检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：马海滨北京交通大学

学位级别：硕士

β-淀粉样蛋白(p-amyloid, Aβ)是老年斑(senile plaques, SPs)的主要成分,目前普遍认为Aβ的聚集是阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease, AD)发病的主要原因,大量聚集的Aβ具有神经毒性。近年来研究发现,作为人体必需微量元素之一的... 详细信息

β-淀粉样蛋白(p-amyloid, Aβ)是老年斑(senile plaques, SPs)的主要成分,目前普遍认为Aβ的聚集是阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease, AD)发病的主要原因,大量聚集的Aβ具有神经毒性。近年来研究发现,作为人体必需微量元素之一的硒具有神经毒性保护作用。鉴于此,本研究通过一系列体外实验探讨了硒甲基半胱氨酸对Aβ1-42导致的神经干细胞(neural stem cells, NSCs)凋亡作用的保护及其保护机理,有助于进一步了解Aβ对神经发生的作用,为NSCs用于治疗AD等神经退行性疾病提供理论依据和实验数据。取新生1d的ICR (institute of cancer researcch, ICR)小鼠大脑,通过机械分离和体外培养获取NSCs。利用免疫组织化学和RT-PCR方法验对NSCs进行鉴定。在体外将1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL的硒甲基半胱氨酸分别作用于NSCs24 h后,再将聚合后的10μmol/L的Aβ1-42寡聚体加入相应实验组中作用12 h、24 h和48 h,运用MTT法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况。通过RT-PCR和Western Blot检测硒甲基半胱氨酸和Aβ1-42寡聚体作用前后NSCs中c-Jun和JNK基因的表达,探寻硒甲基半胱氨酸对Aβ1-42导致的NSCs凋亡的保护机制。结果显示,1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL硒甲基半胱氨酸分别单独作用于NSCs12h、24 h和48 h,对NSCs增殖无显著影响；而50μg/mL的硒甲基半胱氨酸作用于NSCs12h、24 h和48 h, NSCs增殖下降,说明大剂量的硒甲基半胱氨酸对NSCs有损伤作用。在10μmol/L的Aβ1-42和1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL的硒甲基半胱氨酸共作用组中,12h时,1μg/mL、5μg/mL和50μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡无明显保护作用,而10μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡具有极显著保护作用(p<0.01)；24 h时,1μg/mL、5μg/mL和10μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡均具有极显著保护作用(p<0.01),而50μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡无明显保护作用；48 h时1μg/mL、5μg/mL和10μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡均具有显著保护作用,且5μg/mL和10μg/mL硒甲基半胱氨酸保护作用极显著(p<0.01),而50μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/L的Aβ1-42导致的凋亡无明显保护作用。随后,我们对具有保护作用的三组浓度进行时间上的比较,发现仅有10μg/mL硒甲基半胱氨酸对10μmol/LAβ1-42导致的凋亡的保护作用,在48 h时与24h、12 h时具有极其显著差异(p<0.01),而其它浓度的硒甲基半胱氨酸对10μmol/LAp1-42导致的凋亡的保护作用不具有作用时间上的差异。硒甲基半胱氨酸对Aβ1-42导致的NSCs凋亡作用的保护机制中,RT-PCR结果显示,保护组中,10μmol/LAβ1-42+1μg/mL Se.10μmol/L Ap1-42+5μg/mL Se.10μmol/LAp1-42+10μg/mL Se与10μmol/LAp1-42单独作用组比较,c-Jun和JNK表达逐渐减弱,而10μmol/LAp1-42+50μg/mL Se作用组中c-Jun和JNK表达增强。说明适当剂量硒甲基半胱氨酸可抑制c-Jun和JNK的表达,从而达到对Aβ1-42导致的NSCs凋亡作用的保护。

关键词：硒甲基半胱氨酸 Aβ1-42 NSCs 凋亡保护

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高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术用于胁迫富硒海带硒形态研究

引用

高等学校化学学报 2008年第1期29卷 77-80页

作者：仲娜王小如杨黄浩曹煊王庚中国海洋大学化学化工学院青岛266003 青岛市药品检验所青岛266071 国家海洋局第一海洋研究所青岛现代分析及中药标准化重点实验室青岛266061 山东大学化学与化工学院济南250100

通过对海带胁迫富硒培养,研究了海带对硒的富集总量及硒化学形态转变.建立了反相离子对缓冲盐等3个色谱系统的高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用(RP-HPLC-ICP-MS)技术测定亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)... 详细信息

通过对海带胁迫富硒培养,研究了海带对硒的富集总量及硒化学形态转变.建立了反相离子对缓冲盐等3个色谱系统的高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用(RP-HPLC-ICP-MS)技术测定亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)三种硒形态.采用3种提取溶剂,超声提取缩短提取时间,分离检测富硒海带的主要硒形态为亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸和硒代蛋氨酸.

关键词：富硒海带 RP—HPLC—ICP—MS SEC—HPLC—ICP—MS 总量形态亚硒酸钠硒甲基半胱氨酸硒代蛋氨酸

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