检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2013年第41期17卷 7213-7220页

作者：徐彪李芳孙青许云云赵娟梁含思马树立陈永珍苏州大学江苏省苏州市215006 苏州市儿童医院江苏省苏州市215001

背景:由于人胎盘来源的间充质干细胞具有多方面的优点,近年来已成为干细胞研究的热点。目的:分析鉴定羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞的生物学特性,探讨其作为皮肤种子细胞在三维气液培养构建组织工程皮肤中的应用情况。方法:用胰酶胶... 详细信息

背景:由于人胎盘来源的间充质干细胞具有多方面的优点,近年来已成为干细胞研究的热点。目的:分析鉴定羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞的生物学特性,探讨其作为皮肤种子细胞在三维气液培养构建组织工程皮肤中的应用情况。方法:用胰酶胶原酶多步消化法获取羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞,通过流式细胞术、反转录-聚合酶链反应和免疫荧光染色技术,鉴定两种细胞的表面分子标记、干细胞特性、与皮肤角质形成细胞的相似性,并利用两种细胞为种子细胞以鼠Ⅰ型胶原为基质进行三维气液培养。结果与结论:①流式细胞术检测体外培养羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞均高表达CD90、CD73、CD105,不表达造血干细胞标志CD34以及MHC-Ⅱ类分子HLA-DR。②反转录-聚合酶链反应检测到羊膜间充质干细胞表达干细胞特性基因CMCY和NANOG,羊膜上皮细胞表达干细胞特性基因CMCY和KLF4,两种细胞均有干细胞特性。③反转录-聚合酶链反应检测羊膜间充质干细胞表达皮肤角质形成细胞特性基因K19、β1-integrin、K8,羊膜上皮细胞表达K19、β1-integrin、K5、K8,免疫荧光染色见羊膜上皮细胞表达与角质形成细胞增殖相关的的特性蛋白K14,说明羊膜上皮细胞与皮肤角质形成细胞更具相似性,在特定条件下更易于分化为皮肤角质形成细胞。④利用两种细胞成功构建组织工程皮肤,苏木精-伊红染色切片显示其具有一定的皮肤结构,且羊膜上皮细胞发生了初步分化。以上结果说明羊膜间充质干细胞与羊膜上皮细胞通过三维培养构建人皮肤组织是可行的。

关键词：组织构建皮肤组织构建皮肤黏膜组织构建羊膜间充质干细胞羊膜上皮细胞组织工程皮肤流式细胞术反转录聚合酶链式反应免疫荧光染色其他基金

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去炎松-A固体脂质纳米颗粒透皮吸收在瘢痕治疗中的效应

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第1期12卷 35-38页

作者：郭庆民薛晓东吴建蒋丽媛樊芙蓉甘肃省人民医院烧伤整形科兰州大学甘肃省兰州市730000 兰州大学

目的:为克服目前瘢痕非手术治疗中糖皮质激素治疗的副作用,尝试应用去炎松-A固体脂质纳米颗粒经透皮吸收技术治疗瘢痕,观察其效果。方法:实验于2007-04/08在解放军兰州军区总医院动物实验中心实验室进行。①造模:选用新西兰白兔16只,每... 详细信息

目的:为克服目前瘢痕非手术治疗中糖皮质激素治疗的副作用,尝试应用去炎松-A固体脂质纳米颗粒经透皮吸收技术治疗瘢痕,观察其效果。方法:实验于2007-04/08在解放军兰州军区总医院动物实验中心实验室进行。①造模:选用新西兰白兔16只,每个兔耳上将全层皮肤切除,形成1cm×1cm上、下两个创面,术后30d上皮化生逐渐形成病理性瘢痕。②分组干预:造模成功后随机分为对照组和实验组,每组8只。对照组不干预,实验组于术后30d起应用含有去炎松-A1mg/cm2的固体脂质纳米颗粒卡波姆凝胶覆于已形成的瘢痕上透皮吸收。③观察指标:分别于模型形成后第30,60,90和120天时依次取每只大白兔左耳上、下,右耳上、下的病理性瘢痕作为标本来源进行组织病理学观察,同时采用免疫组化检测组织中的ki-67表达和羟脯氨酸含量,并抽静脉血测血中皮质醇浓度。结果:16只白兔均进入结果分析。①实验组做模型后第30天时ki-67表达及羟脯氨酸含量与对照组比较无明显差异(P>0.05),但第60,90和120天实验组瘢痕组织中表达及羟脯氨酸含量较对照组明显减少(P<0.01)。②实验组及对照组各时段血中的皮质醇浓度比较无明显差异(P>0.05)。③实验组造模后120d病理性瘢痕中成纤维细胞的数量少于对照组。结论:含有去炎松-A1mg/cm2的固体脂质纳米颗粒卡波姆凝胶透皮吸收对瘢痕有治疗作用,且长期应用血液中的皮质醇浓度不升高,能预防糖皮质激素治疗瘢痕的副作用。

