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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

检索规则说明：

AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

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62 篇 专利
9 篇 期刊文献
9 篇 学位论文
3 篇 会议

馆藏范围

83 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

19 篇 农学
- 6 篇 作物学
- 4 篇 植物保护
- 3 篇 园艺学
- 3 篇 林学
- 2 篇 农业资源与环境
- 1 篇 兽医学
7 篇 理学
- 7 篇 生物学
6 篇 工学
- 3 篇 生物工程
- 2 篇 林业工程
- 1 篇 风景园林学（可授工...
2 篇 医学
- 1 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学

主题

21 篇 瞬时表达系统
2 篇 外源基因
2 篇 半夏
2 篇 根癌农杆菌
2 篇 水稻
2 篇 靶基因验证
1 篇 covid-19
1 篇 原丝体
1 篇 抗病性
1 篇 gfp
1 篇 p30蛋白
1 篇 输卵管
1 篇 原生质体分离
1 篇 非洲猪瘟病毒
1 篇 玉米抗病机制
1 篇 植物生物反应器
1 篇 鸡
1 篇 本氏烟草
1 篇 基因功能
1 篇 基因组序列

机构

12 篇 南京农业大学
5 篇 南京林业大学
4 篇 广东省农业科学院...
4 篇 云南省烟草农业科...
3 篇 上海柯莱逊生物技...
2 篇 浙江省农业科学院
2 篇 仲恺农业工程学院
2 篇 海南大学
2 篇 中国农业科学院作...
2 篇 江苏大学
2 篇 北京同立海源生物...
2 篇 福建农林大学
2 篇 新乡医学院
2 篇 长江大学
2 篇 广西壮族自治区林...
2 篇 中国农业科学院郑...
2 篇 吉林农业大学
2 篇 电子科技大学
2 篇 中国农业大学
2 篇 内蒙古农业大学

作者

6 篇 曾文韬
6 篇 柴春月
6 篇 窦道龙
5 篇 胥猛
5 篇 徐立安
4 篇 肖炳光
3 篇 苏国新
3 篇 陆玲玲
3 篇 叶永清
2 篇 钟云鹏
2 篇 耿少雷
2 篇 李树俊
2 篇 万永青
2 篇 伍洪铭
2 篇 陈英
2 篇 张绍铃
2 篇 王光萍
2 篇 李永平
2 篇 雷德坤
2 篇 方敦煌

语言

83 篇 中文

检索条件"主题词=瞬时表达系统"

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详细简洁

排序：

猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法

猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法

引用

作者：齐秀娟李玉阔黄海雷顾红林苗苗孙雷明钟云鹏王然 450009 河南省郑州市管城回族区未来路南端中国农业科学院郑州果树研究所

本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一个猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法。猕猴桃AaPG18基因序序列如SEQ ID No.1所示。所述转基因猕猴桃的单果验证方法，以转基因瞬时表达系统为技术基础，首先构建重组的pBI121‑AaPG1... 详细信息

标准号: CN114438108B

本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一个猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法。猕猴桃AaPG18基因序序列如SEQ ID No.1所示。所述转基因猕猴桃的单果验证方法，以转基因瞬时表达系统为技术基础，首先构建重组的pBI121‑AaPG18过表达载体，并制备侵染液，随后从猕猴桃果实左右两侧注射侵染液。总体上，本申请基于瞬时表达技术，结合猕猴桃果实特点，一方面对AaPG18基因功能进行了初步明确，另一方面设计提供了一种可对猕猴桃果实相关功能基因进行快速且严格的单果对照验证法，且其验证结果高效、直观、重复性强，且可较好克服果实异质性问题，从而减少相关功能基因验证的工作量和误差。

关键词：猕猴桃果实转基因猕猴桃验证相关功能基因染液基因工程技术瞬时表达系统表达载体基因功能技术基础瞬时表达验证结果左右两侧基因异质性构建申请制备工作量注射果实直观

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一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP2及其重组表达载体和应用

