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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

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1,258 篇 专利
4 篇 期刊文献
1 篇 学位论文
1 篇 会议

馆藏范围

1,264 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

4 篇 农学
- 3 篇 作物学
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 畜牧学
3 篇 理学
- 3 篇 生物学
2 篇 工学
- 2 篇 生物工程
2 篇 医学
- 1 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学

主题

6 篇 目的片段
2 篇 重组载体
1 篇 测序鉴定
1 篇 il-2基因
1 篇 scar标记
1 篇 特异免疫
1 篇 基因克隆
1 篇 λred同源重组
1 篇 克隆
1 篇 海洋放线菌酰基转...
1 篇 高表达载体
1 篇 esat-6
1 篇 结合反应
1 篇 puc18
1 篇 错配蛋白
1 篇 重组蛋白
1 篇 报告基因载体
1 篇 rapd分析
1 篇 pcr扩增
1 篇 原核表达载体

机构

29 篇 扬州大学
22 篇 华中农业大学
18 篇 中国海洋大学
17 篇 华南农业大学
16 篇 四川农业大学
14 篇 南京农业大学
14 篇 浙江大学
13 篇 西南大学
13 篇 西北农林科技大学
13 篇 吉林大学
12 篇 安徽农业大学
11 篇 福建省农业科学院...
11 篇 天津大学
11 篇 北京市理化分析测...
10 篇 上海赛安生物医药...
10 篇 贵州大学
9 篇 上海交通大学
9 篇 河南农业大学
8 篇 上海市农业科学院
8 篇 中国水产科学研究...

作者

19 篇 王金玉
18 篇 谢恺舟
18 篇 张跟喜
18 篇 戴国俊
16 篇 李琪
15 篇 孔令锋
14 篇 俞亚波
12 篇 王明
11 篇 杜美红
11 篇 于贞贞
11 篇 杨寅
11 篇 陈婷
11 篇 陈舜琮
11 篇 孙永军
11 篇 刘清珺
10 篇 李鸿筠
10 篇 李玥
10 篇 冉春
10 篇 刘浩强
9 篇 李晓明

语言

1,264 篇 中文

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排序：

以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法

以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法

引用

作者：宋厚辉程昌勇孙静汪枫婷夏菁陈绵绵徐加利卫芳芳陈中炜 310000 浙江省杭州市临安区锦城街道武肃街666号

本发明提供一种以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法，涉及基因工程领域，是以减毒单増李斯特菌背景菌株Lemo‑C07为背景载体，利用PCR技术扩增Lemo‑C07的hly基因498bp以及hly基因下游500bp分别作为片段A和片段B；利用SO... 详细信息

标准号: CN114250244A

本发明提供一种以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法，涉及基因工程领域，是以减毒单増李斯特菌背景菌株Lemo‑C07为背景载体，利用PCR技术扩增Lemo‑C07的hly基因498bp以及hly基因下游500bp分别作为片段A和片段B；利用SOE‑PCR技术将三个片段(抗原片段AH1设计在引物上)连在一起获得A‑B的目的片段，如序列SEQ ID NO.1所示；以KpnⅠ和PstⅠ为酶切位点，经酶切、酶连至李斯特菌穿梭质粒pKSV7，获得重组质粒pSL1885，并经质粒电转、同源重组和质粒丢失，获得重组减毒单増李斯特菌载体疫苗。将肿瘤特异性抗原基因整合至减毒李斯特菌基因组中，使抗原基因能够稳定表达，不易丢失；使用的减毒株Lemo‑C07与野生株相比，毒力降低了近10000倍；不含抗性质粒，无抗生素耐药风险，安全性更高。

关键词：李斯特菌减毒肿瘤特异性抗原基因工程领域抗生素耐药背景载体穿梭质粒基因整合抗性质粒抗原基因抗原片段酶切位点目的片段同源重组稳定表达载体疫苗质粒丢失重组质粒背景菌基因组减毒株结肠癌野生株电转毒力扩增酶切引物质粒制备疫苗

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检测牙鲆抗病力的引物、重组蛋白及其应用

检测牙鲆抗病力的引物、重组蛋白及其应用

引用

作者：王磊张子威卢昇李开敏陈松林 266071 山东省青岛市市南区南京路106号

本发明公开了一种检测牙鲆抗病力的引物、重组蛋白及其应用，属于分子生物学技术领域，所述的引物序列为SNP‑Rnd1‑FCAGAGGAACAGCGGAATAGT，SNP‑Rnd1‑RGCTCCCCAAAAGGTAAGATA。本发明还提供利用所述引物在牙鲆抗病品种选育中的应用，选择... 详细信息