关键词：固体脂质纳米颗粒病理性瘢痕去炎松-A 透皮吸收技术卡波姆凝胶 ki-67 羟脯氨酸皮肤组织构建

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离体人皮肤成纤维细胞热损伤后转归的形态学观察

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第11期12卷 2056-2060页

作者：李德全黄晓元杨兴华中南大学湘雅医院烧伤整形科湖南省长沙市410008

目的:在以往创面愈合研究中,多注意周围正常组织或血液中成纤维细胞的迁入对伤口治愈作用。实验拟验证成纤维细胞热损伤后形态学的变化,为研究"深Ⅱ度烧伤创面自体薄皮覆盖变性真皮"新手术方式提供理论依据。方法:实验于2006-... 详细信息

目的:在以往创面愈合研究中,多注意周围正常组织或血液中成纤维细胞的迁入对伤口治愈作用。实验拟验证成纤维细胞热损伤后形态学的变化,为研究"深Ⅱ度烧伤创面自体薄皮覆盖变性真皮"新手术方式提供理论依据。方法:实验于2006-04/2007-04在解放军第三军医大学创伤,烧伤,复合伤国家重点实验室完成。取门诊手术后废弃的小儿包皮,利用体外细胞培养技术对人真皮成纤维细胞进行传代培养,实验分2组,正常组细胞置于37℃水浴30s,实验组细胞采用不同温度(50,51,52,53℃)及不同时间(30,60,90,180s)处理,采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞生存率;倒置显微镜及透射电镜下观察不同时间(3h,1,2,3,4,5,7d)成纤维细胞损伤后的形态;流式细胞仪技术对烫伤细胞周期进行检测。结果:不同温度以及同一温度不同时间条件下,各实验组成纤维细胞的生存率与正常组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。与正常组相比,52℃30s成纤维细胞的生存率50%,差异显著(P<0.05)。透射电镜观察热损伤后成纤维细胞变圆钝,体积增大,表面有较多突起,胞浆中有大量的异常疏松透亮区。热损伤后成纤维细胞的形态有明显改变,7d恢复正常。流式细胞仪检测显示成纤维细胞的S期是其热损伤的敏感期,与正常组比,实验组成纤维细胞S期凋亡明显增多(P<0.01)。结论:热损伤后变性的成纤维细胞活性明显降低,形态学及细胞周期发生显著改变,7d形态基本恢复正常。

关键词：成纤维细胞热损伤形态学变化皮肤组织构建

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原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞的生物学行为

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中国组织工程研究 2013年第7期17卷 1174-1179页

作者：杜启翠肖文林孙桂兰马秀兴姚如永青岛大学医学院山东省青岛市266000 青岛大学医学院附属医院口腔科山东省青岛市266000 青岛大学医学院附属医院中心实验室山东省青岛市266000

背景:增生性瘢痕组织的形成是创面愈合过程中不可避免的,但是增生性瘢痕组织的形成产生很多不良的影响。目的:建立可靠的人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养方法。方法:采用组织贴壁法和消化法分别进行人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞的原代... 详细信息

背景:增生性瘢痕组织的形成是创面愈合过程中不可避免的,但是增生性瘢痕组织的形成产生很多不良的影响。目的:建立可靠的人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养方法。方法:采用组织贴壁法和消化法分别进行人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养,使用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃,体积分数5%CO2,饱和湿度下培养,分别描述其生长曲线、形态及波形蛋白的表达。结果与结论:组织贴壁法人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞培养成功,20-40d可传第1代,以后每7-10d可传1代,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性;消化法培养人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞成功,15-20d细胞可融合成片,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性。进一步证实两种方法进行人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养均培养成功。

关键词：组织构建皮肤组织构建人增生性瘢痕成纤维细胞原代培养细胞培养贴壁法消化法波形蛋白生物学行为细胞分裂分裂指数组织构建图片文章

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胚胎不同发育阶段人类皮肤及附属器官汗腺的基因表达

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中国组织工程研究 2013年第24期17卷 4421-4428页

