检索结果-内蒙古大学图书馆

广西植物 2021年第8期41卷 1219-1225页

作者：武丽霞韩丽赵宜婷周璇杜云龙云南农业大学植物保护学院昆明650201 云南生物资源保护与利用国家重点实验室云南农业大学昆明650201 云南农业大学农业生物多样性与病害控制教育部重点实验室昆明650201

生长素输出载体在植物发育中起非常重要的作用。然而,生长素输出载体蛋白PIN1在农作物水稻、小麦、玉米和大豆的根和胚中的亚细胞定位尚不清楚。该研究首先分析了OsPIN1b和它的同源物的氨基酸序列特征,发现小麦(TaPIN1)、玉米(ZmPIN1b)... 详细信息

生长素输出载体在植物发育中起非常重要的作用。然而,生长素输出载体蛋白PIN1在农作物水稻、小麦、玉米和大豆的根和胚中的亚细胞定位尚不清楚。该研究首先分析了OsPIN1b和它的同源物的氨基酸序列特征,发现小麦(TaPIN1)、玉米(ZmPIN1b)和大豆(GmPIN1b)中的PIN1序列与水稻的OsPIN1b序列分别具有61.5%、62.5%、61.9%的相似性。然后根据水稻‘日本晴’(‘Nipponbare’)的OsPIN1b的氨基酸序列,人工合成OsPIN1b多肽并注射健康的新西兰白兔获得了抗兔的OsPIN1b多克隆抗体,在通过免疫印迹方法检测抗兔的OsPIN1b多克隆抗体的有效性后,发现可以利用该抗体有效检测到水稻叶片及根中OsPIN1b的表达。为检测OsPIN1及其同源物在不同作物胚根和胚中子叶细胞的定位,利用制备的抗兔的OsPIN1b多克隆抗体并通过免疫组化实验,发现水稻的OsPIN1b、小麦的TaPIN1和玉米的ZmPIN1b非极性定位在早期的胚根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上,大豆中的GmPIN1b非极性定位在胚根表皮细胞的质膜上,而在胚的子叶细胞中是胞质定位。为进一步检测水稻中OsPIN1b的亚细胞定位,对水稻根分生区表皮细胞用蛋白质转运抑制剂BFA(Brefeldin A)及抗兔的OsPIN1b多克隆抗体处理后,进行免疫组化实验,结果发现水稻中的OsPIN1b可以通过胞吞转运途径从水稻根表皮细胞膜进入细胞质中。该研究利用抗兔的OsPIN1b多克隆抗体有效检测了OsPIN1b及其同源物在水稻、小麦、玉米和大豆的胚根表皮细胞及胚中子叶表皮细胞的亚细胞定位,这将有助于进一步揭示生长素输出载体OsPIN1b及其同源物通过调控生长素极性运输而参与作物发育的作用机制。

关键词：生长素输出载体 PIN1 水稻小麦玉米大豆

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一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用

一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用

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作者：何文兴尹宁李佳林全晓艳单秋丽王文波王思齐师慧娟李洪梅 250000 山东省济南市市中区南辛庄西路336号

本发明具体涉及一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用，属于植物基因工程技术领域。本发明首次发现了赖草的生长素输出载体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的赖草生长素输出载体... 详细信息

标准号: CN115010796B

本发明具体涉及一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用，属于植物基因工程技术领域。本发明首次发现了赖草的生长素输出载体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的赖草生长素输出载体与拟南芥AtPIN1的功能相近，在赖草中是影响根茎生长素运输及根发育的关键转运子。赖草生长素输出载体编码基因的过表达促进了转基因拟南芥中生长素的极性运输和根的发育，并促进了生长素的积累，这些结果表明，赖草生长素输出载体对赖草根系发育和生长素运输具有重要影响，通过利用赖草生长素输出载体调控根系发育的功能，有助于实现调控赖草形态结构、根系发育并最终提高赖草品质的目标。

关键词：生长素输出载体编码基因根系发育生长素生长素运输植物基因工程技术转基因拟南芥发育氨基酸序列核苷酸序列极性运输形态结构重要影响根茎拟南芥转运子调控积累应用发现

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一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用

一种赖草生长素输出载体及其编码基因与应用

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作者：何文兴尹宁李佳林全晓艳单秋丽王文波王思齐师慧娟李洪梅 250000 山东省济南市市中区南辛庄西路336号

标准号: CN115010796A

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一种山核桃生长素输出载体蛋白CcPILS基因克隆及表达分析方法

一种山核桃生长素输出载体蛋白CcPILS基因克隆及表达分析方法

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作者：郑炳松高柳肖郭文彬闫道良袁虎威赵亮徐栋斌童亚菲 311300 浙江省杭州市临安市锦城镇环城北路88号

本发明公开了一种山核桃生长素输出载体蛋白CcPILS基因克隆及表达分析方法，包括以下步骤：准备材料、RNA提取与纯化、CcPILS基因RACE、生物信息学分析和时空表达分析。本发明利用RACE方法，克隆出山核桃PIL同源基因CcPILS，该基因全长... 详细信息

