检索结果-内蒙古大学图书馆

生殖医学杂志 2021年第6期30卷 767-771页

作者：李雯骆海燕淡清华郐艳荣高小博陆彩玲国家卫生健康委科学技术研究所遗传优生中心北京100081 北京协和医学院研究生院北京100730

目的探究五氯硝基苯(PCNB)亚急性暴露对SD大鼠卵巢甾体激素合成的影响。方法将30只3周龄雌性SD大鼠随机分为3组:给予50 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为低剂量组,给予100 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为高... 详细信息

目的探究五氯硝基苯(PCNB)亚急性暴露对SD大鼠卵巢甾体激素合成的影响。方法将30只3周龄雌性SD大鼠随机分为3组:给予50 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为低剂量组,给予100 mg·kg^(-1)·d^(-1)PCNB灌胃给药的为高剂量组,给与等体积玉米油灌胃给药的为对照组,每组10只,连续灌胃28 d。用电化学发光法检测各组大鼠血清孕酮和E2水平;用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠卵巢组织中3种甾体激素合成关键酶:类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)及芳香化酶(Aromatase)的表达情况。结果PCNB亚急性暴露期间,两实验组大鼠的体重变化、卵巢系数与对照组比较均无显著差异(P>0.05);两实验组大鼠血清孕酮水平均显著高于对照组,血清E2水平均显著低于对照组(P<0.05)。Western Blot结果显示,大鼠卵巢组织中StAR的表达量低剂量组>高剂量组>对照组,各组组间无统计学差异(P>0.05);大鼠卵巢组织中P450scc表达量高剂量组>对照组>低剂量组,各组组间无显著性差异(P>0.05);低、高剂量组大鼠卵巢组织中芳香化酶表达水平均显著低于对照组(P<0.05),并呈剂量依赖性下降。结论PCNB亚急性暴露可导致大鼠血清孕酮和E2水平发生改变,其机制可能与卵巢组织中甾体激素合成关键酶的表达量改变有关。

关键词：卵巢五氯硝基苯甾体激素合成

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溴氰菊酯对大鼠卵巢甾体激素合成的影响

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生殖医学杂志 2020年第4期29卷 522-527页

作者：刘晨晨骆海燕郐艳荣高小博陆彩玲国家卫生健康委科学技术研究所遗传优生中心北京100081 北京协和医学院研究生院北京100005

目的探讨溴氰菊酯(Deltamethrin,DLT)对大鼠卵巢甾体激素合成的影响及相关的分子机制。方法不同剂量DLT暴露处理大鼠和原代颗粒细胞;取DLT暴露后的大鼠血清和培养上清液,电化学发光法测定雌二醇和孕酮的水平;Western Blot法检测DLT暴露... 详细信息

目的探讨溴氰菊酯(Deltamethrin,DLT)对大鼠卵巢甾体激素合成的影响及相关的分子机制。方法不同剂量DLT暴露处理大鼠和原代颗粒细胞;取DLT暴露后的大鼠血清和培养上清液,电化学发光法测定雌二醇和孕酮的水平;Western Blot法检测DLT暴露后大鼠卵巢组织及原代培养颗粒细胞中甾体激素合成关键酶:甾体激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、芳香化酶的表达量,同时检测组蛋白去乙酰化酶Sirt1的蛋白表达。结果体、内外实验中,DLT各处理组大鼠血清、原代颗粒细胞培养上清液中雌二醇水平均显著升高(体内实验P<0.05,体外实验P<0.001);体内实验中DLT各处理组大鼠血清孕酮水平均显著降低(P<0.05),而体外实验中DLT各处理组原代颗粒细胞培养上清液孕酮水平无显著变化(P>0.05);体、内外实验中DLT各处理组大鼠卵巢组织、原代培养颗粒细胞中StAR、P450scc、芳香化酶以及Sirt1的表达量均显著升高(P<0.01)。结论 DLT能影响大鼠卵巢雌二醇和孕酮的合成,其机制可能与其关键酶表达的变化有关。

关键词：溴氰菊酯卵巢甾体激素合成颗粒细胞

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卵巢局部糖原合成酶激酶3β过表达对大鼠卵巢功能的影响及补肾化痰方干预机制

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中华中医药杂志 2020年第10期35卷 5256-5261页

作者：李威陈静樊锐锋匡洪影吴效科艾雯霞黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学哈尔滨150040

