检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 1997年第3期13卷 229-234页

作者：刘淑红陈启民耿运琪 C Wood 南开大学生命科学学院美国Nebraska Lincoln大学生命科学学院

通过合胞体分析和反转录酶活力测定，首次证明牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）能激活牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）的复制与表达，并进一步通过转染实验和凝胶电泳漂移分析证明，当ＢＩＶＬＴＲ的ＮＦ－κＢ区缺失时，ＢＶＤＶ则不能实现其激... 详细信息

通过合胞体分析和反转录酶活力测定，首次证明牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）能激活牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）的复制与表达，并进一步通过转染实验和凝胶电泳漂移分析证明，当ＢＩＶＬＴＲ的ＮＦ－κＢ区缺失时，ＢＶＤＶ则不能实现其激活作用，ＢＶＤＶ直接或间接诱导牛ＮＦ－κＢ因子作用于ＢＩＶＬＴＲ的ＮＦ－κＢ区实现其激活作用。

关键词：牛病病毒性腹泻病毒牛免疫缺陷病毒

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牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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中国兽医科技 2005年第5期35卷 349-352页

作者：张光辉刘占通李祥瑞南京农业大学动物医学院江苏南京210095 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

在MDBK细胞上增殖牛病毒性腹泻病毒(BVDV)HN 1 株,用蔗糖密度梯度离心法纯化后免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞并与NS0 骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到4株能稳定分泌抗BVDV单克隆抗体(McAb)的... 详细信息

在MDBK细胞上增殖牛病毒性腹泻病毒(BVDV)HN 1 株,用蔗糖密度梯度离心法纯化后免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞并与NS0 骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到4株能稳定分泌抗BVDV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株:3A8、3C7、3C11和3E9。经鉴定,3A8、3C7、3E9株为IgG1亚类,3C11株为IgG2a亚类;杂交瘤细胞的平均染色体数目为99 条。3A8、3C7、3E9、3C11 与BCV、BRV均无交叉反应,但3A8、3C7、3E9与HCV、BDV存在交叉反应,而3C11与HCV、BDV无交叉反应,3C11显示出较好的特异性;杂交瘤细胞培养上清液及小鼠腹水McAb的ELISA效价分别为1∶1 000 和1∶200 000,该杂交瘤细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体。这些McAb的获得为BVDV的研究及快速诊断方法的建立奠定了基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株快速诊断

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牛病毒性腹泻病毒长春分离株P125基因的克隆与序列测定

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中国兽医科技 2001年第2期31卷 3-6页

作者：骆延波张绍学王新平宣华牛钟相柴家前王承宇山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 解放军军需大学动物医学系吉林长春130062

以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)NCD毒株 ,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,并根据BVDVNADL参考株序列设计合成的 1对引物 (W 1与W 2 ) ,进行反转录PCR (RT PCR) ,扩增出P12 5基因区约40 0bp的片段。经 pGEM T载体... 详细信息

以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)NCD毒株 ,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,并根据BVDVNADL参考株序列设计合成的 1对引物 (W 1与W 2 ) ,进行反转录PCR (RT PCR) ,扩增出P12 5基因区约40 0bp的片段。经 pGEM T载体连接后克隆、测序 ,并与已发表的NADL、Osloss、SD 1、184、D、H、Yak等BVDV毒株序列进行比较。结果表明 :NCD株P12 5基因区无插入或缺失变异 ,但存在着核苷酸的替换 ;经聚类分析初步认为NCD株属于Ⅰa型。NCD株与长春 184、H株核苷酸序列差异较大 ,而亲缘关系较近。

关键词：牛病毒性腹泻病毒基因克隆序列测定致细胞病变型非致细胞病变型 R25基因

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牛病毒性腹泻病毒侵染宿主细胞的电镜观察

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畜牧兽医学报 2002年第5期33卷 501-503页

作者：王新华刘守仁张荣兴葛锡锐新疆农垦科学院石河子832000 中国科学院上海细胞生物研究所上海200031

用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒OregonC2 4 株在侵染新生犊牛睾丸细胞中的形态发生。成熟的病毒颗粒呈直径约为 5 0nm的球形颗粒 ,内含直径约为 30nm的核芯。病毒侵染宿主细胞后 ,在胞质内复制 ,通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可通过侵... 详细信息

用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒OregonC2 4 株在侵染新生犊牛睾丸细胞中的形态发生。成熟的病毒颗粒呈直径约为 5 0nm的球形颗粒 ,内含直径约为 30nm的核芯。病毒侵染宿主细胞后 ,在胞质内复制 ,通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可通过侵染细胞外排或在细胞死亡后含有病毒颗粒的空泡破溃而释放到胞外。