标准号: CN106591321A

本发明公开了一种山核桃生长素输出载体蛋白CcPILS基因克隆及表达分析方法，包括以下步骤：准备材料、RNA提取与纯化、CcPILS基因RACE、生物信息学分析和时空表达分析。本发明利用RACE方法，克隆出山核桃PIL同源基因CcPILS，该基因全长序列1541bp，其中开放阅读框序列1263bp，应用生物信息学软件分析，预测该序列编码420个氨基酸，CcPILS蛋白分子量约为46.22KD，PI为5.38，定位在内质网膜，N、C两端各有5个跨膜疏水结构域，被中间的亲水环所分隔，该基因与拟南芥AtPILS5、AtPILS7具有较高同源性，属于PILS基因家族中的Clade III亚族，荧光定量RT‑PCR分析表明，在山核桃嫁接前后，CcPILS在接穗中表达趋势和在砧木中的表达一致，对山核桃嫁接难、品种选育困难、品质难以提高等问题的解决提供了有利的促进作用。

关键词：山核桃嫁接开放阅读框序列生长素输出载体生物信息学分析应用生物信息学接穗砧木基因全长序列蛋白分子量表达分析促进作用基因家族基因克隆品种选育软件分析时空表达疏水结构同源基因序列编码荧光定量拟南芥同源性基因氨基酸分隔亲水网膜亚族核桃蛋白克隆预测分析

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狗蔷薇生长素输出载体蛋白基因PIN1和PIN2的分离与表达分析

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园艺学报 2014年第5期41卷 925-934页

作者：刘凤栾寇亚平陈晓丽高彬王玲赵梁军中国农业大学农学与生物技术学院北京100193 山东省林业科学研究院济南250014 深圳华大基因研究院广东深圳518083

植物体内生长素输出载体PIN蛋白基因的表达变化间接反映了生长素的运输与积累状态。为分析生长素在狗蔷薇(Rosa canina)类原球茎发生初期的作用,以狗蔷薇叶片愈伤形成的不定根为材料,分离了生长素输出载体蛋白基因PIN1和PIN2的cDNA,分... 详细信息

植物体内生长素输出载体PIN蛋白基因的表达变化间接反映了生长素的运输与积累状态。为分析生长素在狗蔷薇(Rosa canina)类原球茎发生初期的作用,以狗蔷薇叶片愈伤形成的不定根为材料,分离了生长素输出载体蛋白基因PIN1和PIN2的cDNA,分别命名为RcPIN1(GenBank登录号KF543362)和RcPIN2(GenBank登录号KF543363)。RcPIN1全长2 266 bp,编码621个氨基酸;RcPIN2全长2 248 bp,编码643个氨基酸,两者推导蛋白结构差异微小,在N端和C端均有5个跨膜区域,中间1个亲水区。Blast比对发现两个基因与多种植物PIN基因具有高度同源性(>70%)。半定量RT-PCR分析表明,RcPIN1在根、茎中表达量高于叶和花,RcPIN2在根中表达水平高于茎、叶和花;在狗蔷薇类原球茎发生初期,TDZ诱导培养下愈伤—不定根RcPIN1和RcPIN2表达上调,而TDZ+TIBA抑制培养下两基因表达不活跃,且类原球茎形成率降低。试验结果表明生长素的极性运输与积累参与了调控狗蔷薇类原球茎的初期形态建成。

关键词：狗蔷薇 PIN 生长素生长素输出载体类原球茎

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应用CRISPR/Cas9技术研究水稻OsPIN10a基因功能

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植物生理学报 2022年第9期58卷 1715-1723页

作者：张艳雯杨晓祎王慧慧侯典云张红晓张卓妍胥华伟河南科技大学农学院河南洛阳471000

生长素输出载体蛋白(PIN-FORMED,PIN)是控制生长素极性运输的关键蛋白。OsPIN10a是单子叶植物特异的生长素输出载体蛋白,但其生物学功能报道甚少。本研究在OsPIN10a基因的第1个外显子上设计编辑位点,构建了OsPIN10a的CRISPR/Cas9基因编... 详细信息

生长素输出载体蛋白(PIN-FORMED,PIN)是控制生长素极性运输的关键蛋白。OsPIN10a是单子叶植物特异的生长素输出载体蛋白,但其生物学功能报道甚少。本研究在OsPIN10a基因的第1个外显子上设计编辑位点,构建了OsPIN10a的CRISPR/Cas9基因编辑载体。通过遗传转化水稻粳稻品种‘日本晴’获得19株转基因植株。测序分析表明14个转基因株系中有7种不同的突变类型,总突变率为73.68%。进一步鉴定获得4种不同类型的纯合突变体。序列比对分析表明,这4种类型的突变均造成移码突变和蛋白翻译提前终止,其中2种突变蛋白的长度为7和9个氨基酸,将其命名为ospin10a-1和ospin10a-2;2种突变蛋白的长度为235和232个氨基酸,命名为ospin10a-3和ospin10a-4。跨膜螺旋结构域分析表明这四种突变体中OsPIN10a蛋白的跨膜结构全部消失。幼苗期表型分析表明,ospin10a-1和ospin10a-2突变体植株地上部的生长和不定根的发育都受到显著影响。ospin10a-1和ospin10a-2突变体根的向重性受到显著抑制,说明OsPIN10a参与调控水稻根的向重性。

