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痴呆模型小鼠脑组织铁及铁蛋白分布、海马CA1区神经元形态学改变的实验研究

中国老年学杂志 2005年第9期25卷 1092-1094页

作者：孙强三王晓红徐青山东大学第二医院山东济南250033

目的观察痴呆小鼠部分脑区中的铁及铁蛋白的分布变化,探讨铁及铁蛋白对老年性痴呆的影响及作用。方法应用组化及免疫组织化学法,对三氯化铝胃饲造成痴呆的小鼠部分脑区中的铁及铁蛋白的分布变化进行观察;应用光镜和电镜对神经元形状特... 详细信息

目的观察痴呆小鼠部分脑区中的铁及铁蛋白的分布变化,探讨铁及铁蛋白对老年性痴呆的影响及作用。方法应用组化及免疫组织化学法,对三氯化铝胃饲造成痴呆的小鼠部分脑区中的铁及铁蛋白的分布变化进行观察;应用光镜和电镜对神经元形状特征参数进行体视学定量统计分析。结果痴呆模型组铁蛋白阳性细胞在脑区中密度和着色程度都有明显的下降。模型小鼠脑海马CA1区神经元形状特征参数下降。结论痴呆小鼠脑海马CA1区胞核数量未减少,胞核萎缩、形状不规则,铁在脑组织中异常堆积是造成痴呆的一个重要因素。

关键词：痴呆模型铁铁蛋白脑海马CA1 神经元形状特征参数

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调心方对Aβ大鼠痴呆模型脑组织IL-1β、IL-6及APPmRNA表达的影响

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中国中西医结合杂志 2004年第6期24卷 529-533页

作者：周晖赵伟康金国琴上海中医药大学老年医学研究所上海200032 上海中医药大学基础医学院生化教研室

目的探讨中药治疗Alzheimer型痴呆 (AD)的有效方剂调心方的神经免疫调节作用机制。方法采用免疫组化、RT PCR方法分别研究了侧脑室注射 β 淀粉样蛋白 (Aβ1- 40 )诱导的AD大鼠模型神经免疫学病理变化。主要包括脑组织中胶质细胞原纤维... 详细信息

目的探讨中药治疗Alzheimer型痴呆 (AD)的有效方剂调心方的神经免疫调节作用机制。方法采用免疫组化、RT PCR方法分别研究了侧脑室注射 β 淀粉样蛋白 (Aβ1- 40 )诱导的AD大鼠模型神经免疫学病理变化。主要包括脑组织中胶质细胞原纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达及炎性细胞因子白细胞介素 1β(IL 1β)、白细胞介素 6 (IL 6 )mRNA和Aβ前体 βAPPmRNA基因表达水平 ,并观察调心方的作用。结果Aβ在脑组织的沉积能诱导星形胶质细胞的激活以及炎性细胞因子IL 1β、IL 6mRNA水平异常增高 ,APPmRNA水平也明显提高 ;而调心方能有效控制以上病理变化。结论调心方能有效地控制Aβ启动的炎症和免疫级联反应 ,提示有效控制AD患者脑内Aβ免疫级联反应是调心方的重要作用机制之一。

关键词：调心方 Aβ 大鼠痴呆模型脑组织 IL-1β IL-6 APPmRNA表达 AD 神经免疫学

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三七有效成分对SD大鼠拟痴呆模型的影响

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中国临床康复 2004年第28期8卷 6152-6154页

作者：孙启祥陆阳胡雅儿姚凤秀张乃钲林琦夏宗勤上海第二医科大学细胞调控研究室上海市200025 上海第二医科大学化学教研室上海市200025

目的:中药三七活性成分(panaxnotoginsengfractionB,PNF)对神经损伤具有一定保护作用,探讨PNF是否能改善实验动物的记忆障碍,起到抗老年痴呆的作用。方法:SD大鼠脑右侧基底核部注入淀粉样β蛋白(Aβ)和鹅膏氨酸。艹覃混合物以造成拟似... 详细信息