目的:探讨大鼠卵巢局部糖原合成酶激酶3β(GSK3β)基因过表达对卵巢功能的影响及补肾化痰方的干预作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组,模型组,补肾化痰方低、中、高剂量组。对照组大鼠给予卵巢包膜内10μL 0.9%氯化钠溶液注射,其余4组... 详细信息

目的:探讨大鼠卵巢局部糖原合成酶激酶3β(GSK3β)基因过表达对卵巢功能的影响及补肾化痰方的干预作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组,模型组,补肾化痰方低、中、高剂量组。对照组大鼠给予卵巢包膜内10μL 0.9%氯化钠溶液注射,其余4组动物均卵巢包膜内注射10μL Lenti-GSK3β病毒溶液。各组分别给予0.9%氯化钠溶液及相应剂量的补肾化痰方药物灌胃,治疗15d后,检测卵巢组织中细胞凋亡水平,凋亡相关因子、胰岛素信号通路因子、甾体激素合成关键酶及PPARγ-LXRα信号通路关键因子的表达水平以及血清睾酮(T)、孕酮(Prog)、雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)及促黄体生成素(LH)水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠卵巢组织TUNEL染色阳性细胞核密度增加,卵巢组织甾体激素合成酶HSD3β、CYP17a1 mRNA表达水平上升及血清T水平显著上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组对卵巢组织TUNEL染色后阳性细胞核密度及胰岛素信号通路关键因子的表达水平差异无统计学意义,但能以剂量依赖的方式激活PPARγ-LXRα信号通路,降低CYP17a1、HSD3βmRNA的表达水平(除补肾化痰方低剂量组CYP17a1)及血清T水平(除补肾化痰方低剂量组外)(P<0.05,P<0.01)。结论:卵巢GSK3β基因表达水平的上升可能是卵巢胰岛素信号通路异常所体现出的结果,而非造成PCOS患者卵巢病理变化的直接原因;补肾化痰方可能激活PPARγ-LXRα信号通路调节PCOS患者异常的生殖内分泌临床表型。

关键词：多囊卵巢综合征糖原合成酶激酶3β 胰岛素信号通路甾体激素合成补肾化痰方 PPARγ-LXRα信号通路卵巢功能机制

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肌细胞增强因子2A介导邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯影响睾丸间质细胞甾体激素mRNA表达水平

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湖北科技学院学报（医学版） 2019年第5期33卷 377-380页

作者：邹云飞王婉露笃梦雪刘露王舒仪江明菲吴欢皖南医学院公共卫生学院

目的探讨肌细胞增强因子2A(MEF2A)在邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)抑制睾丸间质细胞甾体激素合成的作用。方法体外培养细胞mLTC-1,取对数生长期的细胞用于实验。设DMSO溶媒对照组(0μmol/L)、MEHP处理组(200、400、800μmol/L),作用... 详细信息

目的探讨肌细胞增强因子2A(MEF2A)在邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)抑制睾丸间质细胞甾体激素合成的作用。方法体外培养细胞mLTC-1,取对数生长期的细胞用于实验。设DMSO溶媒对照组(0μmol/L)、MEHP处理组(200、400、800μmol/L),作用24h,加hCG0.1U/mL作用4h后收集细胞培养液用于检测孕酮;提取细胞总RNA用于检测类固醇激素合成关键酶(StAR/P450scc/3βHSD)及MEF2A的mRNA表达水平。结果MEHP作用24h后,细胞培养液中孕酮(PROG)随染毒剂量增高呈下降趋势,其中800μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。随着MEHP染毒剂量的增高,StAR mRNA逐渐降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。P450sccmRNA和3βHSD mRNA表达水平在400μmol/L和800μmol/L组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。不同实验组MEF2A mRNA均比对照组低(P均<0.01)。结论MEHP对雄性的生殖毒性机制可能通过抑制MEF2A mRNA的表达,干扰孕酮合成关键酶,从而影响睾酮活性。

关键词：肌细胞增强因子2A 邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯甾体激素合成

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溴氰菊酯对大鼠卵巢功能影响的初步研究

溴氰菊酯对大鼠卵巢功能影响的初步研究

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作者：刘晨晨北京协和医学院

学位级别：硕士

溴氰菊酯(DLT)是一种拟除虫菊酯类低毒性农药,遍及农业和家庭害虫防治领域。DLT有拟雌激素活性,是一种环境内分泌干扰物,长期低剂量暴露会产生生殖毒性。卵巢作为雌性哺乳动物主要的生殖和内分泌器官,其主要功能是分泌甾体激素和排卵,... 详细信息