标准号: CN114085915B

本发明公开了一种检测牙鲆抗病力的引物、重组蛋白及其应用，属于分子生物学技术领域，所述的引物序列为SNP‑Rnd1‑FCAGAGGAACAGCGGAATAGT，SNP‑Rnd1‑RGCTCCCCAAAAGGTAAGATA。本发明还提供利用所述引物在牙鲆抗病品种选育中的应用，选择出具有特异性扩增目的片段的个体作为亲本，进行牙鲆抗病新品种的选育。基于牙鲆Rnd1基因序列SEQ IP NO.3重组获得的重组蛋白对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、迟缓爱德华氏菌、哈维氏弧菌均具有抑制作用，本发明还提供所述重组蛋白在制备防治牙鲆细菌病生物药品中的应用。

关键词：牙鲆重组蛋白引物迟缓爱德华氏菌分子生物学技术葡萄球菌应用抗病品种选育大肠杆菌哈维氏弧菌特异性扩增基因序列目的片段生物药品抗病力细菌病种检测亲本制备抗病新品种防治

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一种微环游离表达载体及其构建方法和应用

一种微环游离表达载体及其构建方法和应用

引用

作者：王天云王小引石如玲董玉珍杨磊韩忠敏张靖林艳 453003 河南省新乡市金穗大道东段

本发明涉及一种微环游离表达载体及其构建方法和应用，该载体含有噬菌体整合酶基因、I-SceI基因及酶切位点、人源性的MAR序列及attB和attP位点；其构建方法是首先构建含整合酶基因和I-SceI基因的载体pET-及含人源性的MAR序列的载体pcDNA... 详细信息

标准号: CN101942475A

本发明涉及一种微环游离表达载体及其构建方法和应用，该载体含有噬菌体整合酶基因、I-SceI基因及酶切位点、人源性的MAR序列及attB和attP位点；其构建方法是首先构建含整合酶基因和I-SceI基因的载体pET-及含人源性的MAR序列的载体pcDNAM，然后将pcDNAM载体上的目的片段再克隆到pET-载体中构建成微环游离表达载体pEMW；其应用体现在基因治疗及基因工程方面。本发明的载体能在宿主菌内完成微环载体的重组过程，消除原核质粒元件；还可游离于宿主细胞基因组DNA之外稳定持久的表达外源基因；利用本发明的表达载体可以成功地在各种人类及动物细胞中高效表达外源基因。

关键词：表达载体基因宿主细胞基因组高效表达外源噬菌体整合酶人类及动物基因工程基因治疗目的片段外源基因重组过程宿主菌整合酶酶切微环原核质粒克隆细胞

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一种牛疱疹病毒Ⅰ型gE蛋白胞外区的原核可溶性表达方法

一种牛疱疹病毒Ⅰ型gE蛋白胞外区的原核可溶性表达方法

引用

作者：杨峰贺泂杰王慧辛蕊华张世栋孙研徐国伟崔东安王旭荣 730000 甘肃省兰州市七里河区硷沟沿335号

本发明涉及分子生物学技术及生物医药制品技术领域，具体涉及一种牛疱疹病毒Ⅰ型gE蛋白胞外区的原核可溶性表达方法，该方法包括以下步骤：(1)构建pUC19‑gE克隆载体；(2)构建pET‑SUMO‑gE表达载体；(3)表达gE重组蛋白；(4)纯化gE重组蛋... 详细信息

标准号: CN113817027A

本发明涉及分子生物学技术及生物医药制品技术领域，具体涉及一种牛疱疹病毒Ⅰ型gE蛋白胞外区的原核可溶性表达方法，该方法包括以下步骤：(1)构建pUC19‑gE克隆载体；(2)构建pET‑SUMO‑gE表达载体；(3)表达gE重组蛋白；(4)纯化gE重组蛋白；其有益效果在于：本发明以牛疱疹病毒Ⅰ型gE蛋白胞外区编码基因的优化序列为目的片段，成功构建了gE蛋白胞外区表达载体pET‑SUMO‑gE，在大肠杆菌中诱导表达出大小约为70kd的gE重组蛋白，均以可溶性形式存在，且均有良好的反应原性，为BHV‑Ⅰ诊断试剂盒的研发奠定了理论基础。

关键词：重组蛋白胞外区构建蛋白表达载体分子生物学技术生物医药制品疱疹病毒Ⅰ型大肠杆菌可溶性表达可溶性形式牛疱疹病毒诊断试剂盒编码基因反应原性克隆载体理论基础目的片段诱导表达研发原核优化成功

