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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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460 篇 学位论文
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学科分类号

1,658 篇 医学
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- 634 篇 基础医学(可授医学...
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- 84 篇 公共卫生与预防医...
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- 21 篇 中西医结合
- 7 篇 中药学(可授医学、...
- 2 篇 特种医学
949 篇 农学
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767 篇 理学
- 765 篇 生物学
- 2 篇 生态学
654 篇 工学
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- 2 篇 电子科学与技术（可...
- 2 篇 轻工技术与工程
- 1 篇 机械工程
- 1 篇 光学工程
- 1 篇 仪器科学与技术
3 篇 教育学
- 2 篇 教育学
- 1 篇 心理学(可授教育学...
1 篇 历史学
- 1 篇 中国史
1 篇 管理学
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主题

2,676 篇 真核表达载体
177 篇 转染
159 篇 基因克隆
127 篇 克隆
114 篇 构建
110 篇 基因表达
90 篇 基因治疗
69 篇 基因转染
68 篇 绿色荧光蛋白
67 篇 重组质粒
60 篇 rna干扰
56 篇 基因
51 篇 细胞凋亡
47 篇 表达
46 篇 细胞增殖
42 篇 鉴定
39 篇 小鼠
38 篇 dna疫苗
37 篇 序列分析
36 篇 乙型肝炎病毒

机构

78 篇 第四军医大学
68 篇 吉林大学
67 篇 华中科技大学
65 篇 郑州大学
56 篇 扬州大学
48 篇 四川大学
46 篇 重庆医科大学
44 篇 第四军医大学西京...
43 篇 华南农业大学
40 篇 华中科技大学同济...
38 篇 西北农林科技大学
38 篇 华中科技大学同济...
37 篇 广西大学
35 篇 山东大学
35 篇 南通大学
34 篇 第三军医大学
34 篇 哈尔滨医科大学
33 篇 贵州大学
32 篇 南方医科大学
32 篇 中国农业大学

作者

22 篇 张强
21 篇 钱泓
20 篇 赵国强
20 篇 沈爱国
19 篇 车影
18 篇 叶海峰
17 篇 卞广林
17 篇 吴素芳
15 篇 薛帅
15 篇 查银河
15 篇 吴有强
14 篇 徐玉兰
14 篇 王琳
13 篇 张巧
13 篇 王涛
12 篇 李光玉
12 篇 蒋钦杨
12 篇 欧阳红生
12 篇 兰干球
11 篇 冯志华

语言

3,315 篇 中文
4 篇 英文

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GFI1截短体的应用

GFI1截短体的应用

引用

作者：程纯沈爱国王燏婵钟菲 226000 江苏省南通市崇川区啬园路9号

本发明公开了GFI1截短体在制备抗肿瘤药物中的应用；所述的GFI1截短体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用生物工程技术基因重组一段154个氨基酸多肽对应的DNA序列到pcDNA3.1真核表达载体。细胞学实验表明此多肽具有促进非霍奇... 详细信息

标准号: CN106110297A

本发明公开了GFI1截短体在制备抗肿瘤药物中的应用；所述的GFI1截短体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用生物工程技术基因重组一段154个氨基酸多肽对应的DNA序列到pcDNA3.1真核表达载体。细胞学实验表明此多肽具有促进非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡的重要抗癌功能。发明为非霍奇金淋巴瘤的治疗开发新的靶点提供实验依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发应用前景。

关键词：非霍奇金淋巴瘤截短体制备抗肿瘤药物生物工程技术真核表达载体氨基酸多肽氨基酸序列细胞学实验基因重组开发应用抗癌功能临床治疗细胞凋亡靶点多肽应用肿瘤治疗开发

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一种DNA甲基转移酶缺陷型CHO细胞系及其制备方法及应用

一种DNA甲基转移酶缺陷型CHO细胞系及其制备方法及应用

引用

作者：贾岩龙郭潇王天云安文琪马超援路江涛邱乐乐 453003 河南省新乡市红旗区金穗大道601号

本发明涉及一种DNA甲基转移酶缺陷型CHO细胞系及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CHO细胞DNA甲基转移酶Dnmt3a基因，筛选并鉴定获得DNA甲基转移酶Dnmt3a缺陷型CHO细胞，通过转染真核表... 详细信息