关键词：生长素输出载体 OsPIN10a 水稻 CRISPR/Cas9 向重性反应

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菠萝生长素极性运输载体基因AcPINs和AcAUXs的分离与表达分析

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园艺学报 2016年第10期43卷 1916-1928页

作者：李运合孙光明张红娜刘胜辉吴青松中国热带农业科学院南亚热带作物研究所广东湛江524091 农业部热带果树生物学重点实验室广东湛江524091 海南省菠萝种质创新与利用工程技术研究中心广东湛江524091

乙烯已经被广泛应用于菠萝人工催花,但其分子机制不是很清楚。以菠萝(Ananas comosus L.‘Perola’)茎尖为材料,采用RT-PCR结合RACE方法得到3个生长素极性运输输出载体基因(AcPIN1、AcPIN2和AcPIN3)和2个生长素极性运输输入载体基因(AcA... 详细信息

乙烯已经被广泛应用于菠萝人工催花,但其分子机制不是很清楚。以菠萝(Ananas comosus L.‘Perola’)茎尖为材料,采用RT-PCR结合RACE方法得到3个生长素极性运输输出载体基因(AcPIN1、AcPIN2和AcPIN3)和2个生长素极性运输输入载体基因(AcAUX1和AcAUX2)的c DNA及基因组DNA全长。AcPIN1、AcPIN2、AcPIN3、AcAUX1和AcAUX2的cDNA全长分别为2 690、2 388、2 057、2 156和1 580 bp,其开放读码框长度分别为1 854、1 917、1 530、1 479和1 392 bp,分别编码617、638、509、492和463个氨基酸;其基因组DNA全长分别为3 602、3 208、4 204、5 457和2 436 bp,从起始密码子到终止密码子的长度分别为3 244、2 780、3 947、5 264和2 321 bp。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示AcPINs和AcAUXs分别属于植物PINs和AUX/LAXs家族。荧光定量PCR结果表明,菠萝茎尖经200和1 200 mg·L^(-1)乙烯利诱导处理后,AcPINs的表达上调较多,其中AcPIN2在处理后的早期(1~2 d)和后期(28~37 d)显著上调,另外两个PIN家族基因AcPIN1和AcPIN3在处理后的大部分时间都明显提高。AcAUX1的上调表达量相对较少,且相对表达量显著提高也主要集中在处理初期(1 d)和后期(28~37 d),而AcAUX2的上调表达则只在处理后的前期(1、2、9 d)。研究结果表明,乙烯利诱导菠萝成花过程中,存在着生长素极性运输,且生长素极性输出在此过程中的作用可能更重要。

关键词：菠萝开花生长素输出载体生长素输入载体生长素极性运输

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荷叶铁线蕨中PIN基因的克隆及序列分析

荷叶铁线蕨中PIN基因的克隆及序列分析

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2017年中国观赏园艺学术研讨会

作者：尚均忠李巧娟王月胡蝶张杰陈龙清华中农业大学园艺林学学院园艺植物生物学教育部重点实验室

以荷叶铁线蕨配子体为材料,根据转录组库信息,通过RT-PCR方法克隆得到两个生长素输出载体基因,分别命名为4rsPIN1和ArsPIN2。ArsPIN1的ORF长2052bp,编码683个氨基酸;ArsPIN2的ORF长1923bp,编码640个氨基酸。蛋白结构分析表明,ArsPIN1和A... 详细信息

以荷叶铁线蕨配子体为材料,根据转录组库信息,通过RT-PCR方法克隆得到两个生长素输出载体基因,分别命名为4rsPIN1和ArsPIN2。ArsPIN1的ORF长2052bp,编码683个氨基酸;ArsPIN2的ORF长1923bp,编码640个氨基酸。蛋白结构分析表明,ArsPIN1和ArsPIN2氨基酸序列两端都具有完整的膜蛋白结构功能域;亚细胞定位信号分析结果显示,ArsPIN1和ArsPIN2主要定位于细胞质膜和内质网上;进化分析结果表明ArsPIN1和ArsPlN2分别与掌叶铁线蕨(Adiantum aleuticum)和岩蕨(Woodsia scopulina)亲缘关系较近,并且ArsPIN1蛋白和ArsPIN2蛋白都具有典型的PIN蛋白功能结构域—C端、N端的跨膜环状疏水结构域和中间的亲水结构域。二级结构预测分析结果显示ArsPIN1含有63.8%的螺旋结构,59.7%的片状结构以及12.2%的转角结构;ArsPIN2含有56.6%的螺旋结构,58.6%的片状结构以及13.3%的转角结构。

关键词：荷叶铁线蕨生长素生长素输出载体基因克隆

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