溴氰菊酯(DLT)是一种拟除虫菊酯类低毒性农药,遍及农业和家庭害虫防治领域。DLT有拟雌激素活性,是一种环境内分泌干扰物,长期低剂量暴露会产生生殖毒性。卵巢作为雌性哺乳动物主要的生殖和内分泌器官,其主要功能是分泌甾体激素和排卵,这些过程受到卵泡发育的密切调控。研究报道DLT对昆虫卵巢有毒性作用,但还没有关于DLT影响哺乳动物卵巢功能的相关报道,因此本研究探讨了 DLT对大鼠卵巢内卵泡发育和甾体激素合成的影响。我们首先对青春前期的雌性SD大鼠进行为期7天的0、6.25和12.50mg/kg/d的DLT灌胃处理,收集卵巢后观测发现DLT处理引起卵巢质量显著下降,大小也明显减少。卵泡由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞构成,按照发育状况分为原始卵泡、初级卵泡、窦前卵泡和窦卵泡四个阶段。我们进行卵巢切片及HE染色发现,相较于对照组,DLT处理组原始卵泡、初级卵泡和总卵泡的数量没有发生显著性变化,而窦前卵泡数量增加的同时窦卵泡数量减少了,这提示DLT抑制了窦前卵泡向窦卵泡的发育。抗苗勒氏管激素(AMH)是一种能够抑制卵泡募集的旁分泌因子,有研究显示AMH可以抑制窦前卵泡向窦卵泡的发育,我们利用免疫组化染色法检测了卵巢组织中AMH的表达水平,发现相较于对照组,DLT处理组AMH的表达量剂量依赖性显著增加,提示DLT可能通过上调AMH的表达来抑制窦前卵泡向窦卵泡的发育。雌激素和孕激素是卵巢内主要的甾体激素,对于卵泡发育和雌性正常的生殖功能具有重要意义。雌二醇是女性生殖系统中活性最强的雌激素,孕酮是孕激素的主要活性形式。我们用电化学发光法检测了大鼠血清中雌二醇和孕酮的分泌量,发现DLT处理组的雌二醇水平显著升高,孕酮水平显著降低。随后Western印迹法检测发现卵巢组织中甾体激素合成三种关键酶,包括甾体激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)及芳香化酶的表达量均显著增加。为进一步探究DLT对颗粒细胞中甾体激素合成的影响,我们分离了青春前期雌性SD大鼠的原代颗粒细胞,用0、100、200和300μM的DLT处理48小时后,用CCK-8比色法检测了 DLT处理后的原代颗粒细胞活力,发现随着DLT处理浓度的升高,颗粒细胞的活力剂量依赖性显著升高。用电化学发光法检测细胞上清中雌二醇和孕酮的分泌量,发现DLT处理后雌二醇水平显著升高,孕酮水平没有显著性差异。随后用Western印迹法检测了颗粒细胞中StAR、P450scc及芳香化酶的表达情况,发现DLT处理均显著增加了 StAR、P450scc和芳香化酶的表达量。研究报道沉默信息调控子1(Sirt1)可以促进孕酮和雌二醇的合成及其关键酶StAR和芳香化酶的表达,抑制颗粒细胞的凋亡。我们用Western印迹法检测了 DLT暴露后卵巢组织和原代颗粒细胞中Sirtl的表达情况,发现Sirtl的表达量剂量依赖性显著增加。综上所述,利用青春前期大鼠和原代颗粒细胞模型,我们发现DLT急性暴露抑制窦前卵泡向窦卵泡的发育,改变甾体激素合成,其机制可能与上调AMH及甾体激素合成关键酶StAR、P450scc和芳香化酶的表达有关。

关键词：溴氰菊酯卵巢卵泡发育甾体激素合成

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PCOS卵巢局部胰岛素信号通路异常对卵巢细胞生殖内分泌功能的影响