关键词：牛病毒性腹泻病毒宿主细胞电镜观察出芽过程

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牛病毒性腹泻病毒的分子生物学研究进展

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中国病毒学 1997年第2期12卷 112-118页

作者：王镇丁明孝北京大学生命科学学院北京100871

介绍了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的研究概况,概述了BVDV的基因组结构及其表达以及ncp型BVDV向cp型转化的研究进展。

关键词：牛病病毒性腹泻病毒分子生物学

来源：评论

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牛乳铁蛋白抑制伪狂犬病毒与牛病毒性腹泻病毒感染研究

牛乳铁蛋白抑制伪狂犬病毒与牛病毒性腹泻病毒感染研究

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作者：颜甄妮安徽农业大学

学位级别：硕士

乳铁蛋白（Lactoferrion，LF）是非特异性免疫分子，具有抗病毒活性。其抗病毒机制主要通过两种途径，一是LF直接与病毒粒子结合，在病毒侵入或复制阶段起到抗病毒作用;二是直接或间接竞争性结合细胞膜表面的受体，从而使病毒无法吸附... 详细信息

乳铁蛋白（Lactoferrion，LF）是非特异性免疫分子，具有抗病毒活性。其抗病毒机制主要通过两种途径，一是LF直接与病毒粒子结合，在病毒侵入或复制阶段起到抗病毒作用;二是直接或间接竞争性结合细胞膜表面的受体，从而使病毒无法吸附宿主细胞，降低感染细胞。伪狂犬病（Pseudo Rabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的高度传染性疾病;牛病毒性腹泻病（Bovine viral diarrhoea/Mucosal disease，BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhea Virus，BVDV）引起的一种高接触性传染病。针对PRV与BVDV的防控多以疫苗为主，但由于病毒变异导致毒力增强，动物个体免疫力低下等原因造成接种失败，因此寻找更加有效且稳定的治疗药物是当下畜牧养殖业最迫切的需求。本研究的目的是探究牛乳铁蛋白（Bovine Lactoferrin，BLF）是否可以有效抑制PRV与BVDV感染。　　试验主要分为体外验证和体内验证。首先利用CCK-8检测BLF和利巴韦林对Vero细胞与MDBK细胞的细胞毒性，选择安全给药浓度进行后续实验。利用PRV与BVDV病毒分别感染对应的细胞模型，通过细胞病变（CPE）计算病毒滴度，设置不同浓度BLF，采用不同的给药方式（药毒混合、先给药后接毒、先接毒后给药、先给药同药毒混合）作用于细胞24h。作用结束后提取胞内RNA通过实时荧光定量PCR检测病毒载量，采用同样方式处理细胞后提取蛋白通过Western Blotting检测病毒蛋白表达量。根据体外细胞实验结果选择抑制效果最佳的PRV进行进一步的体内验证。将60只小鼠随机分为4组每组15只：空白对照组、PRV攻毒组、BLF给药组、利巴韦林阳性对照组。给药组灌胃一周后进行腹腔注射接毒，空白对照组与PRV攻毒组灌胃同等体积生理盐水。每日观察小鼠精神状况、发病症状，记录死亡率。攻毒后第5d每组随机选取3只小鼠进行剖检，取脑组织、肝脏、脾脏、肾脏和肺脏进行病理组织观察。　　结果显示：　　A）：BLF对Vero细胞与MDBK细胞无细胞毒性，利巴韦林的安全给药浓度为0.003mg/mL。通过qRT-PCR检测BLF在细胞孵育阶段、病毒吸附阶段及病毒吸附前吸附后阶段均对PRV的mRNA转录水平均有抑制作用，呈剂量依赖性，在0.5mg/mL时，较阳性对照药物组相比抑制效果更为显著;BLF在细胞孵育阶段和病毒吸附前后全部阶段可抑制BVDV的复制，抑制效果呈剂量依赖性，在10mg/mL时效果优于阳性药物对照组。　　B）：利用Western Blotting检测验证BLF降低了PRV中gc蛋白和BVDV中E0蛋白的表达量，其结果与qRT-PCR结果相符合。　　C）：通过体内试验进一步验证BLF具有抑制PRV感染的活性，试验结果显示BLF可有效降低小鼠死亡率延缓小鼠死亡时间以及增加对病毒的抵抗力，病理组织观察结果显示BLF可有效降低PRV对组织脏器的损伤，并且BLF比利巴韦林表现出更好的抑制效果。　　这些发现深入揭示了BLF抑制病毒感染的活性，为抗病毒药物的筛选提供了新的方向，为提高动物机体免疫力和生产性能提供新的解决方案，更有望进一步开发成新型抗病毒药物。