作者：陈力莹范锟铻王金水余旭明徐成深圳市第二人民医院烧伤整形科广东省深圳市518000 深圳市北大高科五洲医药有限公司广东省深圳市518000

背景:关于汗腺的发生与发育过程及汗腺损伤与再生之间的联系尚缺乏基因水平的证据,故各种原因所致的皮肤损伤都不能达到解剖结构与生理功能的完全修复。目的:观察胚胎不同发育阶段皮肤组织的形态结构及皮肤附属器汗腺的发生和发育规律,... 详细信息

背景:关于汗腺的发生与发育过程及汗腺损伤与再生之间的联系尚缺乏基因水平的证据,故各种原因所致的皮肤损伤都不能达到解剖结构与生理功能的完全修复。目的:观察胚胎不同发育阶段皮肤组织的形态结构及皮肤附属器汗腺的发生和发育规律,寻找在汗腺发育中起重要作用的相关基因。方法:13例胎龄为12-36周终止妊娠的胎儿,由深圳市第二人民医院妇产科严格遵循伦理原则、征得家属同意并签署合同书后提供。苏木精-伊红染色和ABC免疫组化法观察不同发育阶段人类胎儿皮肤组织及附属汗腺的结构和特征,采用RT-PCR方法分析生长发育过程中人类胎儿皮肤及汗腺附属器官相关基因的表达。结果与结论:①不同胎龄的人类胎儿皮肤组织结构呈现规律性的变化,可大致划分为3个发育阶段:其中汗腺形成初期(胚芽或原基期)(E12-15周)、汗腺形成中期(E16-24周),汗腺成熟期(E25+-36周)。②胎儿皮肤组织内的汗腺细胞中表达角蛋白7、角蛋白8、角蛋白18和癌胚抗原生物分子标记,而在真皮层和表皮层的其他细胞呈阴性反应,角蛋白19不是表皮干细胞的特异性标记物。③表皮生长因子及其受体积极地参与了皮肤及汗腺的形态发生过程,在皮肤及汗腺的功能维持中起着重要的作用。

关键词：组织构建皮肤组织构建胚胎胚胎发育阶段皮肤汗腺皮肤附属器官基因基因表达皮肤再生

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大豆异黄酮酊干预Ⅱ度烫伤模型小鼠创面的愈合

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中国组织工程研究 2013年第2期17卷 264-269页

作者：张丽陈娟苏卫升黄家君重庆医科大学药学院药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆市400016 重庆医科大学生物医学工程学院重庆市400016

背景:雌激素具有促进创面愈合的作用,大豆异黄酮能与雌激素受体结合,具有明显的雌激素样效应。目的:探索大豆异黄酮酊的制备、观察其对小鼠烫伤创面愈合的影响。方法:用冷浸渍法制备大豆异黄酮酊,筛选最佳有效浓度。用昆明小鼠造Ⅱ度烫... 详细信息

背景:雌激素具有促进创面愈合的作用,大豆异黄酮能与雌激素受体结合,具有明显的雌激素样效应。目的:探索大豆异黄酮酊的制备、观察其对小鼠烫伤创面愈合的影响。方法:用冷浸渍法制备大豆异黄酮酊,筛选最佳有效浓度。用昆明小鼠造Ⅱ度烫伤模型,随机分为6组。药物组分别应用0.100,0.361,1.000,3.610g/L的大豆异黄酮酊局部涂抹;溶剂对照组应用体积分数75%乙醇局部涂抹;空白对照组不作任何处理。从第3天起,隔天记录创面面积、计算未愈合创面占原始创面的百分比,于造模后第3,9,14天取创面组织做病理切片,观察形态学改变和创面愈合情况。结果与结论:大豆异黄酮酊的最佳效应浓度是3.61g/mL。在创伤后第5,7,9,11,13天,大豆异黄酮酊组的未愈合创面占原始创面的百分比明显小于溶剂对照组和空白组(P<0.05)。病理组织切片显示,第9天,大豆异黄酮酊组的成纤维细胞明显多于溶剂对照组和空白组,第14天,大豆异黄酮酊组的表皮生长情况比溶剂对照组和空白组好。表明以75%乙醇为溶剂制备大豆异黄酮酊是可行的;3.61g/L的大豆异黄酮酊对小鼠创面的愈合具有明显的促进用。