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医学研究杂志 2020年第1期49卷 13-17页

作者：李威陈静匡洪影艾雯霞黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学哈尔滨150040

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性常见的生殖内分泌异常疾病。PCOS的临床表现除了胰岛素抵抗、糖脂代谢异常等代谢异常特征外,还表现出月经稀发、无排卵、高雄激素血症等生殖机能异常的特征。卵巢作为在女性体内合成雄激素的主要场所之... 详细信息

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性常见的生殖内分泌异常疾病。PCOS的临床表现除了胰岛素抵抗、糖脂代谢异常等代谢异常特征外,还表现出月经稀发、无排卵、高雄激素血症等生殖机能异常的特征。卵巢作为在女性体内合成雄激素的主要场所之一,卵巢细胞的胰岛素抵抗与PCOS高雄激素血症的发生有着密切的联系,但目前还没有找到卵巢胰岛素信号通路与甾体激素合成能力之间的直接联系。对高雄激素血症发生机制与卵巢组织中胰岛素信号通路关系的探讨对阐明PCOS发病机制、制定有针对性的治疗方案拓展临床PCOS的治疗思路有重要的临床指导意义。本文旨在探讨PCOS高雄激素血症病因的基础上,总结卵巢胰岛素抵抗对高雄激素影响的分子机制及胰岛素增敏剂调节PCOS患者雄激素水平的研究进展。

关键词： PCOS 胰岛素抵抗卵巢甾体激素合成

来源：评论

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miRNA-125b-5p通过靶向调节Pak3/ERK信号通路影响多囊卵巢综合征卵泡激素合成

miRNA-125b-5p通过靶向调节Pak3/ERK信号通路影响多囊卵巢综合征...

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作者：肖华南京医科大学

学位级别：硕士

背景:多囊卵巢综合征最主要的特征之一是雄激素、雌激素合成异常。微小RNA(miRNA)是内源性非编码RNA,在多种生物过程中发挥重要作用。前期研究提示PCOS患者外周血清中miR-125b-5p表达明显降低,但其调控卵泡激素生成的内在分子机制尚不... 详细信息

背景:多囊卵巢综合征最主要的特征之一是雄激素、雌激素合成异常。微小RNA(miRNA)是内源性非编码RNA,在多种生物过程中发挥重要作用。前期研究提示PCOS患者外周血清中miR-125b-5p表达明显降低,但其调控卵泡激素生成的内在分子机制尚不清楚。方法:检测PCOS患者及健康对照组人群血清中的miR-125b-5p表达水平的差异。体外分离培养小鼠窦前卵泡,对miR-125b-5p抑制或过表达后检测靶基因Pak3、ERK磷酸化水平、下游甾体激素合成酶以及睾酮、雌二醇的变化。通过荧光素酶报告基因实验,验证miR-125b-5p和Pak3间的直接靶向调节。联合应用miR-125b-5p抑制剂及Pak3抑制剂,开展挽救试验,同时检测POCS患者及对照组卵巢组织中Pak3的表达水平,再次验证miR-125b-5p调节雄激素生成的分子机制。结果:miR-125b-5p在高雄激素PCOS患者血清中的表达水平显著下降。在小鼠窦前卵泡中,抑制miR-125b-5p的表达,雄激素合成相关基因如CYP17A1、CYP11A1的表达上调从而促进雄激素的分泌,雌激素合成相关基因如CYP19A1、及雌激素的水平降低。相反,过表达miR-125b-5p,这些激素合成相关基因及激素的分泌结果随之相反。荧光素酶报告基因实验提示Pak3是miR-125b-5p的直接靶标。此外,在小鼠窦前卵泡中下调miR-125b-5p,可激活ERK1/2;而抑制Pak3能逆转这种激活效应。结论:多囊卵巢综合征患者卵巢中,miR-125b-5p表达降低促进Pak3表达,导致ERK信号通路激活,从而增加雄激素合成相关酶的表达最终促进睾酮的分泌。

关键词： miR-125b-5p 甾体激素合成 Pak3 多囊卵巢综合征

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比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响

比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响

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作者：王硕华中科技大学

学位级别：硕士

小鼠模型被广泛应用于卵巢始基卵泡激活（初始募集）基本规律及各种生长分化因子调控作用的研究中。离开体内的自然环境，卵巢必须适应环境的改变，比如二氧化碳浓度、营养供给、温度及酸碱度。更重要的是，离开体内调节系统卵泡的生长... 详细信息