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一种提高杆状病毒杀虫效率的遗传改造方法

一种提高杆状病毒杀虫效率的遗传改造方法

引用

作者：朱姗颖何华纲时伟汪峰王文兵 212013 江苏省镇江市京口区学府路301号

本发明涉及一种提高杆状病毒杀虫效率的遗传改造方法，属于基因工程领域；本发明以pEGFP‑N1载体为模板扩增EGFP基因，双酶切后连入质粒pFastBacDUAL，得重组质粒pDUAL‑EGFP；根据Clbi138基因序列及其开放阅读框设计合成引物；以豆天蛾... 详细信息

标准号: CN104911201B

本发明涉及一种提高杆状病毒杀虫效率的遗传改造方法，属于基因工程领域；本发明以pEGFP‑N1载体为模板扩增EGFP基因，双酶切后连入质粒pFastBacDUAL，得重组质粒pDUAL‑EGFP；根据Clbi138基因序列及其开放阅读框设计合成引物；以豆天蛾核型多角体病毒基因组DNA作为模板，进行PCR扩增，回收目的片段，双酶切后连入经同样双酶切的重组质粒pDUAL‑EGFP，得重组质粒pDUAL‑EGFP‑Clbi138；转化含有家蚕核型多角体病毒的大肠杆菌菌株，培养纯化后接种于LB液体培养基，振荡培养，提取重组BmNPV DNA；并通过实验首次证实重组BmNPV的杀虫效率显著增强，半致死浓度比对照组减少11倍，半数致死时间比对照组缩短42.9%，且病虫体内液化更严重，从而达到提高虫害的防治效果，具有明显的经济和生态效益，具有广阔的应用前景。

关键词：重组质粒双酶切杀虫豆天蛾核型多角体病毒致死家蚕核型多角体病毒大肠杆菌菌株基因工程领域设计合成引物开放阅读框基因组DNA 杆状病毒基因序列目的片段生态效益遗传改造振荡培养浓度比时间比虫害扩增质粒液化接种体内回收防治转化应用

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一种梅山猪气喘病间接ELISA检测方法

一种梅山猪气喘病间接ELISA检测方法

引用

作者：涂尾龙黄济王洪洋张莺莺谈永松曹建国卫金良曹传闺甘叶青唐赛勇 201106 上海市闵行区北翟路2901号

本发明公开了一种梅山猪气喘病间接ELISA检测方法，包括以下实施步骤：T1：构建重组表达质粒PET‑32a‑N1N2，以PRRSV NSP2基因组为模板，针对N1、N2基因序列设计特异性引物，通过PCR扩增得到目的片段，构建克隆质粒pMD‑18T‑N1N2，对克隆... 详细信息

标准号: CN115433737A

本发明公开了一种梅山猪气喘病间接ELISA检测方法，包括以下实施步骤：T1：构建重组表达质粒PET‑32a‑N1N2，以PRRSV NSP2基因组为模板，针对N1、N2基因序列设计特异性引物，通过PCR扩增得到目的片段，构建克隆质粒pMD‑18T‑N1N2，对克隆载体和原核表达载体pET‑32a同时进行双酶切，连接后得到重组表达质粒pET‑32a‑N1N2；T2：对目的蛋白进行表达及纯化，将构建重组表达质粒PET‑32a‑N1N2转入***21(DE3)，诱导表达融合蛋白，利用His柱层析进行纯化，得到经SDS‑PAGE电泳分析纯度较高的蛋白，利用RT‑PCR和蛋白原核表达技术获得纯度较高且具有良好特异性和免疫原性的融合蛋白PET‑32a‑N1N2，以融合蛋白PET‑32a‑N1N2为包被抗原，建立检测蓝耳病血清抗体的间接ELISA方法。

关键词：重组表达质粒融合蛋白构建间接ELISA检测蛋白原核表达原核表达载体特异性引物间接ELISA 包被抗原基因序列技术获得克隆载体克隆质粒免疫原性目的蛋白目的片段血清抗体诱导表达猪气喘病基因组蓝耳病双酶切柱层析蛋白转入检测分析

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一种pBeloBCA11-MCS(+)重组质粒及其构建方法与应用

一种pBeloBCA11-MCS(+)重组质粒及其构建方法与应用

引用

作者：杨守萍周强丁先龙张浩 210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号

本发明提供了一种pBeloBCA11‑MCS(+)重组质粒及其构建方法与应用，该重组质粒能在分子水平拓展低拷贝质粒载体pBeloBCA11的内切酶识别位点，提高pBeloBCA11质粒与目的片段重组，推动大片段基因组文库的构建和促进基因簇（gene cluster... 详细信息