一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP2及其重组表达载体和应用

引用

作者：窦道龙柴春月曾文韬 211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地

本发明属于生物技术领域，公开一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP2及其重组表达载体和应用，该启动子是以ATCCAA顺式元件及其上下游各12bp的侧翼序列为核心序列。取该顺式元件及其在基因启动子中上下各12bp的侧翼序列，共30bp的序列，人... 详细信息

标准号: CN105861508A

本发明属于生物技术领域，公开一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP2及其重组表达载体和应用，该启动子是以ATCCAA顺式元件及其上下游各12bp的侧翼序列为核心序列。取该顺式元件及其在基因启动子中上下各12bp的侧翼序列，共30bp的序列，人工合成四聚体序列作为启动子PMP2，将PMP2融合GUS报告基因构建到植物表达载体pMDC162中，并通过农杆菌介导的烟草瞬时表达系统，对启动子的病原菌诱导表达特性进行分析。结果发现人工合成PMP2启动子能在疫霉菌的诱导下快速、高效的驱动GUS报告基因的上调诱导表达。由此可见，人工合成PMP2启动子是病原诱导性启动子，为植物抗疫霉基因工程提供有价值的病原诱导性启动子。

关键词：启动子病原诱导性启动子顺式元件疫霉人工合成启动子生物技术领域瞬时表达系统植物表达载体重组表达载体侧翼病原菌诱导基因启动子农杆菌介导侧翼序列核心序列基因工程诱导表达四聚体疫霉菌诱导性构建诱导烟草驱动融合应用分析发现

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一种体内检测ROP蛋白活性的方法

一种体内检测ROP蛋白活性的方法

引用

作者：吴巨友张皓刘雪莹曹鹏张明亮王鹏张绍铃谢智华齐开杰 211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地

本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法，包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞；(2)植物叶片注射；(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度；(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性：使用酶标仪进行荧光扫描，以显示荧火素酶... 详细信息

标准号: CN113789343A

本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法，包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞；(2)植物叶片注射；(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度；(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性：使用酶标仪进行荧光扫描，以显示荧火素酶分解底物后产生荧光的强度来判断荧光素酶活性的强弱，从而检测目标蛋白AtROP1的活性强弱的程度。该方法基于RIC1作为ROP蛋白的下游效应子能特异地与活性形式的ROP结合这一特点，通过荧火素酶互补实验，借助烟草瞬时表达系统，利用植物活体成像仪和酶标仪进行定性定量检测荧光强度，从而实现体内检测ROP蛋白的活性。同时该方法还具有高灵敏度、可视化、可定量化和操作简单高效等特点。

关键词：酶标仪荧光荧光素酶活性定量检测体内检测植物活体成像仪素酶蛋白构建融合蛋白瞬时表达系统感受态细胞表达载体蛋白活性定性检测分解底物高灵敏度互补实验活性强弱活性形式目标蛋白下游效应荧光扫描植物叶片定量化可视化农杆菌定性注射强弱烟草检测转化

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一种银杏叶原生质体分离纯化以及瞬时转化的方法

一种银杏叶原生质体分离纯化以及瞬时转化的方法

引用

作者：韩炘胥猛徐立安 210037 江苏省南京市玄武区龙蟠路159号

本发明公开了一种银杏叶原生质体分离纯化以及瞬时转化的方法，包括以下步骤：首先通过组合酶解液酶解银杏叶，得到银杏的原生质体；然后对得到的银杏原生质体进行分离、纯化，并且进行预处理，再利用PEG介导法将携带绿色荧光蛋白eGFP... 详细信息

