结核病(tuberculosis,TB)流行病快速筛查常采用结核菌素纯蛋白衍生物(pure protein derivative,PPD)皮试,但特异性低,不良反应大。ESAT-6和CFP-10是结核分枝杆菌的分泌蛋白,但卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)中缺失了相关基因。...
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结核病(tuberculosis,TB)流行病快速筛查常采用结核菌素纯蛋白衍生物(pure protein derivative,PPD)皮试,但特异性低,不良反应大。ESAT-6和CFP-10是结核分枝杆菌的分泌蛋白,但卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)中缺失了相关基因。本研究表达纯化了结核分枝杆菌的分泌蛋白ESAT6和CFP10的融合蛋白(ESAT6 and CFP10 fusion protein,EC),并制备成其壳聚糖纳米粒(ESAT6 and CFP10 fusion protein nanoparticals,EC-NPs),进一步制备成透明质酸可溶性微针贴片(microneedle patch,MNP)。MNP-EC-NPs载药量达到每针0.03μg,每片可达到1.92μg,常温下保存期可达6个月,可有效透过表皮。志愿者皮试结果显示MNP-EC-NPs可有效区分BCG接种者,在结核病患者皮肤有效显示阳性反应,无显著不良反应,实验经武汉市肺科医院伦理委员会批准[武肺伦理2022(2)]。本研究建立了一种结核病皮试方法,采用ESAT6-CFP10融合蛋白替代PPD,并采用可溶性微针剂型,提高了结核病皮试诊断的特异性,为结核流行病筛查提供了新的技术方案。
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