目的:中药三七活性成分(panaxnotoginsengfractionB,PNF)对神经损伤具有一定保护作用,探讨PNF是否能改善实验动物的记忆障碍,起到抗老年痴呆的作用。方法:SD大鼠脑右侧基底核部注入淀粉样β蛋白(Aβ)和鹅膏氨酸。艹覃混合物以造成拟似痴呆模型。手术后模型动物随机分为4组,每组10只,包括为模型组、ZMS(知母活性成分,作为阳性对照)组、PNF组及PNF+ZMS组,进行实验治疗观察,另设假手术组10只,右脑基底核注射生理盐水,作为正常对照。各组胃饲相应药物90d后以Y电迷路试验评价动物学习记忆能力,3H-QNB单点结合法测定脑组织M受体密度,用Westernblot法检测PNF对HEK293sw细胞生成Aβ的影响。结果:模型大鼠学习、记忆功能明显下降,学习指数由正常的7.48±2.17,下降为4.56±1.59,差异有显著性意义(P<0.05;)记忆指数由正常的7.65±2.73,下降为4.88±1.20,差异有显著性意义(P<0.05);脑M受体密度显著降低,由正常的(1145±171)pmol/g下降为(992±234)pmol/g,差异有显著性意义(P<0.05)。胃饲PNF后,动物的记忆功能及脑M受体密度均有明显提高,学习、记忆指数分别提高到6.25±2.07和6.51±2.13;脑M受体密度上调至(1265±165)pmol/g。进一步纯化的有效成分PNF-G可减少HEK293sw细胞生成Aβ。结论:PNF具有上调脑M受体密度、抑?

关键词： PNF M受体正常痴呆模型 SD大鼠细胞生成 Aβ 学习显著性结论

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养心健脑方对大鼠双侧电解损毁痴呆模型的实验研究

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山东中医杂志 2002年第1期21卷 41-43页

作者：顾耘林水淼方军上海中医药大学附属龙华医院上海200032 上海中医药大学上海200032

目的 :观察不同剂量养心健脑方对大鼠双侧电解损毁痴呆模型神经生化指标的改善作用 ,从而确立其量效关系 ,并进行有关机制探讨。方法 :分别以相当成人日服剂量的 5倍、2 5倍、5 0倍的养心健脑方对 SD大鼠双侧电解损毁痴呆模型进行行为... 详细信息

目的 :观察不同剂量养心健脑方对大鼠双侧电解损毁痴呆模型神经生化指标的改善作用 ,从而确立其量效关系 ,并进行有关机制探讨。方法 :分别以相当成人日服剂量的 5倍、2 5倍、5 0倍的养心健脑方对 SD大鼠双侧电解损毁痴呆模型进行行为、胆碱乙酰转移酶 (CHAT)、毒蕈碱型乙酰胆碱能受体 (M- R)、去甲肾上腺素 (NA)的研究 ,并设立正常、模型、尼莫地平组。结果 :养心健脑方能使双侧电解损毁痴呆模型的 SD大鼠 Y迷宫试验正确反射次数提高 ,并能不同程度地提高模型鼠大脑皮层、海马中下降的 CHAT、M- R、NA水平 ,且随剂量的增大 ,上述作用更为显著。结论 :养心健脑方能提高大鼠双侧电解损毁痴呆模型的胆碱能传递 ,加强去甲肾上腺素系统的传递 ,从而改善大鼠记忆行为 ,并且此作用随剂量增加而增强。

关键词：养心健脑方痴呆模型实验研究中医药疗法

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淫羊藿总黄酮对痴呆模型大鼠学习记忆功能及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

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中国现代医学杂志 2008年第23期18卷 3429-3432页

作者：蒋淑君杨丽娟许勇于腊梅滨州医学院生理学教研室山东滨州256603 滨州医学院药理学教研室山东滨州256603

目的探讨淫羊藿总黄酮对老年痴呆大鼠行为学及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法大鼠海马CAI区微量注射冈田酸,建立AD大鼠模型,淫羊藿总黄酮灌胃,采用Morris水迷宫实验检测行为学,免疫组织化学检测海马Bcl-2、Bax蛋白表达。结果AD模... 详细信息