标准号: CN110499278A

本发明公开了一种银杏叶原生质体分离纯化以及瞬时转化的方法，包括以下步骤：首先通过组合酶解液酶解银杏叶，得到银杏的原生质体；然后对得到的银杏原生质体进行分离、纯化，并且进行预处理，再利用PEG介导法将携带绿色荧光蛋白eGFP标签的p2FGW7.0质粒载体转入银杏原生质体中，经过培养，使其在银杏原生质体中表达。本发明构建得到银杏叶原生质体瞬时表达系统，操作简单易行，可以获得大量、完整、纯净的银杏叶原生质体，不受季节和地点的限制。本发明适用于银杏实生苗，利用幼嫩的叶即可得到较高质量的原生质体，原生质体活力可达90％，同时对于野外的成熟叶组织在一定程度上也适用。

关键词：原生质体银杏银杏叶绿色荧光蛋白eGFP 瞬时表达系统原生质体分离原生质体活力预处理质粒载体组合酶解成熟叶实生苗再利用构建介导液酶标签野外转入携带转化

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一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP1及其重组表达载体和应用

一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP1及其重组表达载体和应用

引用

作者：窦道龙柴春月曾文韬 211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地

本发明属于生物技术领域，公开一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP1及其重组表达载体和应用，该启动子是以AAACTA顺式元件及其上下游各12bp的侧翼序列为核心序列。取该顺式元件及其在基因启动子中上下各12bp的侧翼序列，共30bp的序列，人... 详细信息

标准号: CN106119246A

本发明属于生物技术领域，公开一种疫霉诱导性人工合成启动子PMP1及其重组表达载体和应用，该启动子是以AAACTA顺式元件及其上下游各12bp的侧翼序列为核心序列。取该顺式元件及其在基因启动子中上下各12bp的侧翼序列，共30bp的序列，人工合成四聚体序列作为启动子PMP1，将PMP1融合GUS报告基因构建到植物表达载体pMDC162中，并通过农杆菌介导的烟草瞬时表达系统，对启动子的病原菌诱导表达特性进行分析。结果发现人工合成PMP1启动子能在疫霉菌的诱导下快速、高效的驱动GUS报告基因的上调诱导表达。由此可见，人工合成PMP1启动子是病原诱导性启动子，为植物抗疫霉基因工程提供有价值的病原诱导性启动子。

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基于dCas9-oToV的基因转录系统及其应用

基于dCas9-oToV的基因转录系统及其应用

引用

作者：范术丽栗战帅张朝军王慧颖马启峰乔凯凯 455000 河南省安阳市开发区黄河大道38号

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体而言，提供了一种基于dCas9‑oToV的基因转录系统及其应用。本发明将用于棉花基因编辑的Cas9突变成dCas9，通过瞬时表达系统筛选出转录激活效率显著的dCas9‑oToV。在陆地棉CCRI24中克隆得到启动子Gh... 详细信息

标准号: CN113637658A

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体而言，提供了一种基于dCas9‑oToV的基因转录系统及其应用。本发明将用于棉花基因编辑的Cas9突变成dCas9，通过瞬时表达系统筛选出转录激活效率显著的dCas9‑oToV。在陆地棉CCRI24中克隆得到启动子GhU6_1，用于启动sgRNA。用单个sgRNA引导dCas9‑oToV结合到靶基因启动子特定位置时，可以将棉花内源基因进行有效激活。在每个sgRNA前引入tRNA^Gly，用同一个pGhU6_1进行启动，可以同时实现棉花中多个内源基因被有效激活。本发明具有较高的实用性和特异性，为棉花基因功能研究和分子育种提供更加高效的策略。

关键词：棉花基因植物基因工程技术激活靶基因启动子棉花内源基因瞬时表达系统分子育种功能研究基因转录内源基因转录激活陆地棉启动子克隆筛选棉花引入应用

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猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法

猕猴桃AaPG18基因及针对该转基因的单果验证方法

引用

作者：齐秀娟李玉阔黄海雷顾红林苗苗孙雷明钟云鹏王然 450009 河南省郑州市管城回族区未来路南端中国农业科学院郑州果树研究所

标准号: CN114438108A

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一种AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法