标准号: CN115717149A

本发明提供了一种pBeloBCA11‑MCS(+)重组质粒及其构建方法与应用，该重组质粒能在分子水平拓展低拷贝质粒载体pBeloBCA11的内切酶识别位点，提高pBeloBCA11质粒与目的片段重组，推动大片段基因组文库的构建和促进基因簇（gene cluster）相关研究方面的应用。

关键词：重组质粒构建大片段基因组文库低拷贝质粒促进基因分子水平目的片段内切酶识别位质粒应用拓展研究

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用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用

用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用

引用

作者：秦冉崔法曹鸣苏蔡益彪王晨阳董继梓徐彗渊吴永振赵春华孙晗翟冬峰孔令让 264025 山东省烟台市芝罘区红旗中路186号

本发明属于小麦育种技术领域，公开了用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用。所述用于检测小麦多性状相关QTL的多重PCR引物组包括：用于同时检测旗叶宽、株高、穗粒数、不育小穗数性状相关QTL的引物，DNA序列分别为：SEQ... 详细信息

标准号: CN115852012A

本发明属于小麦育种技术领域，公开了用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用。所述用于检测小麦多性状相关QTL的多重PCR引物组包括：用于同时检测旗叶宽、株高、穗粒数、不育小穗数性状相关QTL的引物，DNA序列分别为：SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4。本发明利用多重PCR在一个PCR反应中使用一个模板和多对引物同时扩增多个目的片段的PCR反应。与单一PCR相比，提高了PCR的产率，也提高了DNA模板的利用率，环节少周期短。

关键词：性状检测多重PCR引物小麦多对引物多重扩增目的片段小麦育种多重PCR 穗粒数引物组产率旗叶小穗引物应用环节

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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒

引用

作者：范学政王琴徐璐赵启祖邹兴启朱元源 100081 北京市海淀区中关村南大街8号

本发明涉及牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本发明参考GenBank中BVDV和CSFV序列，设计了一对能够特异性扩增BVDV的引物，扩增目的片段长度为470bp，对RT-PCR反应液及反应条件进行优化，发明了牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本... 详细信息

标准号: CN103343170B

本发明涉及牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本发明参考GenBank中BVDV和CSFV序列，设计了一对能够特异性扩增BVDV的引物，扩增目的片段长度为470bp，对RT-PCR反应液及反应条件进行优化，发明了牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本发明具有以下优点：1）特异性好：特异性扩增BVDV的所有毒株，与其他病原无交叉反应；2）灵敏度高：检测极限可达10^1.5TCID₅₀/0.1ml；3)操作简单：采用反应预混液，减少操作步骤，缩短反应时间，减少污染风险。本试剂盒可用于猪及牛的BVDV感染检测，也可用于疫苗生产中牛源成分的BVDV污染检测，为动物疫苗质量安全提供有力的保障。

关键词：试剂盒扩增病毒性腹泻病毒病原动物疫苗反应时间反应条件感染检测交叉反应目的片段污染风险污染检测疫苗生产质量安全灵敏度毒株牛源引物预混检测优化保障

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用于检测HCV 2a亚型耐药突变基因的扩增引物、检测方法及应用

用于检测HCV 2a亚型耐药突变基因的扩增引物、检测方法及应用

引用

作者：王琳曾征宇郭晓磊宋林秀张玉婷 510000 广东省广州市海珠区新港东路2429号三楼

本发明公开了一种用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因的扩增引物、检测方法及应用。所述用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因的扩增引物组,包括一对外引物和一对内引物。其用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因，进行PCR扩增等检测分析时... 详细信息

标准号: CN112961942A

本发明公开了一种用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因的扩增引物、检测方法及应用。所述用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因的扩增引物组,包括一对外引物和一对内引物。其用于检测HCV 2a亚型NS3耐药突变基因，进行PCR扩增等检测分析时，可确保低浓度样本中HCV基因2a亚型NS3耐药突变基因的扩增成功率100％，并获取更长的目的片段，从而有效保证NS3区域耐药相关突变位点的覆盖率。本发明有利于对低HCV RNA浓度的样品进行检测，灵敏度高。从而可用于辅助分析研究2a亚型HCV基因的耐药突变情况，进而为耐药性临床研究提供参考。

关键词：亚型耐药突变基因检测引物扩增引物组耐药性检测分析扩增引物临床研究目的片段耐药突变突变位点灵敏度可用扩增成功率样本覆盖率参考应用分析保证研究

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