关键词：组织构建皮肤组织构建大豆异黄酮酊创伤愈合烫伤模型小鼠省级基金组织构建图片文章

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三七总甙对增生性瘢痕的作用

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中国组织工程研究 2013年第24期17卷 4436-4443页

作者：刘凯潘亮亮李婷刘树发佳木斯大学附属第二医院(口腔医院)颌面外科黑龙江省佳木斯市154007

背景:增生性瘢痕的传统治疗手段如手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等,均易复发或有严重的不良作用而限制了其临床应用。近年来应用活血化瘀类中药提取成分治疗增生性瘢痕取得了较为理想的进展,而且不良反应小。目... 详细信息

背景:增生性瘢痕的传统治疗手段如手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等,均易复发或有严重的不良作用而限制了其临床应用。近年来应用活血化瘀类中药提取成分治疗增生性瘢痕取得了较为理想的进展,而且不良反应小。目的:通过组织染色及相关基因检测的方法,观察三七总甙对兔耳增生性瘢痕的作用以及对转化生长因子β1mRNA表达的影响。方法:创建兔耳增生性瘢痕模型,约术后4周,按随机数字表法将24只大耳白兔分为3组,三七总甙组、曲安奈德组及空白对照组每组8只。以曲安奈德为阳性对照,分组分次瘢痕基底局部给药,用药5次后取瘢痕组织,以苦味酸酸性复红染色法、苏木精-伊红染色法对胶原纤维、成纤维细胞进行观察,应用反转录PCR方法检测细胞内转化生长因子β1基因的表达情况。结果与结论:苏木精-伊红染色结果示三七总甙组兔耳瘢痕中成纤维细胞数量低于空白对照组,与曲安奈德组无明显差异。苦味酸酸性复红染色结果示三七总甙组兔耳瘢痕中胶原纤维较空白对照组排列整齐,与曲安奈德组无明显差异。基因检测结果显示三七总甙组、曲安奈德组转化生长因子β1mRNA的表达显著低于空白对照组(P<0.05)。提示三七总甙及曲安奈德均能通过抑制转化生长因子β1mRNA的表达,降低转化生长因子β1在瘢痕组织中的含量,从而抑制成纤维细胞的过度增殖及以胶原为主的细胞外基质过度沉积,进而降低胶原纤维合成,来达到有效抑制瘢痕组织过度增生的目的。

关键词：组织构建皮肤组织构建三七总甙增生性瘢痕曲安奈德转化生长因子β1 反转录PCR 基因检测苏木精伊红苦味酸酸性复红成纤维细胞胶原纤维

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大鼠皮肤创伤修复过程中转化生长因子β1和β3的表达

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中国组织工程研究 2013年第20期17卷 3643-3649页

作者：赵佳佳杨丕波韩传火刘加荣华中科技大学同济医学院附属协和医院口腔科湖北省武汉市430022

背景:转化生长因子β在组织创伤修复中发挥核心和关键作用。目的:观察转化生长因子β1和转化生长因子β3在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中表达量及表达部位的变化。方法:制备大鼠皮肤全层切伤模型,长度1.5-2.0cm,深及筋膜层。于伤后0h,12... 详细信息

背景:转化生长因子β在组织创伤修复中发挥核心和关键作用。目的:观察转化生长因子β1和转化生长因子β3在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中表达量及表达部位的变化。方法:制备大鼠皮肤全层切伤模型,长度1.5-2.0cm,深及筋膜层。于伤后0h,12h,1d,2d,3d,4d,5d,6d,7d处死大鼠,取损伤部位皮肤,采用免疫组织化学染色检测各时间点转化生长因子β1和转化生长因子β3的表达,并进行定量分析。结果与结论:免疫组织化学染色显示,在创伤愈合的早期阶段(伤后1-5d),转化生长因子β1和转化生长因子β3免疫阳性颗粒主要出现在上皮细胞、上皮基底层细胞胞浆、巨噬细胞等免疫细胞胞浆及肉芽组织中;随着创伤修复时间的持续,免疫阳性颗粒主要出现在真皮层的成纤维细胞及细胞外基质中。其中转化生长因子β1的表达在创伤后1-5d最强,而转化生长因子β3在创伤后六七天时开始明显表达。可见在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中,转化生长因子β1的表达先于转化生长因子β3,提示转化生长因子β1与胶原形成及创伤修复关系密切,而转化生长因子β3在愈合后期表达量有升高趋势,其可能与创伤后期的组织改建密切相关。