目的探讨淫羊藿总黄酮对老年痴呆大鼠行为学及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法大鼠海马CAI区微量注射冈田酸,建立AD大鼠模型,淫羊藿总黄酮灌胃,采用Morris水迷宫实验检测行为学,免疫组织化学检测海马Bcl-2、Bax蛋白表达。结果AD模型组与对照组相比大鼠认知能力明显下降(P<0.01),Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P<0.01),淫羊藿总黄酮组与AD模型组相比大鼠认知能力改善(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.01),Bax蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮可以通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,改善AD大鼠模型的学习记忆能力。

关键词：淫羊藿总黄酮痴呆模型学习记忆 Bcl-2 Bax

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含二苯乙烯苷大鼠血清对NG108-15痴呆模型细胞的影响

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中国药房 2009年第25期20卷 1939-1941页

作者：黄忠仕谢海源张树球李韬农嵩李曙波右江民族医学院生化教研室百色市533000

目的:观察含二苯乙烯苷(TSG)血清对NG108-15痴呆模型细胞的影响。方法:分别用TSG(0.3g·kg-1)、阳性对照药石杉碱甲(0.02mg·kg-1)等灌胃大鼠10d后分离相应的含药血清,以β淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导NG108-15细胞成为痴呆细胞后... 详细信息

目的:观察含二苯乙烯苷(TSG)血清对NG108-15痴呆模型细胞的影响。方法:分别用TSG(0.3g·kg-1)、阳性对照药石杉碱甲(0.02mg·kg-1)等灌胃大鼠10d后分离相应的含药血清,以β淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导NG108-15细胞成为痴呆细胞后用相应的含药血清培养,观察NG108-15细胞的生长状态、存活率、突起率及突起平均长度,并与模型组比较。结果:无论在增殖相或分化相中,TSG组细胞生长状态均良好;在增殖相细胞中,TSG组、模型组存活率分别为89.1%、64.6%(P<0.01);在分化相细胞中,TSG组存活率为74.3%,细胞突起率为(50.83±6.66)%,突起平均长度为(21.52±5.19)μm,模型组分别为59.2%、(41.42±7.23)%、(15.59±4.54)μm(P<0.05或P<0.01),TSG组各指标与石杉碱甲组相近。结论:含TSG大鼠血清对Aβ25-35诱导的NG108-15痴呆模型细胞损伤具有保护作用。

关键词：二苯乙烯苷含药血清大鼠痴呆模型 β淀粉样蛋白25-35 NG108-15细胞

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Aβ代谢异常的小鼠痴呆模型研制以及RNAi降低Aβ生成的实验研究

Aβ代谢异常的小鼠痴呆模型研制以及RNAi降低Aβ生成的实验研究

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作者：潘岩南京大学

学位级别：硕士

为探讨干扰β淀粉样蛋白(Aβ)生成治疗阿尔茨海默病(Alzheimer\'s disease，AD)的方法，我们首先研制一种模拟Aβ代谢异常的Alzheimer\'s病小鼠模型。40只昆明小鼠被随机分为相等的两组，一组用90mg/kg·d的D—半乳糖和40mg... 详细信息

