检索结果-内蒙古大学图书馆

养禽与禽病防治 2023年第4期 25-28页

作者：曹永长何叶峰中山大学生命科学学院广州510275 默沙东动物保健品(上海)有限公司上海200233

传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触传染性疾病。该病广泛流行于世界各地,是严重危害世界养禽业的重大传染病之一。禽传染性支气管炎病毒... 详细信息

传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触传染性疾病。该病广泛流行于世界各地,是严重危害世界养禽业的重大传染病之一。禽传染性支气管炎病毒可感染所有日龄的鸡,主要感染呼吸道上皮细胞和消化道相关组织以及其他组织如肾、输卵管和睾丸等,导致鸡只生长迟缓、发病死亡。肉鸡感染后,其饲料报酬降低、品质下降。维鸡感染还会造成生殖系统永久非可逆损伤,表现为产蛋鸡无产蛋高峰、产蛋数量与质量下降[1]。不少养殖业者深受其困扰,由该病引起的挑战日益严峻。

关键词：禽传染性支气管炎病毒传染性支气管炎高度接触传染产蛋高峰饲料报酬养殖业者养禽业呼吸道上皮细胞

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一种禽传染性支气管炎多表位粘膜免疫疫苗及其应用

一种禽传染性支气管炎多表位粘膜免疫疫苗及其应用

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作者：张晓丹李殿明蒲勤齐春梅田春辉刘甜甜任百亮张导春党将将吴启凡 266061 山东省青岛市崂山区株洲路153号高层次人才创业中心1号楼东单元B302室

本发明涉及一种用于预防禽传染性支气管炎的融合蛋白及该融合蛋白的制备方法及其应用。具体而言，本发明涉及一种融合蛋白，该融合蛋白包含禽传染性支气管炎病毒IBV主要结构蛋白S1蛋白和N蛋白主要的抗原表位、大肠杆菌不耐热毒素B亚单... 详细信息

标准号: CN105622760A

本发明涉及一种用于预防禽传染性支气管炎的融合蛋白及该融合蛋白的制备方法及其应用。具体而言，本发明涉及一种融合蛋白，该融合蛋白包含禽传染性支气管炎病毒IBV主要结构蛋白S1蛋白和N蛋白主要的抗原表位、大肠杆菌不耐热毒素B亚单位及纯化标签，本发明还涉及该融合蛋白的制备方法及其药学应用。

关键词：融合蛋白制备方法大肠杆菌不耐热毒素B亚单位禽传染性支气管炎病毒禽传染性支气管炎纯化标签抗原表位药学应用蛋白预防应用

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IBV S1基因和IL-2基因双顺反子DNA疫苗的免疫原性研究

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微生物学报 2007年第6期47卷 1055-1059页

作者：唐梦君王红宁周生黄勇柳萍胡慧琼廖娟四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室雅安625014 四川大学生命科学学院成都610064

为了研制更加有效的IBV DNA疫苗,将IBV的S1基因和禽白介素2(IL-2)基因插入双顺反子表达载体pIRES-EGFP/DsRed中,构建能分别或同时表达S1基因和IL-2基因的pIRES-S1、pIRES-IL2、pIRES-S1/IL-2质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及... 详细信息

为了研制更加有效的IBV DNA疫苗,将IBV的S1基因和禽白介素2(IL-2)基因插入双顺反子表达载体pIRES-EGFP/DsRed中,构建能分别或同时表达S1基因和IL-2基因的pIRES-S1、pIRES-IL2、pIRES-S1/IL-2质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测表达。将构建的质粒用脂质体包裹后,通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄雏鸡,二免后两周用IBV肾型强毒进行攻毒。结果表明,pIRES-S1/IL-2在体外能够诱导Vero细胞表达S1蛋白和IL-2;pIRES-S1/IL-2和pIRES-S1+pIRES-IL2免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,能明显增强IBV DNA疫苗对同型强毒的攻击保护,但pIRES-S1/IL-2免疫组要优于pIRES-S1+pIRES-IL2混合免疫组及其它对照组,差异显著或极显著。以上结果表明禽IL-2能同时加强DNA疫苗的细胞免疫和体液免疫应答;但抗原基因和IL-2共表达DNA疫苗的免疫效果明显要优于混合注射的DNA疫苗。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因 IL-2 双顺反子 DNA疫苗

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NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

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中国病理生理杂志 2013年第1期29卷 121-127页