关键词：组织构建皮肤组织构建瘢痕创伤愈合皮肤转化生长因子β1 转化生长因子β3 肉芽组织成纤维细胞巨噬细胞细胞因子国家自然科学基金

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糖尿病难愈创面应用小剂量胰岛素:上皮化、纤维化及血管新生

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中国组织工程研究 2013年第20期17卷 3650-3657页

作者：王芳栗勇苏映军王钠徐晨周博解放军第四军医大学第一附属医院整形外科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学临床医学系陕西省西安市710032

背景:糖尿病会影响正常创面愈合过程而形成难愈性创面。目的:观察局部应用小剂量胰岛素对糖尿病难愈性创面愈合的作用。方法:将大鼠随机分为实验组与对照组,对照组喂予普通饲料,实验组采用高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素诱导大鼠糖... 详细信息

背景:糖尿病会影响正常创面愈合过程而形成难愈性创面。目的:观察局部应用小剂量胰岛素对糖尿病难愈性创面愈合的作用。方法:将大鼠随机分为实验组与对照组,对照组喂予普通饲料,实验组采用高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病模型。随后在各组大鼠背部建立创面,对照组大鼠不予处理,实验组随机等分为模型组、凡士林组和胰岛素组,后2组分别以凡士林和小剂量胰岛素涂抹创面。结果与结论:实验组大鼠糖尿病诱导成功率几乎100%;模型组、凡士林组和胰岛素组大鼠创面完全上皮化时间均较对照组明显延长(P<0.05);且与模型组和凡士林组相比,胰岛素组大鼠创面愈合率显著升高,上皮化程度高,并且胶原纤维密度增加,排列较为规整,血管化程度增加。说明局部应用小剂量胰岛素可以促进上皮化、纤维化及血管新生,从而加速糖尿病创面的愈合速度。

关键词：组织构建皮肤组织构建糖尿病难愈性创面创面愈合高糖高脂饮食小剂量胰岛素凡士林链脲佐菌素国家自然科学基金

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A型肉毒毒素引起人增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡

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中国组织工程研究 2013年第24期17卷 4429-4435页

作者：李卫华高玉伟李德水邢玉玺武警后勤学院附属医院整形科天津市300162 邢台博爱医院整形科河北省邢台市054001

背景:A型肉毒毒素临床上可以治疗增生性瘢痕,体外细胞培养研究发现可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。目的:观察A型肉毒毒素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用,以及对人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响。方法:通过消化法分离... 详细信息

背景:A型肉毒毒素临床上可以治疗增生性瘢痕,体外细胞培养研究发现可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。目的:观察A型肉毒毒素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用,以及对人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响。方法:通过消化法分离培养出人增生性瘢痕成纤维细胞,分别用不同浓度的A型肉毒毒素对细胞的生长增殖过程进行干预,通过MTT染色,于酶联免疫检测仪570nm测定吸光度来研究细胞生长增殖情况,计算抑制率。通过Hoechst33342及PI染色检测人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡情况,并计算凋亡率。结果与结论:人增生性瘢痕成纤维细胞生长过程中呈梭形,细胞生长旺盛,细胞融合成单层,细胞排列成高度一致性。经A型肉毒毒素处理后,细胞增殖速度明显减慢,细胞数量减少,细胞排列方向散乱。MTT染色后吸光度减弱,随A型肉毒毒素浓度增加,吸光度明显减弱,与对照细胞比较,差异有显著性意义(P<0.05),半数抑制率出现在0.4IU/L。在荧光显微镜下,人增生性瘢痕成纤维细胞经Hoechst33342和PI染色后细胞核呈现蓝色,细胞核为光滑的圆形或椭圆形外观。A型肉毒毒素干预后细胞核致密浓缩,染色不均匀,折光性增强,核膜皱缩,部分细胞核碎裂,出现碎块,有凋亡小体出现。随着A型肉毒毒素浓度的增加细胞凋亡率逐渐增高,与对照细胞比较差异有显著性意义(P<0.05),半数凋亡率在0.4IU/L。说明A型肉毒毒素可以抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,其主要通过引起细胞凋亡的途径来抑制成纤维细胞的增殖。

关键词：组织构建皮肤组织构建 A型肉毒毒素增生性瘢痕成纤维细胞细胞核细胞培养细胞凋亡增殖皮肤瘢痕烧伤

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