一种AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法

引用

作者：陆玲玲钱妮苏国新叶永清 201201 上海市浦东新区张江高科技产业东区瑞庆路528号20幢乙号4、5层

本发明涉及AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法，具体涉及一种人工信号肽-AFP-609aa-6his的重组蛋白和哺乳动物瞬时表达系统体外高效重组表达方法，其DNA序列如SEQ ID NO:1所示，a.优化AFP重组蛋白DNA序列,b.将重组蛋白基因通过双酶... 详细信息

标准号: CN103755811A

本发明涉及AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法，具体涉及一种人工信号肽-AFP-609aa-6his的重组蛋白和哺乳动物瞬时表达系统体外高效重组表达方法，其DNA序列如SEQ ID NO:1所示，a.优化AFP重组蛋白DNA序列,b.将重组蛋白基因通过双酶切克隆到pcDNA3.1+载体中，构建pcDNA3.1+-AFP表达质粒，并进行质粒抽提，c.将抽提得到的pcDNA3.1+-AFP质粒用PEI转染进CHO-S悬浮细胞进行重组蛋白的表达，d.7天后分离纯化得到的重组蛋白。本发明通过大规模瞬时悬浮CHO-S表达系统制备的人工合成带有6HIS标签的AFP蛋白活性跟天然AFP蛋白相近，且得到的纯度较高，内毒素含量低，无动物源性蛋白的污染，可以有望作为肝癌免疫治疗的肿瘤抗原疫苗。

关键词：重组蛋白质粒抽提体外蛋白瞬时表达系统肿瘤抗原疫苗重组表达方法重组蛋白基因内毒素含量哺乳动物蛋白活性动物源性分离纯化免疫治疗人工信号悬浮细胞重组表达双酶切转染肝癌悬浮标签克隆污染优化

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落叶松原生质体分离纯化及瞬时表达方法

落叶松原生质体分离纯化及瞬时表达方法

引用

作者：张勇郑雪莲刘炳麟 611731 四川省成都市高新区(西区)西源大道2006号

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及落叶松原生质体分离纯化及瞬时表达系统构建的方法。本发明要解决的技术问题是至今为止尚未见到适用于落叶松的原生质体制备的方法。本发明的技术方案是落叶松原生质体分离纯化的方法，包括如下... 详细信息

标准号: CN112126616B

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及落叶松原生质体分离纯化及瞬时表达系统构建的方法。本发明要解决的技术问题是至今为止尚未见到适用于落叶松的原生质体制备的方法。本发明的技术方案是落叶松原生质体分离纯化的方法，包括如下步骤：a、酶解；b、收集；在此基础上，本发明还提供了落叶松瞬时表达系统构建的方法。本申请建立了一套适用于落叶松的原生质体制备方法，可实现高效率的落叶松原生质体瞬时转化。

关键词：落叶松瞬时表达系统原生质体分离原生质体制构建分子生物学技术原生质体高效率酶解申请转化

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一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用

一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用

引用

作者：郑天慧 213000 江苏省常州市新北区华山中路26号B1003室

本发明公开了一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA靶位点高通量筛选系统及其应用，所述测试系统包括：(1)用于同时表达多个候选sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒；(3)利用拟南芥及水稻原生质体瞬时表达系统快速高通量鉴定候选sgRNA靶位点... 详细信息

标准号: CN107034229A

本发明公开了一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA靶位点高通量筛选系统及其应用，所述测试系统包括：(1)用于同时表达多个候选sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒；(3)利用拟南芥及水稻原生质体瞬时表达系统快速高通量鉴定候选sgRNA靶位点切割效率。CRISPR/CAS9系统在敲除或编辑基因之前，选择可以高效切割的靶序列至关重要，短时间内验证多个候选sgRNA靶位点的切割效率，从而选择最佳的sgRNA提高敲除的成功效率，不仅可以降低工作成本，还可以提高工作效率。

关键词：靶位点切割效率敲除质粒高通量筛选系统水稻原生质体瞬时表达系统高通量鉴定测试系统工作成本工作效率靶序列拟南芥切割验证基因应用成功表达质粒酶切位点切割质粒构建

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