作者：颜亮罗滔蔡军伟毕志斐胡巢凤暨南大学医学院病理生理学教研室国家中医药管理局病理生理学实验室广东广州510632 南方医科大学病理生理学教研室广东广州510515 山西医科大学人体解剖学教研室山西太原030001

目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母... 详细信息

目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。

关键词： NALP3蛋白富含亮氨酸重复序列人细胞周期蛋白H 禽传染性支气管炎病毒酵母双杂交系统

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携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌的构建及免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2010年第9期32卷 703-707页

作者：李玉玲王红宁曾瑜虹阳泰郭自成四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室四川成都610064

为研究携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌免疫原性,本研究将携带有禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1、M、N基因的pVAX1-S1、pVAX1-M和pVAX1-N重组质粒转入减毒沙门氏菌X4550株,构建IBV S1、M、N基因DNA质粒重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株(X4550... 详细信息

为研究携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌免疫原性,本研究将携带有禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1、M、N基因的pVAX1-S1、pVAX1-M和pVAX1-N重组质粒转入减毒沙门氏菌X4550株,构建IBV S1、M、N基因DNA质粒重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株(X4550/pVAX1-S1,X4550/pVAX1-M,X4550/pVAX1-N),用间接免疫荧光法(IFA)检测重组质粒体外表达,SPF鸡经口服免疫,测定体内组织分布及稳定性、特异性IgG、IgA、CD4+和CD8+T细胞含量并进行攻毒实验。结果表明,重组质粒可在体外细胞中表达目的蛋白;重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株可在肠、脾、肝、心、肾、肺6个组织中分布并稳定存在;特异性IgG,IgA、CD4+和CD8+T细胞显著升高(p<0.01),用104EID50IBV M41株攻毒,保护率达到73%(11/15)。本研究为研制IBV基因减毒沙门氏菌疫苗提供了依据。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1、M、N基因减毒沙门氏菌重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株

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利用SMART技术构建鸡肺酵母双杂交cDNA文库

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四川动物 2012年第6期31卷 880-883,886页

作者：赵素君王红宁杨鑫张安云周英顺四川大学生命科学学院动物疫病与食品安全四川省重点实验室成都610064 四川省畜牧科学研究院成都610066

以1月龄SPF鸡肺为材料,用Trizol方法提取总RNA,并用mRNA纯化试剂盒纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA)。合成的ds cDNA通过CHROMA SPINTM TE-400 Column进行纯化,纯化后的ds cDNA与线性pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞AH109中,以同源重组的方式,在酵母细胞内构建成鸡肺的cDNA文库。获得的文库容量为3.9×106cfu,随机选取20个克隆进行PCR检测,插入片段大小集中在0.3～3.0kb之间,平均插入片段约为1.4kb左右,文库重组率为100%。结果表明该文库达到了高质量文库所应具备的条件,为酵母双杂交技术筛选与IBV-N相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础。

关键词：禽传染性支气管炎病毒鸡肺酵母双杂交 cDNA文库 SMART技术

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鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

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中国预防兽医学报 2011年第3期33卷 214-218页

作者：张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室/生物资源与生态环境教育部重点实验室/"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川成都610064

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达... 详细信息

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

关键词：禽传染性支气管炎病毒鸡IL-1β 鸡IL-16 免疫增强作用

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IBV M基因与IL-18基因共表达DNA疫苗的免疫原性

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中国兽医学报 2008年第7期28卷 757-761页

作者：唐梦君王红宁周生徐永莉余协中鲜凌瑾四川农业大学动物科技学院四川雅安625014

将禽传染性支气管炎病毒(IBV)的M基因和禽白介素18(IL-18)基因分别插入双顺反子质粒pIRES-EGFP/DsRed中,构建IBV M和IL-18基因的共表达质粒pIRES-M/IL18及表达M基因的pIRES-M质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检... 详细信息

将禽传染性支气管炎病毒(IBV)的M基因和禽白介素18(IL-18)基因分别插入双顺反子质粒pIRES-EGFP/DsRed中,构建IBV M和IL-18基因的共表达质粒pIRES-M/IL18及表达M基因的pIRES-M质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测质粒在体外的表达。将构建的质粒用脂质体包裹后,通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄雏鸡,28日龄加强免疫1次;免疫前后均采血检测ELISA抗体效价和外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量;二免后2周用IBV肾型强毒进行攻毒。结果显示,pIRES-M/IL18、pIRES-M质粒均在Vero细胞中有效地转录并表达目的蛋白。从免疫后7 d起,pIRES-M/IL18免疫组产生的抗体水平及外周血T淋巴细胞亚群数量均高于pIRES-M组。pIRES-M/IL18、pIRES-M组对强毒的攻击保护率分别为65%和40%。以上结果表明,禽源IL-18基因与IBV M基因共表达可增强鸡体对DNA疫苗的免疫应答,提高对IBV强毒的抵抗力。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 M基因 IL-18 DNA疫苗

