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一种提高团花遗传转化
瞬时表达效率
的方法
一种提高团花遗传转化瞬时表达效率的方法
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引用
作者:
黄浩
白隆华
翟勇进
530023 广西壮族自治区南宁市长堽路189号
一种提高团花遗传转化
瞬时表达效率
的方法,包括材料选择、菌液制备、外植体浸染、共培养、阳性筛选、
瞬时表达
检测6个步骤。采用本发明能够将团花遗传转化
瞬时表达效率
提高863.6~908.9%,有效解决通过农杆菌介导方法浸染
效率
低、较...
详细信息
标准号: CN104630261A
一种提高团花遗传转化
瞬时表达效率
的方法,包括材料选择、菌液制备、外植体浸染、共培养、阳性筛选、
瞬时表达
检测6个步骤。采用本发明能够将团花遗传转化
瞬时表达效率
提高863.6~908.9%,有效解决通过农杆菌介导方法浸染
效率
低、较难获得团花转基因植株的问题,有效降低农杆菌斑的生长,延长农杆菌与外植体共培养的时间而基本不伤害外植体,提高转基因的
瞬时表达
率。
关键词:
外植体
杆菌
团花
瞬时表达效率
瞬时表达
遗传转化
共培养
浸染
转基因植株
材料选择
阳性筛选
转基因
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基因枪法介导玉米遗传转化方法的探究
基因枪法介导玉米遗传转化方法的探究
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山东植物生理学会第七次代表大会暨植物生物学与现代农业研讨会
作者:
张丹
侯绪刚
李奇
王丽
安海龙
李德全
山东农业大学生命科学学院
作物生物学国家重点实验室
玉米作为重要的粮食作物和饲料作物,种植面积仅次于小麦和水稻。本实验以A188和齐-319自交系授粉后9-13天的玉米幼胚为材料,N6培养基为基本培养基,运用金粉包裹外源DNA的基因枪法进行玉米转化。通过实验证实,在影响基因枪转化
效率
的参数...
详细信息
玉米作为重要的粮食作物和饲料作物,种植面积仅次于小麦和水稻。本实验以A188和齐-319自交系授粉后9-13天的玉米幼胚为材料,N6培养基为基本培养基,运用金粉包裹外源DNA的基因枪法进行玉米转化。通过实验证实,在影响基因枪转化
效率
的参数中,微弹的制作与包裹起着关键作用。在微弹制作时,使用水做溶剂,而不采用乙醇或者50%甘油,这样对微弹的包裹以及轰击时微弹载体膜片的制作有较好的效果。GFP荧光标记进行的
瞬时表达
实验表明,亚精胺包裹的质粒进行基因枪转化
瞬时表达效率
达80%左右,而使用鱼精蛋白包裹质粒能够略微减缓DNA在愈伤组织细胞内的降解速度。为了获得Marker-free的植株,我们也进行了片段DNA的基因枪转化实验。在进行片段DNA基因枪转化实验中,发现使用片段DNA进行基因枪转化其DNA在细胞内的降解速度比质粒DNA略快。目前我们进行的片段DNA基因枪
瞬时表达效率
在30%以上。这些实验结果表明使用片段DNA进行基因枪转化能够达到和质粒DNA一样的
效率
。
关键词:
基因枪法
玉米
微弹制作
瞬时表达效率
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