的Rel同源域,仍然具有二聚结合,DNA锚定和核定位的功能,因此能竞争性抑制NF-κB信号通路。通过本实验的结论,p65RHD能有效的、特异的抑制蛋白NF-κB转录因子激活的一系列基因：IL-8、E-selectin,、P-selectin和组织因子。四环素诱导表达的p65RHD在内皮细胞中有同样的抑制作用。这使得用转基因动物作为异种移植的器官供体成为可能。

关键词： NF-κB沼信号通路 p65RHD 猪血管内皮细胞四环素诱导系统异种移植排斥反应

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黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染后猪血管内皮细胞TLRs/NF-κB和NLRP3/caspase-1信号通路的影响

黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染后猪血管内皮细胞TLRs/NF-κB和NLRP3/c...

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作者：徐磊武汉轻工大学

学位级别：硕士

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是存在于猪上呼吸道的一种常在菌,在特定条件下可引起格拉泽氏病(Gl?sser’s disease),给养猪业带来巨大的经济损失。该病在临床上以脑膜炎、浆膜炎、关节炎等为主要特征,严重感染时出现败血症... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是存在于猪上呼吸道的一种常在菌,在特定条件下可引起格拉泽氏病(Gl?sser’s disease),给养猪业带来巨大的经济损失。该病在临床上以脑膜炎、浆膜炎、关节炎等为主要特征,严重感染时出现败血症致猪死亡。副猪嗜血杆菌能够引起血管内皮细胞损伤和全身炎症反应。本试验成功分离猪原代血管内皮细胞并建立了副猪嗜血杆菌体外感染猪血管内皮细胞的细胞感染模型,研究黄芩苷在副猪嗜血杆菌感染血管内皮细胞后对细胞炎症反应的影响,并初步探讨黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后TLRs/NF-κB及NLRP3/caspase-1信号通路的作用。1.猪原代血管内皮细胞的分离培养及副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞体外细胞模型的建立。无菌采取猪主动脉,采用Ⅰ型胶原酶消化猪主动脉,分离培养猪血管内皮细胞,待细胞长满,使用胰酶消化传代。设置不同的细菌与细胞感染比(MOI)和互作时间,采用ELISA法测定细胞培养上清液中炎性因子IL-1β、IL-18和TNF-α的含量。结果表明,当MOI为1:10时,炎性细胞因子IL-1β、IL-18和TNF-α的分泌量呈增加趋势(p>0.05),而当MOI为1:1,10:1,100:1,即MOI大于1:1时,炎性细胞因子IL-1β、IL-18和TNF-α的分泌量与对照组相比极显著增加(p<0.05),因此确定副猪嗜血杆菌感染血管内皮细胞模型的副猪嗜血杆菌与血管内皮细胞感染比(MOI)为1:1。2.黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后TLRs/NF-κB信号通路的影响。试验设空白对照组、副猪嗜血杆菌造模组、乙酰半胱氨酸(NAC)药物对照组、黄芩苷处理组(12.5、25、50、100μg/mL)。药物组先加入相应浓度的黄芩苷及1 mM的NAC预处理1 h,再加入副猪嗜血杆菌感染血管内皮细胞,共培养12 h后ELISA法测定细胞培养液中炎性因子(IL-6、IL-8和IL-10)和炎性介质(PGE)的释放量,细胞内COX-2的表达量;Q-RT PCR法测定细胞炎性因子(IL-6、IL-8和IL-10)和炎性介质(COX-2)以及核转录因子(NF-κB)的mRNA表达情况;荧光免疫法和ELISA法测定NF-κB核转移。结果表明,副猪嗜血杆菌感染血管内皮细胞后,造模组的NF-κB p65的核转移显著增加,NAC及黄芩苷作用后核转移显著降低(p<0.05);HPS造模组细胞培养液中的炎性因子(IL-6、IL-8和IL-10)和炎性介质(PGE)的释放量和细胞内COX-2的蛋白表达量以及IL-6、IL-8、IL-10、COX-2的mRNA表达水平与空白对照组相比均有极显著上调(p<0.01),各浓度的黄芩苷处理组及1 mM NAC药物对照组均能显著或极显著下调炎性因子(IL-6、IL-8和IL-10)和炎性介质(PGE)的释放量和细胞内COX-2的蛋白表达量以及IL-6、IL-8、IL-10、COX-2的mRNA表达水平(p<0.01)。3.黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后NLRP3/caspase-1信号通路的影响。试验设空白对照组、副猪嗜血杆菌造模组、乙酰半胱氨酸(NAC)药物对照组、黄芩苷处理组(12.5、25、50、100μg/mL)。HPS感染后,检测细胞ROS的产生和细胞凋亡情况,细胞培养液中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-18的释放量、炎性因子及炎性小体受体的mRNA表达水平以及活化的Caspase-1(Cleaved caspase-1 p20)蛋白表达水平,研究HPS对血管内皮细胞NLRP3通路的激活以及黄芩苷的作用。结果表明,HPS感染血管内皮细胞可使细胞内ROS的产生极显著增加(p<0.01);细胞培养液中TNF-α、IL-1β和IL-18的含量极显著增加(p<0.01);细胞IL-1β、IL-18、TNF-α和NLRP3的mRNA表达量极显著上调(p<0.01);细胞中Cleaved caspase-1 p20蛋白表达量也极显著增加(p<0.01)。黄芩苷浓度在12.5、25、50和100μg/mL以及1 mM的NAC,能够显著下调IL-1β、IL-18、TNF-α和NLRP3的mRNA表达,降低细胞培养液中TNF-α、IL-1β和IL-18的分泌量,减少Cleaved caspase-1 p20蛋白表达以及抑制细胞内ROS的产生和细胞凋亡(p<0.01)。综上所述,副猪嗜血杆菌感染猪血管内皮细胞后可激活TLRs/NF-κB和NLRP3/caspase-1信号通路引起炎症反应,黄芩苷可能通过抑制TLRs/NF-κB和NLRP3/caspase-1信号通路而发挥抗炎作用。本研究结果为预防和控制副猪嗜血杆菌的感染炎症提供一种新的策略。

关键词：黄芩苷副猪嗜血杆菌猪血管内皮细胞 NF-κB NLRP3 caspase-1 乙酰半胱氨酸

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