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高等学校化学学报 2002年第2期23卷 195-198页

作者：裴仁军崔小强杨秀荣汪尔康中国科学院长春应用化学研究所电分析化学开放研究实验室长春13002

使用生物分子相互作用分析 ( Biomolecular interaction analysis,BIA)技术实时监测了在链霉亲和素表面层层组装亲和素 -生物素化抗体多层膜的过程 ,结果表明 ,通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用 ,能够在表面形成均一的多层膜 ,... 详细信息

使用生物分子相互作用分析 ( Biomolecular interaction analysis,BIA)技术实时监测了在链霉亲和素表面层层组装亲和素 -生物素化抗体多层膜的过程 ,结果表明 ,通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用 ,能够在表面形成均一的多层膜 ,并用实时 BIA技术求得了每层蛋白质的表面浓度 .对于生物素化抗体 ,单层吸附表面浓度为 1 .32 ng/mm2 ;对于链霉亲和素 ,单层吸附表面浓度为 2 .93ng/mm2 .

关键词：表面等离子体子共振层层组装链霉亲和素生物素化抗体生物分子相互作用分析技术亲和作用力

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生物分子相互作用分析

生物分子相互作用分析

引用

作者：杨帆中国科学院研究生院长春应用化学研究所

学位级别：博士

该论文通过基于表面等离子体共振原理的生物传感技术以及其它新的分析技术,对生物分子之间的相互作用进行了研究. 1.研究了肿瘤坏死因子与其单克隆抗体之间的相互作用的动力学性质,测定了该抗原-抗体复合物的结合和解离的动力学常数.2.... 详细信息

该论文通过基于表面等离子体共振原理的生物传感技术以及其它新的分析技术,对生物分子之间的相互作用进行了研究. 1.研究了肿瘤坏死因子与其单克隆抗体之间的相互作用的动力学性质,测定了该抗原-抗体复合物的结合和解离的动力学常数.2.采用最新发展的电化学表面等离子体共振联用技术研究模拟生物膜与壳聚糖的相互作用,探讨了壳聚糖对生物膜的作用机理.通过自组装技术,在传感片的金膜表面组装一层巯基丙酸,在其上利用静电作用构建双分子层的类脂膜,利用电化学循环伏安法和电化学阻抗以及表面等离子体共振技术对其进行了表征.当将低分子量的壳聚糖加到类脂膜上时,由于二者的相互作用,在脂双层膜上产生了物质传输的通道,使得探针离子到达电极表面.3.研究了肿瘤坏死因子与肿瘤坏死因子的两种可溶性受体之间的相互作用.4.利用BIA技术测定了致病菌沙门氏菌细胞壁脂多糖与几种生物分子之间的相互作用.5.利用BIA技术研究了聚乙烯亚胺、多聚赖氨酸和小分子量的壳聚糖与DNA相互作用的动力学性质.

关键词：生物分子相互作用表面等离子体共振生物分子相互作用分析技术

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中药天南星抗HIV-1有效成分的研究

中药天南星抗HIV-1有效成分的研究

引用

作者：王霞北京工业大学

学位级别：硕士

艾滋病又称获得性免疫缺陷综合症（Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS），是由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）感染人体淋巴细胞等所致。自1981年艾滋病首次在美国发现以来，全球大约已有2500万人死于... 详细信息

艾滋病又称获得性免疫缺陷综合症（Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS），是由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）感染人体淋巴细胞等所致。自1981年艾滋病首次在美国发现以来，全球大约已有2500万人死于艾滋病相关疾病，3340万人感染艾滋病病毒，其中包括1570万妇女及210万15岁以下儿童。理论上，病毒复制的每个步骤都可成为抗HIV药物的研究靶点，但实际上，目前抗HIV药物的研究重点仍然聚焦于逆转录酶、蛋白酶、整合酶及病毒吸附融合等几个靶点。自1987年第一个抗HIV药物核苷类逆转录酶抑制剂AZT上市以来，已有32种药物被FDA批准使用。目前常用于临床治疗AIDS的方法，高效抗逆转录病毒疗法-HAART（Highly Active AntiretroviralTherapy）也称为鸡尾酒疗法，此疗法虽能显著延长病人的寿命，但仍不能彻底清除病人体内的HIV，且毒副作用大、费用高，使病人承受着巨大的经济和生理负担。因此开发研究低毒、廉价、新型抗HIV药物非常必要。　　中药历史悠久，资源丰富，具有多功能、多成分和结构多样的特点，而且有些传统中药经过临床试用，显示了一定的抗HIV疗效，为开发新药和寻找新的抗HIV有效成分提供了宝贵的线索。天南星（Araceae）《中国药典》描述其为辛温，有毒，归胃、肝经，有祛风痰，定惊搐，解毒散结止痛之功效。民间广泛用于治疗癌症，尤以生食治疗喉癌为多。天南星药理作用广泛，但对其抗HIV活性除本实验室外没有报道，因此研究其抗HIV活性意义重大。　　本研究在体外药效学活性实验指导下，利用各种分离纯化手段，对天南星30％乙醇提取物进行分离，找出具有抗HIV活性的有效部位及有效化合物。前期实验结果显示，E2、E1-2和E1-2b都有很好的抑制HIV-1活性，在浓度为31.25、125、125μg/mL时病毒抑制率达到71.43％、78.57％和74.88％;本实验通过Biacore分子偶联技术进一步对有效部位抗HIV活性加以证实，更重要的是研究其作用靶点及作用成分。通过研究发现E1-2和E1-2b都与整合酶有较好的结合情况，其中E1-2在浓度为50、100、200、300μg/mL时，与IN的结合量为128.5、165.4、214.9、249.4RU，呈现剂量依赖性，E1-2b在浓度是200、300μg/mL时，结合量为151.0 RU和238.0 RU。进一步利用各种柱色谱、重结晶等手段，从E1-2b中分离到4个化合物，通过特征化学反应及光谱学方法，鉴定了其中2个化合物的结构，剩余2个化合物结构正在鉴定中。并且在E1-2甲醇溶解部分也分离到4个化合物，结构已经鉴定。　　综上所述本文从30％乙醇有效部位得到8个单体化合物，其中6个结构已经鉴定为氨基酸多肽类、有机酸等，另外2个HPLC显示为单体，结构正在鉴定中。在已鉴定结构的这6个化合物中，其中有3个时首次在本植物中发现。对这8个化合物利用Biacore分子偶联技术检测其作用靶点，发现化合物1在测试溶液PBS中溶解度不好的情况下，当浓度为200、400μg/mL时，与IN的结合量为124.2、145.4 RU。化合物2在浓度200μg/mL时，结合量为95.7RU。Biacore的实验结果显示IN可能是E1-2、E1-2b以及化合物1的作用靶点，本文为天南星抗HIV进一步研究提供了理论和实验依据。

关键词：抗免疫缺陷病毒天南星有效成分生物分子相互作用分析技术

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