关键词：动物医学乳铁蛋白伪狂犬病毒病毒性腹泻病毒抗病毒活性

来源：评论

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牛病毒性腹泻病毒野毒株的分离鉴定

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中国预防兽医学报 2000年第6期22卷 463-464页

作者：钟发刚王新华沈敏温建新张银国新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000

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牛病毒性腹泻病毒RT-RAA检测体系及侧流层析检测方法

牛病毒性腹泻病毒RT-RAA检测体系及侧流层析检测方法

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作者：陈楠楠李阳金鑫朱战波刘宇尹革芬 163000 黑龙江省大庆市高新区新风路5号

本发明涉及一种牛病毒性腹泻病毒RT‑RAA检测体系，包括BVDV RNA模板5μL，上游引物2μL，下游引物2μL，探针2μL，A buffer 25μL，反应干粉一管，ddH2O13.5μL，B buffer 2.5μL。本发明还涉及了牛病毒性腹泻病毒RT‑RAA检测体系的侧... 详细信息

标准号: CN116024383A

本发明涉及一种牛病毒性腹泻病毒RT‑RAA检测体系，包括BVDV RNA模板5μL，上游引物2μL，下游引物2μL，探针2μL，A buffer 25μL，反应干粉一管，ddH₂O13.5μL，B buffer 2.5μL。本发明还涉及了牛病毒性腹泻病毒RT‑RAA检测体系的侧流层析检测方法。本发明成功建立了BVDV‑1和BVDV‑2的RT‑RAA‑LFD快速检测方法，可以在30min检测出BVDV RNA，且特异性、敏感性、重复性良好，其中，BVDV1型的检测结果与国标RT‑qPCR方法的符合率高达99％，适用于BVDV1型和2型的临床快速、可视化检测。

关键词：检测牛病毒性腹泻病毒病毒性腹泻病毒可视化检测层析检测检测结果快速检测上游引物下游引物干粉侧流探针成功

来源：评论

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一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用

一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用

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作者：郑海学茹毅李亚军郝荣增杨洋卢炳州秦晓东刘华南张贵财李丹张越陈娇吴秀萍赵东梅任蕊芳 730046 甘肃省兰州市城关区徐家坪1号

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.35mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用于牛病毒性腹... 详细信息

标准号: CN114773438B

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.35mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备；在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG，能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30％以上，且不影响其免疫原性。

关键词：截短蛋白病毒性腹泻病毒免疫原性制备蛋白牛病毒性腹泻病毒牛病毒性腹泻生物技术领域亚单位疫苗表达量氨基酸可用应用发现

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一种检测气溶胶中牛病毒性腹泻病毒的方法

一种检测气溶胶中牛病毒性腹泻病毒的方法

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作者：何洪彬侯佩莉 250100 山东省济南市历城区工业北路159-1号

本发明公开了一种检测气溶胶中牛病毒性腹泻病毒的方法：(1)采集气溶胶样本；(2)提取气溶胶样本中病毒的RNA和cDNA；(3)检测：进行PCR扩增；(4)建立标准曲线和溶解曲线：建立阳性标准质粒的标准曲线，以及扩增体系的溶解曲线；(5)判断... 详细信息

标准号: CN103981285A

本发明公开了一种检测气溶胶中牛病毒性腹泻病毒的方法：(1)采集气溶胶样本；(2)提取气溶胶样本中病毒的RNA和cDNA；(3)检测：进行PCR扩增；(4)建立标准曲线和溶解曲线：建立阳性标准质粒的标准曲线，以及扩增体系的溶解曲线；(5)判断气溶胶样本中是否含有牛病毒性腹泻病毒。本发明还公开了特异性引物(如SEQIDNO.3～8所示)以及试剂盒(由特异性引物、牛病毒性腹泻病毒阳性质粒pEASY-T3-B1、SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR试剂和ddH₂O组成)。本发明的方法，既可用于牛病毒性腹泻病毒气溶胶样本的分型检测，也可用于临床血液、奶样、组织等样本的检测，具有广泛的应用前景。

关键词：气溶胶病毒性腹泻病毒样本特异性引物标准曲线溶解曲线检测实时荧光定量PCR 分型检测临床血液阳性标准阳性质粒试剂盒扩增质粒病毒采集

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