检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：谢文军关素华 510000 广东省广州市黄埔区云埔街道万科东荟城C17栋206室

本发明涉及一组稳定高效表达活性融合蛋白的Gateway真核表达系统，其中包括了12xHis‑GFP‑GW(A载体)和12xHis‑GW‑GFP(B载体)两个通用目的载体(Destination vector)，使用者可根据需要选择它们跟入门载体(ENTR vector)进行LR反应，即可得... 详细信息

标准号: CN113337531A

本发明涉及一组稳定高效表达活性融合蛋白的Gateway真核表达系统，其中包括了12xHis‑GFP‑GW(A载体)和12xHis‑GW‑GFP(B载体)两个通用目的载体(Destination vector)，使用者可根据需要选择它们跟入门载体(ENTR vector)进行LR反应，即可得到最终表达目的载体。这两个通用载体的制作分别以pK7WGF2或pK7FWG2载体为起始骨架，利用限制性内切酶SpeI和重组酶MultiS，将12xHis的编码序列分别进行了融合插入。本发明作为对前面申请专利(专利申请号202110472170.X)的必要补充，提供了一种方便快捷的分子克隆系统，用于少数不能在原核系统中表达的真核蛋白的高效准确表达，使蛋白表达纯化系统更全面和完善，功能更强大，可有力促进活性蛋白的纯化工作，为蛋白的功能学研究建立基础。

关键词：活性融合蛋白限制性内切酶真核表达系统编码序列纯化系统蛋白表达分子克隆高效表达活性蛋白起始骨架入门载体通用目的通用载体原核系统真核蛋白功能学重组酶蛋白融合补充制作申请研究

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一种新型真核表达系统、其构建方法及应用

一种新型真核表达系统、其构建方法及应用

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作者：钱卫珠 201203 上海市中国(上海)自由贸易试验区李冰路99号3楼301室

本发明的一种新型真核表达系统、其构建方法及应用属于生物技术领域。本发明设计不同长度的PolyA转录终止基因序列，并采用双启动子的表达方式构建新型真核表达系统。用于目标蛋白质的生产表达，可以提高目标蛋白质的生产表达量。

标准号: CN105821077B

关键词：真核表达系统目标蛋白质构建生物技术领域表达方式基因序列双启动子转录终止表达量生产应用

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家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建方法

家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建...

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作者：刘晖贺莉芳王灵军王鑫 563000 贵州省遵义市大连路201号

本发明涉及一种家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建方法。以家蝇抗菌肽attacin为目标基因，重组杆状病毒Bacmid-pFastBacTM-attacin转染建立的家蝇胚胎细胞系MDEC-07114,构建抗菌肽attacin的家蝇胚胎细胞真... 详细信息

标准号: CN105274143A

本发明涉及一种家蝇胚胎细胞构建抗菌肽attacin真核表达系统所表达的产物及构建方法。以家蝇抗菌肽attacin为目标基因，重组杆状病毒Bacmid-pFastBac^TM-attacin转染建立的家蝇胚胎细胞系MDEC-07114,构建抗菌肽attacin的家蝇胚胎细胞真核表达系统。全基因合成家蝇抗菌肽attacin，将目的基因attacin克隆入PUC57质粒，重组质粒经双酶切后连接到pFastBac^TMHTA供体质粒，重组杆状病毒Bacmid？DNA；重组杆状病毒Bacmid？DNA转染家蝇胚胎细胞MDEC-07114中，提取培养上清和细胞裂解物粗蛋白，经镍柱纯化，SDS-PAGE和Western-Blot对蛋白表达进行检测、鉴定，对表达产物进行抗菌活性检测。

关键词：家蝇重组杆状病毒胚胎细胞真核表达系统家蝇抗菌肽抗菌肽构建抗菌活性检测胚胎细胞系全基因合成细胞裂解物表达产物蛋白表达供体质粒构建方法目标基因目的基因重组质粒粗蛋白双酶切镍柱一种转染克隆提取鉴定连接检测表达进行培养涉及建立