为探讨干扰β淀粉样蛋白(Aβ)生成治疗阿尔茨海默病(Alzheimer\'s disease，AD)的方法，我们首先研制一种模拟Aβ代谢异常的Alzheimer\'s病小鼠模型。40只昆明小鼠被随机分为相等的两组，一组用90mg/kg·d的D—半乳糖和40mg/kg·d的氯化铝颈背部皮下注射处理(简称Al＋D－gal组)，另一组用等量的生理盐水0．9％ NaCl处理(简称生理盐水组)，用药周期90d。\n 造模结束后，用五天的水迷宫实验在行为学上分析小鼠的记忆和学习能力；用Western杂交确定Aβ代谢相关分子淀粉样蛋白前体(Amyloid Precusor Protein，APP)、β分泌酶(Beta Amloid Cleaving Enzyme 1，BACE1)、β淀粉样蛋白(β amyloid，Aβ)、晚期糖基化末端终产物(the Receptor for Advanced Glycation End products，RAGE)的改变；免疫组织化学分析Aβ的变化及分布；RT—PCR来确定Aβ代谢相关分子低密度脂蛋白受体相关蛋白1(the Low—density lipoprotein Receptor—related Protein，LRP1)、胰岛素降解酶(Insulin Degrading Enzyme，IDE)、中性内肽酶(Neprilysin，NEP)的表达变化。\n 结果：\n 与生理盐水组相比，氯化铝和D—半乳糖制作的小鼠痴呆模型在水迷宫行为学测试中逃避潜伏期明显延长，而且其Aβ代谢相关分子变化与已报道的AD的分子病理变化一致。例如：BACE1表达增强；Aβ沉积增加；RAGE表达增强；LRP1表达下降等特征。\n 结论：\n 该模型较好的模拟了AD的分子病理变化，可作为一种AD药物筛选模型。\n β分泌酶是Alzheimer\'s病病理过程中Aβ产生的限速酶。我们构建并筛选出能够有效抑制β分泌酶的siRNA质粒，以BACE1基因的人、小鼠、大鼠的共有序列被选定为干扰的靶标，设计四对干扰片段连接至带有GFP和U6 RNA聚合酶启动子的PRNATU6.1载体，将构建好的质粒转染HEK293T细胞，通过RT—PCR和Western blot的方法分别在RNA和蛋白水平上来检测BACE1和Aβ，以鉴定其干扰效率，两者分别可以达到90％和80％，通过夹心ELISA的方法进一步在过表达蛋白APP和BACE1的HEK293T细胞体系中验证出干扰质粒可使Aβ1-42生成减少，为进一步治疗阿尔茨海默病的研究奠定基础。

关键词： Aβ代谢异常痴呆模型药物筛选

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文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ<,1-42>致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的改善作用

文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ<,1-42>致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的...

引用

作者：李伟沈阳药科大学

学位级别：硕士

β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein。Aβ)在细胞外沉积形成老年斑是Alzheimer's病(AD)的主要神经病理学特征之一。大量的证据显示Aβ纤维发挥了多种神经毒性作用，本论文以侧脑室注射Aβ1-42致痴呆小鼠为模型，考察了文冠果壳... 详细信息

β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein。Aβ)在细胞外沉积形成老年斑是Alzheimer's病(AD)的主要神经病理学特征之一。大量的证据显示Aβ纤维发挥了多种神经毒性作用，本论文以侧脑室注射Aβ1-42致痴呆小鼠为模型，考察了文冠果壳苷对痴呆模型小鼠学习记忆障碍的改善作用，并对其作用机理进行了初步探讨。主要采用小鼠Y迷宫、水迷宫、新物体辨别、跳台、避暗等行为学测试方法研究文冠果壳苷改善学习记忆障碍的作用，用生化学方法检测脑组织AchE、ChAT、CAT、T-AOC及ATP酶活性以及GSH、MDA含量，从改善中枢胆碱能神经系统功能及抗氧化损伤角度探讨文冠果壳苷对抗Aβ1-42致痴呆作用的机制。结果显示，文冠果壳苷(0.08～0.32mg/kg)显著提高Y迷宫实验中小鼠自发交替反应率；显著延长新物体辨别实验中新物体探索时间并提高优先指数；显著减少避暗及跳台实验中的错误次数，延长潜伏期，缩短总电击时间。生化检测结果表明，文冠果壳苷显著显著对抗模型小鼠大脑ChAT及AchE活性的降低，提高模型小鼠大脑CAT、T-AOC及．ATP酶活性，减少MDA含量、增加GSH含量并提高GSH/GSSG比值。综上所述，文冠果壳苷能显著改善侧脑室注射Aβ1-42致痴呆模型小鼠的学习记忆障碍，其作用机制可能与改善中枢胆碱能神经系统功能、对抗自由基损伤、抑制脂质过氧化反应、改善脑细胞能量代谢及调节钙离子稳态等有关。