标准号: CN107828738A

本发明涉及一种DNA甲基转移酶缺陷型CHO细胞系及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CHO细胞DNA甲基转移酶Dnmt3a基因，筛选并鉴定获得DNA甲基转移酶Dnmt3a缺陷型CHO细胞，通过转染真核表达载体并筛选稳定表达重组CHO细胞株而建立基于DNA甲基转移酶缺陷型的新型CHO细胞表达系统。本发明通过宿主CHO细胞遗传改造建立重组基因CHO细胞表达系统，能够明显提高重组蛋白的表达水平、同时克服重组蛋白表达不稳定的问题，提高重组蛋白表达稳定性。

关键词：缺陷型重组蛋白表达表达系统制备方法和应用基因工程技术真核表达载体重组CHO细胞筛选宿主表达水平稳定表达遗传改造重组蛋白重组基因基因敲除转染

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一种基于Tim-3/Galectin-9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法

一种基于Tim-3/Galectin-9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方...

引用

作者：范春雷吴王亲武虎匡红刘美星莫一平 311401 浙江省杭州市富阳区东洲街道工业功能区13号路1号第1幢

本发明建立了一种基于Tim‑3/Galectin‑9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法：将红色荧光蛋白tagRFP偶联于Galectin‑9蛋白羧基末端(C端)，构建真核表达载体，并制备Galectin‑9‑tagRFP融合蛋白；将Ceacam‑1构建在真核表达载体的CMV... 详细信息

标准号: CN109666698A

本发明建立了一种基于Tim‑3/Galectin‑9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法：将红色荧光蛋白tagRFP偶联于Galectin‑9蛋白羧基末端(C端)，构建真核表达载体，并制备Galectin‑9‑tagRFP融合蛋白；将Ceacam‑1构建在真核表达载体的CMV启动子下游，黄色荧光蛋白基因Ypet构建在Tim‑3蛋白的下游，以及青色荧光蛋白基因CyPet通过一个连接肽(G4S)3构建在Bat3基因的下游，分别构建真核表达载体，并获得新型的稳转细胞系Ceacam‑***‑***3CyPet/Jurkat，以Galectin‑9‑tagRFP与细胞系的亲和进行荧光检测筛选阻断剂。本方法可精确反映抗Tim‑3和抗Galectin‑9药的效应，可同时获得阻断功能与Tim‑3/Galectin‑9信号通路的生物学效应数据，构建快速筛选抗Tim‑3和抗Galectin‑9药物和评估其生物学效应的实验模型。

关键词：构建真核表达载体生物学效应快速筛选基因蛋白红色荧光蛋白黄色荧光蛋白青色荧光蛋白融合蛋白生物效应实验模型信号通路荧光检测羧基末端连接肽阻断剂偶联制备筛选评估

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用于克隆鸡ACP5基因CDS区序列的引物

用于克隆鸡ACP5基因CDS区序列的引物

引用

作者：施晓丽文光林赵忠海 550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大学北校区科学技术处

本发明公开了一种用于克隆鸡ACP5基因CDS区序列的引物。本发明设计了一组特异性引物，结合该引物运用RT‑PCR技术对鸡ACP5基因进行PCR扩增，PCR扩增目的片段为鸡的ACP5基因的完整CDS区序列，所获得获得的ACP5基因的完整CDS区序列的准确... 详细信息

标准号: CN109576291A

本发明公开了一种用于克隆鸡ACP5基因CDS区序列的引物。本发明设计了一组特异性引物，结合该引物运用RT‑PCR技术对鸡ACP5基因进行PCR扩增，PCR扩增目的片段为鸡的ACP5基因的完整CDS区序列，所获得获得的ACP5基因的完整CDS区序列的准确性高、结果可靠，为构建鸡的ACP5基因的原核、真核表达载体及相关动物模型等研究提供基础材料。本发明通过普通克隆手段获得高GC含量序列克隆，所设引物添加酶切位点，可直接用于其他表达实验，同时对笼养蛋鸡骨代谢治疗、改善具有重要实验室意义。

关键词：基因引物克隆高GC含量序列真核表达载体特异性引物动物模型基础材料笼养蛋鸡酶切位点目的片段骨代谢构建原核治疗研究

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鸭MEF2B基因的编码序列及其克隆方法

鸭MEF2B基因的编码序列及其克隆方法

引用

作者：李辉赵忠海卜小雁易恒洁彭邦星师新彩张蓉 550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大学北校区科学技术处