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以鸡胚为宿主针对冠状病毒消毒效果评估模型的建立及培养特性

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中国动物传染病学报 2022年第4期30卷 69-74页

作者：陈卓冯敬敬刘爱玲马利芳牛登云孟小宾陈家锃天津渤海农牧产业联合研究院有限公司天津300308

本研究以鸡胚为宿主,以禽传染性支气管炎病毒(IBV)H120株作为指示病毒,构建了针对冠状病毒消杀效果的评价模型,并评价了不同浓度的过硫酸氢钾复合物粉、月苄三甲氯铵、戊二醛癸甲溴铵溶液、二氯异氰脲酸钠粉(有效氯20%)、消毒剂84,以及... 详细信息

本研究以鸡胚为宿主,以禽传染性支气管炎病毒(IBV)H120株作为指示病毒,构建了针对冠状病毒消杀效果的评价模型,并评价了不同浓度的过硫酸氢钾复合物粉、月苄三甲氯铵、戊二醛癸甲溴铵溶液、二氯异氰脲酸钠粉(有效氯20%)、消毒剂84,以及75%酒精与病毒液感作30 min、10 min、5 min后的杀毒效果。实验结果表明,在与病毒液感作30 min后,过硫酸氢钾复合物粉的杀灭效果最好,在1∶8000倍稀释后仍能杀灭IBV;其次为二氯异氰脲酸钠和月苄三甲氯铵,在1∶4000和1∶3200倍稀释后仍能杀灭IBV病毒。通过对最小有效感作时间的摸索,过硫酸氢钾复合物粉1∶4000倍稀释、二氯异氰脲酸钠1∶2000倍稀释、84消毒剂1∶600倍稀释后可在5 min内完全杀灭IBV病毒;10%月苄三甲氯铵1∶1600倍稀释、戊二醛癸甲溴铵溶液1∶1300倍稀释后需10 min完全杀灭IBV;75%的酒精杀灭病毒所需时间最长。

关键词：鸡胚法消毒剂评价模型冠状病毒禽传染性支气管炎病毒杀灭效果

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IBV-NSP16通过调控STAT3/IL-6/SOCS3信号通路促进病毒复制

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中国兽医科学 2023年第11期53卷 1424-1430页

作者：雷尧王真方守国长江大学农学院湖北荆州434025 长江大学医学部湖北荆州434025

冠状病毒编码的非结构蛋白16(NSP16)在结构和功能上相对保守。NSP16具有2’-O-MTase活性,类似真核宿主的mRNA加帽体系,可使病毒RNA的5’-端形成帽子结构,起到稳定病毒mRNA和实现免疫逃逸的作用。为了研究IBV编码的NSP16的生物学功能,我... 详细信息

冠状病毒编码的非结构蛋白16(NSP16)在结构和功能上相对保守。NSP16具有2’-O-MTase活性,类似真核宿主的mRNA加帽体系,可使病毒RNA的5’-端形成帽子结构,起到稳定病毒mRNA和实现免疫逃逸的作用。为了研究IBV编码的NSP16的生物学功能,我们利用反向遗传学方法,构建并获得了丧失甲基转移酶活性的突变体rIBV-D128A,发现其致病力和复制速率比野生型rIBV弱。随后运用qRT-PCR和Western-blot等分子生物学方法,通过检测rIBV和rIBV-D128A感染H1299细胞中天然免疫反应相关基因的差异表达,以明确NSP16的生物学功能。研究结果显示,相比于rIBV,rIBV-D128A感染增强了细胞中STAT3的磷酸化水平,显著上调了SOCS3蛋白和炎症因子IL-6的表达。这些结果表明,IBV-NSP16可通过调控STAT3/SOCS3/IL-6信号通路,创造出有利于IBV复制的细胞环境。研究结果为进一步明确IBV nsp16生物学功能提供了理论依据。

关键词：禽传染性支气管炎病毒非结构蛋白16 病毒复制 H1299细胞

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