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具有重要应用价值的真核表达系统

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生物工程进展 1998年第1期18卷 31-31页

作者：陈峰朱祯中国科学院遗传研究所

基于Ｔ７ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７强启动子（１０）间的特异识别而建立起来的偶联表达系统在大肠杆菌中已取得了令人满意的结果。最近，该系统在酵母、昆虫、哺乳动物细胞和植物细胞中陆续实现了高效表达。Ｔ７ＲＮＡ聚合酶－１０启动子... 详细信息

基于Ｔ７ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７强启动子（１０）间的特异识别而建立起来的偶联表达系统在大肠杆菌中已取得了令人满意的结果。最近，该系统在酵母、昆虫、哺乳动物细胞和植物细胞中陆续实现了高效表达。Ｔ７ＲＮＡ聚合酶－１０启动子偶联表达系统的相对独立性和高效性，不仅预示着该系统可以在真核基因工程中发挥重要作用。

关键词：真核表达系统 T7RNA 聚合酶基因工程

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一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用

一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的...

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作者：孙坚贺骞余军军崔超月陈冲廖晓萍刘雅红 510000 广东省广州市天河区五山路483号

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用，为构建一种可分泌四环素类抗生素降解酶的真核表达系统，从而为四环素类抗生素的降解提供了一种新的途径，本发明在基因tet(X... 详细信息

标准号: CN111172180A

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用，为构建一种可分泌四环素类抗生素降解酶的真核表达系统，从而为四环素类抗生素的降解提供了一种新的途径，本发明在基因tet(X)序列的基础上经过优化得到适用于真核表达系统的tet(X)^*序列，并首次使用pPIC9K载体将优化后的基因稳定的转入到毕赤酵母GS115中，构建得到一种工程酵母，该工程酵母具有表达Tet(X)蛋白的能力。通过工程酵母的表达效果试验可见，该工程酵母外源基因所表达的蛋白质在NADPH、Mg²⁺、O₂的参与下表现出生物功能，对四环素类抗生素具有高效的降解作用。

关键词：四环素类抗生素工程酵母真核表达系统构建降解优化基因工程技术毕赤酵母基因稳定降解基因生物功能首次使用外源基因效果试验降解酶分泌蛋白质蛋白转入基因应用表现

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一种新型真核表达系统、其构建方法及应用

一种新型真核表达系统、其构建方法及应用

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作者：钱卫珠 201203 上海市浦东新区张江高科技园区郭守敬路351号1号楼440室

标准号: CN105821077A

关键词：真核表达系统目标蛋白质构建生物技术领域表达方式基因序列双启动子转录终止表达量生产应用

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真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白

真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白

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作者：任哲刘俊伟王紫鋆陈静怡王一飞 510000 广东省广州市黄埔大道西601号

本发明提供了一种真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白，涉及分子生物学技术领域，本发明提供的真核表达载体，能够高表达GDF11基因。本发明提供的上述真核表达载体的制备方法，包括将GDF11基因片段插入重组... 详细信息

标准号: CN108753819A

本发明提供了一种真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白，涉及分子生物学技术领域，本发明提供的真核表达载体，能够高表达GDF11基因。本发明提供的上述真核表达载体的制备方法，包括将GDF11基因片段插入重组质粒，操作简单，制备得到的真核表达载体具有高表达GDF11基因的效果。本发明提供的真核表达系统，宿主细胞为CHO，能够稳定高效地表达重组蛋白GDF11。本发明提供的上述真核表达系统的制备方法，包括将真核表达载体转染到CHO细胞中，培养并筛选，通过DHFR二氢叶酸还原酶系统进行转染子筛选，能够在保证细胞活率的情况下，通过反馈调节，使GDF11基因扩增，提高蛋白的表达量。