本发明公开了一种鸭MEF2B基因的编码序列及其克隆方法。本发明对鸭的组织提取总RNA，并将总RNA逆转录为cDNA第一条链后，设计特异性引物，利用该特异性引物，并运用RT‑PCR方法结合A/T克隆技术对鸭MEF2B基因进行克隆，经过实验证明，本... 详细信息

标准号: CN106046138A

本发明公开了一种鸭MEF2B基因的编码序列及其克隆方法。本发明对鸭的组织提取总RNA，并将总RNA逆转录为cDNA第一条链后，设计特异性引物，利用该特异性引物，并运用RT‑PCR方法结合A/T克隆技术对鸭MEF2B基因进行克隆，经过实验证明，本发明的方法准确性高，结果可靠，能为构建鸭MEF2B基因的原核、真核表达载体及相关动物模型等研究提供基础材料。

关键词：特异性引物克隆基因真核表达载体总RNA逆转录提取总RNA 编码序列第一条链动物模型基础材料构建原核研究

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183aa小分子多肽的应用

183aa小分子多肽的应用

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作者：程纯沈爱国王燏婵钟菲 226000 江苏省南通市崇川区啬园路9号

本发明公开了183aa小分子多肽在制备抗癌药物中的应用。本发明利用生物工程技术，基因重组一段183个氨基酸多肽对应的DNA序列到p3×FLAG‑CMV‑14真核表达载体。经酶切和序列分析证明重组成功后，将此重组多肽转染到多发性骨髓瘤RPMI ... 详细信息

标准号: CN105920583A

本发明公开了183aa小分子多肽在制备抗癌药物中的应用。本发明利用生物工程技术，基因重组一段183个氨基酸多肽对应的DNA序列到p3×FLAG‑CMV‑14真核表达载体。经酶切和序列分析证明重组成功后，将此重组多肽转染到多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞中，免疫印迹检测多肽的蛋白表达，实现了多肽的重组。接着对多肽的抗多发性骨髓瘤功能进行了研究，细胞学实验表明此多肽具有促进多发性骨髓瘤细胞凋亡的重要抗癌功能。为肿瘤治疗开发新的靶点提供实验依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发应用前景。

关键词：多肽多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤细胞免疫印迹检测生物工程技术真核表达载体氨基酸多肽细胞学实验小分子多肽蛋白表达基因重组开发应用抗癌功能抗癌药物临床治疗序列分析肿瘤治疗重组多肽靶点凋亡酶切转染制备应用肿瘤细胞成功开发研究

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HADHA mRNA的干扰序列及其验证方法

HADHA mRNA的干扰序列及其验证方法

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作者：王娟娟张杰练杨华黄亚运 430070 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号D3-3栋

本发明涉及一种干扰序列，具体涉及HADHA mRNA的干扰序列及其验证方法，所述干扰序列的正义链如SEQ ID NO：1所示，所述干扰序列的反义链如SEQ ID NO：2所示；所述干扰序列的正向引物如SEQ ID NO：7所示，所述干扰序列的反向引物如SEQ I... 详细信息

标准号: CN113430199A

本发明涉及一种干扰序列，具体涉及HADHA mRNA的干扰序列及其验证方法，所述干扰序列的正义链如SEQ ID NO：1所示，所述干扰序列的反义链如SEQ ID NO：2所示；所述干扰序列的正向引物如SEQ ID NO：7所示，所述干扰序列的反向引物如SEQ ID NO：8所示。本发明还提供了上述干扰序列的验证方法，将序列构建在真核表达载体上，并以慢病毒包装的形式干扰靶基因的mRNA水平，从而降低靶蛋白的表达。本发明所提供的干扰序列可以有效的降低目的蛋白的表达，具有针对性强，保守性好，稳定性高的优点；同时该方法还可以得到稳定表达的细胞株，对于后续基础功能试验具有重要的意义。

关键词：验证真核表达载体干扰靶基因反向引物基础功能目的蛋白稳定表达序列构建正向引物靶蛋白保守性反义链慢病毒细胞株正义链试验

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PP1γ截短体的应用

PP1γ截短体的应用

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作者：万春华吴淼淼沈爱国陆翠华 226000 江苏省南通市啬园路9号