关键词：文冠果壳苷 β-淀粉样蛋白痴呆模型学习记忆障碍药理实验侧脑室注射

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淫羊藿苷对铝盐诱导痴呆模型大鼠的保护作用及其机理的实验研究

淫羊藿苷对铝盐诱导痴呆模型大鼠的保护作用及其机理的实验研究

引用

作者：罗勇遵义医学院

学位级别：硕士

本文旨在观察淫羊藿苷(icariin，ICA)对铝盐诱导痴呆模型大鼠学习记忆的保护作用，并探讨其作用机制，结果表明，ICA对铝盐诱导的痴呆模型大鼠学习记忆有保护作用，其机制可能与以下因素有关，促进大鼠脑内胆碱能神经功能恢复；抑制铝... 详细信息

本文旨在观察淫羊藿苷(icariin，ICA)对铝盐诱导痴呆模型大鼠学习记忆的保护作用，并探讨其作用机制，结果表明，ICA对铝盐诱导的痴呆模型大鼠学习记忆有保护作用，其机制可能与以下因素有关，促进大鼠脑内胆碱能神经功能恢复；抑制铝负荷引起的氧化应激反应；增加大鼠脑内Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性，降低铝负荷导致的神经细胞毒性反应；降低大鼠脑内Aβ片段含量，减少Aβ的神经毒性。　　

关键词：淫羊藿苷铝盐痴呆模型学习记忆大鼠

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喹啉酸致小鼠痴呆模型的神经生化学研究

喹啉酸致小鼠痴呆模型的神经生化学研究

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作者：陆伟泉北京协和医学院(清华大学医学部)&中国医学科学院

学位级别：硕士

喹啉酸是体内色氨酸的代谢产物，在中枢神经系统能够激活谷氨酸能神经的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体而产生神经兴奋毒作用。本实验通过向小鼠脑室内注射不同剂量喹啉酸制造小鼠拟痴呆模型，从行为学、病理学、神经生化学等方面探讨... 详细信息

喹啉酸是体内色氨酸的代谢产物，在中枢神经系统能够激活谷氨酸能神经的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体而产生神经兴奋毒作用。本实验通过向小鼠脑室内注射不同剂量喹啉酸制造小鼠拟痴呆模型，从行为学、病理学、神经生化学等方面探讨喹啉酸致神经损伤的机制及其量效关系，以及胆碱能系统神经损伤与阿尔茨海默氏病之间的相关性，并在寻找相应于中枢神经系统病变的外周生物学指标方面作了初步尝试。小鼠脑室内注射不同剂量喹啉酸后，被动回避避暗法测试表明小鼠的学习记忆能力出现不同程度的损伤。以H（左上标3）-MK801结合实验测定NMDA受体的激活情况，皮层增加29．9-82．7％，海马增加36．6-96．2％；中枢胆碱能系统标志酶-胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性在皮层下降15．6-30．7％，海马下降15．9-40．3％；以H（左上标3）-QNB结合实验测定毒蕈碱受体(MR)，皮层降低44．1-81．9％，海马降低20．4-55．5％；以H（左上标3）-nicotine结合实验测定烟碱受体(NR)，皮层降低19．8-43．9％，海马降低26．8-44．7％。以上指标均表现出一定的剂量依赖性。外周脾淋巴细胞膜MR及NR结合量亦呈下降趋势，与中枢相应受体变化相似。病理形态学检查发现海马与皮层锥体细胞有较多退化和坏死，亦呈剂量依赖性，且海马的变化较皮层严重。

关键词：喹啉酸 NMDA受体痴呆模型学习记忆胆碱能系统损伤

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