小鼠模型被广泛应用于卵巢始基卵泡激活（初始募集）基本规律及各种生长分化因子调控作用的研究中。离开体内的自然环境，卵巢必须适应环境的改变，比如二氧化碳浓度、营养供给、温度及酸碱度。更重要的是，离开体内调节系统卵泡的生长会发生改变。近几年，卵巢的孵育方法主要包括体外培养和肾被膜下移植。但没有文献报道不同孵育体系对卵巢发育的影响，及孵育卵巢和在体卵巢间卵泡发育的区别。在本研究中，我们比较了体外培养卵巢、移植卵巢及体内生长卵巢中各级卵泡的数量。用免疫组化技术和半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测三个重要基因的表达及蛋白定位，包括透明体蛋白3（ZP3）、生长分化因子9（GDF-9）和抗苗勒氏管激素（AMH）。结果显示，体外培养加速卵泡激活、延缓发育卵泡的生长，影响ZP3、GDF-9和AMH蛋白的表达模式。尽管移植造成少量始基卵泡的丢失，但移植卵巢的特征与体内生长卵巢非常相似，这一结果提示移植可以提供最佳的卵泡孵育环境。在体外培养体系中，alpha-Modifie Eagle Medium （α-MEM）是较好的基础培养基。本实验系统研究了孵育卵巢与体内生长卵巢间的相同及不同，证明了移植可以最好的模拟体内卵巢生长环境。【目的】探讨microRNA-145（miR-145）对小鼠颗粒细胞增殖、分化和甾体激素合成的调节作用及机制。【方法】选择3周龄未性成熟小鼠卵巢，用原位杂交技术检测miR-145的表达。应用机械法获取3周龄小鼠卵巢窦状卵泡中的颗粒细胞进行体外培养。用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测颗粒细胞中miR-145、分化相关基因及激素合成酶mRNA的表达。胸腺嘧啶核苷类似物（EdU）方法检测颗粒细胞增殖。用免疫组织化学法检测颗粒细胞分化关键基因蛋白的表达。【结果】miR-145在小鼠卵巢窦状卵泡的颗粒细胞中高表达，始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡及卵巢间质中未见明显表达。在体外培养颗粒细胞中，miR-145的表达受卵泡刺激素（FSH）的调节。下调miR-145可显著抑制颗粒细胞的增殖、分化，并且通过降低孕激素合成相关酶表达而抑制孕激素的合成分泌，而对雌激素合成没有影响。【结论】miR-145参与调节颗粒细胞增殖、分化及甾体激素合成，但其具体机制仍有待进一步研究。

关键词：培养体系移植卵巢卵泡发育自发激活 miR-145 颗粒细胞甾体激素合成原位杂交 RT-PCR

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多囊卵巢综合征卵泡膜细胞功能的研究

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生殖与避孕 2008年第7期28卷 444-447页

作者：胡敏王勇侯丽辉吴效科黑龙江中医药大学附属第一医院妇产科哈尔滨150040 南京大学医学院组织与胚胎学教研室南京210009

多囊卵巢综合征(PCOS)是女性最常见的内分泌疾病之一,影响了6%-10%的育龄期妇女。PCOS卵巢的特性是卵泡内膜过度增生。而卵泡膜细胞是PCOS患者雄激素合成过多的原始来源之一。PCOS的卵泡膜细胞中CYP11A1、CYP17、StAR、3β-HSD表达增加... 详细信息

多囊卵巢综合征(PCOS)是女性最常见的内分泌疾病之一,影响了6%-10%的育龄期妇女。PCOS卵巢的特性是卵泡内膜过度增生。而卵泡膜细胞是PCOS患者雄激素合成过多的原始来源之一。PCOS的卵泡膜细胞中CYP11A1、CYP17、StAR、3β-HSD表达增加。PCOS卵巢雄激素过多的发病机制中存在MAPK信号通路的改变,胰岛素能调控PCOS卵泡膜细胞甾体激素的合成。因此,对于PCOS卵泡膜细胞功能的研究将有助于此疾病的病因学和治疗学的发展。

关键词：多囊卵巢综合征(PCOS) 卵泡膜细胞甾体激素合成

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外源物致宫内发育迟缓的胎肾上腺内分泌功能干预机制

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毒理学杂志 2007年第4期21卷 318-319页

作者：汪晖武汉大学基础医学院药理学系湖北武汉430071

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