本发明公开了PP1γ截短体的应用。本发明利用生物工程技术，基因重组一段多肽对应的DNA序列到pcDNA3.1真核表达载体。经酶切和序列分析证明重组成功后，将此真核表达重组多肽转染到肿瘤细胞，免疫印迹证明多肽的蛋白表达，实现了多肽的... 详细信息

标准号: CN106478798B

本发明公开了PP1γ截短体的应用。本发明利用生物工程技术，基因重组一段多肽对应的DNA序列到pcDNA3.1真核表达载体。经酶切和序列分析证明重组成功后，将此真核表达重组多肽转染到肿瘤细胞，免疫印迹证明多肽的蛋白表达，实现了多肽的重组。接着对多肽的抗肿瘤功能进行了研究，细胞学实验表明此多肽具有抑制肿瘤细胞存活和增殖的重要抗癌功能。为肿瘤治疗开发新的靶点提供实验依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发应用前景。

关键词：多肽免疫印迹证明生物工程技术抑制肿瘤细胞真核表达载体抗肿瘤功能细胞学实验蛋白表达基因重组开发应用抗癌功能临床治疗序列分析真核表达肿瘤细胞肿瘤治疗重组多肽截短体增殖的靶点酶切转染应用存活肿瘤成功开发研究

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一种利用嗜水气单胞菌外膜蛋白抗原制备卵黄抗体及其制备方法

一种利用嗜水气单胞菌外膜蛋白抗原制备卵黄抗体及其制备方法

引用

作者：林晨韬林岗黄镇 350300 福建省福州市福清市龙江街道校园新村一号福建师范大学研发中心

本发明公开了一种利用嗜水气单胞菌外膜蛋白抗原制备卵黄抗体及其制备方法，为了构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗，我们根据已发表的该菌的外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物，应用PCR技术，扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜... 详细信息

标准号: CN111733177A

本发明公开了一种利用嗜水气单胞菌外膜蛋白抗原制备卵黄抗体及其制备方法，为了构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗，我们根据已发表的该菌的外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物，应用PCR技术，扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜蛋白基因，并插入到真核表达载体pcDNA3上，构建成DNA疫苗，命名为pcDNA3‑POMP；以纯化的原核表达蛋白GST‑POMP免疫SD大鼠制备抗血清，用ELISA测定了抗体效价达到1：100000以上；用pcDNA3‑POMP质粒转染293细胞，转染48小时后收集细胞，提取细胞的RNA进行RT‑PCR，检测到外源基因的表达。至此，初步完成了嗜水气单胞菌DNA疫苗表达载体的构建，为进一步的疫苗免疫和效价检测奠定了基础。

关键词：嗜水气单胞菌制备外膜蛋白基因细胞构建外膜蛋白抗原原核表达蛋白真核表达载体核苷酸序列特异性引物表达载体抗体效价卵黄抗体外源基因效价检测疫苗免疫质粒转染抗血清扩增转染检测应用

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基因NOVA1在制备治疗神经细胞缺氧损伤药物中的应用

基因NOVA1在制备治疗神经细胞缺氧损伤药物中的应用

引用

作者：李华玲孔玲吕贝夏靖陈欣虹 225009 江苏省扬州市大学南路88号

本发明涉及医学生物化学领域，具体涉及治疗神经细胞缺氧损伤的药物。发明通过构建Nova1的真核表达载体，模拟神经元细胞缺氧的条件，探索Nova1的缺氧损伤保护作用。发明以PC12细胞，即大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤为对象，建立稳定的物理缺氧... 详细信息

标准号: CN104548138A

本发明涉及医学生物化学领域，具体涉及治疗神经细胞缺氧损伤的药物。发明通过构建Nova1的真核表达载体，模拟神经元细胞缺氧的条件，探索Nova1的缺氧损伤保护作用。发明以PC12细胞，即大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤为对象，建立稳定的物理缺氧损伤模型；用酶切和PCR方法构建了Nova1的真核表达载体，Pcmv-myc-Nova1，并进行了测序验证；进行细胞转染实验，从细胞形态、RNA和蛋白水平进行检测，发现神经特异性剪接因子 Nova1具有缺氧损伤的保护作用，为今后研究缺氧损伤保护机制奠定了基础。

关键词：缺氧损伤真核表达载体构建神经细胞肾上腺模拟神经元嗜铬细胞瘤生物化学保护机制蛋白水平剪接因子细胞缺氧细胞形态细胞转染测序大鼠酶切涉及神经验证进行检测医学治疗探索发现稳定研究建立

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