关键词：真核表达载体真核表达系统制备高表达蛋白二氢叶酸还原酶分子生物学技术制备方法和应用筛选表达重组蛋白反馈调节基因扩增基因片段宿主细胞重组质粒表达量转染子基因转染细胞保证

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一种利用真核表达系统制备HIV‑1gp120的方法

一种利用真核表达系统制备HIV‑1gp120的方法

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作者：欧卫军沙海花娟王蕾牛青青 226001 江苏省南通市南通开发区星湖大道1692号15号厂房A座

本发明公开了一种利用真核表达系统制备HIV‑1gp120的方法，步骤如下：利用大肠杆菌体外表达系统，获得pFastBac‑Ysgp3质粒；利用上述灭活质粒转染昆虫sf9细胞，待细胞病变后收集P1代病毒上清；利用P1代病毒上清再次感染昆虫sf9细胞，获... 详细信息

标准号: CN107513536A

本发明公开了一种利用真核表达系统制备HIV‑1gp120的方法，步骤如下：利用大肠杆菌体外表达系统，获得pFastBac‑Ysgp3质粒；利用上述灭活质粒转染昆虫sf9细胞，待细胞病变后收集P1代病毒上清；利用P1代病毒上清再次感染昆虫sf9细胞，获得P2代病毒上清；重复C步骤，依次获得P3、P4代病毒上清；用P4代病毒上清感染昆虫sf9细胞，在gp120表达量出现峰值的时候收集细胞，获得gp120蛋白；纯化gp120蛋白；本发明具有以下优点：通过基因重组的方法获得gp120的重组抗原，该重组抗原编码基因能够在昆虫细胞中表达，解决了现有HIV‑1检测试剂研发过程中存在的无法获得高纯度、高灵敏度的gp120抗原的问题。

关键词：病毒昆虫sf9细胞重组抗原体外表达系统真核表达系统大肠杆菌编码基因高灵敏度基因重组检测试剂昆虫细胞细胞病变表达量高纯度感染研发质粒转染制备细胞重复

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提高真核表达系统表达的ACE2蛋白稳定性的方法

提高真核表达系统表达的ACE2蛋白稳定性的方法

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作者：张林杨育秀 100176 北京市大兴区经济技术开发区宏达北路8号4幢4层

本发明提供一种提高真核表达系统表达的ACE2蛋白稳定性的方法，包括：利用真核表达系统表达ACE2蛋白，并纯化ACE2蛋白，向纯化的ACE2蛋白溶液中添加精氨酸，或者，在ACE2蛋白纯化过程中向用于纯化ACE2蛋白的试剂中添加精氨酸。本发明通... 详细信息

标准号: CN112522317A

本发明提供一种提高真核表达系统表达的ACE2蛋白稳定性的方法，包括：利用真核表达系统表达ACE2蛋白，并纯化ACE2蛋白，向纯化的ACE2蛋白溶液中添加精氨酸，或者，在ACE2蛋白纯化过程中向用于纯化ACE2蛋白的试剂中添加精氨酸。本发明通过向基于真核表达系统制备的ACE2蛋白溶液中添加精氨酸，或在ACE2蛋白纯化过程中引入精氨酸，并从外观澄清度、SEC‑HPLC检测纯度、蛋白收率等方面综合评估真核表达系统所表达的ACE2蛋白的稳定性，结果显示，加入精氨酸后蛋白溶液显著稳定，目测澄清，SEC‑HPLC检测蛋白纯度不变，有利于蛋白冻融，有利于蛋白溶液长期储存，有利于提高蛋白收率。

关键词：精氨酸蛋白真核表达系统蛋白溶液蛋白纯化收率蛋白稳定性长期储存蛋白纯度综合评估澄清度蛋白冻目测制备澄清引入

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真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白

真核表达载体、真核表达系统、二者的制备方法和应用及GDF11蛋白

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作者：任哲刘俊伟王紫鋆陈静怡王一飞 510000 广东省广州市黄埔大道西601号

标准号: CN108753819B

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